人单克隆抗独特型抗体诱导动物产生有中和活性的抗HFRSV抗体

在建立稳定分泌具有肾综合征出血热病毒(HFRSV)抗原内影像的抗独特型(αId)人单抗(Ab_2β)的基础上,用纯化的αId人单抗免疫6只BALB/c小鼠和2只大耳白兔,均有效地诱导产生特异性的抗HFRSV抗体(Ab_3)(IFAT),抗体滴度随加强免疫次数的增加而增高。αId诱导的抗HFRSV抗体与HFRSV野鼠型76/118株和家鼠型L99株均起反应,其中免疫小鼠血清具有一定效价的血凝抑制活性和中和活性。从而进一     

首次从汉中地区褐家鼠分离出流行性出血热病毒及其抗原性鉴定

应用细胞培养技术和免疫荧光(IF)检查方法,从汉中地区褐家鼠分离出EHF 病毒R_6、R_(10)株。分离的病毒能在鼠体和细胞两个不同宿主系统连续稳定传代;检查10份确诊的EHF 病人双份血清,抗体滴度均有4倍以上增高;病毒抗原能与EHF病人阳性血清、兔抗KHFV76-118株免疫血清及多个单克隆抗体(M_cAb)反应,而不能与正常人和非出血热病人血清反应;兔抗KHFV76-118株免疫血清能阻断病毒株抗原同EHFM_cAb4E_7的阳性反应,抗呼肠弧病毒Ⅰ～Ⅲ免疫血清、抗类环状病毒免疫血清、抗CMV 免疫血清和抗HSV 免疫血清均无此阻断作用;用感染的VeroE_(-6)细胞作超薄切片,电镜下观察到大小约100nm 典型病毒颗粒;M_cAb 型别鉴定试验确定为EHFV野鼠型毒株。     

轮状病毒单克隆抗体的研究和鉴定

运用杂交瘤技术,制备出7株分泌抗人轮状病毒短型S_2株单克隆抗体的杂交瘤,其中6株分泌IgG_(2a),1株分泌IgG_(2b)抗体。7株杂交瘤培养上清的免疫荧光抗体(IFA)滴度为1:32～256,腹水IFA滴度为1:8000～25600。双夹心ELISA腹水抗体滴度达10~(-4)～10~(-6)。7株McAb均与HSV、CMV、RSV、ADV等其它常见病毒无交叉反应。7株McAb均能与HRV长型Wa株反应,滴度为10~(-3)～10~(-6)。将其中二株或数株McAb混合后用ELISA检测其相应的OD值较每一单株为高,但相加指数(AI)值均在10%左右。结果表明,7株McAb均属RV群特异性抗体,但各自作用的抗原决定簇可能稍有差异。     

流行性出血热患者血浆和尿液中EHF病毒的分离与鉴定

用 Vero-E。细胞从164份流行性出血热患者血浆或尿液中分离到126株流行性出血热病毒(EHFV)。经 IFA 和 ELISA 法检查,病毒在细胞培养中稳定地增殖,病毒效价随传代次数增加而升高,随意对其中两株病毒(来源于血浆的 EHFV_(435)株和尿液的 EHFV_(114)株)进行了初步血清学鉴定和单克隆抗体分析发现:①对恢复期血清抗体效价较急性期有4倍以上升高;②抗原性与EHFVA_9株和汉坦病毒76-118株关系密切;与来自湖北疫区黑线姬鼠的病毒有抗原性差异;③病毒的感染性能被兔抗 EHFVN 清所中和。④当病毒传至第7代时,电镜下可见圆形和椭圆形颗粒。以上结果表明早期患者约80％存在病毒血症。还提示肾损害与病毒的作用有关。     

慢性牙周炎患者抗伴放线放线杆菌IgG滴度改变的临床意义

目的：明确慢性牙周炎(chronic periodontitis, CP)患者血清抗伴放线放线杆菌(Aggregatibacter actinomycetemcomitans, Aa)血清c型的抗体反应并探讨其与牙周临床指标的关系。方法: 采集30例CP患者和45例牙周健康者的空腹静脉血, 同时收集CP患者的龈下菌斑和非刺激性全唾液用于Aa的检测(PCR方法), 应用酶联免疫吸附方法（ELISA）测定血清中抗Aa血清c型IgG抗体滴度。结果: CP组和健康对照组血清抗Aa血清c型抗体检出率均为100%。CP组IgG抗体滴度高于健康对照组,差异有统计学意义［(10.9 ± 1.9） vs （9.1 ± 1.8）, P=0.000］; 同时CP组抗体滴度升高率也高于健康对照组, 差异有统计学意义(23.3% vs 0%, P=0.003)。龈下菌斑或唾液Aa检出阳性的7例慢性牙周炎患者血清IgG抗体滴度(12.6 ± 1.6)高于Aa阴性患者(10.4 ± 1.7), 差异有统计学意义(P=0.005)。 CP患者血清抗Aa IgG抗体滴度与全口平均探诊深度呈正相关(r=0.344, P=0.068)。结论: 血清c型为CP患者定植的Aa的重要血清型;CP患者血清抗Aa抗体并非简单的保护作用。     

中国流行性出血热病毒的抗原性研究——不同毒株间交叉免疫荧光和交叉中和试验

用不同来源EHF病毒毒株免疫家兔制备相应的抗血清,对各株病毒进行交叉免疫荧光测定和交叉中和试验,结果显示交叉免疫荧光法难以对我国不同来源病毒抗原性差异作出型别判断。交叉中和试验,根据同株与异株中和抗体滴度相差4倍的判断标准,可将病毒分为三个不同的类型:Ⅰ型(野鼠型):Chen、A_(96)、A_3及汉坦76-118;Ⅱ型(家鼠型):R_(22);Ⅲ型(中间型):H_(8205)、L_(99)。Ⅰ型抗体对Ⅱ型(R_(22))病毒与Ⅰ型病毒有相同的中和效力。反之,R_(22)(Ⅱ型)抗体对Ⅰ型病毒的中和滴度则低于同型的4倍;Ⅲ型L_(99)株兼有部份Ⅰ型及Ⅱ型病毒相同水平的中和抗体滴度,而H_(8205)株又缺乏Ⅱ型及Ⅰ型中另一些毒株有效中和能力。     

肾综合征出血热病毒血凝活性的初步研究

目前,我国已从多种宿主动物和不同疫区患者血液中分离出肾综合征出血热病毒(HFRS-V),并已证实这些毒株的毒力及抗原性并不完全一致。1984年,汤一苇、TF Tsai等曾报道朝鲜出血热(KHF)病毒(76/118)株具有血凝活性,但迄今尚未见对我国分离的HFRS-V血凝活性研究的报道。为了探讨我国不同宿主来源的HFRS-V有无血凝活性、血凝活性与毒力的关系、不同毒株血凝素的特异性及其相互关系,我们在将国内各主要代表毒株(曾经McAb检查具有抗原性差异)和KHF76/118株适应于乳鼠的基础上,参照汤一苇等报道的方法加以简化,从感染乳鼠脑制备血凝素,对这些毒株的血凝活性进行了研究。 结果表明,我国自黑线姬鼠、家描和病人血液中分离的HFRS-V均具有不同程度的血凝活性,血凝滴度的高低似与病毒对乳鼠的致病力有关。在野鼠型毒株,血凝活性均达到一定滴度,如自安徽分离的陈株、C_4株,血凝滴度达1:128,略高于76/118侏(1:64),黑龙江的H8205株血凝滴度为1:32～1:64,四川的A_(216)株也达1:32。而家鼠型毒株,如自河南轻型出     

上海地区及浙江省平湖县嗜肺军团菌感染的血清学调查

1986年5～8月,我们采用间接血凝法(PHA)测定住院患者431例及健康人614名血清嗜肺军团菌1～6型抗体滴度,其中抗体滴度≥1:64者56例,占5.4％;滴度≥1:128者16例,占1.5％。滴用≥1:118者中,住     

咸宁市肾综合征出血热患者血清分型探讨

采用血凝抑制试验(HI)对成宁市肾综合征出血热(HFRs)患者血清进行了分型．结果表明；该地HYRS患者血清抗R血凝素的HI抗体漓度为抗A血凝素的2．2倍，但不同临床型患者的血清型无显著性差异，故认为谈地为混合型HYRS疫区，并略偏重于家鼠型。     

混合性结缔组织病患者血清抗鸡卵核中72000蛋白抗体测定及其临床意义

目的:通过检测混合性结缔组织病(MCTD)患者血清抗鸡卵核中72000蛋白抗体,研究其与MCTD有关指标的关系,以探讨该抗体在MCTD发病中的作用.方法:收集MCTD患者、非MCTD结缔组织病患者和正常人群血清.用Dot-ELISA法测定抗鸡卵核中72000蛋白抗体及其滴度.结果:88例MCTD患者血清中有71例检出该抗体,阳性率为80.7%(71/88);正常对照人群100例均为阴性;皮肌炎和多发性肌炎(DM/PM)76份,硬皮病(PSS)48份和系统性红斑狼疮(SLE)116份血清无交叉反应出现.在MCTD患者血清中,该抗体的几何平均倒数滴度(GMRT)治疗前高于治疗后,与疾病活动指数、ANA滴度及抗nRNP抗体滴度呈显著正相关.结论:MCTD患者血清抗鸡卵核中72000蛋白抗体检测,对MCTD诊断有较高的价值,在治疗随访中也可起到一定的临床提示作用.     

免疫荧光试验与反向被动血凝抑制试验测定乙型脑炎抗体对比分析

目的：比较两种乙型脑炎实验室诊断方法。方法：用间接免疫荧光法和反向被动血凝抑制试验检测疑似乙型脑炎患者的血清标本。用SPSS统计软件分析两者的特异性和敏感性。结果：50份临床疑似乙型脑炎患者的血清两种方法检测结果，IgG抗体检出率均为86％。无统计学意义。IgG抗体几何平均滴度RPHI法略高于IFA，但无统计学意义。IgM抗体阳性率IFA为78％；RPHI为76％。RPHI法的几何平均滴度为31，6。IFA的几何平均滴度为30，3，几何平均滴度无统计学意义。两种方法的相关性检测．相关系数分别为0．835和0，696。结论：IFA和RPHI法用于检测乙型脑炎抗体阳性检出率和几何平均滴度差异均无统计学意义。由于RPHI法无需特殊仪器设备。操作简便易行。IFA法除需要一台较好的荧光显微镜外，其操作简便，适于病人的早期诊断。     

系统性红斑狼疮患者血清抗鸡卵核中42000 蛋白抗体的测定及其临床意义

目的:通过检测系统性红斑狼疮(SLE)患者血清抗鸡卵核42000蛋白抗体,研究其与SLE有关指标的关系,以探讨该抗体在SLE发病中的作用.方法:收集SLE患者、非SLE结缔组织病患者和正常人群血清.用Dot-ELISA方法测定抗鸡卵核42000蛋白抗体及其滴度.结果:116例SLE患者血清有78例检出该抗体,其阳性率为68.2%(78/116);正常对照人群100例未见假阳性;皮肌炎和多发性肌炎(DM/PM)76份、硬皮病(PSS)48份和混合性结缔组织病(MCTD)88份血清均无交叉反应出现.该抗体的几何平均倒数滴度(GMRT)在活动期高于缓解期,与疾病活动指数和ANA滴度呈显著正相关,与C3呈负相关,与抗ds-DNA抗体滴度无明显相关.结论:血清抗鸡卵核42000蛋白抗体的检测,对SLE诊断和随访可起到一定的临床提示作用.     

流行性出血热防治人员血清中特异性抗体的调查

<正> 国外在分离朝鲜出血热病原方面已获得成功,并提出应用感染黑线姬鼠的肺切片或病毒感染的A_(549)细胞为抗原,均能用间接免疫荧光试验法(IFA)检测朝鲜出血热病原体的抗体。今年我国出血热病原分离亦获得成功。我们使用我国分离所获得的毒株感染黑线姬鼠,以受感染的黑线姬鼠肺组织冰冻切片为抗原,用间接免疫荧光技术对我省疫区出血热防治人员进行血清中特异性抗体的测定,证实在部分出血热防治人员的血清中含有低滴度的出血热特异性抗体,提示存在隐性感染的可能。现将这次调查结果报告如下:     

侵袭性牙周炎患者抗伴放线聚集杆菌血清c型IgG滴度分析

目的：分析侵袭性牙周炎（aggressive periodontitis, AgP）患者血清中的抗伴放线聚集杆菌（Aggregatibacter actinomycetemcomitans, Aa）血清c型IgG抗体滴度及其影响因素。方法：采集62例AgP患者（18例切磨牙型,44例广泛型）和45例牙周健康者的空腹静脉血,同时收集AgP患者的龈下菌斑和非刺激性全唾液用于Aa的检测（PCR方法）,应用酶联免疫吸附方法测定血清中抗Aa血清c型IgG抗体滴度。结果：AgP组和健康对照者血清中的抗Aa血清c型IgG抗体检出率均为100%,AgP组的抗体滴度为11.1±1.9,显著高于健康对照组（9.1±1.8,P<0.01）。切磨牙型AgP患者的抗Aa血清c型的IgG抗体滴度和抗体升高率与广泛型比较差异无统计学意义。唾液或龈下菌斑样本Aa检出阳性的AgP患者抗体滴度显著高于Aa阴性患者（11.9±1.3 vs. 10.7±2.1, P<0.05）。结论：Aa血清c型为我国AgP患者定植的Aa的重要血清型,广泛型AgP患者血清抗Aa抗体滴度与切磨牙型AgP患者无明显差异。     

42例莱姆病抗生素治疗效果分析

目的探讨临床使用抗生素治疗不同类型、不同阶段莱姆病患者的效果,观查治疗前后莱姆抗体滴度的变化及其对临床转归的意义。方法对确诊的42例不同类型、不同阶段莱姆病患者使用抗生素治疗,治疗前后采用间接免疫荧光试验（IFA）、蛋白印迹试验（WB）方法,检测患者血清和脑脊液（CSF）中抗伯氏疏螺旋体IgM、IgG抗体。以自身对照方法,观测治疗后临床转归和抗伯氏疏螺旋体抗体滴度的动态变化。结果使用抗生素治疗早期局限性病变和急性神经系统病变患者,临床可治愈或好转,总有效率为83.33%。治疗一年后患者血清学反应转阴者32例。晚期中枢神经系统发生实质性受累者治疗效果不佳,血清及CSF抗体滴度变化均不明显。结论早期确诊对患者的治疗至关重要。治疗越早,效果越好,抗体滴度的变化可作为临床疗效的佐证之一。晚期中枢神经系统实质性受累者,难以治愈。     

乙型肝炎患者抗核抗体检出率调查

目的 检测乙型肝炎患者血清中抗核抗体,了解阳性检出率及滴度水平,为规范使用干扰素治疗乙型肝炎和监测治疗中的不良反应提供依据.方法 采用德国欧蒙医学实验诊断有限公司滴定平板间接免疫荧光技术,以复合生物薄片(Hep-2细胞、猴肝)为基质,分别检测228例未经干扰素治疗的乙列肝炎患者和50例健康体检者血清中抗核抗体及滴度水平,以1:100血清稀释度呈现典删荧光模型为阳性判断标准,无荧光者判为阴性.结果 (1)228例乙型肝炎患者血清共检出抗核抗体阳性51例,阳性检出率22.4%(51/228).其中乙肝"大三阳"患者血清59例,抗核抗体阳性18例(18/5930.5%).乙肝"小三阳"患者血清142例,抗核抗体阳性29例(29/142 20.4%).HBsAg、抗-HBc两项阳性患者血清27例,抗核抗体阳性4例(4/27 14.8%).阳性血清滴度分布1:100 39例,1:320 10例,1:1000 2例.51例抗核抗体阳性血清共出现荧光模型9种,以核均质型、核颗粒型为主.(2)50例健康体检者血清共检出抗核抗体阳性2例,阳性检出率4%(2/50).其中滴度1:100 1例,1:320 1例.(3)乙型肝炎患者血清抗核抗体阳性检出率与健康体检者比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 未经干扰素治疗的乙型肝炎患者血清中抗核抗体阳性率(22.4%)明显高于健康对照组(4%).在选择干扰素治疗乙型肝炎前,检测患者血清中抗核抗体及滴度,对治疗的适应症和监测治疗中的不良反应很有必要.     

从汉坦病毒吸附的特异性B淋巴细胞扩增人抗体可变区基因

从肾综合征出血热恢复期患者外周血中分离人外周血单个核细胞(hPBMNs)贴壁除去吞噬细胞及粒细胞,用汉坦病毒76-118株包被的6孔板吸附分泌抗出血热抗体的特异性B淋巴细胞,提取该种细胞总RNA后,反转录成cDNA,用人抗体重链可变区(VH)基因和轻链可变区(VL)基因的通用引物扩增出VH及VL基因,为今后用噬菌体抗体库技术制备抗汉坦病毒抗体等研究工作奠定了基础。     

流行性出血热血清流行病学的研究——(一)患者血清与几种鼠肺抗原的特异性关系

应用间接荧光抗体技术用不同流行性出血热(EHF)疫区的三种鼠肺抗原对安徽EHF患者血清抗体进行检验,其结果如下: 1、用江西省EHF疫区的黑线姬鼠鼠肺抗原检查了25例安徽EHF病人的双清,急性期(1～7天)血清的阴性率为20％(滴度≥1:80);恢复期(19～4天)血清的阳性率为88％(滴度≥1:80),并且两期的抗体滴度有明显的动态化。一般为4倍增高。其中15例达16倍以上。可见两者具有特异的血清学关系。 2、用四川省EHF疫区褐家鼠鼠肺抗原重复检查上述双份血清,得到非常致的结果。 3、通过对另外11份恢复期血清的检查,还确定了辽宁EHF疫区棕背鼠平鼠肺抗顾与上述黑线姬鼠鼠肺抗原的血清学关系。从而证实了辽宁、四川,江西和徽四省EHF的病毒病原的抗原性相同。     

肺部感染患者嗜肺军团菌感染情况的研究

本文用DFA法检测了98例肺部感染患者的痰,32例纤维支气管镜检查患者支气管刷取物的嗜肺军团菌Lp Ⅰ-Ⅳ型抗原,结果均为阴性。用IFA法检测了277名正常人,32例纤维支气管镜检查者,53例慢性呼吸系统患者的362份血清,35份血清示Lp Ⅰ-Ⅳ型低滴度IgG抗体;检测了92例肺部感染患者的184份急性期和恢复期双份血清,Lp Ⅰ-Ⅳ型IgM抗体均阴性,14份血清示Lp Ⅰ-Ⅳ型低滴度IgG抗体。提示军团病杆菌感染在北京地区并非常见。     

野兔自然感染流行性出血热的调查

为证实流行性出血热(EHF)流行地区常见的其他野生小型兽类能否被感染,我们先后对疫区猎获的野兔进行调查,从野兔体内检出了EHF抗原和抗体,证明野兔能自然感染。实验采用的野兔来源于湖北EHF疫区的咸宁、潜江等县。受试血清有EHF病人恢复期血清,抗体滴度在1∶5120～10,240;正常人血清;猎人血清。特异性抗原抗体分别为:EHFV HA_(1018)株鼠脑抗