化学发光免疫分析法研究进展

化学发光免疫分析法(chemiluminescence immunoassay,CLIA)是一种高灵敏度高特异性的检测分析技术,具有广泛的应用领域。本文简要介绍了化学发光免疫分析法的分类、发展和应用,重点从实际应用的角度阐述了化学发光在解决低丰度低信噪比、多组分检测、高速自动化等方面的发展情况,以及简要介绍了新型材料、试剂和技术应用于化学发光体系的进展,并对化学发光免疫分析法的发展趋势进行了展望。     

化学发光分析及其临床应用

化学发光分析是根据化学反应产生的光辐射强度确定物质含量的一种痕量分析方法,可与电化学分析、免疫分析、固定化试剂技术、传感器技术等分析技术联用,具有灵敏度高、线性范围宽、不需要外来光源、分析速度快、仪器设备相对简单、便宜等优点。常用的化学发光技术有电化学发光、化学发光免疫分析、微粒子化学发光等。化学发光分析在临床实验室中主要应用于激素、肿瘤标志物、传染病监测、血药浓度检测等。     

临床检验中化学发光免疫分析的应用

目的:探析临床检验中化学发光免疫分析的应用。方法:选取我院2013年2月——2014年2月间收治的120例甲状腺疾病患者,分为40例甲状腺肿瘤组,40例甲亢组,40例其他甲状腺相关疾病组,对照组为40例健康人员。采用放射免疫分析与化学发光免疫分析对患者的甲状腺球蛋白进行检测,比较4组结果。结果:对于甲状腺球蛋白浓度的测定,化学发光免疫分析法明显优于放射免疫分析法(P<0.05);化学发光免疫分析法对甲亢组的特异性与灵敏度为100%,相较于放射免疫分析法差异较小(P>0.05);化学发光免疫分析法对甲状腺肿瘤组和其他疾病组特异性与灵敏度均比放射免疫分析法高(P<0.05)。结论:甲状腺疾病原因化学发光免疫分析法准确可靠,安全有效,操作便捷,值得临床检验广泛应用。     

临床检验中化学发光免疫分析的应用

目的：探析临床检验中化学发光免疫分析的应用。方法：选取我院2013年2月——2014年2月间收治的120例甲状腺疾病患者,分为40例甲状腺肿瘤组,40例甲亢组,40例其他甲状腺相关疾病组,对照组为40例健康人员。采用放射免疫分析与化学发光免疫分析对患者的甲状腺球蛋白进行检测,比较4组结果。结果：对于甲状腺球蛋白浓度的测定,化学发光免疫分析法明显优于放射免疫分析法（P<0.05）;化学发光免疫分析法对甲亢组的特异性与灵敏度为100%,相较于放射免疫分析法差异较小（P>0.05）;化学发光免疫分析法对甲状腺肿瘤组和其他疾病组特异性与灵敏度均比放射免疫分析法高（P<0.05）。结论：甲状腺疾病原因化学发光免疫分析法准确可靠,安全有效,操作便捷,值得临床检验广泛应用。     

酶联免疫法和化学发光法在测定CA-125中对比分析

目的 讨论酶联免疫法(ELISA)和化学发光法(CLIA)在测定CA-125中对比分析.方法 选取86例血液标本,同时采用酶联免疫法和化学发光法测定CA-125,比较两种方法的灵敏度、敏感性、批内批间变异.结果 化学发光法的灵敏度、敏感性、批内批间变异均优于酶联免疫法.结论 化学发光法的稳定性好、重复性好、敏感度高、但费用昂贵;酶联免疫法经济实用,再高值测定中的敏感性比较好,临床上要根据自己的具体情况,量力而行.     

电化学发光免疫分析系统E170的应用评价

目的定量评价E170电化学发光免疫分析仪技术性能。方法以E2（Estradiol）检测为例,对系统检测的准确度、精密度、灵敏度和可测范围等指标进行研究。结果各项技术指标均达到和超过了实验方法选择的标准。结论 Elecsys170电化学发光荧光免疫分析系统是一套有效性好、准确度高、灵敏度高、系统精度良好的自动化免疫分析系统,可满足临床和科研工作的需要。     

低浓度乙型肝炎表面抗原三种检测方法的比较与分析

目的:分析比较低浓度乙型肝炎表面抗原三种检测方法效果。方法:抽取500例本院自2018年1月-2019年2月收治的乙型肝炎患者与同时段来本院进行体检的健康者500例作为研究对象。前者定为观察组、后者定为对照组,两组研究对象均实施化学发光微粒子免疫分析法、胶体金法、酶联免疫吸附法检查,并以电化学发光免疫分析法作为金标准,对比化学发光微粒子免疫分析法、胶体金法、酶联免疫吸附法检测敏感度与特异度。结果:化学发光微粒子免疫分析法出率最高,而胶体金法最低;特异度比较化学发光微粒子免疫分析法最高,酶联免疫吸附法最低;化学发光微粒子免疫分析法灵敏度明显高于胶体金法、酶联免疫吸附法,差异具有统计学意义,P0.05。结论:在低浓度乙型肝炎表面抗原检测中,化学发光微粒子免疫分析法、时间分辨荧光免疫法检测准确性、敏感度与特异度均较高,值得临床推广应用。     

化学发光免疫分析在临床检验中的应用

目的:应用化学发光免疫分析进行乙肝抗-HBC检验,总结检验体会。方法:收集60例乙肝患者并将其分为两组,分别进行化学发光免疫分析检查和酶联免疫吸附检查,比较检验阳性率。结果:化学发光免疫分析法的抗-HBc阳性率为90.0%,酶联免疫吸附法的抗-HBc阳性率为76.6%,(χ~2=4.517,P0.05)。结论:化学发光免疫分析法用于临床检验能提高检验准确率,值得推广。     

酶联免疫法和化学发光法检测25-羟基维生素D的一致性

目的研究酶联免疫法和化学发光法两种方法检测血清中25-羟基维生素D[25(OH)D]浓度结果的一致性。方法参考NCCLS-EP9-A2文件的相关规定,收集了40例人体血清样品,分别使用IDS酶联免疫试剂盒和IDS-i SYS化学发光法自动分析仪检测25(OH)D浓度。剔除方法内及方法间离群值,分析两种检测方法的相关性,并进行回归分析、偏倚性分析。结果两种方法的相关系数r=0.981,回归方程为y=0.995x+2.3928,偏倚性分析显示随着样品浓度的升高,两种方法检测值之间的相对标准偏差有减小的趋势。结论酶联免疫法和化学发光法检测血清中25(OH)D浓度的重复性及相关性较好。     

化学发光免疫分析系统质量管理相关问题探讨

化学发光免疫分析系统是通过抗原抗体反应和化学发光反应原理定性或定量测定人类血清、血浆、全血或其它各种体液中病毒、细菌或真菌的抗原或抗体、人体内分泌激素、肿瘤     

Determination of blood concentration of valproic acid--a comparative study of methods

The substrate labeled fluorescent immunoassay technique (SLFIA method) was examined in terms of clinical utility for the determination of blood levels of valproic acid (VPA) by comparing it to the enzyme-multiplied immunoassay technique (EMIT method). Both accuracy and precision were very high, and the correlation between the two was excellent (r = 0.985). Practically, the presence of hemoglobin in the sample had little influence on the accuracy. Results show that the SLFIA method is a useful means for the determination of blood concentration of VPA in epileptic patients.     

酶联免疫分析测试仪的设计

内分泌激素测量技术是医疗诊断技术发展的重要分支,磁分离酶联免疫技术是其中的主要测量方法.文中阐述了国产磁分离酶免疫测定仪的仪器原理及设计,对数据处理模型的设计进行了重点讨论.     

Rapid quantitation of follistatin by surface plasmon resonance (SPR) immunoassay

A simple, rapid, and accurate assay using surface plasmon resonance (SPR) apparatus with anti-follistatin antibody (SPR immunoassay) has been developed for the quantitation of recombinant follistatin. This assay can be performed with a direct injection of conditioned medium; results were obtained within 10 min. The quantitation component of this assay was precise and accurate with a limit of quantitation of 62.5 ng/ml in Ham's F12 medium containing 2% fetal bovine serum. These results demonstrate that SPR immunoassay is a powerful technique for several researches, especially for screening of gene transfectant and monitoring of protein production.     

Prevalence of asymptomatic carriers of Chlamydia trachomatis among pregnant and non-pregnant women in south-western Greece

One-hundred-ninety-three pregnant and seventy five non-pregnant women, aged 18–35 years, were examined for endocervical infection with Chlamydia trachomatis using an enzyme immunoassay technique on cervical specimens. Chlamydia trachomatis was discovered in 7.2% of the pregnant women and in 10.6% of the non-pregnant ones. There was no correlation between chlamydia infection and either previous vulvovaginitis, previous pregnancies or pregnancy outcome. However, younger, more highly educated women with high sexual promiscuity tended to be more frequently colonized.     

心脏型脂肪酸结合蛋白免疫浊度法的建立及初步临床应用

目的建立免疫浊度法检测血浆心脏型脂肪酸结合蛋白,探讨心脏型脂肪酸结合蛋白在早期急性心肌梗塞中的诊断价值。方法建立免疫浊度法反应体系;应用本研究所建立的免浊度法疫观察早期急性心肌梗塞患者0～6 h血浆心脏型脂肪酸结合蛋白的变化情况,并与Sandwich-ELISA法进行比较;比较心脏型脂肪酸结合蛋白与肌红蛋白、肌酸激酶同工酶和肌钙蛋白T/I用于诊断早期急性心肌梗塞的灵敏度和特异性。结果免疫浊度法具有与Sandwich-ELISA法相似的检测效果,两者具有较好的相关性(r=0.966);早期急性心肌梗塞组血浆心脏型脂肪酸结合蛋白较对照组明显升高(P<0.05);心脏型脂肪酸结合蛋白具有较好的精密度、较高回收率和不易受其他因素干扰;与肌红蛋白、肌酸激酶同工酶和肌钙蛋白T/I相比,心脏型脂肪酸结合蛋白对早期急性心肌梗塞诊断具有较好的灵敏度和特异性。结论与ELISA法相比,免疫浊度法检测心脏型脂肪酸结合蛋白具有快速、简便、灵敏度和特异性高的特点,值得临床推广应用。     

噬菌体展示肽库筛选赭曲霉毒素A模拟表位的研究

目的从噬菌体随机肽库中筛选模拟赭曲霉毒素A表位的噬菌体粒子,并以其替代毒素建立免疫学检测方法。方法以抗赭曲霉毒素A的单克隆抗体为配基,免疫亲和筛选以融合蛋白形式表达在丝状噬菌体M13外壳蛋白Ⅲ上的随机七肽库,以ELISA方法鉴定阳性克隆,同时进行DNA测序确定插入七肽的氨基酸序列。结果经过4轮淘选,共筛选到11株能与该抗体特异性结合的阳性克隆,且该结合能被赭曲霉毒素A阻断,模拟表位的共有序列为IRPMVXX,X为任意氨基酸。以其中的P2号克隆建立了竞争ELISA检测方法,线性范围为200～8000pgml,检测下限为150pgml。结论噬菌体展示技术可成功筛选到赭曲霉毒素A模拟表位,筛选到的噬菌体粒子可作为毒素的替代品建立免疫学分析方法。     

糖类抗原CA19-9光激化学发光免疫分析方法的建立

目的:建立一种检测人血清糖类抗原CA19-9(CA19-9)浓度的光激化学发光免疫分析方法。方法:采用2株针对不同抗原表位的抗CA19-9抗体,其中一株抗体用来包被发光微粒,另一株抗体标记生物素,以双抗体夹心法检测血清中CA19-9浓度,并与Roche公司试剂(电化学发光法)进行比较。结果:发光微粒浓度为25 mg/ml、生物素标记抗体浓度为16.17 mg/ml时,监测范围为0 U/ml～500 U/ml,灵敏度为0.27 U/ml,平均回收率为101.26%,批内变异系数(CV)为1.67%～4.35%,批间CV为1.12%～3.25%,与CEA、CA12-5、CA15-3的交叉反应率低,稳定性好,与电化学发光免疫分析法的符合率高(符合率=98.8%,γ=0.991)。结论:光激化学发光免疫分析方法测定CA19-9具有高灵敏度、精密度和准确性,与电化学发光免疫分析法的符合率高,适用于临床测定。     

上海市社区定量免疫检验技术的试点利用状况分析

目的:分析试点期间相关免疫检验项目利用情况,为上海市在社区卫生服务中心推广定量免疫检验技术提供依据。方法:运用VIDAS全自动荧光免疫分析系统在社区卫生服务中心试点开展甲状腺激素、肿瘤标记物、肝炎、绒毛膜促性腺激素和心血管相关免疫检测项目。分析试点项目利用状况、检验结果和使用满意度。结果:试点共开展4 450次免疫检测,癌胚抗原和甲种胎儿球蛋白检测次数最多,甲状腺激素和其他肿瘤标记物的检测次数也较多。社区卫生技术人员对试点项目总体评价较好,临床医生的满意度高于检验科人员。结论:社区患者对肿瘤标记物免疫检测的需求较大,在社区开展甲状腺激素免疫检测有助于慢性病管理,部分检测项目在市郊社区中有潜在需求。试点免疫检验项目总体效果良好。     

游离甲状腺素固相试管酶免测定方法建立的初步研究

目的:研究建立血清游离甲状腺素固相试管酶免测定方法。方法:采用经60Co源γ射线辐照改性的聚苯乙烯试管吸附抗甲状腺素抗体,标本中的甲状腺素和甲状腺素碱性磷酸酶标记物竞争结合固相抗体,通过内插法从标准曲线计算标本浓度,并与磁酶免测定法对比。结果:该方法与磁酶免测定法对比实验直线回归分析,回归方程为Y=1.083X-0.212,相关系数r=0.910,提示两种方法显著相关;灵敏性测试为0.01pg/ml,精密度测试平均变异系数为4.15%。配对样本t检验双侧P>0.05,提示两种检测方法无显著性差异。结论:以磁酶免测定作参照,所建立的测定方法更简便、快速,且具有磁酶免测定同样的灵敏性和稳定性。     

免疫胶体金快速诊断技术的临床应用与质量控制

目的:免疫胶体金技术(ICGT)是继免疫荧光、放射性免疫和酶联免疫吸附法之后发展起来的固相标记免疫测定技术,了解ICGT在临床快速诊断的应用,提出在此实验过程中的质量控制建议。方法:以胶体金作为示踪标志物,应用于抗原抗体反应中。通过文献检索与归纳,对目前胶体金免疫技术的临床诊断、应用和常见问题进行总结。结果:医学检验中应用的免疫胶体金快速检测技术主要方法——快速斑点免疫金渗滤法(DIGFA)和胶体金免疫层析法(GICA)均以微孔滤膜为载体,该技术具有敏感性和特异性高、操作便捷及可快速判读结果等特点。结论:ICGT因其操作简便、快速诊断的特点,适用于广大基层医疗单位并能在现场进行检测和诊断。