MCP-1 mcAb和Losartan拮抗Ang Ⅱ介导的VSMCs的增殖与迁移效应的实验研究

目的探讨单核细胞趋化蛋白－１单克隆抗体（ＭＣＰ－１－ｍｅＡｂ）或Ｌｏｓａｒｔａｎ 拮抗血管紧张素Ⅱ（ＡｕｇⅡ）介导的血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣｓ）增殖与迁移效应的可能性，为防治动脉硬化提供一定的理论依据。方法采用改良的Ｂｏｙｄｅｎ小室法检测 ＶＳＭＣｓ的迁移效应；以 ＭＴＴ法、~３Ｈ－ＴａＲ掺入法、~３Ｈ－脯氨酸标记法和ＶＳＭＣｓ计数评价ＶＳＭＣｓ的增殖效应。将培养ＶＳＭＣｓ分为 ５组； ２％胎牛血清（ ２％ＦＣＳ）组、 ＡｕｇⅡ组（其浓度为 １０－１０～１０－６ｍｏｌ／Ｌ）、Ｌｏｓａｒｔａｎ组（其浓度为 １０－７～１０－５ｍｏｌ／Ｌ）、ＭＣＰ－ｌｍｃＡｂ组（终浓度为 １０μｇ／ｍｌ）和阳性对照组（含５％的酵母多糖活化血清）。结果（１） ＡｕｇⅡ具有剂量依赖性的促进 ＶＳＭＣｓ的增殖与迁移效应；（２） ＭＣＰ－１ｍｃＡｂ或 Ｌｏｓａｒ－ｔａｎ能有效地拮抗ＡｕｇⅡ介导的ＶＳＭＣｓ增殖与迁移效应。结论 ＭＣＰ－１ｍｃＡｂ或Ｌｏｓａｒｔａｎ对动脉硬化性疾病可能具有较大的应用前景。     

血小板活化因子介导肾小球系膜细胞产生活性氧的研究

为探讨血小板活化因子（ＰＡＦ）对肾小球系膜细胞（ＧＭＣ）产生活性氧的调节作用，本研究观察了ＰＡＦ对体外培养的大鼠ＧＭＣ产生超氧化物阴离子（Ｏ）和过氧化氢（Ｈ－２Ｏ－２）的影响。结果表明１０￣（－９）Ｍ／Ｌ的ＰＡＦ已能诱导ＧＭＣ产生Ｏ和Ｈ２Ｏ２（１．１４±０．４２ｎｍｏｌ／１０￣５ＧＭＣ、０．９７±０．１６ｎｍｏｌ／１０－５ＧＭＣ），这一效应呈剂量依赖性；溶ＰＡＦ无诱导ＧＭＣ产生活性氧作用；特异性ＰＡＦ受体拮抗剂ＢＮ５２０２１抑制ＰＡＦ的刺激作用，抑制作用也呈剂量依赖性，５×１０￣（－５）Ｍ／ＬＢＮ５２０２１完全抑制ＧＭＣ合成活性氧。本研究说明ＰＡＦ可诱导ＧＭＣ合成活性氧。     

抗病毒蛋白MxA的诱导和检测方法的实验研究

目的 研究抗病毒蛋白ＭｘＡ的表达及其活性。方法用ＩＦＮα２ｂ或３型腺病毒（Ａ＿３）分别对ＷＩ－３８细胞或人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）作用 １２或２４ ｈ，并用Ｗｅｓｔｅｍ ｂｌｏｔ法或ＦＡＣＳ法，分别对Ｍ蛋白的表达进行定性和定量检测。采用微量细胞病变抑制法，对重组的ＭｘＡ和ＩＦＮα２ｂ进行抗病毒效应实验。结果 （１）低浓度的 ＩＦＮα２ｂ（＞ １×1０～＃ＩＵ／Ｌ）和Ａｄ＿３（＞２００ ＴＣＩＤ＿５０），均可诱导相应细胞表达 ＭｘＡ；（２）１０μｇ／Ｌ ＭｘＡ可抵抗２０个 ＴＣＩＤ＿（５０）的 ＨＳＶ－Ｉ、Ｐｏｌｉｏ． Ｖ感染 Ｖｅｒｏ细胞、Ａｄ＿３感染ＨｅＬａ细胞，抵抗２００个ＴＣＩＤ＿（５０）的ＶＳＶ感染Ｗｉｓｈ细胞。结论ＭｘＡ只能由干扰素（ＩＮＦα2ｂ）或病毒诱导产生，其具有广谱的抗病毒活性。     

T细胞疫苗抗同种移植排斥反应的研究

应用Ｔ细胞疫苗于同种心脏移植的研究，用Ｃｏｎ Ａ和ＣＤ３单抗诱导受同种特异性抗原（Ｃ５７ＢＬ／６（Ｈ－２＾ｂ）小鼠脾细胞）免疫的ＢＡＬＢ／Ｃ（Ｈ－２＾ｄ）小鼠，取后者脾细胞所制备的Ｔ细胞疫苗具有延长同种心脏移植物的存活期。受Ｔ细胞疫苗接种的ＢＡＬＢ／Ｃ（Ｈ－２＾ｄ）鼠脾细胞对经Ｃｏｎ Ａ激活或未激活的Ｃ５７ＢＬ／６小鼠脾细胞皆表现出特异的强烈的增殖反应，而对同系脾细胞呈低的反应。Ｔ细胞疫苗表型分析     

乙型肝炎病毒在丁型肝炎病毒包装中的作用机理研究

用含ＨＢＶ全基因和ＨＢＶ大、中、小分子表面蛋白基因的真核细胞表达质粒（ＣＭＶ－ＨＢＶ、ＣＭＶ－ＬＳ、ＣＭＶ－ＭＳ、ＣＭＶ－Ｓ）分别与含ＨＤＶ ｃＤＮＡ三聚体的重组质粒共转染ＣＨＯ细胞。转染后３天在上述４种转染细胞内及培养上清中均检出了ＨＤＶ ＲＮＡ和ＨＤＡｇ表明上述４种转染细胞的培养上清中均有ＨＤＶ病毒颗粒的包装和分泌。提示：ＨＤＶ病毒的包装可能仅需ＨＢＶ Ｓ 基因及其小分子表面蛋白的辅助。     

HBcAg/HBeAg对慢性乙型肝炎患者PBMC中Th1/Th2类细胞应答的影响

目的 探讨ＨＢｃＡｇ／ＨＢｅＡｇ对慢性乙型肝炎患者ＰＢＭＣ中Ｔｈ１／Ｔｈ２类细胞应答的影响。方法 用套式ＰＣＲ法检测６４便慢性ＨＢＶ感染者ＰＢＭＣ中ＨＶＢ ＤＮＡ;分别用ＰＨＡ、ＨＢｃＡｇ和ＨＢｅＡｇ体外培养;ＥＬＩＳＡ法检测ＰＢＭＣ产生Ｔｈ１类细胞因子（ＩＬ－２、ＩＦＮ－γ）和Ｔｈ２类细胞因子（ＩＬ－４、ＩＬ－１０）的含量。结果 表明ＨＢＶ ＤＮＡ阳性组和阴性组相比,无论是在ＰＨＡ还是在ＨＢｃＡ     

高压氧抗小鼠同种皮肤移植排斥反应的实验研究

目的：探讨高压氧抗移植排斥反应机理。方法：Ｃ５７ＢＬ／６小鼠接受ＢＡＬＢ／ｃ小鼠移植皮片后，在９９２％Ｏ２，０２５ｍＰａ条件下每天１ｈ直至皮片排斥。动态观察移植局部Ｔ细胞及亚群，ＩＬ－２Ｒ（α）阳性细胞浸润情况以及混合淋巴细胞培养（ＭＬＣ）、细胞杀伤活性（ＬＭＣ）等。结果：高压氧组小鼠移植皮片存活时间明显延长；移植局部Ｔｈｙ－１，Ｌ３Ｔ４，Ｌｙｔ－２及ＩＬ－２Ｒ（α）阳性细胞浸润明显减少，ＭＬＣ及ＬＭＣ均降低。结论：高压氧可通过抑制移植局部Ｔ淋巴细胞浸润及ＩＬ－２Ｒ表达以及Ｈ－２诱导的增殖反应及杀伤活性，从而抑制移植排斥反应。     

鉴别HCV C蛋白上HLA—A2限制的CTL识别表位的研究

本文先用计算机预测，后用＾５１Ｃｒ４ｈ释放分析证实的方法，对丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核心区蛋白（Ｃ蛋白）上，ＨＬＡ－Ａ２限制性ＣＴＬ识别表位进行了鉴别。结果发现，２名感染ＨＣＶ和ＨＬＡ－Ａ２阳性供血员的外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）对ＡＬＡＨＧＶＲＡＬ（ｃｏｒｅ１５０－１５８）肽段标记的自体靶细胞有溶解作用，杀伤率分别为３７．５％和１５．８％，用抗ＣＤ４ｍＡｂ阻断后杀伤率无明显变化，而用抗ＣＤ８ｍＡｂ     

通过受体介导法将核酶特异导入肝细胞以阻断HBV蛋白表达的初步研究

应用半乳糖末端糖蛋白受体（ＡＳＧＰ－Ｒ）介导的内吞作用，将外源基因导入真核细胞，与脂质体介导的转染和细胞表面转铁蛋白受体（Ｔｆ－Ｒ）介导的内吞作用相比，虽然三种方式均能有效介导外源基因的转移，但ＡＳＧＰ－Ｒ法具有肝细胞特异性，而脂质体法和Ｔｆ－Ｒ法不具此特性。将克隆于真核表达载体的针对乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ｍＲＮＡＰｒｅＣ／Ｃ区的核酶质粒ｐＣＭＶ－Ｒｉｐｃ特异性导入肝细胞并发挥作用，通过酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测细胞培养液中的乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）和ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ），评价核酶在细胞水平对ＨＢＶ抗原表达的阻断作用。结果表明当核酶质粒ｐＣＭＶ－Ｒｉｐｃ与ＨＢＶ抗原表达质粒ｐＵＣ－２ＨＢＶ共转染ＨｅｐＧ２细胞时，核酶对ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ表达的抑制率分别为５５．２９％和６８．７３％。     

BCL—2基因表达与乳腺癌抗凋亡及免疫耐受的关系

目的 观察乳腺癌细胞株ＢＣＬ－２基因表达与其耐受肿瘤浸润淋巴细胞（ＴＩＬ）免疫攻击的关系,探索应用ＢＣＬ－２硫代反义寡核苷酸（ＢＣＬ－２ＳＯＮ）治疗乳腺癌的途径。方法 ＢＣＬ－２硫代反义寡核苷酸处理乳腺癌细胞株ＭＣＦ－７,Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法观察其对ＢＣＬ－２表达的抑制;并将ＭＣＦ－７细胞与乳腺标本分离出来的ＴＩＬ共同培养,通过ＪＡＭ试验观察ＴＩＬ诱导ＭＣＦ－７细胞凋亡的情况。结果 ＢＣＬ－２ＳＯＮ处理的ＭＣＦ－７细胞无ＢＣＬ－２表达,并在ＪＡＭ试验中随着ＴＩＬ浓度增加,凋亡细胞也增加,未经处理的对照组可见ＢＣＬ－２表达,ＪＡＭ试验中随着ＴＩＬ浓度增加,凋亡细胞的量无明显变化。结论 ＢＣＬ－２表达的乳腺癌细胞可对抗肿瘤浸润淋巴细胞的免疫攻击,ＢＣＬ－２ＳＯＮ可作为治疗乳腺癌的新途径。