DOX联合HMME-PDT对人肝癌细胞HepG2联合作用的研究

目的:初步探讨阿霉素(DOX)联合血卟啉单甲醚介导的光动力疗法(HMME-PDT)对人肝癌细胞(HepG2)的作用及可能的机制.方法:实验分对照组、单独PDT组、单独DOX组和联合作用组.PDT组所用的光敏剂剂量为2.5μg/mL,能量密度为0.2 J/cm2、0.4 J/cm2、0.8 J/cm2、1.6 J/cm2和3.2 J/cm2.DOX组所用的DOX浓度为0.1 μg/mL、0.2μg/mL和0.4μg/mL.联合作用为不同剂量单独作用的组合,联合时序为PDT后立即加入阿霉素(PDT DOX)或阿霉素先于PDT24h加入(DOX PDT).MTT法检测24h后的细胞活性抑制率,并用金氏公式分析联合效应.荧光显微镜观察不同处理组阿霉素的摄取情况.结果:MTT法结果表明,联合作用的细胞抑制率高于单独作用,这在PDT DOX的联合时序作用中表现更为明显.金氏公式分析表明,PDT DOX的联合作用相对DOX PDT的联合作用产生更明显的协同或相加效应.荧光显微镜实验可以观察到联合作用明显提高了细胞对阿霉素的摄取,并且随着联合剂量的加大摄取加强.结论:相对单独作用,联合作用有更高的细胞活性抑制率,联合效应与联合时序有关,PDT DOX的联合作用的联合效果好.联合作用产生相加或协同效应的机制之一可能是因为PDT处理改变了细胞膜通透性从而更有利于细胞对阿霉素的摄取,最终提高作用效果.     

研究不同光敏剂诱导的光动力疗法对人白血病细胞的杀伤作用

目的 研究并比较3种卟啉类光敏剂——血卟啉衍生物(HpD)、癌光啉(PsD007)和血卟啉 单甲醚(HMME)诱导的光动力疗法(PDT)对白血病细胞K562的杀伤效应.方法 以人白血病细胞K562为研究对象,分为对照组和PDT组,以梯度浓度的光敏剂与K562细胞共同孵育,经不同能量光照后,用噻唑蓝(MTT)法测定PDT对K562细胞的杀伤作用.结果 与对照组相比,PDT对K562细胞有明显杀伤作用,并随着光敏剂浓度的增加和光照能量的增大,效果增强.PsD007-PDT和HMME-PDT的效果都明显优于HpD-PDT(P＜0.05);而当光敏剂质量浓度较大(25 μg/ml)或能量密度较大(7.2 J/cm2)时,PsD007-PDT的作用效果优于HMME-PDT.结论 PDT对人白血病细胞K562具有明显的杀伤作用,其对细胞的抑制率具有显著的剂量效应关系;PDT对K562的杀伤效应与光敏剂种类有关,HpD-PDT的杀伤效果不如PsD007和HMME;在较高能量密度和较大光敏剂浓度的条件下,PsD007-PDT的效果优于HMME-PDT.     

以532nm激光为光源的HMME-PDT对人类乳腺癌细胞的杀伤作用

目的：探讨532nm激光不同光剂节参数及血卟啉单甲醚（HMME）不同浓度参数对体外培养的乳腺癌细胞（MCF-7）的光动力学杀伤作用。方法：MCF-7细胞用浓度分别为5μg／ml、10μg／ml、20μg／ml的HMME孵育2h后，以532nm半导体激光照射，能量密度分别为0．3J／cm^2、0．6J／cm^2、1．2J／cm^2,2．4J／cm^2、4．8J／cm^2，24h后用CCK-8检测细胞存活率，并在光镜及电镜下观察细胞的形态变化。结果：随着激光剂景的增大，在一定的范围内，细胞的抑制率呈现上升趋势；能量密度为2．4J／cm^2．HMME浓度为20μg／ml时，达到最大的抑制率为55．5％；并且细胞的抑制率也和HMME浓度呈剂量依赖型；光镜下可观察到细胞坏死和凋亡样改变。结论：以532nm激光为光源的HMME-PDT对MCF-7细胞有明显的杀伤作用．并在一定范围内呈光剂量和HMME浓度剂最依赖型。     

nm23蛋白在口腔鳞癌Tca8113细胞中的表达

目的:研究nm23蛋白在口腔鳞癌细胞株Tca8113中的表达,探讨其在口腔鳞癌发展中的作用。方法:Western blot法检测nm23蛋白的表达,免疫细胞化学法检测nm23蛋白的表达及其分布,激光扫描共聚焦显微镜观察细胞骨架的变化。结果:nm23蛋白在口腔鳞癌细胞中随着维生素E琥珀酸酯作用时间的延长表达上调,主要分布在细胞质中,细胞骨架的主要成分微丝肌动蛋白逐渐减少,呈碎片状。结论:nm23蛋白可能与口腔鳞癌的发展有关。     

HMME介导的光动力对兔血管平滑肌细胞生长抑制及诱导细胞凋亡的作用

目的：观察原代培养的兔血管平滑肌细胞在HMME-PDT作用下生长的变化及其死亡方式。方法：常规台盼兰染色观察HMME-PDT作用后6h和24h对细胞的杀伤作用，HMME的浓度为10μg／ml，激光剂帚为2．4～9．6J／cm^2；HE染色法观察PDT后24h细胞形态的变化；流式细胞仪Annexin V／PI双染法检测细胞死亡方式；共聚焦品微镜观察HMME在线粒体的定位。结果：台盼兰法检测结果娃示随着PDT能量密度的增加细胞的存活率逐渐下降，光镜下可见大部分细胞呈死亡或凋亡样改变，Annexin V／PI法检测显示PDT 24h后凋亡率可达50．5％．共聚焦显微镜观察到HMME在线粒体内有分布。结论：HMME-PDT能显著抑制兔血管平滑肌细胞的生长．并使其发生明显的凋亡。     

HMME-PDT对大鼠致龋模型中变形链球菌抑制作用的研究

目的 探讨不同参数光动力疗法(PDT)在大鼠口腔龋齿预防中的作用.方法 用变形链球菌感染Wistar大鼠口腔,建立龋齿模型.以0.9%生理盐水、0.2%氟化钠为对照组,单纯激光、单纯光敏剂、不同参数PDT为实验组.采用血卟啉单甲醚(HMME)为光敏剂,532 nm半导体激光为光源,每周处理牙齿1次,5周后处死大鼠,Ke...     

桂皮酸抑制舌鳞癌细胞Tca8113的增殖

目的探讨桂皮酸(CINN)对舌鳞癌Tca8113细胞增殖的影响及机制。方法舌鳞癌细胞Tca8113经CINN处理后,倒置显微镜下观察细胞增殖和形态;MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期;免疫组化检测KLF6、Bcl-2、P53、cyclin D1、c-Jun及PTEN的蛋白表达。结果 CINN呈时间-剂量依赖性显著抑制Tca8113细胞增殖(P0.05);可见典型的Tca8113细胞分化的形态学特征;CINN处理后,G1、G2期细胞显著减少,S期细胞显著增加,细胞明显被阻滞于S期(P0.05);CINN处理后KLF6和P53的蛋白表达上调(P0.05),Bcl-2、cyclin D1及c-Jun的蛋白表达下调(P0.05)。结论 CINN可抑制舌鳞癌细胞Tca8113的增殖并将其阻止于S期,同时诱导细胞凋亡。     

HMME-PDT对牙骨质片及种植体表面Pg菌斑生物膜的影响

目的 探讨光动力疗法（PDT）对牙骨质片及种植体表面牙龈卟啉单胞菌（Pg）菌斑生物膜的杀灭效果,获得有效杀灭Pg的光敏剂和激光照射的合理剂量.方法 选用Pg标准菌株分别联合经全唾液处理后的无菌牙骨质片和无菌种植体共同培养,建立简易的体外人工牙骨质片和种植体表面细菌附着模型.以血卟啉单甲醚（HMME）为光敏剂,波长630 nm半导体激光为光源,照射牙骨质片表面细菌附着模型60 s后,计算菌落形成单位（CFU）,筛选出最佳激光能量密度（EDL）和HMME剂量,以筛选的合理剂量照射种植体表面细菌附着模型,并用扫描电镜观察PDT对种植体表面菌斑生物膜的影响.结果 当EDL为12J/cm2、HMME质量浓度为25 μg/ml时,PDT可有效杀灭Pg菌斑生物膜（（13.00±5.00） CFU）,且扫描电镜观察到种植体表面无损伤.结论 630nm半导体激光联合HMME介导的光动力疗法（HMME-PDT）对Pg菌斑生物膜有良好的杀灭效果,本实验使用的EDL与HMME剂量较小,有望作为临床治疗剂量.     

HMBA对人舌癌Tca8113细胞增殖和KLF6及相关蛋白表达的影响

目的: 研究六亚甲基二乙酰胺(hexamethylene bisacetamide, HMBA)对人舌癌Tca8113细胞增殖和Kruppel样因子6(Kruppel-like factor 6, KLF6)及相关蛋白表达的影响。方法: HMBA处理Tca8113细胞后,观察细胞生长和细胞形态;流式细胞术观察细胞周期;RT-PCR检测KLF6 mRNA的表达;免疫细胞化学技术检测KLF6、p53、cyclin D1及c-Jun的蛋白表达。结果: HMBA处理后贴壁细胞的数量随浓度增加明显减少;MTT实验显示其生长抑制作用呈浓度/时间-效应关系;镜下观察显示处理后Tca8113细胞出现向正常细胞形态逆转演变的特征。流式细胞术检测结果显示,对照组Tca8113细胞G₁期比例为(52.00±0.02)%,S期为(34.00±0.08)%,G期为(14.00±0.10)%;HMBA处理后,随作用时间增加,G₁期细胞显著增加,S期细胞显著减少,G₂期细胞也减少,细胞明显被阻滞于G₁期(P<0.05);出现凋亡峰。 RT-PCR结果显示HMBA处理后KLF6 mRNA的表达上调(P<0.05); 免疫组化检测显示HMBA处理后KLF6和p53蛋白表达上调(P<0.05),cyclin D1和c-Jun表达下调(P<0.05)。结论: HMBA对Tca8113细胞增殖具有抑制作用;其作用机制一方面可能通过p53上调p21的表达和活性,另一方面可能通过上调表达的KLF6解除c-Jun对p21的抑制作用,下调cyclin D1,抑制CDK4/6和cyclin D1复合物活性,将Tca8113细胞阻滞于G₀/G₁期,诱导Tca8113细胞向正常细胞分化,恢复正常细胞的表型和功能,并促进细胞凋亡。     

不同能量HMME-PDT对离体牙侧支根管内粪肠球菌的杀灭效果

目的 观察不同激光能量对血卟啉单甲醚介导的光动力疗法(HMME-PDT)杀灭离体牙侧支根管内粪肠球菌的效果.方法 选取人单根管离体前牙80颗,常规根管预备后建立粪肠球菌感染人工模拟侧支根管模型.实验随机分为8组:A组为阴性对照组,以生理盐水冲洗根管;B组为阳性对照组,以5.25％ NaClO冲洗根管;其余6组为HMME-PDT处理组,各组以40μg/ml血卟啉单甲醚(HMME)为光敏剂,避光孵育5 min后用不同激光功率的532 nm半导体激光在根管内上下提拉螺旋照射120 s,按照激光功率的不同,分为C组(50 mW)、D组(60 mW)、E组(70 mW)、F组(80 mW)、G组(90 mW)、H组(100 mW).各组实验牙标本(每个离体牙近中面侧支根管作为实验前标本,远中面侧支根管作为对应的实验后标本)处理前与处理后即刻用20#K锉取侧支根管内碎屑,然后将碎屑转至含5 ml TPY液体培养基的试管中,10倍递增连续稀释后厌氧培养24 h,菌落计数.结果 不同激光功率PDT组和生理盐水冲洗组相比,杀菌率的差异有统计学意义(P＜0.05);和5.25％ NaClO冲洗组相比,D组、E组、F组、G组、H组杀菌率均明显增高(P＜0.05),而C组与5.25％ NaClO冲洗组杀菌率之间的差异无统计学意义(P＞0.05);不同激光功率的各PDT组的杀菌率随激光功率的增加而增高,其中F组、G组、H组与C组、D组、E组相比,杀菌率显著提高(P＜0.05),而F组、G组、H组3组间杀菌率的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 在本实验条件下,HMME-PDT对人工侧支根管内粪肠球菌的最佳杀菌功率参数为80 mW.     

薯蓣皂苷元在口腔鳞癌中的抗癌作用研究

目的 探究薯蓣皂苷元对口腔鳞癌 HSC4 细胞生物学行为的影响。 方法 将 HSC4 细胞分为薯蓣 皂苷元 0、 0. 5、 1、 2 μmol / L 4 组, CCK-8、 5-溴-2′-脱氧尿苷 (BrdU) 染色、 克隆形成实验、 流式细胞术、 划痕实验和 Transwell 实验分别检测细胞增殖、 凋亡、 迁移和侵袭, 免疫印迹检测 Bcl-2、 Bax 和 cleaced caspase-3 蛋白表达水平; JC-1 检测线粒体膜电位; H2DCFDA 检测活性氧 (ROS) 产生; 试剂盒检测谷胱 甘肽 (GSH) 和丙二醛 (MDA) 水平。 结果 与薯蓣皂苷元 0 μmol / L 组比较, 薯蓣皂苷元 1 μmol / L 组和 2 μmol / L 组细胞活力、 集落形成能力、 BrdU 阳性细胞率、 迁移和侵袭能力、 线粒体膜电位降低, 细胞凋亡 率升高, Bax 和 cleaced caspase-3 蛋白表达上调, Bcl-2 蛋白表达下调, ROS 和 MDA 水平升高, GSH 水平降 低。 结论 薯蓣皂苷元可抑制 HSC4 细胞的增殖和运动能力, 通过线粒体途径和 ROS 的产生诱导细胞凋亡。     

右美托咪定对口腔鳞癌细胞生长和运动能力的调节

目的 探究右美托咪定 ( dexmedetomidine, DEX) 对口腔鳞癌 ( oral squamous cell carcinoma, OSCC) 细胞生长和运动的调节作用。 方法 人 OSCC 细胞 CAL27 分为 DEX0、 5、 10 及 20 nmol / L 组。 运用 克隆形成实验和 BrdU 实验评估细胞增殖; Transwell 法检测细胞侵袭; 流式细胞术检测细胞凋亡率; ELISA 检测超氧化物歧化酶 (SOD) 和丙二醛 (MDA) 水平; 微管形成实验评估细胞微管形成能力; Western 印 迹检测血管内皮生长因子 (VEGF)、 纤连蛋白 ( FN)、 B 细胞淋巴瘤 2 ( Bcl-2) 和 Bcl-2 相关 X 蛋白 (Bax) 的表达。 结果 与对照组比较, DEX 处理可显著降低 CAL27 细胞克隆形成率和 BrdU 阳性细胞率, 减少侵袭细胞数和微管结节数, 下调 VEGF 和 FN 表达水平。 同时 DEX 处理可促进氧化应激, 提高 Bax / Bcl-2 比率。 结论 DEX 处理可抑制 CAL27 细胞增殖、 侵袭和微管形成能力, 并促进其氧化应激和凋亡。     

人类疱疹病毒8型的K1基因亚型与鳞状细胞癌不同发病部位的相关性研究

目的 了解鳞癌组织中人类疱疹病毒8型(HHV-8)感染情况,探讨感染HHV-8 K1基因亚型与鳞癌发病部位的关系.方法 对40例皮肤鳞癌、40例食管鳞癌石蜡包埋组织进行HHV-8K1基因的DNA抽提、扩增、双向测序,使用Lagergene软件、CLUSTAL W软件和PHYLIP软件包对测序结果进行系统发生学分析,从而...     

SLC7A11-AS1调控miR-429对口腔鳞癌细胞CAL-27细胞增殖、凋亡及迁移的影响

目的 探讨SLC7A11-AS1对口腔鳞癌细胞CAL-27细胞增殖、 凋亡及迁移的影响及分子机制.方法 收集29例口腔鳞癌患者癌组织及癌旁组织;CAL-27细胞分为si-NC组、si-SLC7A11-AS1组、si-SLC7A11-AS1+anti-miR-NC组、si-SLC7A11-AS1+anti-miR-429...     

VAV3蛋白在喉鳞状细胞癌中的表达及作用机制

目的 研究VAV3蛋白在喉鳞状细胞癌组织中的表达情况,及其对喉癌临床分型、淋巴转移等影响,分析其可能的机制.方法 利用免疫组织化学方法检查VAV3蛋白在喉鳞状细胞癌组织及喉部非癌组织中的表达,检测VAV3蛋白对喉鳞状细胞癌侵袭,淋巴转移等影响.结果 VAV3蛋白在喉鳞状细胞癌组织中表达为69.76％,在喉部非癌组织中的表达为10％,前者明显高于后者,差异有统计学意义(x2=11.937,P=0.001).它的表达与临床分型、T分型及淋巴结转移有统计学意义(P＜0.05),与性别、年龄、吸烟、分型之间无统计学意义(P＞0.05).结论 VAV3蛋白在喉癌组织中高表达,且可促进喉癌组织侵袭、转移能力.VAV3蛋白高表达,可作为判断喉癌及预后的一种新的分子标志.     

食管鳞癌组织中miRNAs差异表达谱的筛选及研究

目的 筛选并鉴定在食管鳞癌（ESCC）及癌旁组织中miRNAs的差异表达,为进一步阐明其在ESCC发病机制中的作用奠定基础。方法 选取在邯郸市第一医院行食管癌切除术患者新鲜的鳞癌组织及癌旁正常组织,各3例,抽提总RNA,利用miRNAs芯片筛选其中差异表达的miRNAs,并对miR-106b-3p通过进一步RT-qPCR 技术进行验证。结果 miRNAs芯片从配对组织中共筛检出62个差异表达的miRNAs,其中41个miRNAs表达上调,21个miRNAs表达下调,鳞癌组织与癌旁正常组织中差异表达的miRNAs比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。miR-106b-3p在ESCC组织中的表达高于癌旁组织,差异有统计学意义（P＜0.05）,与芯片结果一致。结论 食管鳞癌组织中miRNAs的差异表达为进一步研究miRNAs在ESCC发病中的作用奠定了基础;miR-106b-3p的高表达可能与ESCC的发生、发展有关。     

Inhibition of Leukocyte Adherence by Potassium Chloride Extract of Allogeneic Squamous Cell Carcinoma of the Human Uterine Cervix

ABSTRACT: Leukocyte adherence inhibition (LAI) assay was used to evaluate cell-mediated immunity in patients with invasive squamous cell carcinoma of the cervix. The reactivity of the peripheral blood leukocytes of these patients was evaluated after incubation with pooled extracts of allogeneic squamous cell carcinoma of the cervix. One hundred sixty-seven sets of LAI assays were performed on 54 individuals, including 23 patients with Stage I squamous cell carcinoma of the cervix, 9 patients with other stages of this tumor, 9 patients with unrelated tumors and 13 normal healthy volunteers. A protein concentration of one milligram per milliliter in the tumor extract and 10% fetal bovine serum in the feeding media gave the best results. Eighty-seven percent (28/32) of patients with squamous cell carcinoma of the cervix showed marked specific reactivity. No difference was found in the LAI indices of different stages of the disease.     

The Expression of MicroRNA-155 in Plasma and Tissue Is Matched in Human Laryngeal Squamous Cell Carcinoma

PurposeTumor-associated microRNAs have been detected in cancer, though whether plasma microRNA-155 (miR-155) could be a potential biomarker for laryngeal squamous cell carcinoma (LSCC) prognosis is unclear. We aimed to determine how miR-155 can be used to predict the clinical characteristics of patients with LSCC and correctly diagnose them.ResultsA total of 280 LSCC patients and 560 age- and sex-matched controls were included in the study. The miR-155 level was more up-regulated in LSCC tissue than in the non-tumor tissues (13.6±2.4 vs. 3.1±0.80, p<0.001). Additionally, a significantly higher miR-155 level in plasma samples from LSCC patients than in those of the controls (8.9±1.25 vs. 1.8±0.8, p<0.001) was reported. Tissue miR-155 showed an area under the curve (AUC) of 0.933, with a sensitivity of 82.6% and a specificity of 89.2%. The AUC for plasma miR-155 was 0.757, with a sensitivity of 58.4% and a specificity of 69.5%. When early LSCC in TNM I stage was considered, tissue miR-155 showed an area under the curve of 0.804, with a sensitivity of 85.2% and a specificity of 87.3%.ConclusionThe expression of tissue and plasma miR-155 were significantly up-regulated in patients with LSCC. Our work will serve as a basis for further investigation, preferably large-scale validation in clinical trials.