旋复代赭汤及其拆方对反流性食管炎模型大鼠食管线粒体UCP2表达的影响

目的:本实验旨在通过分析旋复代赭汤及其拆方对反流性食管炎(RE)模型大鼠食管组织线粒体UCP2表达的影响,探讨气机升降与线粒体能量代谢调控机制的相关性,以期进一步阐释RE的病机及旋复代赭汤治疗RE的作用机理。方法:将150只健康雄性Wister大鼠随机分为10组,即对照组(正常组、模型组)、旋复代赭汤全方组及拆方组(苦降组、甘升组、升降相因组、全方去苦降组、全方去甘升组、全方去升降相因组)与西药组,每组15只。采用"4.2mm幽门夹+胃底2/3结扎术"制备酸碱混合反流性食管炎大鼠模型。术后第8天开始,旋复代赭汤全方组及拆方各组分别给予相应药液灌胃,西药组给予兰索拉唑+莫沙必利灌胃,对照组(正常组+模型组)均给予等量生理盐水灌胃。干预14天后,第22天处死所有模型大鼠。在光镜下观察食管黏膜组织病理变化,采用Western-blot法检测各组RE模型大鼠食管组织线粒体中UCP2的相对表达量。结果:通过Western-blot相对灰度的比较分析,正常组UCP2的相对表达量最低,同全方组及西药组比较无明显差异(P0.05);而全方组及西药组UCP2的相对表达量明显低于模型组(P0.01);全方去苦降组、甘升组、升降相因组与模型组比较,结果有差异(P0.05);其余各组(全方去甘升组、全方去升降相因组、苦降组)UCP2的相对表达量与模型组比较无明显差异(P0.05),不具有统计学意义。结论:旋复代赭汤可以明显降低RE大鼠食管组织线粒体UCP2的表达量,表明此方能够很好的调节RE大鼠食管线粒体能量代谢,以此推断该方能明显改善RE大鼠食管下端括约肌松弛,在缓解胃食管反流方面具有良好的疗效。     

基于气机升降理论观察旋覆代赭汤及其拆方对反流性食管炎模型大鼠食管线粒体ANT转运活性的影响

目的:观察旋覆代赭汤及其拆方对反流性食管炎(RE)模型大鼠线粒体腺苷酸转运体(ANT)转运活性的影响。方法:将60只雄性Wistar大鼠,随机分成6组,即正常组、模型组、西药组,旋覆代赭汤全方组及拆方组(包括苦降组、甘升组),每组10只大鼠。对除正常组外的造模组大鼠采用"4.2 mm幽门夹+胃底2/3结扎术"制备RE动物模型。从术后第7天开始,正常对照组、模型对照组给予生理盐水灌胃,旋覆代赭汤全方组、拆方各组及西药组分别给予相应药液灌胃,干预14 d后,第22天处死全部大鼠后,取材,在光学显微镜下观察RE大鼠病理分级,各组随机取6份食管标本匀浆制成线粒体悬浮,液通过H3-ADP掺入法测量检测食管线粒体ANT转运活性。结果:各组大鼠食管黏膜病理形态学积分比较:模型组大鼠食管黏膜病理积分比正常组显著升高,有显著性差异(P0.01);全方组、西药组、甘升组食管黏膜病理形态学积分比模型组明显降低,差异有统计学意义(P0.05),苦降组食管黏膜病理形态学积分较模型组稍有降低,但差异无统计学意义(P0.05);全方组及西药组食管黏膜病理形态学积分较甘升组稍降低,但差异无统计学意义(P0.05)。各组食管线粒体ANT转运活性比较:与正常组比较,模型组、西药组、全方组、甘升组大鼠食管线粒体ANT转运活性略提高,差异无统计学意义(P0.05),苦降组略降低,差异无统计学意义(P0.05);与模型组比较,西药组、全方组及甘升组大鼠食管线粒体ANT转运活性略提高略升高,但差异无统计学意义(P0.05);西药组、全方组、甘升组及苦降组组间比较均无统计学意义(P0.05)。结论:旋覆代赭汤通过调节脾胃气机改善RE模型大鼠食管黏膜光镜下表现,促进黏膜修复,改善炎症。在一定程度上提高RE大鼠线粒体ANT转运活性,辅助线粒体能量的顺利完成,亦可能是旋覆代赭汤治疗RE的作用机制之一。     

旋覆代赭汤及其拆方对RE大鼠血浆Na~+-K~+-ATP酶及Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶活性的影响

[目的]探讨反流性食管炎(RE)食管黏膜血浆细胞能量代谢与黏膜损伤的关系以及旋覆代赭汤治疗RE的作用机制。[方法]将120只Wistar大鼠按照随机数字法随机分为10组,每组12只,即正常组、模型组、旋覆代赭汤全方组(全方组)、苦降组、甘升组、升降相因组、去苦降组、去甘升组、去升降相因组和西药组;除正常组外,其余9组行"4.2 mm幽门夹+胃底2/3结扎术"造模。治疗14 d后,即造模后第22天处死,检测各组大鼠血浆Na~+-K~+-ATP酶及Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶的活性。[结果]实验后各模型组大鼠ATP酶活性低于正常组;全方组、西药组酶活性较好,与正常组差异无统计学意义(P0.05),与模型组相比有统计学差异(P0.05);苦降组及去甘升组与模型组相比,差异无统计学意义(P0.05),与全方组及西药组比较差异有统计学意义(P0.05);正常组与其他各组比较,均有统计学差异(P0.05);西药组与全方组比较,差异无统计学意义。[结论]旋覆代赭汤全方组能提高模型大鼠血浆Na~+-K~+-ATP酶及Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶的活性,改善模型大鼠食管黏膜组织形态学病变,且作用优于各拆方组。     

旋覆代赭汤对反流性食管炎家兔食管黏膜脑肠肽和一氧化氮合酶的影响

目的:研究旋覆代赭汤对混合反流性食管炎(RE)家兔食管黏膜血管活性肠肽(VIP)、P物质(SP)和一氧化氮合酶(NOS2)水平的影响。方法:制备家兔RE模型,并进行常规HE染色观察食管黏膜病理改变,免疫组织化学技术检测兔食管黏膜VIP、SP、NOS2的水平。结果:与正常组比较,模型组家兔食管黏膜炎细胞浸润明显,VIP、NOS2表达明显升高(P<0.01),SP表达明显减弱(P<0.01);经中药治疗后全方组、甘升组、去苦降组、去升降相因组光镜下食管黏膜组织有不同程度的修复,其中全方组、甘升组食管黏膜中VIP的表达明显减弱,与模型组相比有显著性差异(P<0.01);与模型组比较,全方组、去升降相因组SP的表达显著增强(P<0.01);与模型组比较,全方组、去苦降组NOS2的表达显著减弱(P<0.01)。结论:旋覆代赭汤全方通过减少食管黏膜VIP和NOS2表达、增强SP表达调节胃肠运动,抑制胃肠内容物的反流和促进黏膜的修复,对RE治疗作用最好;而苦降组、升降相因组、去甘升组对RE治疗效果不佳。     

基于气机升降理论观察旋复代赭汤及其拆方对RE模型大鼠AMPK的影响

目的:观察旋复代赭汤及其拆方对反流性食管炎(RE)模型大鼠腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)含量的影响。方法:将84只雄性Wistar大鼠,随机分成7组,即正常对照组、模型对照组、旋复代赭汤全方组及拆方各组(包括苦降组、甘升组、升降相因组)、西药组(兰索拉唑+莫沙必利),每组12只大鼠。对造模组大鼠采用"4.2 mm幽门夹+胃底2/3结扎术"制备反流性食管炎动物模型。从造模术后7天开始,正常对照组、模型对照组给予生理盐水灌胃,旋复代赭汤全方组及拆方各组分别给予相应药液,西药组给予(兰索拉唑+莫沙必利)灌胃,干预14天后,处死全部大鼠后,其中每组分别送2份大鼠食管组织制作线粒体超微结构切片,应用电镜观察食管下段黏膜组织线粒体超微结构变化,其余食管组织匀浆后应用ELISA测定AMPK含量的表达情况。结果:食管组织线粒体超微结构:模型对照组大鼠电镜下食管黏膜线粒体稀少,形态、大小不一,内膜、外膜及嵴断续模糊,部分线粒体呈肿胀、空泡化,偶见巨线粒体;旋复代赭汤全方组、西药组较模型对照组改善(P0.05),甘升组、升降相因组较模型对照组也明显改善(P0.05);各组AMPK含量:旋复代赭汤全方组、西药组较模型对照组降低(P0.05);甘升组、升降相因组较模型组也降低(P0.05)。结论:旋复代赭汤及其药物通过调节脾胃气机,降低食管组织AMPK含量,促进线粒体能量三磷酸腺苷(ATP)的生成代谢,增加线粒体数量,减少线粒体结构及食管黏膜损伤,调节线粒体能量代谢,治疗RE。     

旋覆代赭汤对反流性食管炎家兔食管下括约肌受体操纵性钙通道调控作用的研究

目的：研究旋覆代赭汤对反流性食管炎家兔食管下括约肌（LES）受体操纵性钙通道（ROCC）的调控机制。方法：制备家兔反流性食管炎模型,用磷脂酶C（PLC）特异性抑制剂（U-73122）抑制PLC、三磷酸肌醇受体拮抗剂（2-APB）阻断三磷酸肌醇受体（IP3R）,比较各组LES环行肌受体操纵性钙通道阻断前后张力幅度的差异。结果：用U-73122、2-APB阻断ROCC前后各组LES环行肌张力比较：正常组、全方组、甘升组、去苦降组、去升降相因组LES环行肌钙释放相、内流相张力均高于模型组（P〈0．05或P〈0．01）,而苦降组、升降相因组、去甘升组LES环行肌钙释放相与模型组比较有显著性差异（P〈0．01）,正常组与全方组LES环行肌钙释放相、内流相张力相比无显著性差异（P〉0．05）。结论：旋覆代赭汤方可以通过调控ROCC、活化PLC、恢复IP3R孔道开放,使胞浆中的钙离子浓度增加而提高LES环行肌张力;旋覆代赭汤全方对反流性食管炎治疗效果最好。     

旋覆代赭汤对反流性食管炎大鼠食管组织舒缩神经递质的影响

目的:观察旋覆代赭汤及原方倍用甘补组方对反流性食管炎(RE)模型大鼠食管舒缩神经递质活力的影响。方法:将110只雄性Wistar大鼠随机分成正常对照组、假手术组和造模组。将造模组大鼠制备成反流性食管炎动物模型后随机分为模型对照组、旋覆代赭汤原方组、原方倍用甘补方组、西药对照组。进而观察食管下段黏膜组织形态学变化及食管组织及血浆ChAT及NOS活力的表达情况。结果:原方组、甘补组及西药组大鼠食管组织ChAT活力较模型组明显提高,差异有统计学意义(P<0.05);原方组、甘补组及西药组大鼠食管组织NOS活力较模型组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:旋覆代赭汤能够通过影响食管组织及血浆舒缩神经递质合成酶活力,改善食管组织的舒缩功能。     

旋覆代赭汤及其拆方对反流性食管炎模型大鼠COX-2表达的影响

目的观察旋覆代赭汤及其拆方对反流性食管炎（RE）模型大鼠环氧合酶-2（COX-2）表达的影响。方法将90只Wistar大鼠留取10只为正常对照组（正常组）,其余80只行＂食管十二指肠端侧吻合术＂后,随机分为6组,即模型组、旋覆代赭汤全方组（全方组）、辛开中药治疗组（辛开组）、甘补中药治疗组（甘补组）、咸降中药治疗（咸降组）、西药对照组（西药组）,连续给药21天后,观察各组大鼠食管黏膜COX-2的表达情况。结果与正常组比较,模型组、辛开组、甘补组差异有统计学意义（P〈0.05）;与模型组比较,除辛开组外,其他各用药组差异有统计学意义（P〈0.05）;与西药组比较,辛开组差异有统计学意义（P〈0.05）;与全方组比较,辛开组、甘补组差异有统计学意义（P〈0.05）;与辛开组比较,甘补组、咸降组差异有统计学意义（P〈0.05）;与甘补组比较,咸降组差异有统计学意义（P〈0.05）。结论旋覆代赭汤全方组、咸降中药治疗组药物可抑制细胞中的环氧合酶-2表达,逆转模型大鼠食管黏膜组织形态学病变,且作用优于辛开组、甘补组药物。     

旋覆代赭汤对混合性反流性食管炎模型大鼠IL-10的影响

目的:观察旋覆代赭汤对混合性反流性食管炎模型大鼠血浆及食管组织细胞因子IL-10浓度水平的影响,揭示RE的关键病机及深入研究旋覆代赭汤治疗RE的作用机理。方法:采用"食管十二指肠端侧吻合术"制作动物模型。110只大鼠随机分为正常对照组、模型组、西药(莫沙必利)对照组、旋覆代赭汤原方组治疗组、原方倍用甘补组给予相应处理或用药后,取血浆及食管组织,通过ELISA的方法分别检测血浆及食管组织中细胞因子IL-10的浓度变化。结果:旋覆代赭汤原方倍用甘补组及原方组能显著提高反流性食管炎模型大鼠食管组织中IL-10的浓度,与模型组相比IL-10的浓度明显增加(P<0.05),与西药组相比IL-10的浓度增加更为明显(P<0.05),西药组与模型组相比差异无显著意义(P>0.05),倍用甘补组与原方组相比无显著性差异(P>0.05),血浆中IL-10含量结果表明,原方组与倍用甘补组及西药组与模型组比较,差异无显著性意义(P>0.05),其余结果与食管组织结果一致。结论:旋覆代赭汤原方倍用甘补组及原方组可显著提高反流性食管炎模型大鼠食管组织中IL-10的浓度,反应旋覆代赭汤原方倍用甘补组及原方组对改善食管局部及外周炎症反应、改善食管下端括约肌的松弛情况等有显著效果,通过对炎症因子的研究,可以更好的指导RE的临床用药,为RE的临床治疗提供新的理论指导。     

旋覆代赭汤对反流性食管炎模型大鼠IL-6及TNF-α的影响

目的:观察旋覆代赭汤对混合性反流性食管炎模型大鼠血浆及食管组织细胞因子IL-6及TNF-α浓度水平的影响,揭示RE的关键病机及深入研究旋覆代赭汤治疗RE的作用机理。方法:采用"食管十二指肠端侧吻合术"制作动物模型。110只大鼠随机分为正常对照组、模型组、西药(莫沙必利)对照组、旋覆代赭汤原方组治疗组、原方倍用甘补组给予相应处理或用药后,取血浆及食管组织,通过ELISA的方法分别检测血浆及食管组织中细胞因子IL-6及TNF-α的浓度变化。结果:旋覆代赭汤原方倍用甘补组、原方组及西药组能明显降低反流性食管炎模型大鼠食管组织中IL-6及TNF-α的浓度,与模型组相比IL-6及TNF-α的浓度明显降低(P<0.05),倍用甘补组及原方组与西药组相比IL-6及TNF-α的浓度降低(P<0.05),倍用甘补组与原方组差异无显著性意义(P>0.05),而血浆中IL-6含量结果表明,倍用甘补组及原方组与西药组比较,差异无显著性意义(P>0.05),其余结果与食管组织结果一致。结论:旋覆代赭汤原方倍用甘补组及原方组可显著降低反流性食管炎模型大鼠食管组织中IL-6及TNF-α的浓度,反应旋覆代赭汤原方倍用甘补组及原方组对改善食管局部及外周炎症反应、改善食管下端括约肌的松弛情况等有显著效果,通过对炎症因子的研究,可以更好的指导RE的临床用药,为RE的临床治疗提供新的理论指导。     

旋覆代赭汤对RE模型大鼠食管黏膜Na+-K+-ATP酶及 Ca2+-Mg2+-ATP酶的影响

目的: 观察旋覆代赭汤对反流性食管炎(RE)模型大鼠食管黏膜组织Na⁺-K⁺-ATP酶及Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性的影响,探讨RE食管黏膜细胞能量代谢障碍与黏膜损伤的关系以及旋覆代赭汤治疗RE的作用机制。方法: 将96只雄性Wistar大鼠随机分成6组,即假手术组、模型组、旋覆代赭汤组高、中、低剂量组(24,12,6 g·kg^-1)及西药对照组(奥美拉唑10 mg·kg^-1+2 mg·kg^-1莫沙必利),每组16只。采用"食管-十二指肠端侧吻合术"制备胃及十二指肠液混合RE模型。从术后第3天开始,假手术组、模型组给予生理盐水灌胃,药物治疗组分别给予旋覆代赭汤高、中、低剂量、西药(奥美拉唑10 mg·kg^-1+莫沙必利2 mg·kg^-1)灌胃,连续7天,记录大鼠体重变化及死亡情况,于第8天处死大鼠留取标本,观察食管下段黏膜大体及病理组织学变化;化学法检测食管黏膜组织Na⁺-K⁺-ATP和Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性。结果: 与假手术组比,模型组大鼠体重明显减轻(P<0.05),食管黏膜肉眼及镜下病理改变明显,评分增高(P<0.05);食管黏膜组织Na⁺-K⁺-ATP酶及Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性显著降低(P<0.05);与模型组及西药组比,旋覆代赭汤高、中剂量组大鼠死亡率明显降低(P<0.05):与模型组比,旋覆代赭汤高、中剂量组、西药组肉眼及病理评分显著降低(P<0.05);食管黏膜组织Na⁺-K⁺-ATP酶及Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性明显提高(P<0.05)。结论: 旋覆代赭汤能明显提高RE大鼠食管黏膜细胞膜Na⁺-K⁺-ATP 酶及Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性, 从而保持食管黏膜细胞完整性,减轻黏膜损伤。     

基于气机升降探讨叶天士对旋覆代赭汤的临床应用

旋覆代赭汤是《伤寒论》中经典方剂,为汗吐下后、表证已解、中气受伤、胃虚气逆所致心下痞硬、噫气不除而设,后世医家抓住其"胃虚气逆"这一主要病机,对此方发挥甚多。文章从气机升降角度,探讨叶天士《临证指南医案》及《未刻本叶天士医案》的医案中对张仲景旋覆代赭汤临床应用,并从气机升降理论、立方新意、脏腑气机三方面对其进行总结分析,以期临床更好地运用此方。     

旋覆代赭汤对混合性反流性食管炎模型大鼠CyclinD1表达的影响

[目的】观察旋覆代赭汤对混合性反流性食管炎模型大鼠食管黏膜组织细胞周期蛋白D1（CyclinD1）表达的影响。【方法】将80只Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、中药治疗组、西药对照组,后3组行“食管十二指肠端侧吻合术”,术后1周分别给予生理盐水、旋覆代赭汤水煎剂和枸橼酸莫沙必利分散片混悬液,连续给药21d后,观察各组大鼠食管黏膜CyclinD1的表达情况。【结果】模型组较正常对照组食管黏膜CyclinD1的表达明显增强,有显著性差异;中药治疗组及西药对照组较模型组食管黏膜CyclinD1的表达明显降低,且中药治疗组降低更为明显,有显著性差异;中药治疗组食管黏膜CyclinD1的表达与正常组比较,无显著性差异。【结论】旋覆代赭汤可明显降低混合性反流性食管炎食管黏膜CyclinD1的表达,从而起到治疗混合性反流性食管炎的作用。     

旋覆代赭汤对反流性食管炎大鼠模型TLR4/NF-κB的影响

目的观察旋覆代赭汤对反流性食管炎(RE)模型大鼠食管黏膜与脂多糖(LPS)、Toll样受体4(TLR4)、核因子κB(NF-κB)表达的影响。方法将60只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为正常对照组、模型组、旋覆代赭汤组(简称中药组,9.89 g/kg)、西药(奥美拉唑+莫沙比利,2.58 mg/kg)组,每组15只。除正常对照组外大鼠采用“4.2 mm幽门夹+2/3胃底结扎术”制备酸碱混合反流RE大鼠模型。术后第7天予相应药物干预,持续干预14天。利用光学显微镜观察大鼠食管下段黏膜组织形态学变化;应用ELISA法检测定外周血中LPS含量;采用Western Blot法与RT-PCR法检测食管黏膜组织中TLR4、NF-κB蛋白和基因表达。结果与正常对照组比较,模型组大鼠食管黏膜镜下损伤最为严重,食管黏膜呈炎性改变,可见急慢性炎细胞浸润,病理积分和外周血中LPS含量升高(P<0.05),食管组织中TLR4、NF-κB蛋白和基因表达升高(P<0.05)。与模型组比较,中药组、西药组病理积分和外周血中LPS含量降低(P<0.05),食管组织中TLR4、NF-κB蛋白和基因表达亦明显降低(P<0.05)。结论旋覆代赭汤能够减轻RE模型大鼠食管黏膜的损伤,抑制TLR4、NF-κB的表达,促进食管黏膜损伤的恢复。     

旋复代赭汤加味预防化疗致消化道反应26例临床观察

目的：观察旋复代赭汤加味预防化疗致消化道反应的临床疗效。方法：将51例患者分为治疗组26例,对照组25例,两组均用托烷司琼及地塞米松针预防消化道反应,治疗组加服旋复代赭汤,观察两组患者消化道反应情况。结果：治疗组未发生消化道反应者为76.9%,对照组为68.0%。结论：中西医结合预防化疗消化道反应优于单用西药治疗。     

旋覆代赭汤加减治疗胆汁反流性胃炎30例

目的:观察旋覆代赭汤加减对治疗胆汁反流性胃炎的疗效。方法:将60例胆汁反流性胃炎患者随机分为治疗组(30例)和对照组(30例),治疗组采用中药旋覆代赭汤加减治疗,对照组采用口服西药治疗。结果:经1个疗程治疗后,治疗组临床治愈16例,好转12例,未愈2例,总有效率为93.3%;对照组分别为临床治愈12例,好转10例,未愈8例,总有效率为73.3%。治疗组的总有效率高于对照组,两组疗效比较有显著性差异(x2=4.32,P0.05)。     

加味旋覆代赭汤对反流性食管炎的有效性及临床安全性的研究

目的:观察加味旋覆代赭汤对反流性食管炎的有效性及临床安全性的作用。方法:选取2011年9月至2016年12月河南省濮阳市第三人民医院收治的反流性食管炎患者100例,随机分为对照组和观察组,对照组口服兰索拉唑;观察组在对照组基础上给予加味旋覆代赭汤。详细记录患者反流症状并根据胃灼热、反酸及胸痛症状严重程度记0、1、2、3分;检测食管压力分别检测受试者食管下括约肌静息压(LESP)、食管下括约肌松弛率(LESR)、食管体部下段蠕动波压力(LEPP)、食管体异常收缩百分数,同时进行食管阻抗-pH联合监测和安全性评价。结果:1)经治疗后2组胃灼热、反酸和胸痛的症状积分均下降(P0.05),观察组下降程度优于对照组(P0.05)。2)治疗后除异常收缩百分数外,下括约肌静息压、下段蠕动波压力和下括约肌松弛率均见明显提高(P0.05),其中观察组优于对照组(P0.05)。3)pH4,酸反流的情况下,经治疗后总时间、立位时间和卧位时间均见明显下降(P0.05),其中观察组下降程度低于对照组(P0.05)。4)观察组仅有2例出现恶心的不良反应,原因为中药的特殊苦味;对照组不良反应发生率较观察组高(P0.05),口干10%,头晕2%,恶心8%。结论:加味旋覆代赭汤能有效改善反流性食管炎患者胃灼热、反酸、胸痛等临床症状且临床用药安全性良好。