大鼠实验性干眼的角结膜上皮组织学改变

目的 建立大鼠干眼模型并进行评价,比较正常大鼠和干眼大鼠角结膜上皮组织形态学特点。方法 采用苯扎氯铵滴眼诱导大鼠出现干眼,麻醉后处死动物,取正常大鼠和干眼大鼠角结膜组织行HE染色,及电镜下观察大鼠角结膜超微结构。结果 干眼大鼠角膜上皮和结膜上皮出现上皮细胞缺失,结膜上皮杯状细胞减少,电镜下观察干眼大鼠角膜结膜上皮细胞微绒毛缺失,断裂,出现基底膜溶解,细胞内线粒体溶解。结论 苯扎氯铵诱导的大鼠干眼模型与人干眼发生后角膜结膜发生的改变相似,此干眼模型在动物实验研究中具有重要的参考价值。     

羊膜凝胶对大鼠干眼的治疗作用及其作用机制

目的 通过局部应用苯扎氯铵(benzalkonium chloride,BAC)建立大鼠干眼模型,观察羊膜凝胶对大鼠干眼的治疗作用。方法 随机选取25只健康Wistar大鼠制作干眼动物模型后,随机分为干眼对照组(A组)、溶剂治疗组(B组)、羊膜提取液组(C组)、羊膜凝胶组(D组)和人工泪液治疗组(E组),另取5只大鼠作为正常对照组。每组治疗前后分别检测大鼠干眼指标,包括泪液分泌试验、泪膜破裂时间及角膜荧光染色评分。治疗4周后收集大鼠眼组织标本行病理及生化检测,包括角膜HE染色、PAS染色、免疫组化染色及TUNEL试验。结果 随着治疗时间的延长,羊膜匀浆提取液及羊膜凝胶均可改善大鼠干眼状况。治疗4周后D组大鼠的各项干眼指标相对于B组均有明显好转,干眼治疗效果明显优于E组(P<0.05)。另外,羊膜凝胶可使干眼大鼠的角膜上皮平整规则,角膜上皮K10表达下调,增加角膜MUC1 的表达,有助于维持泪膜稳定性。结论 羊膜凝胶可通过维持角膜上皮完整性,抑制角结膜鳞状上皮化生,促进结膜杯状细胞增殖、黏蛋白分泌而减轻干眼的病理损伤,从而缓解干眼的症状,具有治疗大鼠干眼的效果。     

养阴润目丸对苯扎氯铵诱导的干眼兔模型结膜上皮细胞焦亡的影响

目的 研究养阴润目丸对干眼兔结膜上皮细胞焦亡的调控作用。方法 将40只雌雄各半的健康普通级新西兰兔采用随机数字表法,取8只作为空白组,剩余32只均采用双眼局部滴注0.1%苯扎氯铵溶液制备干眼模型,模型成功后随机分为空白组,模型组,养阴润目丸低、中、高剂量组,每组8只。养阴润目丸低、中、高剂量组分别按剂量0.435、0.869、1.738 g·(kg·d)-1给予养阴润目丸水溶液灌胃。连续灌胃2周后,分别进行泪液分泌试验（Schirmer’s test, SIT）、泪膜破裂时间（break up time, BUT）和角膜荧光素染色评分;取兔结膜上皮细胞,透射电镜下观察结膜上皮的细胞形态;Western blot检测结膜中NOD样受体家族核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NOD-like receptor family pyrin domain-containing protein 3, NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-1(cysteine aspartate-specific proteinase-1, Caspase-1)、消化道皮肤素D(Gasdermin D, GS...     

苯扎氯铵溶液膀胱冲洗对长期留置导尿患者下尿路感染的影响

目的 :观察苯扎氯铵溶液膀胱冲洗治疗下尿路感染的临床疗效。方法:将我院收治的120例因颅脑外伤而需要留置导尿患者,随机分为苯扎氯铵组60例,对照组60例,分别采用0.0025%苯扎氯铵溶液、0.9%氯化钠溶液进行膀胱冲洗,比较两种不同方法对患者尿路感染发生率的影响,并在第3、7、14天留取中段尿进行尿常规及细菌培养检测。结果:膀胱冲洗后第7、14天苯扎氯铵组尿白细胞计数明显低于对照组,对照组尿液细菌培养的阳性率明显高于苯扎氯铵组(P<0.01),两组均未出现明显的不良反应。结论:用苯扎氯铵溶液进行膀胱冲洗能够有效预防和治疗与留置尿管相关的下尿路感染,未发现明显不良反应,具有一定的临床应用价值。     

干眼小鼠模型的建立及眼表病理生理学改变

目的建立泪液分泌不足合并蒸发过强型干眼小鼠模型,对其病理生理学改变进行观察,分析该模型作为临床干眼研究动物模型的科学性及实用性。方法6周龄C57BL／J雌性小鼠36只,据观察时间（1、5、12、20、35d）随机分为6组,未干预的正常小鼠为对照。小鼠下肢皮下注射氢溴酸东莨菪碱配合风扇模拟干燥环境诱发小鼠干眼。使用酚红棉线实验检测泪液分泌量、裂隙灯下观察角膜荧光染色、PAS染色检测结膜杯状细胞数目。HE染色观察小鼠眼表组织病理学改变。Real—Time PCR检测小鼠结膜组织中TNF—α及IL-1β的表达。结果与对照组相比,各实验组小鼠的泪液分泌量均显著降低（P〈0．001）、结膜杯状细胞数目明显减少（P〈0．01）,角膜荧光染色增加,同时眼表角结膜上皮表现出增生过度,细胞厚度增加,层次紊乱,基底细胞排列紊乱,表层细胞损伤脱落。与对照纽相比,造模5、12、35d时结膜组织中TNF-α表达明显上调（P〈0．05）。而IL-1β表达在各实验组小鼠结膜组织中均显著上调（P〈0．01）。结论皮下注射东莨菪碱配合风扇模拟干燥环境诱导的小鼠干眼模型能够引起与临床常见干眼患者眼表现的病理生理学相似的改变。诱发炎症反应是建立一种简单、快速且实用的干眼研究动物模型的方法,对干眼炎症及神经机能障碍发病机制方面的研究有一定价值。     

角膜碱烧伤大鼠模型中细胞外基质受体Ⅲ的表达及意义

目的 研究细胞外基质受体Ⅲ(CD44)及其配体透明质酸(HA)在角膜碱烧伤修复过程中的作用. 方法 制作角膜碱烧伤大鼠模型,免疫组织化学方法观察CD44及HA在角膜碱烧伤后的表达变化,以正常大鼠和机械性划伤大鼠角膜为对照. 结果 CD44及HA在正常及机械性伤大鼠角膜仅少量表达;碱烧伤模型中烧伤后12 h即可见表达增多.同时角膜鳞状上皮细胞、翼状细胞出现CD44. 结论 在角膜碱烧伤过程中CD44及HA对角膜的重新上皮化可能有积极作用.     

苯扎氯铵对大鼠降结肠上皮离子转运的影响

目的探讨苯扎氯铵对大鼠降结肠上皮离子转运的影响。方法8～9周龄SD大鼠40只,随机分为两组。氯胺酮麻醉下开腹,实验组用0.1%苯扎氯铵处理大鼠降结肠浆膜40min,温盐水冲洗后关腹,对照组用生理盐水代替苯扎氯铵。分别于术后1,2,3,4,8周取处理段结肠,利用短路电流技术检测结肠上皮离子转运的变化。结果实验组大鼠结肠上皮各时间点跨膜电压、基础电流明显降低,钠离子吸收电流占基础电流的百分比升高。另外,由Forskolin所引起的氯离子分泌电流也明显高于对照组,但DPC阻断Forskolin所引起的短路电流的百分比下降且小于100%(对照组大于100%),而结肠跨膜电阻两组之间无差异。结论苯扎氯铵不影响大鼠结肠黏膜屏障功能,但可造成结肠上皮离子转运功能紊乱,提示与结肠失神经有关。     

高渗盐水点眼制作的小鼠干眼模型与评估

目的 通过高渗盐水点眼提高泪液渗透压制作小鼠干眼模型并对该模型进行评估.方法 60只雌性6～8周龄BALB/c小鼠,采用随机数字表法分为空白组、对照组和实验组,每组20只.对照组采用308 mOsmol/L氯化钠溶液点眼,每天5次,实验组采用500 mOsmol/L氯化钠溶液点眼,每天5次,空白组不点眼.分别在第0,7,14,28,42天行SchirmerⅠ实验、角膜荧光素钠染色和评分、眼表虎红染色观察、泪液蕨类实验、角膜上皮HE染色观察、角膜上皮厚度测量、结膜上皮PAS染色观察和杯状细胞计数.第42天行角膜上皮扫描电子显微镜观察.结果 第0天各组间比较差异无统计学意义(P>0.05).第7天起,与空白组[(3.0±0.5)mm]和对照组[(3.1±0.5)mm]相比,实验组[(2.3±0.4)mm]BALB/c小鼠出现泪液生成明显减少(P<0.05),角膜荧光素钠染色和虎红染色出现点、片状着色,角膜荧光素钠染色评分升高[3组分别为(0.9±1.2)、(0.5±0.7)、(1.4±1.6),P<0.01],泪液蕨类图形减少.第14天起,与空白组和对照组相比,实验组BALB/c小鼠结膜杯状细胞计数减少[3组分别为(10.6±2.0)、(11.8±1.3)、(5.4±1.8),P<0.01].角膜上皮基底部细胞排列紊乱缺失,角膜上皮分层减少,出现空泡,角膜上皮层厚度减少[3组分别为(21.69±3.41)、(21.23±2.64)、(15.82±1.38)μm,P<0.05],角膜上皮细胞微绒毛丢失.结论 高渗盐水可以在小鼠眼表引起类似干眼的病理损害,泪液高渗透压在干眼的发病中起重要作用.     

苯扎氯铵溶液用于烧伤创面的初步临床观察

目的观察苯扎氯铵溶液对烧伤创面的抑菌作用及对创面愈合的影响。方法 2007年10月-2008年8月共观察30名成年住院烧伤患者,按自身对照分别使用苯扎氯铵和碘伏溶液换药,在第1、第7天换药前行细菌培养观察长期抑菌作用;10例在消毒后3 min再次行细菌培养,观察其即时消毒效果;第7天观察创面愈合率。结果苯扎氯铵组和碘伏组的长期、即时抑菌作用基本类似,用药第7天创面愈合率苯扎氯铵组高于碘伏组,差异有统计学意义。两组在换药时患者感觉均有疼痛感,未见伤口周围皮肤瘙痒和皮疹。结论苯扎氯铵溶液用于烧伤创面的抑菌作用与碘伏类似,但是苯扎氯铵溶液是阳离子表面活性剂,可清洁创面血污及有机物,有利于创面愈合,有可能替代碘伏成为烧伤创面基本用药。     

保存羊膜移植重建兔眼表的形态学实验研究（摘要）

观察应用保存羊膜移植重建兔眼表后的形态变化 ,以期从结构上探讨羊膜移植后恢复正常眼表功能的机制 .方法 :3 0眼分六组 .A :正常眼 ;B :中央角膜板层切除 ;C :角膜缘部切除 ;D :中央角膜板层切除后行羊膜移植 ;E :角膜缘部切除后环行羊膜移植 ;F :结膜大部切除后行羊膜移植 .术后观察眼表的愈合情况 . 2月后取材行病理检查 .结果 :术后 2月 ,B组角膜透明 ,眼表恢复正常 ;C组角膜混浊 ,角膜表面结膜上皮化 ;D组羊膜被覆上皮细胞为角膜型上皮 ,羊膜内出现的角膜基质细胞 ,胶原纤维排列规则且分层 ,羊膜与其下基质愈合 ,羊膜变透明 ,羊膜…     

共聚焦显微镜下干眼症患者角膜形态变化的诊断价值初探

目的 应用共聚焦显微镜观察干眼症患者的角膜形态改变.方法 运用日本Nidek公司共聚焦显微镜(Confoscan 4.0)对正常人群和干眼症患者各50例(100只眼)的中央区角膜上皮细胞的密度和异型性、上皮下神经纤维形态、朗格汉斯细胞的浸润和内皮细胞密度进行观察,并对结果进行统计学分析.结果 共聚焦显微镜观察下,干眼症患者和正常人群的角膜中央区表层鳞状上皮细胞、翼状上皮细胞、上皮基底层细胞的细胞密度比较差异有统计学意义(P<0.05).干眼症患者的中央区角膜上皮细胞异型性增多(t=14.3,P<0.01),少量细胞呈激活状态,上皮下神经纤维明显增粗,走行紊乱,伴朗格汉斯细胞浸润,内皮细胞计数和形态差异无统计学意义.结论 共聚焦显微镜可以从细胞层面实时、无创观测干眼症患者的角膜形态的改变,根据角膜上皮细胞细胞密度和异型性、上皮下神经纤维形态、朗格汉斯浸润等病理变化直观识别和诊断干眼症.     

Cyclosporine Inhibits Apoptosis in Experimental Murine Xerophthalamia Conjunctival Epithelium

Dysfunction of the functional units of sur- face-lacrimal gland leads to tear film instability and the ocular surface epithelial disease called xerophthalamia, which results in eye irritation and vision impairment. The pathological mechanisms underlying xerophthalamia remain unknown, but the study by Yeh et al showed that accelerated apoptosis of the ocular surface epithelia may play a role in the process[1]. Cyclosporine A (CsA) is the first FDA-approved drug used for the treatment of xe- r…     

培养角膜上皮和自体角膜缘移植治疗眼表损伤的比较

目的比较培养角膜上皮移植和自体角膜缘移植治疗严重眼表损伤的效果。方法对去除全角膜缘的新西兰大白兔行培养自体角膜上皮和自体角膜缘联合羊膜移植,观察术后角膜形态改变,并进行组织学和免疫细胞化学检测。结果培养角膜上皮移植后兔眼表面平整稳定,角膜中央无新生血管生长,自体角膜缘联合羊膜移植后兔眼表面不同程度结膜上皮化,两者治疗效果有显著性差异。结论培养角膜上皮移植能有效治疗以角膜缘干细胞受损为特征的严重眼表损伤。     

兔机械性角膜上皮损伤对结膜杯状细胞及结膜上皮细胞的作用研究

目的 探讨机械性角膜上皮损伤对结膜杯状细胞及结膜上皮细胞的作用.方法 选取雄性新西兰大白兔12只,建立机械性角膜上皮损伤模型(角膜中央直径8 mm上皮刮除),建模后使用盐酸林可霉素滴眼,用法为3次/日,1滴/次,观察时间为7d.在模型建立后第l、4、7天共3个时间点进行结膜印迹细胞学检查、结膜组织透射电镜检查,对结膜上皮细胞及杯状细胞数量及形态进行分析.结果 成功建立机械性角膜上皮损伤模型.结膜印迹细胞学检查显示,造模前结膜杯状细胞数量平均值为66.367±2.466(个/每200 pan×150 μm面积),Nelson 0级;造模后第1天,结膜杯状细胞数量明显下降,平均值为2.933±0.242(个/每200 μm×150 μm面积),Nelson 3级;造模后第4天,结膜杯状细胞数量开始恢复,平均值为17.350±0.991(个/每200μm×150 μm面积),Nelson 2级;造模后第7天,结膜杯状细胞数量已明显恢复,平均值为32.467±2.244.(个/每200 μm×150μm面积),Nelson 1级.结膜组织透射电镜检查可见到造模后结膜杯状细胞大量减少,分泌颗粒排空,细胞凋亡,结膜上皮细胞脱落坏死,胞核固缩,胞质中可见溶酶体,上皮下及上皮细胞间炎症细胞浸润;随时间推移,结膜杯状细胞数量及形态逐渐恢复,初期细胞形态欠规则,结膜上皮细胞胞间隙大,连接松散;后期杯状细胞数量明显恢复,形态饱满,分泌功能开始恢复.结膜上皮细胞分化好,细胞连接较为紧密.结论 机械性角膜上皮损伤可造成结膜杯状细胞的数量下降及分泌增加,同时可造成结膜上皮细胞凋亡增加,炎症细胞浸润.结膜杯状细胞的数量、功能以及结膜上皮细胞正常结构可在一定时间内自行修复.     

诺帝滴眼液对碱烧伤诱导角膜新生血管的抑制作用

目的 观察自制诺帝滴眼液（Nordy eye drop）对Long．Evans大鼠角膜碱烧伤后新生血管（CRNV）有无抑制作用及其对正常角膜有无毒副作用。方法 采用0．025％、0．1％两个不同浓度诺帝滴眼液滴眼21d,通过裂隙灯、光镜、电镜观察检测诺帝滴眼液的毒副作用。建立角膜碱烧伤后角膜新生血管模型,0．025％、0．1％两个不同浓度诺帝滴眼液4次／d滴眼治疗,0．1％地塞米松磷酸钠滴眼液作为阳性对照、空白溶液作为阴性对照,观察诺帝治疗效果。结果 诺帝滴眼液滴眼21d后观察正常大鼠,无畏光、结膜充血等刺激症状,组织学检查显示结构正常,未见炎性细胞浸润。大鼠角膜碱烧伤后1d时仅见角膜缘血管网扩张,3d时新生血管长入,7～14d达高峰,14d时治疗组和地塞米松组新生血管开始退化;比较各组CRNV面积与角膜面积的比值,治疗组和阳性对照组均小于阴性对照组并有非常显著性差异（P〈0．01）。治疗组与阳性对照组间、0．025％与0．1％治疗组间均无显著性差异（P〉0．05）。结论 0．025％、0．1％的诺帝滴眼液局部滴眼无明显毒副作用,并且对CRNV有显著抑制作用。     

逍生散对干眼杯状细胞影响的实验研究

目的通过C57BL/6小鼠干眼模型,探讨中药复方逍生散对干眼杯状细胞的影响及治疗干眼的机制。方法将180只健康C57BL/6小鼠随机分6组:分别为正常组,模型组,生理盐水组,逍生散低剂量、中剂量、高剂量组,每组30只。每天于小鼠后肢根部,皮下注射氢溴酸东莨菪碱造成干眼模型。造模成功后于造模前、造模后、治疗后第4周,测定其泪膜破裂时间、泪液分泌量、角膜染色、结膜杯状细胞数量等情况。结果东莨菪碱皮下肌肉注射造成小鼠干眼模型成功,造模后模型组、生理盐水组、逍生散低剂量组、逍生散中剂量组、逍生散高剂量组在泪液分泌、泪膜破裂时间、杯状细胞数量方面均有明显下降,角膜荧光染色具有明显增加,与造模前有差异(P0.05),正常组与造模前无明显改变,无统计学意义(P0.05)。治疗后逍生散中剂量组、逍生散高剂量组在泪液分泌、泪膜破裂时间、角膜荧光染色、杯状细胞数量方面均有明显改善,具有统计学意义(P0.05)。逍生散低剂量组在泪膜破裂时间有所延长,角膜荧光染色分数有所下降,具有统计学意义(P0.05)。正常组、模型组、生理盐水组在治疗后有所改变,不具有统计学意义(P0.05)。结论东莨菪碱皮下肌肉注射可造成小鼠干眼模型。逍生散可增加小鼠泪液分泌量,延长泪膜破裂时间,提高泪膜的稳定性,减少杯状细胞的凋亡,减少眼表损伤等。     

角膜上皮树突状细胞和神经纤维密度与干眼程度的相关性研究

目的 应用角膜共聚焦显微镜观察不同程度干眼患者角膜上皮树突状细胞的密度和基底层下神经纤维的密度,以进一步探讨干眼和炎症及神经密度之间的关系,为干眼的诊断治疗提供依据。方法 收集2016年12月至2017年9月在我院门诊就诊的确诊为干眼的患者,轻度、中度和重度各20例(40只眼)进行共聚焦显微镜检查,观察测量角膜中央区域树突状细胞的密度及基底层下神经纤维的密度,比较不同程度干眼患者之间的变化。结果 轻度、中度、重度干眼患者角膜上皮树突状细胞密度与干眼程度呈正相关(r=0.293,P=0.001);角膜基底层下神经纤维密度与干眼程度为负相关(r=-0.331,P＜0.001)。随着干眼程度的增加,角膜上皮树突状细胞的密度增加,基底层下神经纤维密度下降。不同程度干眼患者角膜树突状细胞密度总体差异有统计学意义(H=11.502,P=0.003);神经纤维密度总体差异有统计学意义(H=13.157,P=0.001)。结论 角膜上皮树突状细胞的密度反映了干眼炎症的程度,基底层下神经纤维的密度反映了神经支配和营养,两者均与干眼程度相关,对其定量分析可以为干眼的诊断治疗提供依据。     

围绝经期女性的眼表改变与干眼症的个体化诊断

 【目的】 探讨围绝经期女性的眼表改变与干眼症的个体化诊断。【方法】 收集96例围绝经期妇女的临床资料，包括眼部症状、裂隙灯检查、干眼诊断性试验、角膜厚度及结膜印迹细胞学检查，全身检查包括了妇科体检、围绝经期特征的性激素水平检查以及可疑免疫性疾病患者的血清类风湿因子、自身抗体、涎腺分泌功能；56例有眼部干燥症状为研究组，余40例为对照组，统计分析所有患者的眼表改变特征与围绝经期关系以及诊断干眼症的个体化。【结果】 研究组56例，最终37例（66．1％）确诊为干眼病，余19例（33．9％）诊断为以干眼症状为主要表现的围绝经期综合征；对照组40例患者，9例（22．5％）干眼诊断性试验阳性，但最终与本组另外共25例（62．5％）患者被确诊为围绝经期综合征。研究组和对照组相比，只有结膜杯状细胞的减少有显著性差异；96例围绝经期妇女中，干眼确诊患者（37例）与不能确诊患者（59例）相比，角膜厚度均变薄、结膜杯状细胞减少和印迹细胞学Nelson分级增加，且有统计学意义；干眼诊断试验阳性（46例）和阴性（50例）的患者相比，结膜杯状细胞数量减少也具有统计学意义。【结论】 有眼干燥症状的围绝经女性的干眼确诊率高，但仍存在干眼诊断性试验假阳性。干眼患者的角膜厚度、结膜杯状细胞数量和印迹细胞学的眼表特征改变，可协助与围绝经期综合征鉴别。