VitE对尿毒症患者血清诱导淋巴细胞凋亡的影响

目的 通过观察尿毒症患者血清对培养的正常人淋巴细胞凋亡、Fas分子表达的影响以及VitE的干预作用,探讨淋巴细胞凋亡与尿毒症患者免疫功能低下的关系,并寻找防治对策.方法 分离健康正常人外周血淋巴细胞并进行体外培养一周,分成对照组、尿毒症患者血清组、尿毒症患者血清+VitE组,培养一定时间后,用流式细胞仪测淋巴细胞早期凋亡率和Fas分子表达率.结果 加入尿毒症患者血清培养12、24 h,淋巴细胞早期凋亡率、Fas表达率分别较对照组明显增高(P＜0.01),且两者呈正相关(rs=0.905,P＜0.01);VitE干预后淋巴细胞早期凋亡率、Fas表达率与尿毒症血清组比较,明显降低(P＜0.05).结论 尿毒症患者血清可使正常淋巴细胞Fas分子表达增高和细胞早期凋亡率上升,可能是尿毒症患者免疫功能低下易发生感染的原因之一.VitE在一定程度可抑制尿毒症患者血清诱导的淋巴细胞Fas分子表达,减少细胞凋亡.     

内毒素诱导淋巴细胞凋亡

内毒素 (ＬＰＳ)是革兰氏阴性细菌细胞壁的成分 ,它可以引起宿主的广泛病理生理效应 ,如休克、组织损伤 ,甚至宿主死亡。ＬＰＳ也激活免疫系统 ,但主要作用于中性粒细胞、单核/巨噬细胞和Ｂ淋巴细胞。ＬＰＳ是否能影响Ｔ淋巴细胞 ,一直是研究者们感兴趣的课题。本研究对ＬＰＳ体外诱导淋巴细胞凋亡进行初步观察。1　材料与方法1 1　材料　 (1)试剂 :ＬＰＳ(Ｓｉｇｍａ ,10 0 μｇ·ｍｌ-1) ,淋巴细胞分离液 (上海试剂二厂 ) ,ＲＰＭＩ16 40完全培养基 (Ｇｉｂｃｏ ,美国 ) ,丫啶橙 (Ｓｉｇｍａ ,2 0 0 μｇ·ｍｌ-1)和嗅乙啶 (上海生产 ,2 0 0 μｇ·ｍｌ-1)。     

VitE和硒对白血病细胞凋亡及c-myc基因表达的影响

目的研究VitE和硒对人髓系白血病细胞株HL-60细胞凋亡和c-myc基因表达的影响.方法应用体外细胞培养法,DNA凝胶电泳技术、Northern印迹杂交技术.结果 VitE(100μmol/L) 和Se(8μmol/L)作用24h后,HL-60细胞出现细胞凋亡现象.VitE(100μmol/L)可以抑制c-myc基因的表达,作用有显著性(P＜0.05).Se(8μmol/L)无此作用.结论抑制c-myc基因的表达,诱导白血病细胞凋亡是VitE抑制白血病细胞增殖的重要途径之一.硒与VitE同样具有抗氧化作用,可诱导HL-60细胞凋亡.但对c-myc基因的表达却无影响,提示二者的作用机制是不同的.     

尿毒症患者血清对内皮细胞凋亡的影响及rhEPO的干预作用

目的 探讨尿毒症患者血清对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)凋亡的影响及重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,rhEPO)的干预作用.方法 选择我院2008年12月至2009年4月收治的尿毒症患者和健康志愿者各10例,HUVECs按不同的干预方式分3组进行实验:对照组(含10%健康者血清)、尿毒症组(含10%尿毒症患者血清)、rhEPO干预组(rhEPO 5、10、15 U/ml,分别加入含有10%尿毒症患者血清的培养基).各组干预24 h,TUNEL法检测细胞凋亡,比色法测定细胞内活性氧.结果 尿毒症患者血清环境中内皮细胞的凋亡指数和活性氧水平均高于对照组(P<0.01).rhEPO可抑制尿毒症患者血清诱导的内皮细胞凋亡(P<0.01),降低细胞内活性氧水平(P<0.01);随着rhEPO浓度的增加,内皮细胞凋亡指数和ROS水平都逐渐降低(P<0.05).相关分析显示:凋亡指数与活性氧水平呈正相关(r=0.89,P<0.01).结论 尿毒症患者血清可以诱导HUVECs凋亡,其机制可能与氧化应激有关.rhEPO可能通过减轻氧化应激反应而抑制尿毒症患者血清诱导的内皮细胞凋亡.     

锌对尿毒症血透患者血清睾丸酮水平的影响

尿毒症血透患者临床上有不同程度的缺锌 ,使患者的性功能受到了影响。本研究对 30例血透患者口服葡萄糖酸锌前后的血清睾丸酮水平、精子密度进行观察 ,探讨补锌治疗后是否能改善性功能及锌对他们的影响。对象和方法一、对象　观察对象为 1996～ 1997年在我科住院的 30例尿毒症男性维持性血透患者 ,平均年龄 36 (2 8～ 45 )岁 ,接受透析治疗 3个月以上 ,均使用瑞曲Ｇａｍｂｒｏ Ｓ90 ,ＧＦＥ 11透析器 ,每周透析 2～ 3次。健康对照组 30例 ,为本院血库献血员 ,均无肾脏疾病 ,平均年龄 32 (2 0～ 35 )岁。二、方法1 30例男性患者均给予口服 10…     

锌对尿毒症血透患者血清睾丸酮水平的影响

尿毒症血透患者临床上有不同程度的缺锌,使患者的性功能受到了影响。本研究对30例血透患者口服葡萄糖酸锌前后的血清睾丸酮水平、精子密度进行观察,探讨补锌治疗后是否能改善性功能及锌对他们的影响。对象和方法　　一、对象　观察对象为1996～1997年在我科住院的30例尿毒症男性维持性血透患者,平均年龄36(28～45)岁,接受透析治疗3个月以上,均使用瑞曲Gambro-S90,GFE-11透析器,每周透析2～3次。健康对照组30例,为本院血库献血员,均无肾脏疾病,平均年龄32(20～35)岁。     

VitE对维持性血液透析患者氧化应激状态的影响

目的:研究抗氧化剂维生素E对维持性血液透析(MHD)患者氧化应激状态的影响.方法:MHD患者58例,口服维生素E400mg/d,服药6周,观察用药前后血浆丙二醛(MDA),循环晚期氧化蛋白产物(AOPP),过氧化物歧化酶(SOD),谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-PX)及血浆中维生素E浓度,选20例健康者作正常对照.结果:患者氧化指标AOPP(187.27±54.9 μmol/Lvs99.05±26.2 μmol/L)和MDA(7.74±2.17 nmol/ml vs3.06±1.70 nmol/ml)明显高于正常对照组(P＜0.01),GSH-PX活性(74.42±27.46 μmol/L vs127.27±25.88 μmol/L)、SOD活性(70.88±14.74 U/ml vs 114.67±24.65U/ml)VitE浓度(3.27±1.36 μg/ml vs6.58±1.44 μg/ml)明显低于正常对照组(P＜0.01)及(P＜0.05),给予维生素E治疗后,AOPP(143.41±33.7 μmol/Lvs187.27±54.9 μmol/L)、MDA(5.19±2.85 nmol/ml vs7.74±2.17 nmol/ml)较治疗前明显降低(P＜0.01)、VitE(5.49±2.06 μg/ml vs3.27±1.36 μg/ml)、SOD活性(108.30±22.95 U/ml vs70.88±14.74 U/ml),GSH-PX活性(91.56±14.49 μmol/L vs74.42±27.46 μmol/L)较治疗前升高(P均＜0.01).结论:口服大剂量维生素E(400mg/d)可以改善血透患者的氧化应激状态,血透患者短期应用大剂量维生素E未见明显副作用.     

尿毒症患者血清对大鼠系膜细胞增殖的影响

取尿毒症患者血清,稀释成不同浓度,体外培养大鼠系膜细胞(MC),采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,流式细胞仪测定细胞周期,免疫细胞化学法检测C-jun蛋白表达.发现不同稀释浓度尿毒症患者血清抑制大鼠MC增殖,具有浓度和时间依赖性;并促使S+G2/M期细胞减少,G0～G1期细胞增多;明显抑制C-jun蛋白的表达(P<0.01,P<0.05).同时,高甲状旁腺激素(PTH)尿毒症患者血清的抑制作用大于PTH正常的患者血清(P<0.05).提示慢性肾衰竭晚期尤其合并甲状旁腺功能亢进时,MC增殖已不是导致病程进展的主要原因.     

阿魏酸钠对氧化诱导人淋巴细胞凋亡的抑制作用

目的了解抗氧化剂阿魏酸钠对Ｈ２Ｏ２诱导人淋巴细胞凋亡过程中形态及生化的变化。方法采用电镜，激光共聚焦显微镜，ＭＴＴ及ＤＮＡ电泳分析方法。结＊果Ｈ２Ｏ２处理细胞后Ｂｃｌ－２基因表达明显减少，加入阿魏酸钠后明显恢复，而Ｈ２Ｏ２对Ｂａｘ基因表达略有增加，加入阿魏酸钠后明显降低。结论Ｈ２Ｏ２能诱导淋巴细胞凋亡，阿魏酸钠可减轻细胞凋亡。同时阿魏酸钠可使Ｈ２Ｏ２诱导的细胞Ｂｃｌ－２基因表达明显恢复，对Ｂａｘ基因表达明显降低。     

维生素E对内皮细胞诱发血管平滑肌细胞凋亡的抑制作用

目的：研究维生素E对脂质过氧化损伤的内皮细胞（EC）诱发的血管平滑肌细胞（VSMC）凋亡是否具有抑制作用。方法：以氢过氧化枯烯为诱发剂引发培养的血管EC的脂质过氧化反应,将制备的内皮细胞条件培养液（EC－CM）作为实验因素作用于培养的VSMC。彩和透射电子显微镜,免疫组织化学等方法观察维生素E对内皮细胞条件培养液诱发的血管平滑肌细胞凋亡的影响。结果：电镜可见VSMC凋亡小体。免疫组织化学结果显示,VSMC的P53蛋白表达增加,bcl-2蛋白表达下调。加维生素E组电镜改变轻微,p53,bcl-2异常表达减轻,结果：维生素E对脂质过氧化损伤的内皮细胞诱发的血管平滑肌细胞凋亡具有抑制作用。,     

酮替芬对感染伯氏疟原虫小鼠血清维生素A,C,E含量的影响

采用荧光分光光度法和紫外分光光度法测定感染伯氏疟原虫(P.b,ANKA株)小鼠血清中维生素A,C,E含量。感染未治组小鼠血清V.A,V.C含量明显低于酮替芬组、酮替芬+氯喹组及正常组,与氯喹组无显著差异,酮替芬及酮替芬+氯喹组的小鼠血清中V.A,V.C含量与正常组无显著差异。各组V.E无显著差异。     

Bcl-2、Bak及caspase-9、3在维生素E琥珀酸酯诱导人胃癌细胞凋亡中的作用

目的探讨维生素E琥珀酸酯(VES)对体外培养的人胃癌细胞株SGC-7901细胞的凋亡诱导作用及其可能机制。方法以体外培养的人胃癌SGC-7901细胞为肿瘤模型,给予不同浓度水平的VES处理不同时间后,采用四甲偶氮唑盐比色(MTT)法观察VES对人胃癌细胞的生长抑制作用;用Annexin-V-FITC方法检测VES对胃癌细胞的凋亡诱导作用;采用Western blotting方法检测VES处理后的胃癌细胞中Bcl-2和Bak蛋白表达及caspase-9、caspase-3酶原的表达。结果(12.5～50.0)μmol/L的VES作用于人胃癌细胞24h后就可以抑制胃癌细胞的生长,呈明显的剂量依赖关系;Annexin-V-FITC和PI双染流式细胞仪检测结果表明,50μmol/LVES处理SGC-7901细胞12h后即可以引起细胞凋亡,且随作用时间的延长凋亡越明显。Western blotting结果显示,VES可以调节胃癌细胞中与凋亡相关的Bcl-2和Bak蛋白的表达,同时促进caspase-9、caspase-3酶原的裂解与活化。结论调节Bcl-2和Bak蛋白的表达,并裂解caspase-9、caspase-3是VES在体外发挥对人胃癌细胞的生长抑制和凋亡诱导作用的可能机制之一。     

左卡尼汀对血清饥饿诱导心肌细胞凋亡的保护作用

摘要：目的研究左卡尼汀对血清饥饿诱导心肌细胞凋亡的保护作用。方法新生大鼠心肌细胞分为正常组、模型组和不同剂量左卡尼汀（20、40、80μg／mL）治疗组。MTF法测定细胞存活率,流式细胞仪测心肌细胞的凋亡指数,Wsetemblot法检测心肌细胞内半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（caspase-3）表达水平。结果左卡尼汀明显抑制血清饥饿诱导的心肌细胞凋亡,表现为细胞存活率升高,凋亡率下降,caspase-3表达降低。结论左卡尼汀对血清饥饿诱导的心肌细胞凋亡具有一定的保护作用。     

两种检测方法对地塞米松诱导小鼠淋巴细胞凋亡的观察

目的 探讨地塞米松体外诱导小鼠脾淋巴细胞凋亡的实验方法,为进一步研究淋巴细胞凋亡对机体免疫调节作用机理及其临床应用提供实验依据.方法 取昆明小鼠,分离其脾脏淋巴细胞制成单细胞悬液,实验组加入地塞米松(DEX)使终浓度为10-5 mol/L,培养24 h后,采用瑞氏染色法光镜下观察凋亡细胞形态,用凝胶电泳法观察其DNA ladder;同时设立不加DEX的对照组及新鲜淋巴细胞对照组.结果光镜观察,淋巴细胞在DEX作用下,可见典型的凋亡形态特征变化,主要表现为细胞核边聚、浓缩,以"齿轮状"细胞改变多见;DNA凝胶电泳图谱呈现典型的凋亡DNA ladder,两种方法结果相符.而未加DEX对照组凋亡细胞明显偏少,新鲜淋巴细胞对照组未见凋亡改变.结论 体外条件下用DEX可高效诱导小鼠脾淋巴细胞凋亡,用瑞氏染色法及DNA凝胶电泳法能准确、快速鉴定凋亡淋巴细胞.     

维生素C、E对氢化可的松所致大鼠学习记忆功能损伤的保护作用

为探讨慢性应激对学习记忆功能过氧化损伤的可能机制以及维生素 C(VC)与维生素 E(VE)对慢性应激所致学习记忆功能损伤的抗过氧化保护作用 ,本实验在反复给予大鼠氢化可的松 (HC)建立慢性应激损伤学习记忆功能的动物模型基础上 ,同时给予 VC、 VE后观察大鼠学习记忆成绩、海马形态以及血、海马超氧化物歧化酶 (SOD)与丙二醛 (MDA)含量的变化。发现长期给予 HC的大鼠 :1在 Y-迷宫中的学习记忆成绩下降 ,15次正确数分别由对照组的 10 .38± 1.4 1、 11.5 0± 2 .0 7降为 7.88± 1.73(P<0 .0 1)、 10 .0 0± 2 .2 0 ;2海马 CA1 区发生大量神经细胞核固缩的形态学改变 ,核固缩细胞数由对照组的 (3.2 0± 2 .4 0 )个 / mm线长度增为 (98.4 0± 2 0 .70 )个 / mm线长度 (P<0 .0 1) ;3血、海马 SOD含量减少 ,由对照组的 (134.5 7± 1.2 6 ) U/ ml、 (71.2 3± 3.73) U/ m l降为 (74 .79± 5 .4 7) U/ ml(P<0 .0 1)、 (42 .87± 2 .76 ) U/ ml (P<0 .0 1) ;MDA含量增加 ,由对照组的 (4.76± 0 .73)μm ol/ L、 (130 .89± 30 .6 2 )μmol/L 增为 (9.4 8± 1.4 5 ) μmol/ L (P<0 .0 1)、 (2 15 .6 2± 6 0 .37) μm ol/ L (P<0 .0 5 )。同时给予 VC、VE可使上述指标明显改善 :学习记忆成绩提高为 11.2 5± 1.2 8(     

Vit E和硒对急性肝损伤期肝星形细胞增殖和凋亡的影响

目的 了解Vit E和硒联合干预对急性肝损伤期肝星形细胞增殖和凋亡的影响。方法 采用腹腔内注射50％CCl4制备大鼠急性肝损伤模型,在饲料中添加适量VitE(250mg／kg饲料)和硒(0．2mg／kg饲料)进行营养干预．分别在第1次和第3次注射CCl4后的6、24、48、72h处死大鼠,取其肝组织,用α-SMA免疫组化方法检测激活的HSC细胞。用原位凋亡(TUNEL)技术和α-SMA免疫组化双标染色检测HSC凋亡。结果 注射CCl4后HSC激活,并在第1次注射后72h活化HSC数量达到高峰;在所观察的各时间点,随时间延长HSC凋亡数逐步增加;在同一时间点,抗氧化剂干预组HSC数量少于病理造模组。结论 饲料中添加适量Vit E和硒可抑制CCL4所致的急性期肝损伤时HSC的激活和(或)增殖,并促进激活的HSC凋亡。     

气相色谱法测定维生素E微乳中维生素E的含量

维生素Ｅ微乳由维生素Ｅ，吐温－８０，甘油及水组成，通过绘制相图筛选最佳配方及制备工艺，采用气相色谱法测定微乳中维生素Ｅ的含量，以３％ＯＶ－１７为固定相，８０￣１００目１０１担体，柱温为２６５℃，以三十二烷为内标，线性范围为０．４￣２．０ｍｇ相关系数为０．９９５２，平均回收率为１０１．８％，ＲＳＤ＝０．１％。     

紫外分光光度法测定复方维生素E霜中维生素E的含量

本文报告紫外分光光度去测定复方维生素E霜中维生素E的含量,方法简便,准确, 适用于一般医院制剂室测定。