人工饲养树鼩皮肤真菌携带的调查

目的 调查人工饲养条件下树鼩皮肤真菌携带情况,为实验树鼩的微生物质量控制提供依据。方法 刮取79只树鼩皮肤表皮碎屑,包括野生来源的51只和人工繁殖的F1代28只,采用沙氏青霉素瓶斜面法和沙氏平皿培养法分别进行培养,对长出的每株真菌进行取样涂片染色,显微镜镜检观察真菌形态,用酚氯仿法提取真菌DNA,PCR扩增ITS基因,测序后经BLAST进行核酸同源性比对,进一步鉴定分析。结果 野生来源树鼩有9份样长出真菌,F1代有3份样长出真菌菌落,携带率分别15.69%和10.71%。所有真菌DNA最后进行BLAST比对鉴定后发现为7个种属的真菌,但均无致病性。结论 人工饲养的树鼩种群中皮肤真菌携带率较低,并且随繁殖代次增加而下降,未检测到皮肤病原真菌。     

PCR方法检测实验动物皮肤病原真菌

目的对用于实验动物皮肤病原真菌检测的分子生物学方法即皮肤病原真菌通用引物PCR与AP-PCR（任意引物聚合酶链式反应）相结合技术的特异性及敏感性进行评价,并通过建立动物模型及实际的皮肤真菌检测来验证此方法的可行性。方法特异性测定：用皮肤病原真菌通用引物进行PCR,扩增大肠杆菌DNA、犬肝炎病毒DNA及小鼠肝癌H22细胞DNA。敏感性测定：以紫外分光光度法测定DNA质量浓度,根据测定值将DNA进行10倍系列质量浓度稀释,得到100 ng~10 fg的8个质量浓度,然后对其进行PCR扩增。建立实验动物皮肤病原真菌感染的动物模型。用皮肤病原真菌通用引物PCR与AP-PCR相结合技术检测从动物模型及河北省各地的实验动物单位采集的动物皮肤标本。结果用皮肤病原真菌通用引物扩增实验动物三种皮肤病原真菌标准菌株,均扩增出大小为440 bp的条带,而大肠杆菌、犬肝炎病毒、小鼠肝癌H22细胞均未扩增出条带。皮肤病原真菌通用引物PCR敏感性测定,模板DNA 100 ng~100 fg的7个系列浓度均扩增出了阳性条带,10 fg为阴性。建立了实验动物皮肤病原真菌感染的动物模型。对河北省各地的实验动物皮肤真菌检测过程中出现一例通用引物阳性标本。结论皮肤病原真菌通用引物（CHS1 1S,CHS1 1R）具有较强的特异性,敏感度为100 fg;将皮肤病原真菌通用引物PCR与AP-PCR技术相结合可用于检测实验动物皮肤病原真菌。     

实验动物真菌病鉴定常识

简要介绍了一些有关实验动物的真菌病鉴定常识。阳性标本的采集 ,是真菌病鉴定的前提条件 ;双试管培养法是真菌鉴定最常见的培养方法之一 ,若两支不同试管同时培养出一样的真菌 ,则一般认定是致病真菌 ;大培养 (平皿法 )和小培养 (载玻片法 )也是鉴定真菌最常用的培养方法 ,但不适用于传染性强的真菌如球孢子菌和组织胞浆菌等 ;菌落形态和结构是真菌鉴定最重要的依据 ;常见真菌病举例和特别注意的事项等。实验动物真菌病鉴定常识@徐宏彬$中国医学科学院、中国协和医科大学皮肤病研究!南京210042实验动物;;真菌病;;鉴定;;常识…     

336例真菌培养结果分析

为填补本区真菌培养工作空白,初步检测了我院门诊及住院患者中患有或并发浅部及深部真菌感染的致病性真菌。本室培养采用沙氏改良固体培养基试管培养法,在一定条件下,观察菌落生长,用小培养及生化方法作出菌种鉴定。以1981年1月至82年2月对336例的检测结果,制成了表1、2和3。1、真菌培养总表。2、浅部真菌培养表。3、深部真菌培养表。     

血清（1-3）-β-D葡聚糖早期诊断深部真菌感染的临床价值研究

目的综合分析血清(1-3)-β-D葡聚糖早期诊断深部真菌感染的临床价值。方法选取本院2013年12月~2016年12月收治的71例疑似深部真菌感染患者作为实验组,再选取取我院71例健康体检者作为对照组。采用SPSS20.0统计学软件统计分析实验组和对照组患者的葡萄糖浓度含量、真菌培养法及血清(1-3)-β-D葡聚糖检测对深部真菌感染的阳性检出率。结果 (1)实验组培养阳性患者的血清(1-3)-β-D葡聚糖含量为(68.90±22.66)pg/mL,实验组培养阴性患者的血清(1-3)-β-D葡聚糖含量为(26.01±5.36)pg/mL,对照组血清(1-3)-β-D葡聚糖含量为(2.85±0.17)pg/mL,实验组培养阳性患者、培养阴性患者的血清(1-3)-β-D葡聚糖含量显著高于对照组(P0.05);(2)真菌培养法检测疑似深部真菌感染的阳性例数为35例、阴性例数为36例,血清(1-3)-β-D葡聚糖定量检测方法检测疑似深部真菌感染的阳性例数为60例、阴性例数为11例,血清(1-3)-β-D葡聚糖定量检测方法检测疑似深部真菌感染的阳性率显著高于真菌培养法检测方法(P0.05);(3)真菌培养法检测疑似深部真菌感染患者的敏感性、特异性分别为61.97%(44/71)、77.46%(55/71),血清(1-3)-β-D葡聚糖检测疑似深部真菌感染患者的敏感性、特异性分别为84.51%(60/71)、88.73%(63/71),真菌培养法检测疑似深部真菌感染患者的敏感性、特异性显著低于血清(1-3)-β-D葡聚糖检测方法(P0.05)。结论血清(1-3)-β-D葡聚糖早期诊断深部真菌感染的临床价值比较高,能够正确地指导临床合理用药。     

血浆（1-3）-β-D-葡聚糖检测儿童深部真菌感染诊断的临床研究

目的探讨血清（1-3）-β-D-葡聚糖检测对深部真菌感染的诊断价值。方法对46可疑真菌感染儿童应用MB-80微生物动态快速检测系统及GKT-5MSet动态真菌检测试剂盒定量检测血清中（1-3）-β-D-葡聚糖的含量,比较其与真菌培养法的差异。结果 46例可疑深部真菌感染儿童,真菌培养法20例阳性,阳性率为43.5%;血清（1-3）-β-D-葡聚糖检测法阳性28例,阳性率60.9%,血清（1-3）-β-D-葡聚糖检测法阳性率明显高于真菌培养法（=8.0000,P=0.0047）。深部真菌感染培养阳性组血清（1-3）-β-D葡聚糖含量为（86.46±23.68）pg/ml,深部真菌感染培养阴性组血清（1-3）-β-D-葡聚糖含量为（38.24±19.35）pg/ml,20例健康对照组两法均为阴性,深部真菌感染组血清（1-3）-β-D-葡聚糖浓度明显高于正常对照组（F=117.8,P=0.0000）,而且深部真菌感染培养阳性组血清（1-3）-β-D-葡聚糖浓度亦明显高于深部真菌感染培养阴性组（t=-5.5375,P=0.0000）。结论血清（1-3）-β-D-葡聚糖检测较传统的真菌培养法简便、快速、阳性率高,可用于儿童深部真菌感染的早期快速诊断。     

实验动物皮肤病原真菌DNA快速少量提取法

PCR技术应用于实验动物皮肤病原真菌检测,方法简单、省时。但是,真菌的DNA提取较为困难。本文推荐一种既简单又经济快速的提取皮肤真菌DNA的方法,并能成功用于实验动物皮肤病原真菌质量检测研究。     

侵袭性真菌感染诊断的三种方法研究

目的:评估血浆(1-3)-β-D-葡聚糖检测(G实验)、真菌培养法及直接涂片法在侵袭性真菌感染诊断中的方法比较。方法:通过112例怀疑侵袭性真菌感染住院患者在其发热当天抽静脉血做G实验检测,同时留取血液、呼吸道、泌尿道或肠道标本做真菌培养及涂片法检真菌。结果:回顾性分析以血液病/恶性肿瘤患者侵袭性真菌感染的诊断标准与治疗原则(草案)作为临床诊断标准,并以此为标准比较G实验﹑真菌培养及直接涂片法结果,分别计算三种方法及联合检测的灵敏度、特异度、阳性和阴性预测值。G实验、真菌培养法、直接涂片法及三者联合检测的灵敏度、特异度、阳性和阴性预测值分别为86.44%、83.02%、85.00%和84.61%;83.05%、84.91%、85.96%和81.82%;61.02%、94.12%、87.80%和67.61%;91.53%%、81.13%、84.38%和89.58%。结论:G实验﹑真菌培养法及直接涂片法相比较各有优缺点,G实验的灵敏度和阴性预测值高,直接涂片法的特异度高。如果联合检测既可具有G实验的优点,又具有直接涂片法及真菌培养法的优点,减少假阴性,为临床提供直接的诊断依据,对早期诊断侵袭性真菌感染更具临床意义。     

实验动物皮肤病原真菌核酸鉴定方法的建立

目的选择一种快速、敏感和特异的方法来检测实验动物皮肤病原真菌.方法选取真菌CHS1基因中一段序列设计皮肤真菌通用引物和选取一种随机引物FM1,利用聚合酶链反应（PCR）扩增三种动物皮肤病原真菌标准株：须毛癣菌、石膏样小孢子菌、犬小孢子菌.结果两种引物扩增产物片段大小在三种真菌之间有明显不同.结论本实验方法可快速特异性检测实验动物皮肤病原真菌.     

(1-3)-β-D-葡聚糖动态监测在测新生儿深部真菌感染诊断价值的评价

目的:探讨血清(1-3)-β-D-葡聚糖对新生儿深部真菌感染的诊断价值。方法:对46例临床疑似真菌感染新生儿采用MB-80微生物动态快速检测系统及GKT-5M Set动态真菌检测试剂盒定量检测血清中(1-3)-β-D-葡聚糖的含量,比较其与真菌培养法的差异。结果:46例可疑深部真菌感染新生儿,真菌培养法20例阳性,阳性率为43.5%;血清(1-3)-β-D-葡聚糖检测法阳性28例,阳性率为60.9%,血清(1-3)-β-D-葡聚糖检测法检出率明显高于真菌培养法(χ2=8.0000,P=0.0047)。感染组血清(1-3)-β-D-葡聚糖浓度明显高于正常对照组[(86.46±23.68)pg/ml与(38.24±19.35)pg/ml;F=117.8,P=0.0000),而且培养阳性组血清(1-3)-β-D-葡聚糖浓度亦明显高于培养阴性组(t=-5.5375,P=0.0000)。结论:血清(1-3)-β-D-葡聚糖检测是一种早期、快速诊断新生儿深部真菌感染的方法。