中国仓鼠肺细胞细胞周期阻滞微核试验与常规微核试验的对照研究

本研究测试了细胞松弛素B诱发中国仓鼠肺细胞(CHL)双核细胞的最佳时间的浓度；比较研究了丝裂霉素C，甲基磺酸甲酯，水合氯醛和秋水仙碱4种诱变剂在细胞周期阻滞法中诱发双核细胞微核率及常规微核试验中诱发单核细胞微核率的大小，结果表明：细胞松弛素B诱发CHL双核细胞的最佳时间为16h，     

培养人淋巴细胞微核测试法检测非整倍体诱变剂的研究

直接用培养人淋巴细胞微核测试系统，采取控制化学品处理培养细胞和恢复时间，对已知非整倍体诱变剂长春新碱进行微核检测，实验结果显示，在设定的微核检测程序中，阴性对照和断裂剂丝裂霉素Ｃ未诱发微核率的显著增加（Ｐ〉０．０５）而ＶＢＬ却引起ＭＮＦ显著增加（Ｐ〈０．０１）。结果揭示培养人外周血淋巴细胞微核测试法可能成为一种新的人类化学品非整倍体诱变剂的检测方法。     

人精子2细胞胚微核技术在化学诱变研究中的应用

人精子经化学诱变处理后与去透明金黄地鼠卵受精，在离体条件下孵育１８小时后发育为２细胞胚，采用压片技术观察每个２细胞胚的微核形成情况。平阳霉素１０、２０、４０μｇ／ｍｌ诱发微核２细胞胚率分别为３９．０％，５０．０％，５８．１１％，微核均数依次为０．９９，１．５８。２０．２，微核指数依次为２．５４，３．１７，３．４８。与阴性对照组相应的微核２细胞胚率１７．１９％、微核均数０．４０、微核指数２．３２比较     

生物反应调节剂（BRM－102）冲剂诱变和抗诱变作用的研究

采用微核法对生物反应调节剂冲剂（ＢＲＭ－１０２）的诱变和抑制诱变作用进行了研究。结果显示ＢＲＭ－１０２提取液各种浓度组与阴性对照组统计学处理无意义，表明该冲剂尚未有诱发正常人淋巴细胞微核率升高的作用，不致引起体细胞遗传损伤；对诱变剂丝裂霉素Ｃ诱发正常人淋已细胞微核率有明显的抑制作用。     

人参茎叶总皂甙对遗传物质损伤的修复作用及其时间效应

本研究通过微核试验证明：给小鼠腹腔注射丝裂霉素Ｃ（ＭＭＣ）后，再给予人参茎叶总皂甙（ｇｉｎｅｓｅｎｏｓｉｄｅｓＧＮＳｉ．ｇｏｒｉ．Ｐ），可明显降低０．５、１．００ｍｇ／ｋｇＭＭＣ诱发的小鼠骨髓细胞微核率；时间效应试验证明；在诱变剂作用前，给予小鼠ＧＮＳ，降低微核细胞率效果更好，以作用４８ｈ效果最佳。     

生物反应调节剂（BRM—102）冲剂诱变和抗诱变作用的研究

采用微核法对生物反应调节剂冲剂的诱变和抑制诱变作用进行了研究。结果显示ＢＲＭ－１０２提取液各种浓度与阴性对照组统计学处理无意义，表明该冲剂尚未有诱发正常人淋巴细胞微核率升高的作用，不致引起体细胞遗传损伤；对诱变剂丝裂毒素Ｃ诱发正常人淋巴细胞微核率有明显的抑制作用。     

一氧化氮供体药物硝普钠的遗传毒性的研究

本文以硝普钠为ＮＯ供体药物，研究慢性升高的ＮＯ对哺乳动物细胞的诱变作用和微核形成的影响。结果ＳＮＰ处理，均以剂量－反应方式诱发ｇ１２细胞ｇｐｔ位点突变，在最高受试剂量，诱变率分别超过本底１３和２５倍，在处理组还观察到含微核的双核细胞数显著增多。在０．５－４ｍＭ或２－８ｍＭ（－Ｓ９）ＳＮＰ剂量范围内，双核微核细胞率、微核率及含多微核的双核细胞比率均以剂量－依存方式增加，结果表明ＳＮＰ释放的ＮＯ过量积     

Trad—MCN分析中引入多微核四分体率

在Ｔｒａｄ－ＭＣＮ分析中，以微核率作指标来判断环境诱变剂对染色体的损伤程度和诱变剂量强弱一直沿用至今，本文用实验证明了当作物中存在有诱变剂镉的阻遏剂，如维生素Ｅ或褐藻酸钠时，单一微核率指标已不足以反映出诱变剂的强度与剂量大小，更不能反映诱变剂与阻遏剂间的作用及其程度，因此，作者建议应将多微核四分体率作为一项重要指标引入Ｔｒａｄ－ＭＣＮ分析中，与微核率一道共同反映在研究工作中。     

绿茶对明矾诱发遗传物质损伤的抑制作用

本实验以绿茶为材料,以明矾为诱变剂,以微核率作为DNA 损伤指标。结果含10 %绿茶饲料使明矾诱发的微核率从7167 ±1197 ‰降至3150 ±1105 ‰( P < 0101) 。表明绿茶对明矾诱发的DNA 损伤具有明显抑制作用。     

盐酸特拉唑嗪对小鼠骨髓细胞微核率的影响

盐酸特拉唑嗪分成２３，２３０，２０００和４０００ｍｇ／ｋｇ４个剂量组，灌胃给药。最高剂量组在１２7２ｈ５个时间点的微杉细胞率分别为１．８３，２．５０，１．８０，２．３３和１．６０％高中低剂量２１ｈ的微核率为１．６７，１．８３和２，１７油。空白、溶剂和阳性对照组为２．０，１．６７和３６．３３％。各剂量组分别与溶剂对照比较无显著性差异（Ｐ＞０．０５），实验结果表明盐酸特拉唑嗪未诱发小鼠骨髓细胞微核增加。     

微核形态用于区分非整倍体毒剂和染色体断裂剂的研究

目的 :通过比较非整倍体毒剂和染色体断裂剂诱导的各种微核形态类别的差异 ,探讨以微核形态指标区分两类诱变剂的可能性。方法 :对 6种标准诱变剂 (非整倍体毒剂 :秋水仙碱 ,长春新碱 ;染色体断裂剂 :环磷酰胺 ,丝裂霉素C ,乙基磺酸甲酯 ,γ射线 )诱导的小鼠骨髓红细胞微核 ,进行形态学分类分析。结果 :①非整倍体毒剂诱导的环形微核率显著高于染色体断裂剂 (分别为 33 8± 2 8,17 4± 8 3;P =0 .0 0 3) ,而圆形微核率显著低于后者 (分别为 5 1 6± 6 5 ,72 3± 9 1;P <0 .0 0 0 1) ,肾形微核率有高于染色体断裂剂诱导的微核的趋势 ,但差别无显著性 (分别为 14 6± 6 7,10 2± 6 3,P =0 .0 7) ;两类诱变剂诱导的 3种类别的微核 95 %可信区间差异很大 ,其中圆形微核率和环形微核率完全分离 ;②得到通过微核形态区分两类诱变剂的判别方程。结论 :微核的圆形、环形和肾形的发生率可用于区分非整倍体毒剂与染色体断裂剂的参考     

59. Protectivc effect of melatonin on genetic damage by chemical mutagen and the influence on cell prolife-ration kenetics

Objective: In this study, we observed the effect of melatonin on the frequency of sister chromatid exchange, micronucleus formation of binuclear cell in lymphocyte from human peripheral blood in vitro, micronucleus formation of mouse bone marrow polycychromatic erythrocyte in vivo, which were induced by chemical mutagen, and lymphocyte proliferation kenetics in vitro. Methods: ① Lymphocytes were cultured in vitro in the presence of 0.01,0.10,1.00 mmol/L melatonin, mitomycin C(MMC) (positive control), 0.5% ethanol (negative control)and 0.01,0.10,1.00 mmol/L melatonin plus MMC for 72 h at 37℃±1℃. Lymphocytes were examined for the frequence of SCE, mitotic index, cell proliferation cycle, cell cycle ratio and proliferation index. ② Lymphocytes were cultured in vitro in the presence of 0.01,0.10,1.00 mmol/L melatonin, mitomycin C(MMC) (positive control), 0.5% ethanol (negative control) and 0.01,0.10,1.00 mmol/L melatonin plus MMC for 44 h at 37℃±1℃. Then each culture was given cytochalasin B, which was cultured to 72 h. Binuclear lymphocytes were examined for the micronucleus rate. ③ The mice were administered with 0.1, 1.0,10.0 mg/kg*bw melatonin and distillated water (negative control) respectively for 7 d, then were given melatonin plus cyclophosphamide (CP) (positive control) for 2 d since the eighth day. The rate of micronulclei of mouse bone marrow polycychromatic erythrocyte was examined. Results: ① The frequences of sister chromatid exchange of lymphocytes which were cultured in the presence of 0.01,0.10,1.00 mmol/L melatonin compared with negative control exhibited no statistical significance. ② The SCE of cells treated with melatonin plus MMC compared with positive control were markedly decreased. ③ The mitotic indices of lymphocytes cultured in the presence of 0.10,1.00 mmol/L melatonin were lower than negative control. The proliferation index was significant lower than negative control only in the culture exposed to 1.00 mmol/L melatonin. ④ The proliferation cycle of lymphocyte cultured in the presence of 1.00 mmol/L melatonin exhibited an increase in the percent of cells in their first division, and concomitant significant decrease in their third or later division. which were increased in their second division in cells treated with melatonin of three concentration respectively. The ratio between the first and third or later division, between the second and third or later division of lymphocytes exposed to 1.00 mmol/L melatonin were higher than negative control. ⑤ The micronucleus rates of binuclear lymphocytes treated with 0.01,0.10,1.00 mmol/L melatonin plus MMC were lower than positive control, of which the inhibitory rates of micronuclei were 14.37%, 22.17% and 31.34%, respectively. ⑥ The micronucleus rates of mouse bone marrow polycychromatic erythrocytes exposed to 0.1,1.0,10.0 mg/kg*bw melatonin plus CP were lower markedly than positive control, in which it exhibited a significant and concentration－depended decrease, of which the inhibitory rates of micronuclei were 28.89%, 47.73% and 69.96%, respectively. Conclusion: In vitro assay. It seems that melatonin has not only no genotoxic, but also anti-mutagenic effect on lymphocyte. It can inhibit the increase of frequency of SCE in lymphocyte and micronucleus rate of binuclear lymphocyte induced by MMC, and micronucleus rate of mouse bone marrow induced by CP at some concentiations. It can inhibit the lymphocyte proliferation of mitogen stimulated and has some influence on cell proliferation kenetics at higher concentrations (1.00 mmol/L).     

STUDY ON THE ANTIMUTAGENIC EFFECT IN VIVO OF CORTEX ACANTHOPANASIA RADICIS

本文采用小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和小鼠精子畸形试验,探讨中药五加皮的体内抗诱变作用。结果表明,五加皮各剂量（１ｇ／ｋｇ,２ｇ／ｋｇ,４ｇ／ｋｇ）对ＭＭＣ诱发的微核率和精子畸形率均有明显的拮抗作用（Ｐ＜０．０１）,微核抑制率达５０．５％－７３．２７％,精子畸形抑制率高达７３．４５％－８４％。结果提示,五加皮具有拮抗ＭＭＣ诱发的体细胞和生殖细胞遗传损伤的作用。     

菘蓝对小鼠生殖细胞损伤的保护作用

目的: 研究菘蓝叶氯仿提取物对环磷酰胺(CP)引起的雄性小鼠生殖细胞损伤的保护作用.方法:通过精子畸形试验及精细胞微核试验.观察雄性小鼠的精于畸形率及精细胞微核率的变化.结果:菘蓝叶氯仿提取物本身对生殖细胞无毒性,而对CP引起的生殖细胞损伤有一定的保护性抑制作用.CP+菘蓝叶提取物100 mg/kg剂量组对精细胞微核的抑制率为{57.38%,}对精子畸形的抑制率为50.87%.结论:中药菘蓝具有减轻对小鼠生殖细胞遗传损伤的作用.     

致癌物和X射线对人支气管上皮细胞的遗传毒理作用

从组织块长出的人支气管上皮细胞培养于MCDB151无血清培养基中,利用非程序性DNA合成(UDS)和微核试验检测化学致癌物和X射线对人支气管上皮细胞的遗传毒理作用。直接作用致癌物MNNG对所测试的7例上皮细胞均可分别引起UDS或微核增高,并具有剂量反应关系。X射线对4例都可引起微核增高。然而间接作用致癌物NNK和BaP引起的反应有明显个体差异。UDS试验中,NNK处理5例中有3例增高,BaP处理的4例中有3例增高。微核试验表明NNK处理的5例中3例为阳性,BaP处理4例中3例为阳性。本实验结果提示,NNK,BaP和X射线可能是人支气管上皮细胞潜在的致癌物。     

多遗传学终点的遗传毒性试验组合的建立

目的：建立Ames波动试验、中国仓鼠肺成纤维（CHL）细胞体外微核试验和小鼠淋巴瘤细胞基因突变试验（MLA）方法,探讨其作为一套新的遗传毒性试验组合检测化合物诱变性的可能性。方法：在Ames波动试验中,用TA100沙门氏菌进行96孔板的Ames波动试验,非活化条件下以叠氮钠（SA）、活化条件下以环磷酰胺（CP）染毒处理,计数阳性孔数并进行卡方检验。在CHL细胞体外微核试验中,非活化条件下用丝裂霉素C （MMC）分别染毒处理4和24 h,活化条件下用CP染毒4 h,计数2000个细胞中含微核的细胞数,并进行卡方检验。在MLA中,小鼠淋巴瘤细胞经清除自发突变后,非活化条件下用MMC、活化条件下用CP分别染毒处理3 h,计算相对存活率（RS）、相对悬浮增长率（RSG）、相对总增长率（RTG）、平板效率PE0、PE2、突变率（MF）、小集落比例（SC）。2结果：Ames波动试验中SA和CP在各自试验条件下阳性孔数均较对照组显著增加（χ^2＞6.63,P＜0.01）,量效关系明显。CHL细胞体2外微核试验中,MMC和CP在各自试验条件下均引起微核率显著升高（χ^2＞6.63,P＜0.01）,量效关系明显。MLA中MMC和CP在各自＋/-试验条件下均引起L5178Y 3.7.2C-tk^＋/- 细胞的PE、RS、RSG和RTG呈剂量依赖性下降,MF呈剂量依赖性升高,高出溶剂对照的2倍以上。结论：此3种短期遗传毒性试验方法可互为补充、相互验证,其组合应用可提高检出化合物遗传毒性的准确性,有望得到进一步推广应用。     

叶绿酸铜钠的抗诱变作用及其机理

本研究运用小鼠骨髓细胞微核试验评价叶绿素的衍生物－叶绿酸铜钠（Ｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌｉｎ Ｓｏｄｉｕｍ－Ｃｏｐｐｅｒ Ｓａｌｔ，ＣＨＬ）抑制间接诱变剂环磷酰胺（Ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ，Ｃｐ）的诱变作用。实验根据小鼠给予ＣＨＬ和ＣＰ的时间，设计４种不同程序，以此探索ＣＨＬ抗诱变作用的机理。实验结果表明，ＣＨＬ本身无诱变作用，但对ＣＰ诱导微核作用有明显的抑制。同时也提示ＣＨＬ对ＣＰ的抗诱变作     

藏茵陈总萜酮的致突变及抗突变作用

目的：研究藏茵陈总萜酮的致突变及抗突变作用。方法：致突变实验采用Ames实验及小鼠体内微核实验。Ames实验采用常规掺入法;微核实验采用连续灌胃给药10 d的骨髓嗜多染红细胞微核计数法。抗突变实验采用体内、体外两种方法,体外法选用TA100及TA102菌株与环磷酰胺(每皿200 μg)和丝裂霉素C(每皿2 μg)共孵育30 min后,分别给予藏茵陈总萜酮每皿156、312、625、1 250及2 500 μg,检测其对阳性剂诱发的已突变菌落的保护作用;体内实验采用藏茵陈总萜酮25、50及100 mg/kg小鼠连续灌胃给药10 d后,给予40 mg/kg环磷酰胺或2 mg/kg丝裂霉素C,计算微核率,检测其对未发生突变的骨髓细胞的保护作用。结果：致突变实验中,藏茵陈总萜酮在每皿< 2 500 μg剂量下,未诱发Ames实验各菌株回变菌落数增加;在每皿< 40 mg/kg剂量下,未诱发骨髓嗜多染红细胞微核率增高。抗突变实验中,藏茵陈总萜酮在每皿625~ 2 500 μg范围内,可使阳性致突变剂环磷酰胺和丝裂霉素C所诱发的高回变菌落数出现明显降低;藏茵陈总萜酮在50~ 100 mg/kg剂量范围,可使阳性剂环磷酰胺或丝裂霉素C所诱发的高微核率出现明显降低。结论：本实验条件下,藏茵陈总萜酮未表现出诱导基因突变和染色体畸变作用,且有显著的抗突变作用。     

体外双核细胞微核试验的应用研究

本实验用双核细胞微核试验(简称CB徽核试验)检测不同类型诱变剂对体外培养细胞微核率的影响。实验筛选了9株体外培养细胞,发现其中以BALB/c-3T3和CHL细胞的实验效果较好。丝裂霉素、硫酸镍、苯并[a]芘和香烟烟雾凝聚物等不同类型的诱变剂能直接或间接诱使细胞微核的形成。实验显示BALB/c—3T3细胞有部分代谢活化苯并[a]芘能力,CHL细胞则可能缺乏这种活性。实验还表明CB微核试验的稳定性和灵敏度都高于普通微核法,适用于检测多种类型的环境诱变剂的遗传损伤作用。