钙激活钾通道α单位的研究现况

大电导钙激活钾通道(BKca)是血管紧张性的决定因素,在平滑肌细胞张力的维持和调节中起着重要的作用。而BKcaα亚单位是Bkca的基本功能单位,本综述着重α亚单位的结构、功能和作用机制。     

钙激活钾通道及ATP敏感性钾通道在海马神经元缺氧超极化中的作用

研究缺氧超极化缺氧海马神经元中的电生理机制,以提示缺氧超极化在脑损伤中的作用。方法：应用膜片钳制技术的细胞贴附式膜片记录缺氧海马神经元的单通道电流活动,经p-CLAMP软件进行采样储存数据和数据的分析处理。结果：缺氧引起钙激活钾通道（KCa通道）和ATP敏感性通道（KATP通道）的激活,增加通道的开放概率。结论：缺氧超极化可能是缺血性脑损伤早期的重要代偿机制。     

ATP敏感性钾通道和钙激活钾通道对血管平滑肌的调控作用

在所有的离子通道中，钾通道种类最多。在血管平滑肌中目前已确认至少存在４种钾通道：①ＡＴＰ敏感性钾通道（ＫＡＴＰ）；②钙激活钾通道（ＫＣａ）；③电压依赖性（延迟整流）钾通道（ＫＶ）；④内向整流钾通道（ＫＩＲ）。它们在调节血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）膜电位及血管张力方面各有其独特功能。近年来国际上对ＫＡＴＰ及ＫＣａ研究较多，本文就这两个钾通道的特性、调控及生理和病理状态下的改变作一综述。１　ＡＴＰ敏感性钾通道（ＫＡＴＰ）１．１　ＫＡＴＰ的特性　ＫＡＴＰ分布广泛，但密度较低，单个平滑肌细胞（ＳＭＣ）上只…     

钙激活钾通道电流在膀胱逼尿肌不稳定中的表达变化研究

目的观察膀胱逼尿肌不稳定(DI)中钙激活钾通道(BKCa)电流变化,探讨BKCa在DI发生机制中的作用。方法通过膀胱出口部位梗阻法建立大鼠DI模型,取其膀胱平滑肌,酶消化分离单个平滑肌细胞,采用全细胞膜片钳技术记录BKCa宏观电流,比较其电流密度在DI和正常大鼠中的变化。结果大鼠膀胱平滑肌细胞表达较为丰富的BKCa电流,具有其他平滑肌细胞BKCa相似的电生理特性,即外向整流特性,能够被BKCa通道特异性阻断剂IbTX(300 nM)阻断。DI大鼠膀胱平滑肌BKCa在多个膜电位时电流密度明显下降,在膜电位为+60时电流密度由(32.42±7.97)pA/pF(n=21)下降到(20.56±4.63)pA/pF(n=18),两组相比,P<0.01。结论 BKCa可能参与了大鼠膀胱DI的发生,调控DI时BKCa通道活性可能作为治疗DI的靶点之一。     

钙激活钾通道在钙离子致神经细胞损伤中的作用

采用膜片钳单通道记录方法,观察原代培养新生ＳＤ大鼠皮层神经元的钙激活钾通道（ＫＣａ）特征及胞内不同游离钙水平对通道开放动力学的调节。结果显示：培养ＳＤ大鼠皮层神经元的ＫＣａ以大电导活动占优势,胞内游离钙为１０－８ｍｏｌ／Ｌ时,通道几乎不开放,在１０－６ｍｏｌ／Ｌ时达最大激活。由此表明神经元上ＫＣａ通道开放概率明显依赖于胞浆中钙离子和膜电位,ＫＣａ对胞内钙离子浓度变化极为敏感。钾通道的开放剂可能有一定的神经细胞保护作用。     

钙激活钾通道在钙离子致神经细胞损伤中的作用

采用膜片钳单通道记录方法,观察原代培养新生ＳＤ大鼠皮层神经元的钙激活钾通道比（Ｋｃａ）特征及胞内不同游离钙水平对通道开放动力学的调节,结果显示：培养ＳＤ大鼠皮层神经元的Ｋｃａ以大电导活动占优势,胞内游离钙为１０＾－８ｍｏｌ／Ｌ时,通道几乎不开放,在１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ时达最大激活。由此表明神经元上Ｋｃａ通道开放概率明显依赖于胞浆中钙离子和膜电位,Ｋｃａ对胞内钙离子浓度变化极为敏感,钾通道的开放剂可     

中电导钙激活钾通道的研究进展

中电导钙激活钾通道(KCa3.1),又称IKCa和SK4,广泛分布于机体成纤维细胞、增殖型平滑肌细胞、内皮细胞、T淋巴细胞、浆细胞、巨噬细胞、上皮细胞中,并参与体内血管舒缩、炎症、钙化,组织纤维增生、免疫反应、恶性肿瘤发生和内外分泌腺分泌等病理生理过程.近几年发现通过阻断KCa3.1通道或基因敲除等方法,可明显阻止其参与的病理生理进程,而其特异性阻断剂三芳甲烷-34(TRAM-34)已在动物及人类中应用,表现出了药物的安全性及耐受性,为治疗相关疾病提供了新的方向.本文就近几年KCa3.1通道相关疾病研究进展作一综述.     

动脉粥样硬化兔血管平滑肌钙激活钾通道活性和α亚单位表达的变化

目的 研究动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)时血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)大电导钙激活钾通道(big conductance Ca2 -activated K -channel,BKCa)活性和α亚单位表达的变化及意义.方法 高脂饮食建立兔动脉粥样硬化动物模型,利用膜片钳单通道记录技术记录AS组和对照组VSMC BKCa开放概率(Po),平均关闭时间(Tc).应用实时荧光定量PCR技术分析Bkca α亚单位编码基因KCMA1的mRNA表达水平.结果 ①在cell-attachedpatches(膜电位 40mV)下,AS组和对照组的平均关闭时间(Tc)分别为(114.644±48.379)ms和(291.603±180.075)ms(P<0.001,n=10),开放概率(Po)分别为(0.1325±0.0555)和(0.0601±0.0433)(P<0.01,n=10);在inside-out patches(膜电位 40mV)下.二者的Tc为(69.075±37.711)ms和(396.876±177.161)ms(P<0.001,n=10),Po为(0.1676±0.1174)和(0.0409±0.177)(P<0.01,n=10);②AS组Bkca α亚单位表达减少.动脉粥样硬化兔KCMA1和GAPDH相对含量比为(0.68±0.5);对照组(3.19±2.14).结论 兔胸主动脉VSMC Bkca在AS时α亚单位表达减少,但活性显著增强;Bkca的活动可能作为AS时血管内皮源性舒张受损的一种选择性补偿机制,延缓动脉粥样硬化的进程.     

不同潮气量机械通气大鼠血清对血管内皮细胞钙激活钾通道的影响

目的:研究不同潮气量机械通气大鼠血清对血管内皮细胞钙激活钾通道(KCa通道)的影响.方法:健康雄性SD大鼠随机分为A组(麻醉后不做任何处)和B、C组(麻醉后行气管切开插管并分别给予不同潮气量(VT)的机械通气4h.B组VT10mL/kg,C组40 mL/kg),通气结束后取各组大鼠血清,分别刺激已培养好的人脐静脉内皮细胞(ECV304)30 min,利用细胞贴附式膜片钳观察KCa通道的变化.结果:B、C组内皮细胞KCa通道开放率明显上升,且以C组最为明显.结论:不同VT机械通气大鼠血清对ECV304 KCa通道的开放、关闭具有一定的影响.     

逼尿肌不稳定中钙激活钾/氯通道mRNA表达差异的实验研究

目的探讨钙激活钾/氯通道在正常和不稳定逼尿肌组织中的mRNA表达变化.方法雌性Wistar大鼠采用会阴部尿道结扎法制作成膀胱出口梗阻(bladder outlet obstruction,BOO)模型,经清醒状态膀胱测压确定逼尿肌不稳定(detrusorinstability,DI)后,提取正常与DI逼尿肌组织mRNA,以RT PCR方法研究组织中大电导钙激活钾通道(big conduc-tance calcium activated potassium channel,Bkca)、小电导钙激活钾通道(small conductance calcium activated potassium channel,Skca)、钙激活氯通道(calcium activated chloride channel,Clca)的mRNA表达,凝胶成像分析比较其差异性变化.结果大鼠尿道梗阻后DI发生率76.17%,膀胱容量及最大逼尿肌压显著增加(P＜0.01).钙激活钾/氯通道在两组大鼠逼尿肌中均有表达,其中Bkca、Skca2、Skca3明显降低,而Clca明显升高.结论钙激活钾/氯通道的表达改变可影响逼尿肌兴奋性的反馈调节,在逼尿肌不稳定的发病机制中有重要作用.     

大鼠肠系膜细动脉血管平滑肌大电导钙激活钾通道的特性

OBJECTIVE: To investigate the electrophysiological properties of large-conductance calcium-activated potassium channel (BKCa) in mesenteric arteriole smooth muscle cells of rat. METHOD: Mesenteric arteriolar smooth muscle cells from rats were isolated and inside-out patch clamp technique was used to study BKCa. RESULTS: The single channel conductance of BKCa recorded was 221+/-6 pS and the reversal potential was -0.12 mV in the presence of high potassium in the bathing and pipette solutions. The open probability (NPo) of the channel was both voltage- and intracellular calcium dependent, whereas the amplitude of the channel was not calcium-dependent. Prolonged closed state could be observed at intracellular calcium concentrations of 1 micromol/L or above, known as calcium-dependent inactivation. CONCLUSION: BKCa in rat mesenteric arterial smooth muscle cells has the properties of large conductance, high potassium selectivity, steep voltage dependence and high calcium sensitivity. The high sensitivity to calcium of BKCa may be related to the compensatory regulation of the smooth muscles in pathophysiological conditions.     

中电导钙激活钾通道(IKCa通道)在HeLa细胞中的表达及其对细胞增殖的影响

目的:本研究旨在探讨中电导钙激活钾通道(IKCa通道)在宫颈癌He La细胞中的表达及其对细胞增殖的作用。方法:以宫颈癌He La细胞株为研究对象,构建包含IKCa通道特异性sh RNA片段的p Genesil-IK质粒;运用荧光定量PCR和Western Blotting比较p Genesil-IK质粒转染干预前后宫颈癌He La细胞中IKCa通道基因和蛋白表达水平的变化;运用WST-1检测技术和流式细胞术观察转染干扰质粒后对He La细胞增殖的影响。结果:1转染p Genesil-IK干扰质粒后He La细胞IKCa通道m RNA及蛋白表达水平较对照组显著降低(P<0.05)。2转染p Genesil-IK1干扰质粒显著抑制He La细胞增殖和细胞周期(P<0.05)。结论 :宫颈癌He La细胞上有较高的IKCa通道表达,抑制宫颈癌He La细胞株IKCa通道表达能有效抑制癌细胞增殖,提示IKCa通道可能是宫颈癌的治疗靶点之一。     

大电导钙激活钾通道在平滑肌细胞中的调节机制

大电导钙激活钾通道由形成孔道的α亚基及具有调节作用的β亚基组成,因其电导大,对调节平滑肌细胞功能起重要作用,从而成为近年来研究的热点。大电导钙激活钾通道的调节机制多种多样,现对其近年来调节机制的研究进展作一综述。     

钙激活钾/氯通道对大鼠逼尿肌不稳定调节作用的实验研究

目的 研究钙激活钾／氯通道对逼尿肌不稳定的调节作用的变化，探讨其在逼尿肌不稳定(Detrusor instability，DI)发生中的作用。方法 采用Wistar大鼠DI模型，常规制备正常及DI逼尿肌条，体外张力测定其自发收缩频率和幅度，观察通道阻断剂及开放剂的作用。结果 DI组自发收缩频率与张力较对照组显著增加。大电导钙激活钾通道(Big conductance calcium activated potassium channel，BKca)阻断后，对照组频率降低而张力增加，DI组仅频率明显提高，开放后对照组频率与张力均降低，DI组仅频率明显下降。小电导钙激活钾通道(Sroall conductance calcium activated potassium channel，SKca)阻断后两组的频率与张力均明显增加，而开放后则对照组均降低，DI组仅频率下降。钾通道阻断或开放后对照组频率与张力的变化幅度明显高于DI组。钙激活氯通道(Calcium activated chloride channel，Clca)阻断后，DI组频率与张力下降，而对照组无明显改变。结论 钙激活钾／氯通道反馈调节逼尿肌的收缩，DI时Kca作用下调而Clca作用上调，提示钙相关的调节异常在DI的发生中具有重要作用。     

小电导钙激活钾通道在人心房肌细胞中的表达及功能

目的探讨小电导钙激活钾通道在人心房肌细胞中的表达情况和功能意义。方法收集行心内直视手术的窦性心律先心病患者8例,取右心耳组织,行免疫组化分析3种SK通道亚型(SK1、SK2和SK3)表达情况;使用经典两步酶解法分离心房肌细胞,应用穿孔膜片钳和传统电压钳技术分别记录心房肌细胞动作电位(APs)和全细胞的钙激活钾电流(IK,Ca),比较给予SK通道特异性阻断剂apamin(100 nmol/L)前、后动作电位时程(APD)变化。结果 SK1、SK2和SK3通道亚型在心房肌细胞中均呈阳性表达,膜片钳记录证实IK,Ca的存在,且apamin明显延长复极化90%的动作电位时程(APD90),而对APD50无明显影响。结论 3种SK通道亚型在人心房肌细胞中均有表达;与SK通道在神经元细胞中介导动作电位后超极化过程的功能不同,在心房肌细胞中,SK通道是参与APs复极末期过程的重要离子通道。     

原代培养猪冠状动脉平滑肌的电压依赖和钙激活钾通道

目的：研究原代培养的猪冠状动脉平滑肌电压依赖性和钙激活外向钾通道的特性。方法：离子通道电流采用膜片钳技术进行记录。结果：在内面向外式膜片构型,当膜内外K^ 浓度梯度类似生理状态时,该通道单位电导值约为100pS,而当膜内外K^ 浓度为对称的140mM浓度时,该通道单位电导值约270pS。其平均电流显示该通道具时间和电压依赖性激活特性,而无任何时间和电压依赖性失活特性。另外,通道的开放时间常数和开放概率随除极及胞内Ca^2 的增加而显著增加。通过用EGTA降低胞浆内Ca^2 浓度,可使外向电流抑制。动力学分析显示通道激活时存在一种开放状态和至少两种关闭状态。四乙胺（TEA）可在胞外侧阻断该电流,但高达15mM的4－氨基吡啶（4－AP）在胞内外都对通道无影响。在全细胞构型,对细胞膜进行除极可引出宏观外向电流。随着细胞的除极,该电流的激活时间常数逐渐缩短,并显示快速激活动力学特性。结论：在原代培养的猪冠状动脉平滑肌上存在有电压依赖和Ca^2 激活的K^ 选择性离子通道。该类通道具有非常高的单位电导值,除极时快速开放,对胞内Ca^2 高度敏感,但无失活等特性。     

吡拉西坦对海马神经元钙激活钾通道的作用

目的 研究吡拉西坦对原代培养海马神经元钙激活钾通道（KCa通道）的作用,以揭示吡拉西坦抗缺血性脑损伤的电生理机制。方法 应用膜片钳制技术记录原代培养的海马神经元的单通过电流活动,经p-CLAMP软件进行微机采样储存数据和数据的分析处理。结果 吡拉西坦对KCa通道具有明显的激活作用,增加通道开放概率,缩短通道关闭时间（P＜0．01）。结论 吡拉西坦可能通过激活KCa通道而对缺血神经元具有保护作用。     

中枢神经元钙激活钾通道的研究进展与缺血性脑损伤

钾通道广泛分布于生物体各种可兴奋细胞中 ,在中枢神经系统内存在多种类型的钾通道。其中由神经元细胞浆内 Ca2 浓度和动作电位决定其通道开放和关闭的一类钾通道称为钙激活钾通道 ( Kca能通道 )。在许多神经元中 ,动作电位的产生可导致 Ca2 内流 ,从而激活 Kca通道 ,产生钙激活钾电流 ( IKca)。自 1975年Meech等首次在神经细胞上证实了 IKca的存在后 ,先后在多种细胞上发现了一大类电导值不等 ,电压依赖性不同的 Kca通道。神经元表达多种 Kca通道 ,在调节神经元兴奋性 ,放电频率和膜振荡中起重要作用 [1] 。因此 ,对钙激活性钾通道…     

动脉粥样硬化兔血管平滑肌大电导钙激活钾通道KCMB1基因的mRNA表达量的变化研究

目的 研究动脉粥样硬化(atheresderosis,AS)时动脉血管平滑肌细胞大电导的钙激活钾通道(Large-coeduc-tanee Ca2 -activated K channel,BKca)β1亚单位(KCMB1)基因mRNA定量表达,探讨KCMB1基因在AS发生中的作用.方法 建立兔AS模型,应用逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR),检测AS时胸主动脉KCMB1基因的mRNA表达变化.结果 大电导的钙激活钾通道KCMB1基因在动脉粥样硬化组胸主动脉中表达明显减少.结论 大电导的钙激活钾通道β1亚单位调节血管平滑肌细胞的收缩,可能与AS的发生有一定的关系.