大豆异黄酮配伍叶酸对神经管畸形胎鼠神经细胞中凋亡基因表达的影响

目的 :观察大豆异黄酮和叶酸的联合干预对神经管畸形胎鼠神经细胞凋亡基因表达情况的影响 ,并研究其干预机制。方法 :将大鼠孕鼠随机分成对照组、模型组、单独干预组和配伍干预组后进行不同的处理。孕 1 4 d时处死孕鼠取出胎鼠 ,将胎鼠的脑组织进行固定和包埋后进行免疫组化染色 ,在高倍镜下进行观察。结果 :环磷酰胺可以导致凋亡基因 p5 3和 bax表达的增强 ,而大豆异黄酮和叶酸的干预可以增强凋亡基因 Bcl- 2的表达而减弱 p5 3和 Bax的表达 ,且联合干预的效果较好。结论 :3种凋亡基因的表达可能联合参与了神经管畸形的发生机制 ,大豆异黄酮可能通过对神经管畸形胎鼠神经细胞凋亡基因表达的影响而增强叶酸对神经管畸形的干预作用。     

大豆异黄酮与叶酸对大鼠神经管畸形的保护作用

目的　研究大豆异黄酮的抗氧化作用及其与叶酸配伍对大鼠神经管畸形的保护性作用。方法　以环磷酰胺制备大鼠神经管畸形的模型 ,生理盐水作对照组 ,另外设单独叶酸组、叶酸配伍大豆异黄酮共 5个干预组 (叶酸的量固定不变 ) ,分别进行抗氧化指标、胎鼠畸形发生率、生长发育指标和光镜及透射电镜的检测。结果　 ( 1)干预组较模型组孕鼠血清SOD含量增加、MDA含量降低 ,NO含量有所下降 ,且与大豆异黄酮有剂量 -反应关系 ;( 2 )胎鼠大体形态结果显示 ,干预实验组胎鼠脑膨出发生率较模型组均有下降 ,并以 40mg/ (kg·bw)的大豆异黄酮配伍叶酸组下降最明显 ;( 3)干预组胎鼠的各项生长发育指标均较模型组有所增长或增重 ;( 4)光镜病理切片显示 ,干预组细胞碎片和小群凋亡细胞聚集的现象较模型组明显减少 ;( 5 )透射电镜结果可以看见细胞凋亡的严重程度以及凋亡细胞的数量较模型组有明显改善。结论　大豆异黄酮在一定剂量时与叶酸配伍可以较单独补充叶酸更为有效地预防大鼠神经管畸形的发生。     

叶酸配伍大豆异黄酮对大鼠神经管畸形的影响

目的研究不同剂量叶酸配伍大豆异黄酮对神经管畸形孕鼠体内过氧化状态的影响。方法采用正交设计方案来观察叶酸和大豆异黄酮在不同的配伍干预下对环磷酰胺致神经管畸形(脑膨出为主)的孕鼠体内重要的抗氧化物质谷胱甘肽及其酶以及一些与抗氧化相关元素水平的影响。将100只鼠龄25～3个月的孕鼠随机分为对照组、模型组、配伍干预组和单独干预组。孕20d时,处理孕鼠并进行血中谷胱甘肽、谷胱甘肽过氧化物酶及元素硒、锰、铁抗氧化相关指标的检测;剖腹取出胎鼠,统计其畸形发生率。结果叶酸配伍大豆异黄酮的交互作用对血中谷胱甘肽、谷胱甘肽过氧化物酶及元素硒、锰、铁等抗氧化相关指标的水平均产生了影响,且两者之间的配伍关系对抗氧化相关指标的影响随配伍的不同而表现不同。研究结果显示,叶酸07mg/kg配伍大豆异黄酮160mg/kg的干预效果最佳;与叶酸或大豆异黄酮的2倍剂量(叶酸14mg/kg、大豆异黄酮320mg/kg)进行单独干预比较,结果显示配伍干预效果要优于单独干预效果。结论叶酸是预防神经管畸形发生的主要因素,而大豆异黄酮加强了体内抗氧化能力,有可能增强叶酸的保护作用而使神经管畸形的发生率下降,而增强效果的发挥依赖于最佳配伍的选择。     

应激对小鼠心肌Cx43表达及磷酸化水平影响

目的 观察Cx43在应激小鼠心肌中的表达与磷酸化水平,探讨其在应激情况下发生的心源性猝死中的法医学意义。方法 根据文献建立应激小鼠模型和心性猝死小鼠模型;常规苏木素-伊红染色(HE)观察各组小鼠心肌组织病理变化;应用免疫组织化学和图像分析技术检测各组小鼠心肌Cx43表达变化;应用蛋白印迹技术检测各组小鼠心肌Cx43磷酸化水平。结果 应激组小鼠及心性猝死组小鼠心脏出现应激性心肌病相关的病理学改变;与对照组(0.26±0.04)比较,心性猝死组小鼠心肌Cx43表达水平(0.18±0.03)下降且分布紊乱;与对照组(476.28%)比较,应激组、心性猝死组小鼠心肌Cx43磷酸化水平[分别为(432.23%)、(188.69%)]下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 心肌Cx43表达及磷酸化水平对诊断和解释某些猝死案例具有参考意义。     

SELDI蛋白芯片技术检测叶酸对胎鼠神经干细胞作用的蛋白表达谱

目的 探讨应用表面增强激光解离飞行时间质谱技术(surface-enhanced laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)测试不同剂童叶酸作用下胎鼠神经干细胞(NSCs)的蛋白质表达谱,从中筛选出差异表达蛋白.方...     

二氧化硅对肺成纤维细胞连接蛋白Cx43表达的影响

目的通过研究SiO2对连接蛋白(Cx)Cx43表达的调节,了解SiO2抑制肺成纤维细胞细胞间隙连接通讯(GJIC)功能的机制.方法以不同剂量SiO2刺激SD大鼠肺泡巨噬细胞(PAM)及佛波酯(PMA)诱导分化的THP-1(具有PAM特性的人血单核细胞株)细胞培养上清液,作用于中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL),采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定法(ELISA)相对定量CHL细胞Cx43的含量(以A492nm表示),用四唑盐(MTT)法测定其增殖效应(以A570nm表示).结果在0、50、100、200、500μg/ml SiO2浓度范围内,SiO2剂量与SiO2刺激的PAM和PMA-primed THP-1上清液诱导的增殖效应呈正相关(r1=0.914,P＜0.05;r2=0.980,P＜0.01).SiO2刺激的PAM上清液促进CHL细胞Cx43蛋白的表达,50、100、200、500 μg/ml SiO2剂量组Cx43的A492nm值分别为(0.171±0.027、0.161±0.041、0.257±0.040和0.208±0.026),与SiO20 μg/ml对照组(0.105±0.008)比较,差异均有显著性(P＜0.05).SiO2刺激的PMA-primedTHP-1细胞上清液对CHL细胞Cx43蛋白表达水平无明显影响.结论 SiO2刺激PAM分泌活性因子进而抑制肺成纤维细胞GJIC功能的调节机制可能发生在Cx的翻译后水平.     

4种营养素对胎鼠和幼鼠脑发育的影响

研究表明 ,二十二碳六烯酸 (DHA)、牛磺酸、锌和叶酸具有广泛的生物学效应和生理活性。近年来 ,单一缺乏上述某种营养素对脑发育和脑功能的影响报道很多〔1,2〕。本研究旨在探讨同时补充 4种营养素对胎鼠和幼鼠脑发育的影响。材料和方法　 (1)实验动物分组 :实验选用健康纯种SD大鼠 ,体重 (180± 2 0 ) g ,雌、雄按 2∶1进行交配 ,自受孕日起随机将母鼠分为补充组 (SG)和对照组 (CG)。补充组在对照组标准颗粒饲料基础上 ,每百克饲料补充 :DHA原料药 (普陀山制药厂提供 :DHA 31 7% ,二十碳五烯酸 (EPA) 4 2 3% ) 16 0mg ;牛磺酸纯品…     

大豆异黄酮联合叶酸对β淀粉样肽介导的神经毒性的影响—对大鼠学习记忆损伤的拮抗作用

目的探讨大豆异黄酮(SIF)单独或联合叶酸(FA)拮抗β淀粉样肽(Aβ)致大鼠学习记忆损伤的神经保护作用及其机制。方法(1)神经毒性研究Wistar大鼠随机分为4组,每组15只,分别于侧脑室注射生理盐水、Aβ25-35、Aβ31-35和Aβ1-40。于术后7d,Morris水迷宫试验检测大鼠学习记忆能力;术后14d,免疫组织化学法检测大脑Aβ阳性表达细胞数及脑组织中抗氧化相关指标,观察不同Aβ片段的神经毒性。(2)干预研究实验分为5组(对照、Aβ模型、SIF、FA、SIF与SIF+FA干预组),每组15只,分别灌胃0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)、0.5%的CMC-Na、SIF(160mg/kg bw·d)、FA(0.7mg/kg bw·d)和SIF(160mg/kg bw·d)+FA(0.7mg/kg bw·d),14d后,对照组于侧脑室注射生理盐水,Aβ模型、SIF、FA、SIF+FA干预组于侧脑室注射Aβ1-40,检测指标同毒性实验。结果(1)与对照组相比,Aβ25-35、Aβ1-40组大鼠平均逃避潜伏期和总路程显著延长;Aβ25-35、Aβ31-35和Aβ1-40组大鼠大脑皮质Aβ阳性表达细胞数显著增加,Aβ31-35和Aβ1-40组大鼠海马CA1区Aβ阳性表达细胞数显著增加;脑组织中AOC、GSH水平显著降低。(2)与模型组相比,SIF、FA和SIF+FA干预组大鼠平均逃避潜伏期显著缩短;大脑皮质和海马CA1区Aβ阳性表达细胞数显著减少;脑组织中AOC和GSH水平显著增高。结论三种Aβ片段均可引起大鼠学习能力障碍,其作用机制可能与Aβ介导的神经氧化损伤和脑内Aβ沉积直接神经毒作用有关;单独SIF或FA以及二者联合均可拮抗Aβ介导的大鼠神经毒性,发挥神经保护作用。     

大豆异黄酮对成骨细胞生长因子表达的影响

目的　探讨大豆异黄酮对成骨细胞胰岛素样生长因子 -1(IGF -1)表达的影响。方法　体外培养新生大鼠颅骨成骨细胞 ,然后用塞唑盐 (MTT)法测定大豆异黄酮对成骨细胞的增殖作用 ,过氧化物酶标记的链霉卵白素(SP)免疫组织化学染色试剂盒检测IGF -1抗体表达 ,用原位杂交方法检测IGF -1mRNA基因表达 ,用HPIAS -10 0 0图象分析仪对各组表达进行定量分析。结果　大豆异黄酮培养的大鼠第 3代成骨细胞的IGF -1抗体和IGF -1mRNA呈阳性表达 ,并显著高于阴性对照组 (P <0 0 5) ,阳性细胞胞浆呈棕黄色阳性表达。结论　大豆异黄酮可通过促进大鼠成骨细胞IGF -1分泌而影响成骨细胞形成。     

面粉强化叶酸对出生缺陷的影响

大量数据显示面粉中强化叶酸能有效预防出生缺陷的发生并降低其危害性。影响叶酸强化面粉对出生缺陷作用的因素可能包括:种族差异、孕妇年龄及受教育程度、围产期的医疗质量水平、叶酸强化的剂量等。面粉中强化叶酸是预防出生缺陷安全有效的措施,能够最大程度地保障妇女在孕期摄入足够的叶酸以预防和控制新生儿出生缺陷的发生。     

血管生成素样蛋白3在大鼠体内组织表达的探讨

[目的]观察Angptl3在SD大鼠高脂模型中的组织分布与表达水平的差异,探讨其与脂类代谢的关系。[方法]采用高脂饲料诱导高脂动物模型,采用Realtime PCR方法检测脑、肺、心、胃、肝、肾、脂肪等7种组织中Angptl3、LPL的表达水平,分析Angptl3基因表达水平与脂类代谢的关系。[结果]仅在肝、肾组织中检测到Angptl3,其余各组织未见其表达;Angptl3表达水平与血脂水平存在密切关系,随血脂水平升高,其表达增强;LPL在体内各组织均有表达,且表达水平随血脂水平的升高而增强。[结论]在SD大鼠体内Angptl3主要在肝、肾组织中表达,脑、肺、心、胃、脂肪组织表达降低;Angptl3在大鼠体内的组织表达特异性并不随血脂水平的改变而改变,但Angptl3、LPL表达水平均随血脂升高而增强,推测Angptl3可能参与了LPL的表达调控。     

大豆异黄酮对去卵巢大鼠脂类代谢及心肌超微结构影响的研究

目的研究大豆异黄酮(SI)对去卵巢大鼠血脂及脂蛋白(a)[Lp(a)]代谢的动态影响。方法70只雌性SD大鼠按血清总胆固醇(TC)水平随机分为7组高脂组、雌激素组、SI低、中、高剂量组,假手术与正常对照组,前5组摘除双侧卵巢。除正常对照组外,其余各组给予高脂饲料饲养。每周称重一次,灌胃给药,干预周期为12w。对收集的血清、内脏进行TC、甘油三酯(TG)、血清高、低密度脂蛋白胆固醇(HDL-C、LDL-C)、Lp(a)、抗氧化酶活性及内脏超微结构观察,共63只大鼠完成实验。结果SI干预组LDL-C水平显著低于高脂组而高于正常对照组;干预可改变Lp(a)水平但对HDL-C影响甚微;持续干预SI有助于降低TC、TG可维护心肌细胞的超微结构,镜下视野以雌激素组、高剂量SI干预组与正常组结构接近,高脂组镜像损坏明显。结论高剂量SI持续干预可使去卵巢高脂大鼠LDL-C、TC、TG下降,并能维护心肌细胞超微结构。     

缺氧条件下大豆异黄酮对胃癌细胞增殖和缺氧诱导因子-1α表达的影响

目的:研究缺氧条件下大豆异黄酮(soy bean isoflavone,SI)对人胃癌细胞株SGC-7901生长抑制作用及可能机制。方法:运用产气袋法(GasPaK)制造缺氧条件,实验分为正常对照、SI、缺氧对照和缺氧SI四组,用MTT法检测常氧和缺氧条件下药物效应。流式细胞仪分析各组细胞周期分布,透射电镜观察细胞超微形态的改变,免疫细胞化学法检测各组细胞缺氧诱导因子HIF-1α和FAS的表达。结果:不同浓度SI在常氧和缺氧条件下都对人胃癌细胞株SGC-7901生长有抑制作用,并呈剂量-效应关系,细胞均滞留于G2/M期,缺氧条件下SI组抑制作用增加,细胞凋亡率增加。透射电镜观察常氧下SI处理后细胞出现凋亡,缺氧条件下出现凋亡和坏死。SI在不同氧条件下均上调Fas表达,并能下调因缺氧表达增加的HIF-1。结论:SI对人胃癌细胞生长有抑制作用,其机制可能通过阻抑细胞周期进程,上调FAS蛋白表达,从而诱导胃癌细胞凋亡而实现的。缺氧条件下SI抑制作用增强,抑制HIF-1α的表达可能是其重要机制。     

THE EFFECT OF ORAL CADMIUM ADMINISTRATION ON THE PREGNANT RAT AND EMBRYO

Cadmium-induced fetal growth retardation associated with reduced maternal food consumption is prevented by zinc supplements. The placenta does not protect the fetus until midterm.     

不同运动负荷大鼠主要器官各型NOS表达水平的研究

[目的]检测不同运动负荷时大鼠主要器官如心、脑、股外肌等器官组织NOS各亚型的mRNA表达水平和蛋白表达水平的比较,从基因水平探讨一氧化氮在运动中对机体的影响。[方法]用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测3个器官组织的NOS3种亚型(eNOS、nNOS、iNOS)的mRNA表达。Western blot方法检测各组织的蛋白表达。[结果]RT-PCR检测发现:eNOS、nNOS、iNOS在心肌、脑及股外肌组织中均有mRNA表达。股外肌在中等强度运动时eNOS、nNOS、iNOS的mRNA表达明显高于对照组,股外肌的iNOS的mRNA表达在运动疲劳后则比中等强度运动时明显降低(P﹤0.05)。心肌组织在不同的运动负荷状态下各组织eNOS、nNOS的mRNA表达无明显差异,心肌组织在中等强度和疲劳运动后iNOS的mRNA均明显高于对照组(P﹤0.01)。脑组织在中等强度运动后nNOS、iNOS的mRNA表达明显增强(P﹤0.05),nNOS的mRNA表达在运动疲劳后比中等强度运动时明显降低(P﹤0.05)。Westernblot方法检测:股外肌组织在进行中等强度运动时eNOS nNOS、iNOS蛋白表达均明显强于对照组和运动疲劳组,疲劳组蛋白表达均减弱。脑组织在进行中等强度运动时nNOS、iNOS蛋白表达明显强于对照组,疲劳组nNOS蛋白表达最弱。心肌组织在中等强度和疲劳运动后iNOS蛋白表达增强,疲劳组iNOS蛋白表达最强。[结论]中等强度运动上调eNOS、nNOS、iNOS的mRNA表达和蛋白表达;疲劳运动可导致nNOS、eNOS的mRNA表达和蛋白表达减弱或有减弱趋势。     

大豆异黄酮对去势大鼠骨量丢失的抑制作用研究

目的:研究大豆异黄酮(Soybeanisoflavone,SI)对去势后大鼠由于体内雌激素水平下降引起的骨量丢失的抑制作用。方法:腹腔手术切除大鼠双侧卵巢,分为对照组、SI组和雌激素对照组,并设假手术对照组,喂养16w后,测定雌二醇、骨生化指标、骨密度、骨钙、骨磷等指标,扫描电镜和组化分析观察骨小梁微观结构的变化。结果:SI显著降低血清中骨吸收指标TRAP活性,同时明显提高骨形成指标BGP含量;SI具有弱雌激素作用,可抑制去卵巢大鼠体内雌激素水平的下降,骨密度和骨钙、骨磷含量增加,松质骨的骨丢失得到抑制。结论:SI可降低骨吸收、促进骨形成,对去卵巢引起的骨量丢失有明显的抑制作用。     

叶酸对缺氧大鼠神经干细胞Notch信号通路相关基因mRNA表达的影响

目的研究叶酸对缺氧大鼠神经干细胞(NSCs)增殖及Notch信号通路相关基因mRNA表达的影响。方法无血清培养基原代培养新生大鼠NSCs,细胞分为对照组(Control),缺氧组(Hypoxia),叶酸组(Folate)和叶酸缺乏组(Folate-D)。除Control组外,其余3组缺氧6h。增殖第7日收集细胞,MTT法检测细胞活力,实时荧光定量PCR检测Notch1、Hes1/5、Mash1和Ngn1/2基因mRNA表达。结果 Folate组细胞活力高于Hypoxia组,Folate-D组细胞活力低于其他3组(P<0.05);Folate组Notch1、Hes1/5mRNA表达高于Hypoxia组,Folate-D组该3个基因mRNA表达低于其他3组(P<0.05);Folate组Ngn1/2mRNA表达低于Hypoxia组(P<0.05);Mash1mRNA表达在各组间差别无统计学意义(P>0.05)。结论叶酸能促进缺氧损伤NSCs增殖,上调Notch信号通路中Notch1和Hes1/5基因表达。     

普洱茶茶褐素对大鼠激素敏感性脂肪酶活性及其mRNA表达的影响

目的研究普洱茶茶褐素对大鼠肝脏和附睾脂肪组织中HSL活性及其mRNA表达的影响。方法 90只SD大鼠随机分成正常对照组(Ⅰ组)、高脂饲料组(Ⅱ组)和高脂饲料+茶褐素组(Ⅲ组),每组选取10只于实验D15、D30和D45处死,分别测定其血清TG、TC、LDL-C和HDL-C值以及肝脏和附睾脂肪组织中HSL活性及其mRNA表达水平。结果 (1)试验D30、D45时,Ⅱ组大鼠TG、TC、LDL-C水平均较Ⅰ组显著升高(P0.05,P0.01),HDL-C水平较Ⅰ组显著降低(P0.05,P0.01),而Ⅲ组大鼠TG、TC、LDL-C水平则较Ⅱ组显著降低(P0.05,P0.01),HDL-C水平较Ⅱ组显著升高(P0.05,P0.01)。(2)D30时,Ⅲ组附睾脂肪组织HSL活性高于Ⅰ组(P0.05);D45时,Ⅲ组肝脏组织HSL活性高于Ⅰ组(P0.05),Ⅱ组和Ⅲ组中附睾脂肪组织HSL活性显著高于Ⅰ组(P0.01)。(3)D30时,Ⅱ组和Ⅲ组中附睾脂肪组织HSLmRNA表达则分别高于Ⅰ组(P0.05,P0.01),且Ⅱ组和Ⅲ组之间差异极显著(P0.01);D45时,Ⅲ组大鼠肝脏组织HSL mRNA表达明显高于Ⅰ组(P0.05),Ⅱ组和Ⅲ组中附睾脂肪组织HSLmRNA表达则均高于Ⅰ组(P0.05,P0.01),且Ⅱ组和Ⅲ组之间差异极显著(P0.01)。结论普洱茶茶褐素对大鼠降血脂效果明显,并可显著增强大鼠肝脏和附睾脂肪组织HSL活性及其mRNA的表达,是茶褐素降血脂功效的重要作用机制之一。     

慢性低氧对大鼠肾脏组织COX-1蛋白表达及抗氧化的影响

目的 探讨高原慢性低氧对大鼠肾脏组织氧化损伤情况及组织的抗氧化应激能力,揭示氧化应激反应是否是高原低氧对机体损伤的主要因素.方法 将85只Wistar大鼠随机分为平原组(25只)和高原组(60只),其中高原组大鼠运至海拔4300m地区喂养30 d.用ELISA方法对血液中的低氧诱导因子1(HIE-1)、活性氧(ROS)...     

锌对新生大鼠海马培养神经元生长发育的作用

采用无血清培养的新生大鼠海马神经细胞，观察锌对脑细胞生长发育的作用。结果表明，锌能促进体外培养海马神经元的神经突起生长，突起数增多；神经元的活存数和神经元胞体的直径和面积增加。用流式细胞术分析证明，神经元总蛋白含量增高。本结果提示，锌对海马神经元的生长发育具有促进作用