核酸疫苗的研究现状

核酸疫苗（nucleicacid vaccine）是指将含有编码某种抗原蛋白的外源基（DNA或RNA）序列质粒载体作为疫苗，直接导入到动物细胞内，通过宿主细胞的表达系统合成抗原蛋白，诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答，以达到预防和治疗疾病的目的。核酸疫苗又称为基因疫苗或裸DNA疫苗，核酸疫苗包括DNA疫苗和RNA疫苗，其中研究最多的是DNA疫苗。这种免疫称为核酸免疫、基因免疫、DNA介导的免疫以及遗传免疫等。许多研究者将不同病原的保护性抗原基因直接导入动物体内，引起特异性免疫应答，并已在一些疾病如流感、狂犬病、乙肝、艾滋病、牛疱疹病毒感染以及结核病和疟疾等取得初步结果。     

乙型肝炎病毒的核酸疫苗研究进展

传统的乙型肝炎 (乙肝 )治疗主要是干扰素和核苷类似物 ,但仍存在许多缺点 ,而新的抗乙型肝炎的基因治疗手段反义RNA、ribozyme和dominantnegativemutants虽为乙肝的治疗提供了希望 ,但是在实际运用中仍存在许多问题。核酸疫苗技术的出现为乙型肝炎的治疗开辟了一条新的途径。核酸疫苗分为DNA疫苗、RNA疫苗。由于RNA疫苗容易降解 ,不易保存 ,所以目前研究的疫苗主要是DNA疫苗。DNA疫苗是指含有编码抗原的基因的真核表达质粒DNA ,经直接接种体内后 ,可被体细胞摄取、并转录翻译表达出相应抗原。它可通过不同途径刺激机体产生针对此…     

非人灵长类动物模型在核酸疫苗研究中的应用及前景

非人灵长类是人类的近属动物，在核酸疫苗临床前试验中是理想的动物模型。核酸疫苗(Nucleic Acid Vaccines)也称为DNA疫苗或基因疫苗，是近年来快速发展的有很大前景的新一代疫苗，它是把带有编码抗原蛋白基因的真核表达载体直接注入机体，表达蛋白，从而诱发细胞和体液免疫，     

乙型肝炎病毒核心抗原核酸疫苗对猕猴的体液免疫原性观察

核酸疫苗 ( DNA疫苗 )能够有效地刺激机体的特异性免疫应答已经成为共识。鉴于乙型肝炎病毒核心抗原 ( HBc Ag)是机体细胞毒性 T细胞 ( CTL )识别和攻击 HBV感染肝细胞的主要靶抗原 ,我们构建了 HBc Ag核酸疫苗 ,并已观察到该核酸疫苗经不同接种方法免疫不同品系小鼠均可引起特异性体液免疫和细胞免疫应答。为进一步观察该核酸疫苗对非人灵长类动物的免疫原性 ,我们用该核酸疫苗接种猕猴 ,发现猕猴对该核酸疫苗具有良好的抗体应答反应。1　材料和方法( 1 ) HBc Ag核酸疫苗的制备　 HBc Ag核酸疫苗 ( p JW430 3/HBc)及对照质粒 ( …     

乙型肝炎DNA疫苗研究进展

DNA疫苗也有基因疫苗、核酸疫苗、DNA免疫、基因免疫等各种名称和相关概念.有人将DNA疫苗称为第三代疫苗.第一代疫苗以Jenner用牛痘预防天花为代表,人类从此开始摆脱许多疾病的困扰.第二代疫苗是运用基因重组技术,以特定的基因表达产生的抗原作为疫苗,重组乙型肝炎疫苗就是典型例子.DNA疫苗则是将编码目的抗原的基因与载体重组以后,经不同途径将基因直接转入机体细胞内,利用宿主细胞内的表达加工机构合成抗原,从而激发体液免疫和细胞免疫.近年来,DNA疫苗在打破HBV慢性感染的免疫耐受方面取得了一定的进展,对乙型肝炎及HBV无症状携带状态的临床治疗提供了值得探索的新途径.     

核酸疫苗的研究进展(综述)

核酸疫苗又称ＤＮＡ疫苗或基因疫苗，是最近几年从基因治疗研究领域发展起来的一种全新疫苗，其组分为编码蛋白质抗原的双链环状重组表达质粒，它的出现被誉为第三次疫苗革命，通过肌肉注射等途径接种动物后，外源基因能在宿主细胞内表达相应抗原，通过抗原提呈细胞的加工、提呈、诱导免疫应答。 ｌ核酸疫苗的发现：Ｗｏｌｆｆ等（１９９０）将分别编码β－半乳糖苷酶、虫荧光素酶、氯霉素乙酰转移酶的 ＲＮＡ和 ＤＮＡ的表达载体注入小鼠骨骼肌后，这些基因都能在肌细胞内表达相应蛋白［１］。Ｗｉｌｌｉａｍｓ（１９９１）报道用基因枪将…     

自身抗核抗体及其临床意义

一、概述自身免疫性疾病的病人血清中,有抗自身组织或器官的自身抗体。凡是抗细胞核成份的自身抗体统称为自身抗核抗体(Autoantibodies to Nuclear Antigens,ANA)。在细胞核内的抗原存在于核酸(DNA或RNA)、蛋白分子(组蛋白或非组蛋白)或组成核酸和蛋白的抗原决定簇上(如核糖核酸抗原、核糖核蛋白抗原等)。不同的ANA有对这些不同核成份的免疫特异性。循环ANA的临床意义是由于在系统性风湿病中病人血清循环免疫复合物的存在,表1中列出这些疾病。     

影响核酸疫苗应用研究的若干问题

核酸疫苗又称基因疫苗或DNA疫苗，这种核酸既是载体又能在真核细胞中表达抗原，刺激机体产生特异而有效的免疫应答，尤其是能诱导产生具细     

囊虫病的核酸免疫研究进展

囊虫病是一种常见的人兽共患寄生虫病,对人类健康危害极大.目前,尚无可用于人体的有效疫苗.以往的疫苗多为粗抗原疫苗,免疫效果不理想.核酸免疫技术的开展为囊虫病疫苗研制提供了一条新思路.核酸免疫(nuclear acid immunization)又称基因免疫(genetic immunization),是将含有编码目的抗原的质粒直接注入体内,通过宿主细胞的转译系统表达目的抗原,并诱导机体产生免疫应答的一种新技术.目前WHO已将此法正式命名为核酸免疫法(nuclear acidvaccination).     

丙型肝炎治疗的研究进展

丙型肝炎严重威胁着人类的健康,目前寻找一种有效的疗法至关重要。撰文对丙型肝炎的药物治疗、RNA干扰、病毒抗原编码基因的转基因表达、反义核酸技术及表位疫苗等项治疗方案予以综述,提出了包含有多个保守丙型肝炎病毒(HCV)抗原表位的多价融合抗原基因的DNA疫苗将成为今后丙型肝炎治疗的研究方向。该疫苗可以在不同个体中激起广泛而强烈的对不同HCV基因型有交叉反应性的T细胞免疫应答,并有望用于丙型肝炎人群的治疗。     

农吉利对小白鼠S_(180)瘤组织核酸含量及~(32)P参入量的影响

据国内临床报告:农吉利甲素(野百合碱)对皮肤癌、宫颈癌等有显著疗效。国内外动物试验资料也发现有较高的抑瘤率。其抑瘤作用机制,尚待深入探讨。近年来大量国内外文献资料证明:肿瘤发生与机体细胞核酸的生物合成密切相关。病毒的致癌原理乃是:DNA病毒的DNA掺入宿主细胞的DNA中,改变了宿主细胞的遗传特性而引起癌变;RNA病毒由于有“依赖RNA 的 DNA聚合酶”(又名逆转录酶),可由RNA逆行复制出前病毒所需的DNA,     

形成丙型肝炎病毒负链复制体的相关蛋白的分析

【目的】确定丙型肝炎病毒 (HCV)非结构蛋白NS5B以及肝母细胞瘤株HepG2胞浆提取物中的宿主蛋白与HCV负链RNA 3′末端的特异性结合作用。【方法】用蛋白 核酸紫外交联试验分别检测NS5B以及HepG2胞浆提取物中的宿主蛋白与HCV负链RNA 3′末端的结合作用 ,用非同源RNA和非同源蛋白作为竞争物分析这种结合的特异性。【结果】NS5B以及宿主细胞内一约 4 5ku的蛋白质 (简称P4 5 )均可与HCV负链RNA 3′末端特异性结合。【结论】NS5B和P4 5是HCV负链RNA 3′末端复制体的两个成分     

SARS相关冠状病毒M基因片段的克隆及其DNA疫苗诱导的体液免疫

目的：构建含有SARS相关冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus，SARS—CoV)M基因片段的核酸疫苗，观察其免疫小鼠后病毒特异性抗体产生情况。方法：将合成的M基因片段克隆到核酸疫苗真核表达载体pVAX1中，免疫小鼠后，用SARS—CoV抗体ELISA检测试剂盒定期检测免疫小鼠血清中抗SARS—CoV的病毒特异性抗体水平。结果：构建了重组核酸疫苗质粒pVCo—M，免疫小鼠后可诱导产生出病毒特异性抗体。结论：以M为抗原基因的DNA疫苗能诱导SARS病毒特异性抗体，为进一步改进或探索同类DNA疫苗提供有益启示。     

菌影系统作为疫苗载体的研究进展

菌影是完整的革兰阴性细菌的空菌体,不含核酸、核糖体等细胞内容物,但保持了活菌所具有的天然形态及所有结构,具有良好天然佐剂特性,可诱导免疫系统的固有免疫和适应性免疫应答;菌影又是外源性蛋白抗原或DNA的高效递送的载体。菌影可通过口腔、眼、鼻腔或支气管等进行黏膜免疫,这是疫苗最理想的免疫方式。本文综述菌影作为蛋白亚单位疫苗和DNA疫苗的载体的特性及其在人类疫苗和动物疫苗应用领域的研究进展。     

中华硬蜱叮咬105kDa纯化抗原免疫接种宿主后中肠组织化学变化的动态观察

目的 观察虽华硬蜱叮咬105kDa纯化抗原免疫接种宿主后，其中肠组织化学变化。方法 采用茚三酮法、PAS法、Feulgen法及图像分析仪，对中华硬蜱叮咬不同免疫力宿主后中肠蛋白质、糖原及多糖定位和分布以及DNA的含量进行研究。结果 中华硬蜱叮咬105kDa纯化抗原宿主后，中肠上皮细胞蛋白质含量较对照组明显降低，但糖原及多糖含量与初次叮咬或佐剂对照组相比无显性变化；随着叮咬时间的延长，纯化抗原组DNA含量明显低于对照组，且以2－4倍体为主。结论 105kDa纯化抗原组诱导的抗蜱免疫作用可干扰中肠消化细胞蛋白南和核酸的合成，而对中肠糖代谢无明显影响。     

基因疫苗在肿瘤免疫治疗中的研究进展

肿瘤的治疗目前仍是世界性的难题,随着免疫学和分子生物学的发展,肿瘤疫苗的发展经历了肿瘤细胞疫苗、重组蛋白疫苗和基因疫苗三个阶段。肿瘤基因疫苗也称DNA疫苗,是目前研究的热点,主要包括与肿瘤相关抗原（TAAs）有关的全长、表位、独特型（Id）和融合DNA疫苗,能够自主复制的RNA疫苗,与树突细胞（DCs）相关的肿瘤基因疫苗等。近年来,肿瘤基因疫苗在动物基础研究和临床前研究,     

一种可能用于治疗的新疫苗─—DNA疫苗简介

DNA（去氧核糖核酸）疫苗也可称之为“基因疫苗”，是与传统的疫苗（如麻疹疫苗）和基因工程疫苗（重组疫苗，如酵母菌表达的乙肝疫苗）完全不同的疫苗。其主要区别是：①前两种疫苗主要是蛋白质，将这种蛋白质注射至人体就可以诱生免疫反应，从而达到预防的目的。而DNA疫苗不是蛋白质而是核酸（基因），将这种基因注射到人体内，使其在人体内表达各种抗原，从而诱生人体的免疫反应，达到预防和治疗的目的川；②前两种疫苗主要是诱生体液免疫反应（产生抗体），而在病人体内诱生细胞免疫反应的能力比较差，因而主要用于预防，而DNA疫苗…     

SARS病毒S蛋白的原核表达与DNA疫苗的构建

目的探讨SARS冠状病毒的刺突(spike，S)蛋白的免疫学特性，以及S蛋白作为SARS—CoV病毒疫苗组分的可行性。方法将S蛋白基因分段克隆入原核表达载体pET—15b，并在大肠杆菌中表达，经过亲和层析得到纯化的重组蛋白rSa和rSb；将全长S基因克隆入真核分泌表达载体pSecTagB，得到重组DNA疫苗pSecS，免疫小鼠，得到SAS—CoV S蛋白抗血清。然后用纯化的重组蛋白rSa和rSb建立的SARS—CoV S抗体ELISA检测技术研究所构建的S-DNA疫苗的免疫效果。结果分段的重组蛋白rSa和rSb在大肠杆菌中均以可溶性形式得到高效表达，并能与SARS确诊病人血清以及pSecS免疫鼠血清发生特异性抗原抗体反应，原核表达的重组分段S蛋白具有SARS—CoV S蛋白相似的抗原性。结论原核表达的两段重组S蛋白有可能作为抗原组分用于临床SARS—CoV检测中；所构建的SARS—CoV的S基因核酸疫苗能在小鼠体内产生特异性抗体，这为进一步SARS DNA疫苗的研制提供一定的借鉴作用。     

DNA疫苗的靶向策略

DNA疫苗可诱导动物体产生特异的体液免疫和细胞免疫,对细菌、病毒、寄生虫等引起的感染和肿瘤有预防或治疗作用.但是DNA疫苗诱导的免疫应答水平一般较低,对牛羊等大型动物和人类的疗效往往很差[1].提高DNA疫苗效果的一个令人振奋的途径是DNA疫苗的靶向策略,即将DNA疫苗或其表达的蛋白产物定向于抗原提呈细胞(antigen-presenting cells,APCs),特别是树突细胞(dendrtic cell,DC)[2].DNA疫苗的靶向策略的另一途径是将抗原定向于APCs的亚细胞器,促进抗原运输加工和提呈或改变抗原提呈途径,使之能更加有效提呈,减少抗原肽的损失.     

携带抑胃多肽序列的HBc 病毒样颗粒蛋白疫苗的制备及其免疫效果

目的:设计及制备携带抑胃多肽(GIP)抗原序列的HBc病毒样颗粒(VLP)蛋白疫苗,并研究其免疫效果,为肥胖免疫干预治疗提供新的策略。方法:克隆GIP cDNA序列,并与HBc VLP(1~144aa)cDNA序列进行融合,通过原核表达及纯化,制备携带GIP序列的HBc VLP疫苗(HBc-GIP);同时将该融合基因的cDNA序列克隆入pVAX1真核表达载体,制备GIP核酸疫苗。用2种疫苗免疫大鼠并进行免疫学指标评价。结果:成功制备了携带GIP抗原序列的HBc-GIP,并同时制备了编码该融合蛋白序列的核酸疫苗pVAX1-HBc-GIP。经过两种疫苗的联合免疫,可以获得高滴度的GIP特异性抗体IgG,显示了良好的免疫效果。结论:采用HBc(1~144aa)作为GIP的载体,制备VLP蛋白疫苗,联合核酸疫苗免疫可以有效地诱导靶向大鼠GIP的特异性体液免疫反应,打破大鼠自身抗原耐受。该疫苗可以作为一种新的控制肥胖的免疫干预药物来进一步深入研究。