豚鼠耳蜗毛细胞暴露非聚焦超声后的酶组织化学观察

目的 探讨非聚焦超声（non-focused ultrasound,NFU)对耳蜗毛细胞的影响。方法 以A型超声波诊断仪为超声发射器，分别以2.5MHz、8MHz照射各15耳豚鼠耳蜗6h后30min和8h行耳蜗基底膜毛细胞铺片及冰冻切片观察琥珀酸脱氢酶（succinate dehydrogenase,SDH)组织化学变化。结果 2.5MHz、8MHz NFU照射豚鼠耳蜗6h后8h能引起不同节段基底膜毛细胞SDH酶活性降低，其中外毛细胞较内毛细胞SDH酶活性降低更甚。照射后8h组较照射后30min组SDH酶活性有明显恢复。结论 不同频率NFU超声照射耳蜗达一定剂量可以引起不同部位基底膜毛细胞的病理性缺氧改变，而这种缺氧病理改变在一定暴露剂量下是可逆或部分可逆的。提示耳蜗毛细胞可能与超声感受有关，其中外毛细胞可能起更为重要的作用，且不同部位毛细胞与超声感受的频率选择性可能有一定关系。     

非聚焦超声对豚鼠耳蜗毛细胞的影响

为探讨超声（Ultrasound，FU）对豚鼠耳蜗毛细胞的影响，分别以2．5MHz、8MHz非聚焦超声（NFU）照射豚鼠耳蜗3h、6h，于30min后行耳蜗毛细胞组织学及酶组织化学观察。发现照射6h组在基底膜第2周起始段0．87±0．20mm节段及基底周起始段0．80±0．20mm节段，耳蜗毛细胞琥珀酸脱氢酶（SDH）活性降低，乳酸脱氢酶（LDH）活性升高。提示：2．5MHz、8MHzNFU照射豚鼠耳蜗达一定剂量能引起不同部位耳蜗毛细胞有氧代谢改变。     

低能量超声照射对豚鼠耳蜗血管纹的影响

目的 探讨低能量超声照射豚鼠耳蜗后血管纹的酶组织化学变化.方法 以A型脉冲超声波诊断仪为超声发射器,分别以2.5 mHz、8.0 mHz超声照射豚鼠耳蜗6.0小时后间隔0.5小时、8.0小时,行豚鼠耳蜗血管纹铺片观察琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase,SDH)组织化学观察.以Kruskal and Wallis法对血管纹琥珀酸脱氢酶活性(吸光度A值)行统计学处理.结果 2.5 mHz、8.0 mHz超声照射豚鼠耳蜗6.0小时后间隔0.5小时、8.0小时,不同部位耳蜗血管纹SDH酶吸光度A值降低,且照射后8.0小时组较照射后0.5小时组SDH酶吸光度A值有明显升高,这种变化与耳蜗毛细胞SDH酶吸光度A值降低区域大体相对应.结论不同频率低能量超声照射豚鼠耳蜗达一定剂量可引起耳蜗血管纹不同部位SDH酶活性降低,这种变化在一定照射剂量下是可逆或部分可逆的.提示暴露低能量超声达一定剂量可引起耳蜗一定程度的病理改变.     

听力学

982127非聚焦超声对豚鼠耳蜗毛细胞的影响/王富森…//临床耳鼻咽喉科杂志一1 998.12(3)一128一130 为探讨超声(Ultraso、,nd,FU)对豚鼠耳蜗毛细胞的影响,分别以2.SMHz、SMHz非聚焦超声(NFU)照射豚鼠耳蜗3h、61:,于3Omin后行耳蜗毛细胞组织学及酶组织化学观察。发现照射6h组在基底膜第2周起始段0.87士。.Zomm节段及基底周起始段。.80士。.Zon:m节段.耳蜗毛细胞唬拍酸脱氢酶(SI)H);舌性降低,乳酸脱氢酶(I DH)活性升高。提示:2.SMHz、SMHz NFU照射豚鼠耳蜗达一定剂量能引起不同部位耳蜗毛细胞有氧代谢改变。表2参7(原提要)982128切…     

实验性冲击波负压暴露后豚鼠耳蜗基底膜AChE和SDH活性的变化

目的 探讨冲击波负压（BUP）暴露对豚鼠耳蜗基底膜乙酰胆碱酯酶（AChE）和琥珀酸脱氢酶（SDH）活性的影响。方法 中等强度BUP重复暴露3次后2h～3d检测豚鼠听性脑干反应（ABR）阈值，然后处死并应用酶组织化学技术观察其耳蜗基底膜两种酶的活性产物的变化。结果 负压峰值为-44．5kPa～-48．8kPa的BUP暴露后2h，耳蜗基底膜外毛细胞下神经末梢区域AChE活性产物明显减少，在负压暴露后24h和3d时有所恢复，但仍低于正常对照组。基底膜SDH活性下降主要发生于外毛细胞，且以第二转第三排最为明显；BUP暴露后2h活性下降幅度最大，至24h和3d时有所恢复。上述两种酶活性产物的变化，与动物的ABR阈移幅度变化是一致的。结论 BUP暴露后豚鼠耳蜗基底膜的AChE和SDH活性有不同程度的下降，这可能是造成BUP暴露后听力损失的一个主要原因。     

豚鼠耳蜗局灶性微循环障碍模型的建立

目的 :探讨耳蜗局灶性微循环障碍对耳蜗血流、听功能及耳蜗形态学的影响。方法 :采用光化学诱导法 ,经豚鼠颈外静脉注射 2 %四碘四氯荧光素二钠 (RB)后 ,用 (5 4 0± 4 0 )nm的绿色光照射耳蜗第 2转外侧壁(范围约 1.2mm× 1.0mm) ,诱导该部位血管纹微血栓形成。结果 :诱导后观察 5h ,被照射部位的耳蜗血流随时间逐渐下降 ,动作电位阈移值逐渐提高 ,二者的变化呈负相关。耳蜗铺片显示 ,被照射部位诱导后 30min耳蜗外侧壁毛细血管扩张 ,部分毛细血管轮廓不清、血流中断 ;诱导后 90～ 30 0min ,大片的毛细血管萎缩、闭塞、数目减少 ;诱导 3h后 ,光照区内部分外毛细胞、内毛细胞坏死缺失 ,外毛细胞病变较内毛细胞为重 ,毛细胞坏死区的长度为 (115 2 .5 0± 36 3.2 6 ) μm(n =4 )。非光照区CBF及形态学均无明显变化。结论 :光化学法可诱导耳蜗外侧壁局限性微血管损伤 ,造成豚鼠听力下降 ,为耳蜗不同部位微循环障碍导致不同类型听力损伤的研究提供了实验依据 ,并为耳蜗血栓性疾病探索新的治疗方法提供了动物模型。     

一次性大剂量60钴辐射对豚鼠耳蜗影响的实验研究

目的观察一次大剂量６０钴（６０Ｃｏ）辐射对耳蜗功能与结构的影响。方法应用６０Ｃｏ５０Ｇｙ对豚鼠耳颞部一次照射,在辐射后４小时及以后７天中应用ＡＰ反应阈观察其听功能变化,并应用光镜及电镜作耳蜗基底膜损害的形态学观察。结果实验发现在接受辐射后第２天至第７天实验豚鼠听力呈渐进性下降,第７天ＡＰ反应阈达５８．７ｄＢ。光镜及电镜观察可见耳蜗基底膜毛细胞出现损害且内毛细胞的病损比外毛细胞更为明显和严重。结论一次性应用６０Ｃｏ５０Ｇｙ对豚鼠耳颞部照射可造成耳蜗功能与结构的损害。     

快中子照射后豚鼠耳蜗超微结构的改变

快中子照射治疗头颈部肿瘤时，颈骨同时处于照射范围内，是否能引起耳蜗损伤尚未见报道。用动物实验方法证实快中子照射豚鼠头部后引起耳蜗超微结构的改变。32只豚鼠用于扫描电镜观察，每组8只，分为4组，分别用2，6，10及15Gy剂量照射。中子束能量最大时为50．SMev，平均为24Mev。照射后一周处死动物做扫描电镜观察。另有4只未照射作为对照组。将观察到的耳蜗毛细胞表面病理状态，包括毛细胞丢失与静纤毛畸形，用耳蜗细胞图像处理技术进行图形重建。选择耳蜗不同区域，即每一圈的中部1／3处的毛细胞进行计数，一排毛细胞中至少计数200个…     

噪声暴露后耳蜗凋亡与坏死毛细胞琥珀酸脱氢酶活性的变化

目的揭示噪声暴露后耳蜗凋亡、坏死毛细胞线粒体功能的变化。方法将灰鼠暴露于155dBSPL的脉冲噪声75次，噪声暴露后5h解剖取双侧耳蜗。采用琥珀酸脱氢酶（SuccinateDehydrogenase，SDH）染色法进行耳蜗基底膜细胞线粒体染色，细胞核DNA荧光染料碘化丙啶（propidiumiodide，PI）双重染色耳蜗基底膜，以未受噪声暴露动物为对照，显微镜下观察噪声暴露后耳蜗基底膜核固缩和核肿胀毛细胞琥珀酸脱氢酶染色的变化。结果噪声暴露损伤区的耳蜗外毛细胞SDH着色变浅．蓝色颗粒物存在于PI标记固缩的耳蜗毛细胞核周围，而肿胀的毛细胞核周围缺少SDH阳性染色物。结论强脉冲噪声暴露后，凋亡的耳蜗外毛细胞依然存在不同程度的线粒体功能，而坏死的外毛细胞线粒体功能受损严重。     

直流电脉冲刺激豚鼠耳蜗基底膜振动研究

为了在活体上研究哺乳类动物耳蜗基底膜的电－机械特性，将一对铂－铱电极分别置于３０只豚鼠耳蜗底回的前庭阶和鼓阶。用矩形直流脉冲电刺激蜗管，用激光多普勒测速仪测定电刺激诱发的耳蜗基底膜振动的幅度和速度。结果表明，在听敏度正常豚鼠的耳蜗，电刺激可诱发基底膜向正电极方向位移，其位移波形类似于电脉冲的矩形波。在矩形脉冲的起始沿和结束沿，由于外毛细胞的瞬态反应，可诱发与该部位特征频率一致的共振运动。据分析，这一共振运动是外毛细胞的主动耗能过程，并由耳蜗放大器参与。在听力受损的耳蜗，直流电刺激仍能引起基底膜的位移，但振铃运动明显减少或消失。这可能是受损毛细胞的能量代谢障碍所致。直流电刺激诱发的基底膜振动与声波一样，可通过行波沿基底膜向其它部位传输，这一特性奠定了电听觉和耳声发射的生理基础。     

狗喉甲杓肌组织化学及超微结构的研究

目的　研究甲杓肌各型肌纤维光镜及电镜下的结构特点，探讨其与生理功能的关系。方法　采用琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ） 染色及电镜技术对狗喉甲杓肌进行分型。结果　经ＳＤＨ 染色后，甲杓肌可分红肌、白肌及中间肌三种肌纤维型，它们所占比例分别为５３ ．３ ％ 、１７ ．８ ％ 、２８ ．９ ％ 。电镜下，根据线粒体的数量及分布特点可分出三种类型的超微结构，它们分别与光镜下的肌纤维分型相对应。结论　甲杓肌各型肌纤维构成特点与生理功能密切相关；定量分析Ｚ 线及肌节的宽度对于电镜下的肌纤维分型有重要意义     

Lactate dehydrogenase activity in laryngeal carcinoma and surrounding mucosa

The total lactate dehydrogenase (LDH) activity and LDH isoenzyme pattern were measured in tissue taken from laryngeal cancers and from the laryngeal mucosa both close to and distant from the tumour margin. An increase in the total LDH activity and a cathodic shift in the isoenzyme pattern were found in tumour tissue compared to the close and distant mucosa. However, significant LDH alterations in the mucosa close to the tumour were shown in comparison to the distant mucosa and to the laryngeal mucosa of controls. Histochemical studies showed the LDH activity to be located in the basal and parabasal layers of the epithelium and in the cancer foci.     

琥珀酸脱氢酶B在局部复发鼻咽癌组织中的低表达及其与预后的关系

目的 研究琥珀酸脱氢酶B(succinate dehydrogenase subunit B,SDHB)在局部复发鼻咽癌组织中的表达与患者临床病理因素的关系及其与预后的关系.方法 采用免疫组化法检测51例局部复发鼻咽癌患者肿瘤组织和42例初发鼻咽癌患者肿瘤组织中SDHB的表达情况,运用x2检验分析其与临床病理因素的关系、Kaplan-Meier法进行生存分析、Cox比例风险模型进行复发多因素分析.结果 初发鼻咽癌组织中SDHB低表达率为57.1％(24/42),局部复发鼻咽癌组织中SDHB低表达率为76.5％(39/51),差异有统计学意义(x2=3.937,P＜0.05).SDHB低表达与局部复发鼻咽癌患者的T分期、临床分期、脑神经侵犯等有关(P值均＜ 0.05),Kaplan-Meier生存分析显示,SDHB表达降低与患者低生存率有关(x2=4.154,P＜0.05),多因素Cox回归分析显示,SDHB低表达、远处转移、脑神经侵犯是影响鼻咽癌复发的独立危险因素(P值均＜ 0.05).结论 SDHB表达降低对鼻咽癌的局部复发、预后不良可能起着重要作用,SDHB低表达可作为判断鼻咽癌复发及预后一种新的分子标志物.     

喉返神经切断后甲杓肌酶组织化学变化

目的:研究单侧喉返神经(RLN)切断后,两侧甲杓肌纤维所发生的酶组织化学变化。方法:建立单侧RLN麻痹动物模型,应用琥珀酸脱氢酶染色法及显微图像分析仪,动态观察双侧甲杓肌中各型肌纤维直径的变化。结果:去RLN侧4周时各型肌纤维萎缩有意义(P<0.05);10周时,已分辨不出肌型,肌纤维呈纤溶性改变。健侧甲杓肌,4周时直径已发生代偿改变,各型肌纤维均增粗(P<0.05);10周时代偿尤为显著,其中以中间肌纤维代偿最为明显,各型肌纤维构成比没有明显变化趋势。结论:当发生单侧RLN麻痹时,健侧甲杓肌各型肌纤维均增粗,以中间肌纤维最明显,对喉的功能起到一定的代偿作用。     

Clinical factors indicating the presence of malignant lymphoma before lymph node dissection

Conclusion: Lymph node swelling in the neck is one of the initial symptoms of malignant lymphoma (ML). The present study showed that clinical factors including higher age, higher level of maximum standardized uptake value (SUV-max) of positron-emission tomography, elevated serum lactate dehydrogenase (LDH), and elevated serum soluble interleukin-2 receptor (sIL-2R) were all useful indicators to suggest the diagnosis of ML, so may be helpful in the selection of patients for lymph node dissection. Objective: Lymph node dissection is essential for the diagnosis of ML. The factors important for the diagnosis of ML were investigated, to establish surgical indicators. Methods: Preoperative data including age, number and side of lymph nodes, SUV-max, serum LDH, serum sIL-2R, and size of lymph nodes were obtained from medical records. The cut-off level for each factor was calculated using the Youden Index for logistic regression analysis. Results: Multivariate logistic regression analysis showed that the following factors were associated with ML: higher age (≥ 53 years), higher level of SUV-max (≥ 9.0), elevated serum LDH (≥ 203 U/L), elevated serum sIL-2R (≥ 2590 U/ml), with odds ratios of 3.7, 4.9, 3.7, and 11.9, respectively.     

不同龄小鼠内耳中ABAD的表达及临床意义

目的探讨ABAD（AmyloidβBinding Alcohol Dehydrogenase）在不同龄小鼠内耳中表达量上的差异。方法将昆明小鼠分为2周龄、5个月龄、1年3个不同的年龄组,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测ABAD在不同龄小鼠内耳中表达的动态变化。结果ABAD在不同年龄组小鼠内耳中均有表达,每组之间差异有统计学意义（P＜0.05）,且随着年龄的增大ABAD在内耳的表达逐渐增多。结论ABAD可能参与内耳细胞的老化机制;与老年性耳聋的发生有关。     

丙酮酸脱氢酶激酶1与鼻咽癌患者临床病理特征及预后关系

目的研究丙酮酸脱氢酶激酶1（pyruvate dehydrogenase kinase 1,PDK1）在鼻咽癌组织中的表达与临床病理因素的关系及其对预后的影响。方法应用免疫组化法检测52例鼻咽癌组织和20例鼻咽黏膜慢性炎症组织中PDK1蛋白的表达情况,统计分析PDK1表达与各临床病理特征以及其对鼻咽癌患者预后关系。结果PDK1在鼻咽癌组织中阳性表达率为61.5%（32/52）,而鼻咽黏膜慢性炎症组织为阳性表达率为35.0%（7/20）,不同组织PDK1蛋白表达差异有统计学意义（χ2=4.098,P〈0.05）。PDK1蛋白的表达与颈部淋巴结转移及颅神经侵犯以及T分级相关,与患者性别、年龄、临床分期等无显著相关性。生存分析显示,PDK1蛋白阳性表达组患者的中位生存时间为51个月,阴性表达组为58个月。结论 PDK1基因可能在鼻咽癌的发生、发展、淋巴结转移和预后中起着重要作用,PDK1阳性表达可作为鼻咽癌不良预后因素。     

Isolation and chemical analysis of neuron soma samples from the cat cochlear nucleus

Pieces of neuron somata were dissected from the cochlear nuclei of two cats and analyzed for activity of malic dehydrogenase, an important enzyme of oxidative metabolism. Based on location, size and shape the somata were identified as those of spherical bushy cells, octopus cells, and fusiform cells. Somata of cerebellar Purkinje cells were analyzed for comparison. The results suggest that the large cochlear nucleus neurons have malic dehydrogenase activities higher than those of most other neurons so far studied. Also, the octopus and fusiform somata had higher malic dehydrogenase activities than those of the spherical bushy cells.