人类白细胞抗原A和C座位基因重组二个家系分析

目的 探讨2个家系人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)座位的重组情况.方法 采用聚合酶链反应-序列特异寡核苷酸探针技术检测2个家系成员HLA-A、-C、-B、-DRB1和-DQB1位点,应用测序分型方法进行HLA高分辨基因分型,然后通过家系遗传分析确定HLA基因重组相关位点,检测短串联重复序列位点确定其家系成员亲权关系.结果 2个家系HLA单倍型的重组发生在HLA-A和C位点之间,家系调查显示1例为父源、1例为母源HLA单倍型发生了交换后遗传给子代,短串联重复序列结果证实2个家系成员内具有高度的亲权关系.结论 发现了2个中国汉族人群HLA-A和C基因座位间的基因重组家系,为深入研究HLA的重组机制提供了基础.     

人类白细胞抗原分子遗传中的基因重组

深入研究人类白细胞抗原（human leucocyte antigen，HLA）基因重组的分子生物学特性，对于揭示其等位基因多样性形成的演化机理以及人体所具有的抵抗多样致病微生物的防御能力具有重要意义。国外学者通过家系调查研究、统计学分析等方法估算了HLA的重组频率，证实了一些重组发生的热点，并且对重组的单倍型特异性、序列基序特异性、性别特异性等进行了深入研究。本文就HLA重组的交换频率、重组热点以及其它特性的研究现状作一综述。     

人类白细胞Ⅱ类抗原DR、DQ基因型与妊娠期糖尿病的相关性研究

目的探讨人类白细胞II类抗原DR、DQ基因型与妊娠期糖尿病的相关性。方法对26例GDM孕妇及同期入院的42例正常健康孕妇,采用序列特异性引物聚合酶链反应技术(PCR-SSP)检测HLA-II类抗原DR和DQ的等位基因。结果研究中发现,DQA1*0101、DQA1*0201、DQB1*0609、DRB l*07-DQA1*0201-DQB1*0201基因频率在GDM中显著高于正常对照组,两组比较,统计学有差异(Ρ<0.05)。DQB1*0301基因频率在GDM中显著低于正常对照组,两组比较,有统计学差异(Ρ<0.05)。结论人类白细胞II类抗原DR、DQ基因型与GDM的易感性和保护性存在关联。DQA1*0101、DQA1*0201、DQB1*0609、DRB l*07-DQA1*0201-DQB1*0201基因是GDM的易感基因。DQB1*0301基因是GDM的保护基因。     

人类白细胞抗原-A基因芯片分型研究

目的 探索人类白细胞抗原-A（HLA-A）基因芯片分型，为器官移植临床配型服务。方法 根据中国汉族南方人常见的HLA-A位点基因及其多态性的独特序列，设计并合成48条特异性的寡核苷酸分型探针，将其点在玻片上，制成芯片。基因组DNA通过组间特异性引物扩增，并用荧光素Cy5标记。标记后的产物与结合在芯片上的探针进行杂交，通过荧光扫描仪获得杂交产生的荧光信号值，再经过计算机软件自动分析，确定样品的HLA-A基因亚型。用该方法对120份样本进行HLA-A基因分型。结果 120份待检样本，其中6份因PER无产物，不能分型。1份信号杂乱，不能分型。其余113份样本分型成功。实际检出A抗原特异性结果为A2（含A203）：56；A11（含A1101）：52；A24：33；Al：8；A30（含A3001）：7；A33：21；A26：1；A29：2；A31：3；A68：2；A3：9；A32：1。未检出A＊3002基因型。整个检测耗时约4．5h。芯片检测的重复率为100％。结论 HLA-A基因芯片是一种理想的分型方法，具有特异性高、重复性好、操作简便、所需样本量少、结果判读容易、一次可作多份样本的优点，适合临床器官移植配型应用。     

人类白细胞抗原G和人类白细胞抗原E在宫颈癌中的表达及临床意义

目的 评估人类白细胞抗原G(HLA-G)和人类白细胞抗原E(HLA-E)的表达在宫颈癌进展中的意义及对患者预后的影响.方法 采用聚合酶链反应和流式细胞术检测正常组、CIN Ⅰ、CINⅡ、CINⅢ(宫颈上皮内瘤变Ⅰ-Ⅲ级)及浸润癌组HLA-G和HLA-E基因及蛋白的表达,比较两者在各组表达的差异及其对病人长期生存的影响.结果 CINⅢ及浸润癌组HLA-G表达与CIN Ⅰ、CINⅡ和正常组比较U值分别为564.0、536.0和565.5,P均＜0.05,HLA-E前两组的表达与后者比较U值分别为550.0、542.0和578.5,P均＜0.05;并且HLA-G和HLA-E阳性的患者生存率明显低于阴性者(P＜0.05).结论 HLA-G和HLA-E的异常表达促使宫颈癌的发生和发展,并且影响患者的术后长期生存.     

使用PCR—SSP方法检测HLA—DR抗原

目的　采用顺序特异引物聚合酶链反应 (PCR -SSP)建立人类白细胞抗原DR位点的DNA分型方法 .方法　合成 2 9个特异性引物和 1对阳性对照引物 ,组成 2 0个PCR反应用于DR位点 ,建立一步法PCR -SSP .结果　所有样本PCR -SSP基因分型获得成功 ,分型结果经标准DNA ,限制性核酸内切酶分析证实符合 ,特异性和重复性 10 0 % .结论　PCR -SSP检测HLA -DR的方法具有快速、准确、特异性高等优点 ,适合临床应用 .     

人类白细胞抗原复合体与HBV感染的相关性研究进展

乙型肝炎是全球性公共卫生问题,据估计世界约有20亿人口曾感染乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV),其中约4亿人发展为慢性,每年有600 000至1 200 000人死于HBV的感染[1].HBV感染后形成复杂的疾病谱,如亚临床感染、轻重程度不等的急性肝炎、慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)、肝硬化(liver cirrhosis,LC)和肝细胞癌(Hepatic cell carcinoma,HCC)等[2],具体形成机制尚不完全清楚,但环境、病毒(病毒载量、基因型、病毒变异)、宿主(健康状况、免疫特性)等被认为是影响HBV感染后病情进展的关键因素,尤其是宿主的免疫特性.人体免疫特性受主要组织相容性复合体(major his-tocompatibility,MHC)调控,此基因是编码人类白细胞抗原复合体(human leukocyte antigen,HLA)的机密连锁基因组,其具有向抗原特异性受体传递抗原多肽的特性,在免疫应答、免疫调控、破坏外来抗原等方面起重要作用[3].有关HLA基因多态性与HBV感染的临床转归国内外已进行了大量相关研究,但重复性较差,至今尚无定论,此领域仍有待进一步深入研究.本文就目前国内外研究现状作一简要综述.     

人类白细胞抗原HLA-Cω基因第2,3,4外显子测序分型方法的初步研究

目的 初步建立可靠的HLA-Cω基因第2、第3和第4外显子测序分型技术.方法 基于中国汉族人群HLA-Cω基因的全长序列,设计和合成1对PCR引物,采用Stratagene P fu Taq DNA聚合酶特异性扩增HLA-Cω基因5'-启动子区至第4内含子目的基因片段,涵盖完整的第1～4外显子.PCR产物经纯化,采用自行设计的6条测序引物和ABI PRISM BigDye 1.1 Terminator,以及优化的测序反应体系和PCR条件,对HLA-Cω,基因第2、第3和第4外显子进行双向测序.测序反应产物纯化后,采用ABI3730测序仪电泳和Assign 3.5 SBT软件分析结果.结果 PCR扩增获得了清晰的HLA-Cu,基因日的片段,所用的6条测序引物进行HLA-Cω基因第2、第3和第4外显子测序,序列中无背景信号和杂峰.156份汉族随机骨髓志愿捐献者样本用本文的方法检测.分型结果与Atria AlleleSEQR HLA-Cw Plus测序分型试剂盒的结果相一致.结论 初步建立了可靠的HLA-Cω基因测序分型方法,在HLA-Cω基因群体遗传学及组织配型等领域,具有广泛应用前景.     

人类白细胞抗原与人类巨细胞病毒

人类巨细胞病毒（human cytomegalovirus,HCMV)通过多种途径逃避宿主的免疫监视和防御功能，其主要机制为：合成多种时相蛋白，影响和破坏人类白细胞抗原（human leukocyte antigen,HLA)分子在宿主2细胞表面的表达，从而干扰抗原递呈及影响NK细胞的杀伤活性。本文就有关最新研究进展作一综述。     

西藏那曲地区藏族群体人类白细胞抗原-E基因多态性分析

目的:调查西藏那曲地区藏族人群人类白细胞抗原-E(HLA-E)等位基因的分布情况,为探讨HLA-E基因多态性与疾病的关联奠定基础。方法:检测采用聚合酶链反应/序列特异的寡核苷酸探针杂交(PCR-SSO)方法对150名那曲地区藏族正常人HLA-E等位基因进行了检测。结果:共检测到3个HLA-E等位基因:HLA-E~*0101的频率最高,为40.59%,其次为HLA-E~*01032和HLA-E~*01031,分别占36.63%和22.77%。结论:那曲地区藏族人群HLA-E等位基因频率分别为E~*0101 40.59%、E~*01031 36.63%和E~*01032 22.77%。提供了一套比较完整准确的藏族HLA-E基因频率参数。     

HLA-B蛋白在喉癌中的表达及意义

目的研究人白细胞抗原HLA-B蛋白在喉癌组织中的表达及意义。方法应用免疫组化方法检测HLA-B蛋白在50例喉癌组织及癌旁组织的表达,应用Western Blot方法检测HLA-B蛋白在6对喉癌及癌旁组织中的表达。结果 HLA-B蛋白在癌旁正常组织中100%表达,而在喉癌组织中表达水平明显下调,有淋巴结转移组下调明显低于无淋巴结转移组。结论 HLA-B蛋白在喉癌组织中表达下调,可能与颈淋巴结转移相关。     

Diversity and evolution of the DRB1*03 family: description of DRB1*03022, *0307, **0308

Three previously unreported DRB1*03 alleles are described, adding to the diversity of the DRB 1 family of alleles. DRB1*03022 contains a silent substitution at codon 77. DRB1*0307 differs from DRB1*03011 by a substitution at codon 26 resulting in a predicted change from tyrosine to phenylalanine. DRB1*0308 is almost identical to DRB1*03011 differing at codon 58 which specifies the glutamic acid residue commonly found in DRB1*11 alleles. The new alleles (DRB1*03022, *0307, *0308) may have arisen by gene conversion-like events and add to the increasing complexity of the HLA system.     

Identification of a novel HLA-B allele HLA-B*9526 in a Chinese donor

A novel human leukocyte antigen-B (HLA-B) allele, B*9526, was identified. The B*9526 allele has one nucleotide change from the closest matching allele B*1507 resulting in an amino acid change from Y(TAC) to C(TGC) at codon 142.     

A recombination event in the closely linked plasminogen and apolipoprotein(a) gene loci

Genetic studies as well as in situ hybridisation data have strongly demonstrated that the genes coding for apoprotein(a) and plasminogen are linked and localised to chromosome 6 at band 6q26-27. We describe in this report the presence of a recombination event in a region of approximately 50 kb of DNA separating the two genes. The recombination was found in an Italian family, in which a mutation affecting both plasminogen plasma level and activity of plasminogen activity has been detected. Polymerase chain reaction and sequencing analysis showed the presence of a mutation different from those previouly reported in two Japanese families.     

云南汉族人群HLA-B基因多态性与类风湿性关节炎的相关性研究

目的 探讨HLA-B基因多态性与类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的关联性.方法 采用DNA测序和序列特异性引物聚合酶链式反应(polymerase chain reaction-sequencespecific primer,PCR-SSP)方法检测云南汉族中271例类风湿性关节炎患者和264例正常人群的HLA-B基因多态性并进行关联性分析.结果 女性类风湿性关节炎患者的HLA-B*40基因频率(8.84％)明显低于女性对照组(18.33％)(P=0.000),HLA-B*51基因频率(9.53％)明显高于对照组(2.83％)(P=0.000),HLA-B*48基因频率(0.23％)明显低于对照组(2.33％)(P=0.007),差异均有统计学意义.HLA-B*40、HLA-B*51、HLA-B* 48的基因频率在男性类风湿性关节炎患者和男性对照中的分布无统计学差异(P值分别为0.535、0.691、0.289).结论 云南汉族人群中HLA-B基因分布存在多态性.HLA-B基因多态性与云南汉族人群女性类风湿性关节炎的发病相关,HLA-B*51可能是易感基因,HLA-B*40、HLA-B* 48可能是保护性等位基因.     

Severe acute graft-vs-host disease in a patient with acute monocytic leukemia having a recombination event between HLA-A/B loci from a multiple recombinant family

Human leukocyte antigen (HLA) recombination, particularly multiple recombinations can produce novel haplotypes, thereby complicating donor-recipient selection and possibly inducing severe graft-vs-host disease (GVHD) after nonfully matched allogeneic hematopoietic stem cell transplantation. Here, we report for the first time that a 30-year-old female acute monocytic leukemia patient with an HLA-A/B recombinant haplotype, who has three unmatched and one HLA-B/DRB1 recombinant haplotype siblings, presented grade IV acute GVHD (aGVHD) after transplantation from a sibling with a single allele only mismatch at the classical HLA-A locus. Furthermore, using a new three-dimensional structure modeling application, we inferred that the structural differences in peptide-binding and T-cell receptor interaction sites can significantly change the immunogenicity of mismatched HLA molecules, potentially one of the main causes of aGVHD.     

Identification of a novel HLA-B allele, HLA-B*3713, in a Chinese individual

A novel human leukocyte antigen (HLA) class I allele, HLA-B*3713, has been identified in a Chinese individual. The HLA-B*3713 allele differs from the closest matching allele B*370101 by one nucleotide substitutions in exon 3 at nt 527(T-->A), resulting in an amino acid change from Val (GTG) to Glu (GAG) at codon 152.     

Characterization of a new HLA-B allele, HLA-B*5312, and re-evaluation of the published sequences of the untranslated regions of HLA-B*35 and HLA-B*53

We report a novel human leukocyte antigen (HLA)-B allele, HLA-B*5312. Compared with HLA-B*530101, there is one silent substitution at nucleotide 438 and two non-synonymous substitutions at nucleotides 431 and 440, causing a change of the amino acid sequence (Asn-->Ser at codon 77 and Ile-->Thr at codon 80, respectively) within the Bw4 epitope. In contrast to the published sequences (IMGT/HLA Database, version 2.16.0, January 2007), we found that HLA-B*530101 had a C instead of a T at nucleotide -221, whereas HLA-B*350101 had a C instead of an A at nucleotide 2992. According to our sequencing results, HLA-B*5312 resembles HLA-B*350101 regarding its sequence of the untranslated regions. HLA-B*5312 may have been the result of a double crossing over event during which HLA-B*350101 adopted a Bw4 motif.     

A novel HLA-B*35 (B*3570) allele of a Caucasian family differing with one amino acid mismatch from HLA-B*3503 allele in exon 4

A novel human leucocyte antigen (HLA)-B35 (HLA-B*3570) allele has been identified in a Caucasian family from Middle Europe using single allele-specific sequencing strategy. This allele is identical to the HLA-B*3503 allele except for one point mutation in exon 4 at codon 188 (CAC-->CGC), resulting in an amino acid change from histidine to arginine.