三叉神经痛大鼠模型中Cdk5/p35的表达与活性

目的:探讨Cdk5激活剂p35在三叉神经痛过程中所起的作用.方法:以三叉神经眶下支(ION)的慢性压迫性损伤(CCI)建立的三叉神经痛大鼠模型为研究对象,采用Western印迹、免疫沉降和Cdk5活性分析方法,检测大鼠眶下神经慢性压迫性损伤(CCI-ION)后三叉神经脊束尾核(Vc)组织中Cdk5的活性变化和Cdk5、p35的表达水平.应用SPSS13.0软件包中的两两比较和扩展t检验进行统计学分析.结果:CCI-ION呈时间依赖形式诱导神经损伤侧Vc组织中的p35上调(第1天为1.23±0.15,第3天为1.36±0.12,第7天为1.62±0.17,第14天为1.83±0.16);Cdk5表达在CCI-ION第1天到第14天基本一致,而Cdk5的活性与p35表达具有一致性:CCI-ION第14天,Vc内的Cdk5活性(115.5 Kcpm)是CCI-ION第1天Vc内的Cdk5活性(19.0 Kcpm)的6倍,各组之间均有显著差异(P<0.01).结论:Cdk5/p35与三叉神经痛过程中神经元突触变化及神经元可塑性有密切关系.     

神经生长因子在牙齿损伤后三叉神经节中的表达变化

目的：探讨神经生长因子（NGF）在牙齿损伤过程中的变化。方法：制备大鼠磨牙机械损伤的模型,对其三叉神经节中NGF进行免疫组化染色。结果：正常对照组NGF在三叉神经节中低水平表达;损伤1－3d时表达明显增强;损伤5d后表达开始减弱;损伤9d后表达恢复至正常水平。结论：NGF可能参与牙齿损伤后的反应并促进其修复。     

静磁场对大鼠三叉神经节中SP-mRNA作用的实验研究

目的　探讨静磁场对大鼠三叉神经节中SP-mRNA的影响。方法　将 4 4只 6～ 7周的大鼠置于静磁场中 ,在 1、2、6、1 2和 2 4h时分别将动物处死 ,取其三叉神经节 ,用原位杂交方法研究SP-mRNA在各时间点的变化。结果　在静磁场作用下三叉神经节中SP-mRNA的表达呈上调变化 ,2h时达峰值 ,各时间点与正常对照组间均存在显著性差异 (P <0 0 1 )。结论　静磁场可以使三叉神经节中的SP-mRNA呈现上调性变化。     

咬合创伤大鼠三叉神经节中PPTA mRNA表达的变化

目的:观察咬合创伤后,三叉神经节中前速激肽原A (PPTA) mRNA表达的变化。方法:制备大鼠咬合创伤模型,采用分子杂交方法,观察咬合创伤后7、15、30天时,三叉神经节中PPTA mRNA表达的变化。结果:持续性咬合创伤后PPTA mRNA表达高于对照侧。咬合创伤7天,PPTA mRNA表达增高趋势明显高于15天和30天组。15天和30天两组间PPTA mRNA的表达增高没有明显差异。结论:咬合创伤后,三叉神经节PPTA mRNA表达增加,初级感觉神经元合成SP前体增加。     

重度磨耗对大鼠三叉神经节中CGRP表达的影响

目的：探讨重度磨耗对大鼠三又神经节中降钙素基因相关肽（calcitonin gene—related petide,CGRP）表达的影响。方法：8周龄雄性SD大鼠75只,随机平均分为操作对照组、空白对照组和实验组,每组各25只,实验组用人工逐次磨低大鼠牙冠高度的方法建立重度磨耗动物模型。各组分别于干预后3、7、14、21、28天处死5只动物,取出双侧三叉神经节,通过免疫荧光染色的方法观察三叉神经节中CGRP的表达变化。结果：与空白对照组和操作对照组相比,实验组3天组和7天组的CGRP阳性神经元数量明显增加（P〈0．05）,14天组和21天组CGRP阳性神经元数量有所减少,但仍明显多于对照组（P〈0．05）,28天组基本恢复正常（P〉0．05）。结论：重度磨耗可导致大鼠三叉神经节内CGRP表达的可逆性变化。     

咬合重建对大鼠三叉神经节P物质表达影响的研究

目的：研究咬合重建对大鼠三叉神经节P物质（substance P,SP）表达的影响。方法：Wistar雄性大鼠30只,随机分为3个实验组及相应的正常对照组,每组5只。实验组动物间断磨除右上、下颌磨牙牙冠至龈下,有2组分别第3周、第9周停止磨牙,任其自行萌出,恢复咬合关系。双侧三叉神经节（trigeminal ganglia,TG）切片行SP免疫组织化学反应（SABC法）。光镜观察拍片,并用Image Pro Plus5.1图像分析软件进行测定。结果与对照组对照。SPSS10.0软件行统计分析。结果：单侧咀嚼实验组咀嚼侧和非咀嚼侧TG内SP免疫阳性神经元百分比与对照组比较显著降低（P〈0.01,P〈0.05）,其非咀嚼侧明显低于咀嚼侧（P〈0.01）。早期恢复咬合实验组TG内免疫阳性神经元百分比与对照组比较无差别（P〉0.05）,其咀嚼侧与非咀嚼侧比较无差别（P〉0.05）。晚期恢复咬合实验组TG内免疫阳性神经元百分比与对照组比较显著降低（P〈0.01,P〈0.05）,其非咀嚼侧明显低于咀嚼侧（P〈0.05）。结论：早期恢复咬合关系TG内SP表达可恢复正常,晚期恢复咬合关系SP表达不能恢复正常,SP参与了单侧咀嚼引起的颞颌关节病的病理变化过程。     

心理应激对大鼠三叉神经节降钙素基因相关肽表达的影响

目的：使用交流箱心理应激模型,研究心理应激对三叉神经节中降钙素基因相关肽（CGRP）表达的影响。方法：90只SD大鼠,随机分为3组：空白对照组、足部电击组和情绪应激组,采用反转录-聚合酶链作用（RT—PCR）技术,检测应激后不同时间点三叉神经节中CGRPmRNA水平的变化。结果：三叉神经节中CGRPmRNA的表达在应激第1天无显著性差异,后逐渐升高,第7天时达到最高峰．又逐渐降低,但在第14天是与正常对照组相比还是升高了（P〈0．05）,去除应激后CGRP的表达逐渐降低,在恢复14d后基本达到正常水平。结论：心理应激可以引起三叉神经节CGRPmRNA表达发生变化,可能是心理应激导致咀嚼肌痛觉敏感的中枢致病因素之一。     

蟾酥制剂对大鼠三叉神经节及三叉神经脊束核尾侧亚核中P物质的影响

目的：比较分析蟾酥制剂作用于牙髓后，三叉神经节(TG)和三叉神经脊束核尾侧亚核(Vc)内P物质(SP)的变化。方法：利用免疫组织化学染色方法，观察大鼠牙齿开髓封药0、1、2、4、6、24h后TG和Vc内sP的变化。结果：开髓1h时TG内阳性神经元的数目少于对照侧，4h后阳性神经元数量逐渐增多，接近正常。封药1h后Vc内密度低于对照侧，4h时密度明显高于对照侧，随后逐渐减低，至24h后已与对照侧密度一致。结论：蟾酥制剂可抑制TG内SP的合成和释放，Vc内三叉神经末梢释放SP减少。     

大鼠三叉神经脊束尾侧亚核内Cdk5/p39的表达与活性

目的:探讨周期依赖性蛋白激酶5(Cdk5)2种激活剂p35和p39在出生后各发育阶段大鼠三叉神经脊束尾侧亚核内的表达变化.方法:采用Western印迹分析、免疫沉降和Cdk5活性分析,检测出生后各发育阶段大鼠三叉神经脊束尾侧亚核内Cdk5的活性变化和Cdk5、p39的表达水平.采用SPSS11.0软件包中的两两比较和扩展t检验进行统计学分析.结果:在新生大鼠三叉神经脊束尾侧亚核组织中,p39表达较低;出生后2～3周时,p39的表达最高;到成体时,其表达降低到与新生大鼠三叉神经脊束尾侧亚核组织中的相同水平.在出生后各发育阶段,大鼠三叉神经脊束尾侧亚核内Cdk5的表达一致,而Cdk5的活性逐渐减弱,新生大鼠三叉神经脊束尾侧亚核内的Cdk5活性(115.5Kepm)比成体中的Cdk5活性(19.0 Kcpm)约高6倍,各组之间均有显著差异(P<0.01).结论:在出生后各发育阶段,大鼠三叉神经脊束尾侧亚核内p39的表达与p35表达结果在时间上有差异,Cdk5/p39和Cdk5/p35在出生后各发育阶段大鼠三叉神经脊束尾侧亚核内可能扮演不同的角色.     

正畸牙齿移动过程中大鼠三叉神经节CGRP mRNA表达变化

目的：观察正畸牙齿移动不同时期大鼠三叉神经节CGRP mRNA表达变化。方法：采用反转录。聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测正畸加力和撤力后不同时期大鼠三叉神经节CGRP mRNA水平的变化。结果：加力后2h CGRP mRNA的表达量没有明显增加,至加力后8h开始增加,加力1d-1W达到最高峰,至撤力后2～4WCGRP mRNA的表达量开始下降,但CGRP mRNA水平仍然明显高于对照组（P〈0．05）。结论：CGRP可能不仅参与早期正畸牙周组织的炎症损伤过程,而且可能参与了后期的组织修复重建过程。     

舌鳞状细胞癌中p73、p63和p53基因的表达

目的：研究p73、p63和p53基因蛋白在舌鳞状细胞癌中的表达及其意义。方法：用免疫组织化学S－P法检测64例舌鳞状细胞癌组织标本p73、p63和p53基因蛋白表达。结果：舌鳞癌中p73、p63和p53基因蛋白阳性率分别为61％、92％和50％。p73蛋白表达与T分类(r=0.344,P=0.057)、区域淋巴结转移（r=0.334,p=0.007)、肿瘤侵袭方式（r=0.340,P=0.060)和不良预后（r=-0.473,P=0.000)相关。p63与所有临床病理特征和预后无关。p53与区域淋巴结转移（r=0.263,P=0.036)和不良预后（r=-0.342,P=0.013)相关。结论：p73和p53表达有助于判断舌鳞癌的生物学行为和预后。p63可能是鳞状上皮源性肿瘤的标记物。     

p53、p21、p27、p16在口腔鳞癌中的表达及与预后的关系

目的:研究细胞周期相关蛋白p53、p21、p27、p16在口腔鳞癌组织中的表达及其与预后的相关性,寻找预后判断的有效生物标志物。方法:用免疫组织化学的方法检测随访资料完整的110例口腔鳞癌患者术后石蜡切片中p53、p21、p27、p16的表达,通过目标蛋白阳性染色细胞比例和阳性细胞中蛋白的染色强度判定各蛋白的表达水平,应用SAS 9.0软件中的Kaplan-Meier分析p53、p21、p27、p16蛋白表达水平与口腔鳞癌预后的相关性,筛选和确定与口腔鳞癌预后相关的细胞周期蛋白。结果:110例口腔鳞癌标本蛋白检测和统计分析结果表明,p53、p27、p16蛋白的表达水平与口腔鳞癌术后生存时间并无显著的相关性;p21表达与口腔鳞癌的术后生存率呈显著的相关性(P<0.05)。结论:口腔鳞癌患者癌组织标本的p21表达水平与预后呈正相关,p21有望成为口腔鳞癌预后判断的候选生物标志物。     

外周血miR-299-5p和miR-127-3p的表达水平与非综合征型唇腭裂相关性研究

目的:研究外周血中miR-299-5p和miR-127-3p的表达水平与非综合征型唇腭裂(NSOC)的相关性.方法:选取于哈尔滨医科大学附属第一医院就诊的唇裂伴或不伴腭裂(CL/P)患儿、单纯腭裂(CPO)患儿和健康儿童各10例,采用实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)检测各组外周血中miR-299-5p和miR...     

p63在口腔扁平苔藓中的表达

目的探讨p53家族新成员p63在口腔扁平苔藓（OLP）中的表达，其与OLP发生、发展的关系以及是否可作为一种标志物预测OLP的转归。方法采用免疫组织化学方法检测30例012中p63蛋白的表达，同时采用RT—PCR方法分析p63编码的两大类转录产物TAp63和ANp63的mRNA水平，并且与口腔鳞状细胞癌（OSCC）及正常口腔黏膜（NOM）进行比较。结果p63蛋白在NOM、OLP和OSCC组中均有表达，与NOM比较，其累积光密度（IOD）值在OLP中下调，在OSCC中明显上调。在糜烂萎缩型OLP中，p63蛋白表达高于非糜烂型（P〈0．001）。RT-PCR检测结果显示，TAp63的mRNA水平在OLP中表现为中等。略低于NOM．明显高于OSCC；ANp63的mRNA水平在NOM和OLP中极低．其转录扩增带大多数检测不到．但在OSCC组都能检测到．而且呈高水平表达。TAp63的mRNA水平在糜烂萎缩型OLP中低于非糜烂型（P=0．018），ANp63则高于非糜烂型（P=0．049）。结论p63与OLP的发病机制有关，其中TAp63和ANp63分别起不同的作用。p63表达的高低可能可以作为预测OLP是否有高风险癌变的检测指标。     

miR-17-5p在口腔鳞状细胞癌中的表达特点及其临床意义

目的:探讨口腔鳞状细胞癌(OSCC)患者肿瘤组织和血浆中miR-17-5p的表达特点及临床意义.方法:选取2009年6月-2013年6月经手术切除的OSCC组织标本和外周血标本各42例,使用qRT-PCR测定miR-17-5p的表达;采用Mann-Whitney U检验分析miR-17表达及预后的相关性. 结果:OSCC组织和血浆中miR-17-5p表达显著上调(P<0.05),与患者性别、年龄、肿瘤分化程度无明显相关(P>0.05),但与肿瘤的TNM分期、淋巴结转移密切相关(P<0.05);术前血浆中miR-17-5p高表达者术后1年的复发率高于低表达者(P <0.05);治愈患者术后血浆中miR-17-5p表达明显低于术前血浆中miR-17-5p含量(P<0.05),而OSCC术后复发患者无明显变化. 结论:miR-17-5p可以作为临床评估OSCC侵袭、转移和术后复发进行评价的重要指标.