TP在肝癌组织中的表达意义

目的探讨肝癌组织中胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)的表达意义。方法运用免疫组化方法检测TP在肝癌组织、癌旁肝硬化组织及门静脉癌栓中的表达。结果 TP在肝癌组织中的阳性表达率为29.7%,在癌旁肝硬化组织的阳性表达率为78.3%,二者相比,差异有统计学意义(P<0.05);TP在癌旁肝硬化组织中的表达与在癌组织中的表达无关;TP在门静脉癌栓中高表达(83.7%)。结论 TP在肝癌组织中表达可能不支持其在其他癌组织中的促肿瘤生长作用;TP与门静脉癌栓形成关系密切。     

淋巴增殖性疾病的酶标志

利用细胞形态学和免疫学特征对淋巴增殖性疾病进行分类,进一步从生物学方面提供了判定临床预后的指标。最近又从细胞生物化学方面补充在这些疾病中已建立的标志。本文着重综述该领域中一些与临床有关的主要进展。嘧啶途径酶在细胞中催化胸腺嘧啶核苷的最重要的酶是胸腺嘧啶核苷激酶和胸腺嘧啶核苷磷酸化酶,最近研究表明这些嘧啶补救酶(pyrimidine salvage enzymes)活性的测定与临床有关联。     

嘧啶核苷磷酸化酶在恶性肿瘤中的表达及意义

目的　观察嘧啶核苷磷酸化酶 (PyNPase)在胃癌和乳腺癌组织中的表达 ,并探讨其与肿瘤病理类型、转移及预后的关系。方法　应用免疫组化方法观察胃癌组织 4 0例、乳腺癌组织 4 4例及正常组织 12例 (6例胃黏膜组织、6例乳腺组织 )中PyNPase的表达。结果　PyNPase在胃癌及乳腺癌组织中表达的阳性率为 10 0 % ,明显高于正常胃黏膜及乳腺组织中的表达 (33 3%和 16 7% ) (P <0 0 1) ;在不同病理类型肿瘤中PyNPase的表达差异不显著 (P>0 0 5 ) ;在发生淋巴结转移的胃癌及乳腺癌组织中 ,PyNPase的强阳性表达率分别为 5 0 %和 5 7 9% ,而在未发生转移的癌组织中强阳性表达率分别为 13 6 %和 8% ,二者差异显著 (P <0 0 5 ) ;在术后生存 <5年的病例中 ,PyNPase的强阳性表达率为 5 4 5 % ,生存 >5年的病例为 7 8% ,两者差异极显著 (P <0 0 1)。结论　PyNPase在肿瘤组织中表达明显增高 ,与肿瘤的转移及预后密切相关。     

巨幼红细胞性贫血时的血浆胸腺嘧啶核苷激酶

胸腺嘧啶核苷激酶(TK)在DNA合成途径中,能催化胸腺嘧啶核苷至胸腺嘧啶核苷单磷酸盐的磷酸化,并以两种不同的活性出现于人体组织中.在增殖着的细胞中,这种活性被称为胎儿型,显示类似于人体胚胎组织的性质;而在正常暂时休止的细胞中,这种活性被称为成人型.作者近来证实,在由维生素B_(12)或叶酸缺乏所致贫血患者的未受刺激的     

5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记骨髓间充质干细胞的特点及可行性

背景:骨髓干细胞移植成功的定性指标是标记移植的细胞至组织器官后存活并发挥了正常的功能。目前细胞学研究方面采用的标记方法有酶联标记、氚胸腺嘧啶核苷标记、荧光标记和5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记等。目的:观察5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记骨髓间充质干细胞的特点。设计:单一样本观察。单位:华北煤炭医学院附属医院心胸外科。材料:实验于2003-07/2004-12在华北煤炭医学院中心实验室完成。取月龄3个月的日本大耳白兔6只,雌雄不限,体质量(3.00±0.25)kg。方法:①利用密度为1073g/L的Percoll分离骨髓的单核细胞,以含体积分数为0.1的胎牛血清的低糖Dulbecco’s改良的Eagle’s培养基培养与扩增间充质干细胞,纯度可达95%左右。②用5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记骨髓间充质干细胞24,48,72,96h后的检测标记率(标记组);阴性对照为未经5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记骨髓间充质干细胞;空白对照为以磷酸盐缓冲液或正常鼠血清替代一抗。主要观察指标:①3组各检测200个细胞,并在不同时间点观察。②5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记的骨髓间充质干细胞免疫组织化学染色结果及细胞计数结果。结果:①标记组均见5-溴脱氧尿嘧啶核苷阳性细胞,5-溴脱氧尿嘧啶核苷阳性反应物位于细胞核,呈棕色、颗粒状或弥漫性分布;对照组未见阳性细胞。②标记组24,48,72,96h5-溴脱氧尿嘧啶核苷阳性细胞的数目分别为48±2,100±4,173±2,178±3,随着标记时间的延长,标记率逐渐增高,标记72h后标记率在85%以上。③阴性对照和空白对照组各时间点均为0。结论:①用5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记骨髓间充质干细胞的最佳时间是72h。②标记后检测的敏感性好,在低倍镜中亦可见,适合于大块组织的定量研究。③结果表明5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记骨髓间充质干细胞是可行的。     

5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记骨髓间充质干细胞的特点及可行性

背景：骨髓干细胞移植成功的定性指标是标记移植的细胞至组织器官后存活并发挥了正常的功能。目前细胞学研究方面采用的标记方法有酶联标记、氚胸腺嘧啶核苷标记、荧光标记和5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记等。目的：观察5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记骨髓间充质干细胞的特点。设计：单一样本观察。单位：华北煤炭医学院附属医院心胸外科。材料：实验于2003-07／2004-12在华北煤炭医学院中心实验室完成。取月龄3个月的日本大耳白兔6只，雌雄不限，体质量（3．00&;#177;0．25）kg。方法：①利用密度为1073g／L的Percoll分离骨髓的单核细胞，以含体积分数为0．1的胎牛血清的低糖Dulbecco’s改良的Eagle’s培养基培养与扩增间充质干细胞，纯度可达95％左右。②用5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记骨髓间充质干细胞24，48，72，96h后的检测标记率（标记组）；阴性对照为未经5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记骨髓间充质干细胞；空白对照为以磷酸盐缓冲液或正常鼠血清替代一抗。主要观察指标：①3组各检测200个细胞，并在不同时间点观察。②5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记的骨髓间充质干细胞免疫组织化学染色结果及细胞计数结果：结果：①标记组均见5-溴脱氧尿嘧啶核苷阳性细胞，5-溴脱氧尿嘧啶核苷阳性反应物位于细胞核，呈棕色、颗粒状或弥漫性分布：对照组未见阳性细胞。②标记组24，48，72，96h5-溴脱氧尿嘧啶核苷阳性细胞的数目分别为48&;#177;2，100&;#177;4，173&;#177;2，178&;#177;3．随着标记时间的延长，标记率逐渐增高，标记72h后标记率在85％以上。③阴性对照和空白对照组各时间点均为0。结论：①用5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记骨髓间充质干细胞的最佳时间是72h。②标记后检测的敏感性好．在低倍镜中亦可见．适合于大块组织的定量研究。③结果表明5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记骨髓间充质干细胞是可行的。     

氟尿嘧啶的临床新用途

氟尿嘧啶 (5 Fu)为嘧啶类抗代谢药 ,对多种动物肿瘤都有抑制作用 ,而且与常用抗肿瘤药无交叉耐药现象 ,是一种广泛应用于临床的抗肿瘤药。该药在体内先转变为 5 -氟 -2 -脱氧尿嘧啶核苷酸 ,后者抑制胸腺嘧啶核苷酸合成酶 ,阻断脱氧尿嘧啶核苷酸转变为脱氧胸腺嘧啶核苷酸 ,从而抑制DNA的生物合成 ,此外 ,还能掺入RNA ,通过阻止尿嘧啶和乳清酸掺入RNA而达到抑制RNA合成的作用。该药不仅是一个作用于S期的周期特异性药物 ,而且对增殖细胞也有一定的影响。1　主要临床应用氟尿嘧啶在临床上主要用于 :①乳腺癌、消化道癌肿 (原发性和转移…     

假尿嘧啶核苷的测定方法及其对恶性肿瘤的诊断意义

假尿嘧啶核苷是尿嘧啶核苷的异构体,国外许多研究资料表明,恶性肿瘤病人和动物常有大量修饰性核苷排出,尤以假尿嘧啶核苷为著。近年来又发现血、尿液假尿嘧啶核苷可作为原发性肝癌(PHC)生化标志物应用于PHC 诊断、监测、疗效和预后的判断,与甲胎蛋白(AFP)联合检测可提高PHC 的检出率。本文就假尿嘧啶核苷的理化性质、代谢机理、检测方法及临床意义作一综述。     

RNF187在前列腺癌细胞中的表达及其对前列腺癌细胞增殖、侵袭的影响

目的 探讨环指蛋白187(RNF187)在前列腺癌细胞中的表达及其对前列腺癌细胞增殖、侵袭的影响。方法 通过癌症基因组图谱（TCGA）和高通量基因表达（GEO）数据库分析前列腺癌组织和正常组织间RNF187的表达差异，体外培养正常前列腺上皮细胞系RWPE-1和人前列腺癌细胞系LNCaP、C4-2、DU145、PC-3，用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)测定RWPE-1、LNCaP、C4-2、DU145、PC-3中RNF187 mRNA表达水平，蛋白免疫印迹法测定RNF187蛋白表达水平。转染RNF187-siRNA1、RNF187-siRNA2至DU145、PC-3,RT-qPCR测定RNF187 mRNA相对表达量、CCK-8法测定细胞活性，5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷（EdU）法测定细胞增殖能力，Transwell小室测定细胞的迁移和侵袭能力，蛋白免疫印迹法检测RNF187和上皮-间充质转化（EMT）标志蛋白及基质金属蛋白酶（MMP-9）的蛋白表达水平。结果 TCGA和GEO数据集中，前列腺癌组织中RNF187表达量均高于正常前列腺组织，Gleason评分及分期较高者的表达量...     

假尿嘧啶核苷的测定方法及其对恶性肿瘤的诊断意义

假尿嘧啶核苷是尿嘧啶核苷的异构体，国外许多研究资料表明，恶性肿瘤病人和动物常有大量修饰性核苷排出，尤以假尿嘧啶核苷为著。近年来又发现血、尿液假尿嘧啶核苷可作为原发性肝癌（ＰＨＣ）生化标志物应用于ＰＨＣ诊断、监测、疗效和预后的判断，与甲胎蛋白（ＡＦＰ）联合检测可提高ＰＨＣ的检出率。本文就假尿嘧啶核苷的理化性质、代谢机理、检测方法及临床意义作一综述。     

干扰素γ诱导胸苷磷酸化酶表达对氟尿嘧啶抗胃癌活性的调节作用

[目的]探讨干扰素γ(IFN-γ)在胃癌MKN45细胞中对胸苷磷酸化酶(TP)表达的调节作用及其与氟尿嘧啶抗癌作用的关系.[方法]分别用RT-PCR和Westem blot检测不同浓度的IFN-γ和不同作用时间诱导后TP mRNA和蛋白质的表达,MTT法确定氟尿嘧啶对胃癌MKN45细胞的细胞毒性作用,流式细胞术分析氟尿嘧啶和IFN-γ处理后的肿瘤细胞凋亡.[结果]IFN-γ可增强胃癌MKN45细胞表达TP,并呈时间和剂量依赖性,在6000 IU和48 h诱导表达效果最好.IFN-γ与氟尿嘧啶联合应用可使氟尿嘧啶半数致死量(IC50)显著降低(P＜0.05),同时使MKN45细胞凋亡率增加(P＜0.05).[结论]IFN-γ通过诱导胃癌MKN45细胞表达TP增强氟尿嘧啶的抗癌作用,提示联合应用IFN-γ和氟尿嘧啶可能提高胃癌的化疗效果.     

胸苷磷酸化酶在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的　研究胸苷磷酸化酶(TP)在乳腺癌中的表达与癌组织的临床病理特征和肿瘤内微血管密度 (IMVD)的关系。方法　对82例乳腺癌标本及17例正常乳腺组织进行免疫组化染色测定TP的表达情况;通过 CD34免疫组化染色检测乳腺癌组织中的IMVD。结果　乳腺癌细胞中的TP表达阳性率高于正常乳腺组织(P <0.05);TP高表达组中IMVD明显高于TP低表达组(P<0.05);乳腺癌Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级癌组织之间的TP表达率有 明显差异(P<0.05)。结论　乳腺癌TP表达与其组织学分级和血管生成有关。     

葡萄胎组织细胞增殖标记物TK及PCNA的表达研究

目的　探讨葡萄胎中胸腺嘧啶核苷激酶 (TK)和增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达水平及其对葡萄胎预后的影响。方法　采用免疫组化S P法检测 15例正常绒毛和 38例葡萄胎组织内TK和PCNA蛋白表达情况。结果　正常绒毛的TK阳性表达率为 33 33% ,而葡萄胎的表达率为 10 0 %。葡萄胎滋养细胞高度、中度增生者TK表达显著高于轻度增生者 (P =0 0 0 0 )。葡萄胎PCNA表达显著高于正常绒毛 (P =0 0 38)。 9例持续性滋养细胞疾病患者葡萄胎TK及PCNA水平显著高于自然恢复者 (分别P =0 0 0 2 ,P =0 0 15 )。结论　TK表达增高代表葡萄胎DNA解救途径合成增强 ,DNA解救合成途径的增强可能与葡萄胎的增生和恶变有关。TK与PCNA一样可作为葡萄胎滋养细胞增殖的指标     

TYMP基因在肾透明细胞癌中的表达及临床意义

目的:阐述胸苷磷酸化酶(thymidine phosphorylase,TYMP)基因在肾透明细胞癌(clear cell renal cellcarcinoma,CCRCC)中的表达及临床意义。方法:利用Oncomine及GEPIA数据库分析T YMP基因在正常肾组织及CCRCC组织中的表达差异;通过GEPIA数据库进行TYMP基因表达程度与病理分期的相关性分析;利用OncoLnc数据库对TYMP基因的表达水平与CCRCC患者生存率作Kaplan-Meier生存分析和log-rank检验;经MethHC数据库分析CCRCC组织和正常肾组织中T YMP启动子区DNA甲基化水平的差异;利用String-DB数据库分析与TYMP蛋白相互作用的蛋白;最后通过The Human Protein Atlas数据库分析TYMP蛋白在正常肾组织及CCRCC组织中的表达差异。结果:在mRNA及蛋白水平上,TYMP在CCRCC组织较正常肾组织中显著高表达,且TYMP mRNA表达水平越高,CCRCC病理分期越高;与TYMP基因低表达组相比,TYMP基因高表达的CCRCC患者总体生存率明显降低;CCRCC组织中TYMP启动子区DNA甲基化水平较正常组织甲基化水平显著降低;同时,与TYMP蛋白相关的蛋白有TK2,NT5M,CDA,UPRT,NT5C,UPP2,UMPS,TK1,UPP1和DPYD等,主要参与嘧啶核苷的合成、分解、代谢,转移戊糖基、蛋白质同源聚合等生物过程。结论:大样本数据挖掘能迅速获取CCRCC组织中TYMP基因表达的相关信息,为深入研究TYMP基因在CCRCC发生发展中的作用机制及预后奠定基础。     

不同剂型腺苷脱氨酶试剂盒的比较

腺苷脱氨酶(adenosine deaminase,ADA)是嘌呤核苷代谢中重要的酶类,属于巯基酶,每分子至少含2个活性巯基,ADA能催化腺嘌呤核苷转变为次黄嘌呤核苷,再经核苷磷酸化酶作用生成次黄嘌呤,其代谢终产物为尿酸[1].     

UFTM疗法治疗进行性胃癌

UFT(每片含呋喃氟尿嘧啶100毫克和尿嘧啶224毫克)是具有肿瘤选择毒性的代谢拮抗性抗癌药(详见本刊18卷3期第133页),临床给药后肿瘤内可维持长期有效的氟尿嘧啶-尿嘧啶浓度。据观察,UFT与丝裂霉素C(MMC)联合应用(UFTM疗法)对胃     

胃癌患者血清胸苷磷酸化酶表达与临床病理特征、化疗疗效及预后关系的研究

目的探讨晚期胃癌患者血清胸苷磷酸化酶(TP)水平与临床病理特征及以氟尿嘧啶为基础的化疗疗效和预后的关系。方法选取2010年1月至2012年6月于北京友谊医院消化内科接受治疗的晚期胃癌患者化疗前血清,用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测血清中TP表达水平。结果血清TP表达水平与性别、年龄、组织分化程度、KPS评分、肝转移及淋巴结转移无明显相关,腹膜转移患者的TP表达水平显著低于无腹膜转移患者(P=0.017),TP高表达患者与低表达患者的临床获益率无显著差异,但TP高表达患者的无进展生存期(PFS)和总生存期(OS)均长于低表达患者(PFS:177 d vs.106 d,P=0.067;OS:417 d vs.222 d,P=0.002)。结论在接受氟尿嘧啶为基础的化疗的胃癌晚期患者中,血清TP高表达的患者预后较低表达患者好。     

糖原磷酸化酶与肿瘤的研究进展

糖原代谢是肿瘤细胞的重要的物质代谢途径。糖原磷酸化酶是调控糖原代谢的关键酶。近年研究发现,糖原磷酸化酶在多种肿瘤细胞和组织中存在高表达,并参与肿瘤细胞的分化、增殖、衰老和凋亡,并与多种肿瘤的预后相关,已成为肿瘤治疗的新的研究靶点。     

脑缺血再灌注模型大鼠跑台运动后海马神经再生和血管内皮生长因子mRNA的变化

背景:研究表明跑台运动能促进健康大鼠海马的神经细胞再生。目的:观察跑台运动对脑缺血再灌注模型大鼠海马神经再生和血管内皮生长因子mRNA表达的影响。方法:用线栓法阻塞大脑中动脉以建立单侧脑缺血再灌注模型大鼠,将建模成功大鼠随机分为跑台运动组和安静对照组,另设假手术组。安静对照组和假手术组大鼠安静饲养,跑台运动组进行7d跑台运动。跑台运动组和安静对照组大鼠在每天跑台运动前腹腔注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷溶液。结果与结论:免疫组织化学染色结果显示,跑台运动组大鼠双侧海马及齿状回5-溴脱氧尿嘧啶核苷阳性表达细胞数量显著多于安静对照组(P<0.01)。实时荧光定量PCR检测结果显示,跑台运动组大鼠海马血管内皮生长因子mRNA表达水平显著高于安静对照组和假手术组(P<0.05)。结果证实,跑台运动能够明显促进脑缺血再灌注大鼠海马神经细胞的再生并上调海马组织血管内皮生长因子的表达。     

Livin、Survivin在结直肠癌的表达与化疗耐药的关系

目的 探讨凋亡抑制蛋白Livin、Survivin在结直肠癌中的表达与体外化疗药物敏感性的关系.方法 应用免疫组化过氧化物酶标记链霉卵白素法(SP)检测101例结直肠癌标本中Livin和Survivin的表达.取新鲜组织制备原代癌细胞单细胞悬液,分别加入8种不同化疗药物(奥沙利铂、氟尿嘧啶、伊立替康、顺铂、紫杉醇、丝裂霉素、阿霉素、环磷酰胺)培养48小时,噻唑蓝(MTT)法观察药物作用后原代癌细胞活性变化.结果 在结直肠癌组织中Livin和Survivin的表达均明显高于正常结直肠组织(P＜0.05).Livin阳性表达与氟尿嘧啶、顺铂耐药性有关(P＜0.05).Survivin阳性表达与氟尿嘧啶、顺铂、阿霉素耐药性有关(P＜0.05).结论 结直肠癌中Livin、Survivin的阳性表达与部分化疗药物原发性耐药有关.