加味涤痰汤对记忆障碍小鼠神经细胞凋亡和行为学影响

目的：观察加味涤痰汤对造模小鼠学习记忆障碍行为学影响并探讨其作用机制。方法：昆明种雄性小鼠72只,分为3组即正常对照组,模型对照组,加味涤痰汤组,每组24只,采用东莨菪碱制备记忆获得障碍模型,应用跳台实验对各组小鼠进行行为学检测,应用流式细胞仪对各组小鼠进行大脑神经细胞凋亡检测。结果：加味涤痰汤能明显减少行为学检测中的错误次数,延长潜伏期,并能明显降低大脑神经细胞凋亡率。结论：加味涤痰汤对学习记忆障碍有明显改善作用,其作用机制可能是通过凋亡基因的表达从而达到改善记忆功能的作用。     

涤痰化瘀汤诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡作用的研究

目的 :研究涤痰化瘀汤药物血清诱导人食管癌Eca - 1 0 9细胞凋亡作用。方法 :采用MTT法测定细胞生长抑制率 ,通过流式细胞仪 (AnnexinⅤ检测 )、电镜观察凋亡细胞。结果 :涤痰化瘀汤药物血清能明显抑制人食道癌Eca - 1 0 9细胞生长 ,AnnexinⅤ检测及电镜观察结果均表明药物血清能诱导人食管癌Eca - 1 0 9细胞凋亡。结论 :涤痰化瘀汤能诱导人食管癌Eca- 1 0 9细胞凋亡 ,有望用于临床治疗食管癌     

宁心涤痰汤通过AMPK/NF-κB通路抑制巨噬细胞分化改善血管再狭窄的机制研究

目的 研究宁心涤痰汤通过AMPK/NF-κB通路抑制巨噬细胞分化改善经皮冠状动脉介入术（PCI）后血管再狭窄的分子机制。方法 将人急性单核细胞白血病细胞（THP-1）体外诱导分化成巨噬细胞,并分为空白组、模型组、宁心涤痰汤低、中、高剂量组和辛伐他汀组。除空白组外,余下各组通过氧化修饰型低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导构建泡沫细胞模型,并给予相应的含药血清进行干预。分别检测各组细胞内胆固醇的含量,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞上清中炎症因子[白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)]的含量,流式细胞术检测巨噬细胞表型（CD11b+CD86+）及凋亡的影响,Western blotting检测细胞中AMPK/NF-κB通路中相关蛋白的表达水平。结果 与空白组比较,模型组中游离胆固醇（FC）、总胆固醇（TC）、IL-6、IL-1β、TNF-α的含量升高和CD11b+CD86+及凋亡的比例显著升高,细胞内p-AMPK及细胞质NF-κB p65蛋白的表达显著降低,细胞核NF-κB p65蛋白的表达显著上调,差异均有统计学意义（P &l...     

黄芪注射液通过调节JNK和NF-κB通路抑制视网膜神经节细胞凋亡

目的:观察黄芪注射液对视神经牵拉伤大鼠视神经保护作用并探讨其作用机制。方法:将66只SPF级健康Wistar雄性大鼠按随机数字表法分为假手术组、视神经牵拉伤模型组及黄芪注射液治疗组3组各22只大鼠;横向定量牵拉法制作大鼠视神经损伤模型,假手术组仅暴露视神经不予牵拉;术后治疗组给予黄芪注射液腹腔注射,模型组给予生理盐水腹腔注射;治疗14 d后取大鼠视网膜组织,利用蛋白免疫印迹法检测JNK和NF-κB表达变化,并采用real time-PCR方法检测p75NTR的mRNA水平。结果:与假手术组比较,视神经牵拉伤模型大鼠视网膜组织p75NTR mRNA水平及JNK蛋白表达明显上升,NF-κB蛋白表达显著下降;给药14 d后与模型组比较,黄芪注射液治疗组大鼠视网膜组织p75NTR mRNA水平及JNK蛋白表达显著减少,NF-κB蛋白表达明显升高。结论:黄芪注射液具有视神经保护作用,其机制可能与抑制p75NTR mRNA的表达及JNK蛋白水平、促进NF-κB的蛋白表达有关。     

导痰汤通过NF-κB信号通路抑制人脐静脉内皮细胞ICAM-1表达的研究

目的:研究导痰汤能否通过对核因子-κB(NF-κB)信号通路的调节而干预ICAM-1的表达,以揭示导痰汤治疗动脉粥样硬化的机制。方法:通过PCR和Western blot等方法,观察导痰汤对肿瘤坏因子-α(TNF-α)刺激脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养内皮细胞细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和NF-κB表达的影响。结果:TNF-α诱导组ICAM-1和NF-κB显著高于空白对照组和导痰汤对照组(P<0.01);使用导痰汤含药血清或吡咯烷二硫氧基甲酸(PDTC)处理后,ICAM-1和NF-κB p65表达显著下降(P<0.05,P<0.01);NF-κB活性与ICAM-1 mRNA水平呈显著正相关(r=0.716,P<0.01)。结论:导痰汤可以调节NF-κB信号通路,从而有效抑制TNF-α刺激所致的脐静脉内皮细胞ICAM-1的表达。     

竹节参总皂苷通过调节AMPK/Sirt1/NF-κB通路抑制衰老大鼠心肌细胞凋亡的作用研究

研究竹节参总皂苷(saponins extracted from Panax japonicus,SPJ)对自然衰老大鼠心肌细胞凋亡的调节作用及其作用机制。将SD雄性大鼠随机分为青年对照组、自然衰老组、SPJ低剂量组、SPJ高剂量组,每组10只。自然衰老组、SPJ低、高剂量组从18月龄开始分别灌胃给予生理盐水、SPJ 10,60 mg·kg~(-1)·d-1,每周灌胃6 d,持续6个月至24月龄处理动物。HE染色观察各组大鼠心肌形态;Tunel法检测心肌细胞凋亡;Western blot检测各组大鼠心肌组织中Bcl-2,Bax,IL~(-1)β,TNF-α,AMPK,p-AMPK,Sirt1,Ac-NF-κB p65蛋白表达。SPJ能有效改善自然衰老大鼠心肌纤维的排列紊乱,减少炎性细胞浸润,抑制心肌细胞凋亡。同时,SPJ能明显抑制自然衰老过程中心脏组织Bax,IL~(-1)β,TNF-α,Ac-NF-κB p65的表达,促进Bcl-2,Bcl-2/Bax,p-AMPK/AMPK,Sirt1蛋白表达。SPJ可有效抑制自然衰老大鼠心肌细胞凋亡,其作用机制可能与调节AMPK/Sirt1/NF-κB通路介导的炎症反应有关。     

枸杞多糖通过抑制NF-κB/NLRP3通路减少视网膜色素变性小鼠感光细胞凋亡（英文）

目的 探讨枸杞多糖可否通过抑制核因子激活的B细胞的κ-轻链增强子/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NF-κB/NLRP3)信号通路减少视网膜色素变性(RP)小鼠视网膜光感受器细胞的凋亡。方法 (1)体外实验将小鼠视网膜神经节细胞(661W细胞)分为正常组、模型组、枸杞多糖低剂量组(40 mg/L)、中剂量组(80 mg/L)、高剂量组(160 mg/L)和阳性药物对照组(NLRP3抑制剂,160 mg/L);分别用50、100、200和400μmol/L四种剂量的H₂O₂干预661W细胞,选出最佳H₂O₂浓度(200μmol/L)造模,细胞计数试剂盒CCK-8测定细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,免疫荧光检测NLRP3标志物的表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫印迹法(WB)检测细胞凋亡标志物的表达。(2)选用C57/BL6小鼠和Rd10小鼠进行体内实验,分组为正常组、模型组、枸杞多糖低剂量组(0.08 g/d)、中剂量组(0.16 g/d)、高剂量组(0.32 g/d)和阳性药物对照组...     

涤痰汤糖尿病大鼠认知功能障碍的保护作用及机制

目的:观察涤痰汤对糖尿病大鼠认知能力的影响,并探讨其对PI3K-AKT信号通路相关因子的影响。方法:将30只SD鼠纳入研究,随机分为正常对照组、模型组及涤痰汤组,其中模型组及涤痰汤组大鼠均接受糖尿病模型制备,涤痰汤组用0. 88 g/m L涤痰汤药液灌胃,正常对照组及模型组用等量的生理盐水灌胃,3组均连续灌胃28 d。各组采用水迷宫评估大鼠学习记忆功能,Tunel检测神经元细胞调亡情况,HE染色法观察海马组织病理结构改变,Western blotting法检测各组海马组织PI3K、AKT、p-AKT、Bax及Bcl-2蛋白水平变化。结果:涤痰汤可明显改善糖尿病模型大鼠的学习记忆能力,抑制神经元凋亡率及Bax水平,增加海马区PI3K、p-AKT、Bcl-2蛋白表达。结论:涤痰汤可明显改善糖尿病模型大鼠的认知,其作用机制可能与介导PI3K/AKT信号通路有关。     

生慧汤通过调节神经递质改善阿尔茨海默病模型小鼠认知损伤和昼夜节律紊乱

目的 观察生慧汤对阿尔茨海默病（AD）小鼠血清中神经递质含量的影响,并探讨其改善AD认知损伤和昼夜节律紊乱的机制。方法 将27只APP/PS1小鼠随机分为模型组、多奈哌齐组和生慧汤组,另将9只野生型C57BL/6JNju正常小鼠设为空白组。多奈哌齐组（0.92×10^-4 g·kg^-1·d^-1）和生慧汤组（13.5 g·kg^-1·d^-1）分别灌服多奈哌齐和生慧汤,空白组和模型组灌服等体积的纯水,各组连续灌胃4周。采用Morris水迷宫实验和自主活动实验评估小鼠的认知功能和昼夜节律。采用液相色谱-质谱联用（LC-MS/MS）技术检测小鼠血清中乙酰胆碱（ACh）、胆碱乙酰转移酶（ChAT）、去甲肾上腺素（NE）、肾上腺素（E）、谷氨酸（Glu）、5-羟基吲哚乙酸（5-HIAA）和多巴胺（DA）的表达水平。结果 与空白组比较,模型组小鼠的平台潜伏期、游泳距离、初次抵达平台时间、光照活动时间、黑暗活动时间和总活动时间显著增加（P<0.01）,穿越平台次数和目标象限游泳时间则显著减少（P<0.01）;与模型组比较,多奈哌齐组和生慧汤组小鼠的平台潜伏期、游泳距离、初次抵达平台时间、光照活动时间、黑暗活动时间和总活动时间减少（P<0.05,P<0.01）,穿越平台次数和目标象限游泳时间增加（P<0.05,P<0.01）。与空白组比较,模型组小鼠血清中ACh、ChAT的表达水平显著减少（P<0.01）;与模型组比较,多奈哌齐组和生慧汤组小鼠血清中ACh、ChAT的表达水平增加（P<0.05,P<0.01）。与空白组比较,模型组小鼠血清中Glu的表达水平显著增加（P<0.01）,NE、5-HIAA和DA的表达水平显著减少（P<0.01）;与模型组比较,生慧汤组小鼠血清中Glu的表达水平降低（P<0.05）,NE、5-HIAA和DA的表达水平增加（P<0.05,P<0.01）;多奈哌齐组小鼠血清中NE、Glu、5-HIAA、DA的表达水平较模型组变化不明显,且差异没有统计学意义。各组小鼠血清中E的表达水平变化不明显,且差异没有统计学意义。结论 生慧汤可改善AD小鼠的认知损伤和昼夜节律紊乱,其机制可能与其调节神经递质有关。     

加味涤痰汤治疗卒中后抑郁疗效及对患者外周血NF-κB、 miR-146a表达的影响

目的:观察加味涤痰汤对卒中后抑郁的临床疗效及外周血NF-κB、miR-146a表达的影响。方法:收集60例卒中后抑郁患者,随机分为治疗组和对照组,另选取10名健康者作为健康对照组(下称健康组),用以观察外周血清NF-κB、miR-146a含量水平。两组患者均给予西药抗抑郁药艾司西酞普兰片口服治疗,治疗组加用加味涤痰汤治疗。两组治疗的观察时间为8周,治疗前后分别比较两组的汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评分、总疗效、Barthel评分、神经功能缺损评分(NIHSS评分)及对外周血NF-κB、miR-146a表达的影响。结果:HAMD评分上,治疗后两组均较前有差异(P<0.05),且治疗组改善较对照组明显,差异有统计学意义(P<0.05)。总疗效上,治疗组总有效率高于对照组(P<0.05)。Barthel评分上,治疗后均较前升高,且治疗组升高更明显(P<0.05);NIHSS评分上,治疗后均较前降低,且治疗组降低更明显(P<0.05)。两组NF-κB含量上,治疗前较健康组均升高(P<0.01),治疗后与治疗前比较,两组治疗后NF-κB含量水平均降低(P<0.01,P<0.05),以治疗组降低更为明显(P<0.05)。两组miR-146a水平上,治疗前较健康组均升高(P<0.01),两组治疗后与治疗前比较miR-146a水平均降低(P<0.05),两组治疗后miR-146a水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:加味涤痰汤对卒中后抑郁疗效确切,能有效改善患者卒中后的HAMD评分、总疗效、Barthel评分、NIHSS评分,其作用机制可能与抑制NF-κB、miR-146a的含量表达、阻断炎症反应有关。     

哈巴俄苷通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路减轻神经炎症诱导的神经元损伤

目的 研究哈巴俄苷对神经炎症诱导神经元损伤的作用。方法 采用MTT检测血管紧张素II（angiotensin II,Ang II）和哈巴俄苷对小鼠小胶质BV2细胞活性的影响;观察BV2细胞的形态变化;检测细胞上清液中炎症因子水平;采用免疫荧光检测核因子-κB p65（nuclear factor-κB p65,NF-κB p65）核易位以及CD86、髓系细胞触发受体2（triggering receptor expressed on myeloid cells 2,TREM2）的表达;采用Western blotting检测Toll样受体4（Toll like receptor 4,TLR4）、髓样分化因子88（molecule myeloid differentiation factor 88,MyD88）、诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）蛋白表达。分别使用脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）和TLR4抑制剂（TAK-242）进一步验证哈巴俄苷的作用机制。建立BV2-HT22细胞共培养模型,检测线粒体膜电位、细胞凋亡情况以及凋亡相关蛋白表达,研究哈巴俄苷对神经炎症引起的神经元损伤的影响。结果 Ang II显著上调BV2细胞TLR4、MyD88、IL-1β、TNF-α和iNOS蛋白表达（P＜0.01、0.001）,促进NF-κB p65入核（P＜0.001）,调节小胶质细胞表面炎症标志物CD86和TREM2的表达（P＜0.05）。哈巴俄苷和TAK-242可逆转Ang II或LPS诱导的BV2细胞的作用（P＜0.05、0.01、0.001）。此外,哈巴俄苷可显著下调BV2-HT22共培养模型HT22细胞中凋亡相关蛋白的表达（P＜0.01、0.001）,抑制HT22细胞凋亡（P＜0.05、0.001）。结论 哈巴俄苷可能通过抑制Ang II诱导的BV2细胞TLR4/MyD88/ NF-κB通路的激活来减轻炎症反应,进而缓解炎症引起的神经元细胞的凋亡。     

黄芩苷通过IκBα/NF-κB通路调节Aβ_(25-35)诱导的HT22细胞凋亡

目的探讨黄芩苷通过IκBα/NF-κB通路调节Aβ25-35诱导的HT22细胞凋亡。方法将HT22细胞分为空白组、模型组(40μmol/L Aβ_(25-35))、黄芩苷组(50μmol/L),多奈哌齐组(20μmol/L),给药组预处理1 h后加入Aβ_(25-35)。24 h后,MTT检测细胞存活率并观察细胞形态,Annexin V-FITF/PI检测细胞凋亡,Western blot法检测p-IκBα、p-NF-κB、TNF-α, IL-1β蛋白表达。结果与模型组比较,黄芩苷组与多奈哌齐组的细胞形态较完整、细胞密度较高、细胞间隙较小,细胞存活率升高(P0.01),细胞凋亡率降低(P0.01);p-IκBα,p-NF-κB, TNF-α, IL-1β蛋白表达较低(P0.05,P0.01)。结论黄芩苷可能通过抑制由Aβ_(25-35)激活的IκBα/NF-κB通路,减少TNF-α, IL-1β分泌,从而以减少神经元的凋亡,提高细胞的存活率。     

夹脊电针不同时间点干预对ALS-SOD1G93A小鼠腰髓TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的：观察通督调神针法对APP/PS1小鼠学习记忆行为及海马Aβ淀粉样沉积、炎症因子TNF-α的影响,探讨通督调神针法治疗AD的作用机制。方法：4月龄APP/PS1小鼠共16只,随机数字表达法分组,模型组8只,电针组8只。同龄野生型小鼠8只为对照组,以“百会”“印堂”“人中”三穴进行电针干预,每次30min,每天1次,共4周。水迷宫实验检测各组小鼠干预前的学习记忆功能情况,干预后,新物体识别实验的偏好指数检测各组小鼠学习记忆功能的表现,Western blot法测定海马区淀粉样蛋白(Aβ)、核因子激活的B细胞的κ-轻链增强(NF-κB)和肿瘤坏死因子-α蛋白(TNF-α)表达水平。结果：干预前,与对照组相比,在训练的第三、四天,模型组逃避潜伏期明显增加(P<0.01, P<0.05),穿越第三象限次数减少(P<0.01);各组小鼠的游泳速度无统计学差异。与对照组相比,实验第三、四天时,干预前电针组逃避潜伏期明显增长(P<0.01, P<0.01),穿越第三象限次数减少(P<0.01)。而模型组与电针组之间没有差异。干预后与模型组相比,电针组对新物体偏好指数增加(P<0.05, P<0.05),脑内海马Aβ表达水平降低(P<0.01),海马中TNF-α和NF-κB分别显著降低(P<0.01, P<0.05)。结论：通督调神针法可通过抑制NF-κB通路,减少炎症因子TNF-α蛋白表达,减少Aβ沉积,提高学习记忆,从而延缓AD的发展。     

电针通过核转录因子κB通路调节β淀粉样蛋白与Tau蛋白改善糖尿病认知障碍大鼠学习记忆能力

目的:通过观察电针治疗前后糖尿病认知障碍大鼠海马组织中核转录因子κB(NF-κB)、Tau蛋白表达及β淀粉样蛋白(Aβ)含量的变化,探讨电针改善糖尿病认知障碍大鼠学习记忆能力的相关机制。方法:雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组和电针组,每组9只。采用高脂高糖饲料饲养结合腹腔注射链脲佐菌素法复制2型糖尿病认知障碍大鼠模型。电针组针刺“后三里”“内庭”“胰俞”,同侧“后三里”“内庭”连接电针仪,每次20 min,每日1次,每周6次,连续4周。干预后检测大鼠随机血糖,采用Morris水迷宫实验检测逃避潜伏期,ELISA法检测海马组织中Aβ1-42含量,Western blot法检测海马组织中Tau、NF-κB p65蛋白相对表达量,实时荧光定量PCR法检测海马组织中Tau、NF-κB p65 mRNA相对表达量。结果:与正常组比较,模型组大鼠随机血糖、逃避潜伏期、Aβ1-42含量及Tau、NF-κB p65蛋白与mRNA的相对表达量均升高(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,电针组随机血糖、逃避潜伏期、Aβ1-42含量及Tau、NF-κB p65蛋白与mRNA的相对表达量...     

红景天苷通过抑制TNF-α/NF-κB通路改善C2C12细胞萎缩的研究

目的 探讨红景天苷(salidroside,SAL)对脂多糖(lipopolysaccharid, LPS)诱导C2C12肌管细胞萎缩的保护作用及其分子机制。方法 C2C12成肌细胞诱导完全分化后,随机分为对照组、模型组、SAL组、甲睾酮(methyltestosterone,TE)组。CCK8检测各组细胞增殖率;分子对接预测SAL潜在抗炎靶点;Griess试剂检测一氧化氮(nitric oxide,NO)释放量;ELISA法检测肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、白细胞介素(interleukin,IL)-6水平;Western blot检测核因子kappa B (nuclear factor kappa-B,NF-κB),肌球蛋白重链(myosin heavy chain,MyHC)蛋白表达水平。结果 分子对接结果提示SAL是TNF-α转化酶抑制剂。10μmol/L和100μmol/L SAL可明显提高肌管细胞增殖率(P<0.01,P<0.05)。与对照组比较,LPS作用后,NO释放量在6 h升高(P<0.01),TNF-α、I...     

冠心康对动脉粥样硬化LDLR-/-小鼠肝组织MAPKs/NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响

目的 观察冠心康对LDLR^-/-小鼠肝组织MAPKs/NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响。方法 将24只雄性LDLR^-/-小鼠随机分为模型组,冠心康低、中、高剂量组,以C57BL/6J小鼠为对照组。除对照组外,每组给予高脂饲料喂养12周。对照组、模型组每日给予200μL 0.9%NaCl溶液灌胃,冠心康低、中、高剂量组分别每日给予7.24 g/kg、14.48 g/kg、28.96 g/kg的中药煎剂200μL灌胃,共12周。采用生化检测方法检测小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)水平;油红O染色法观察小鼠斑块面积;HE染色法观察小鼠肝组织结构;Western blot测定细胞外调节蛋白激酶(Erk1/2),分子量为38 kDa的促分裂素愿活化蛋白激酶(P38),c-Jun氨基末端激酶(JNK),核因子κB抑制蛋白(IκB),核因子κB蛋白表达(NF-κB);RT-PCR、ELISA法检测白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA及含量;...     

鸡血莲黄酮通过调节AMPK/Sirt1/NF-κB信号通路改善小鼠非酒精性脂肪肝的实验研究

目的:观察鸡血莲黄酮对非酒精性脂肪肝(NAFLD)小鼠的保护作用及机制.方法:40只雄性昆明小鼠随机分为正常组、模型组、鸡血莲黄酮高剂量组和鸡血莲黄酮低剂量组.除正常组外,其余各组连续饲喂高脂饲料4周制备小鼠NAFLD模型,并从第5周开始,鸡血莲黄酮高、低剂量组分别以200、100 mg/kg的鸡血莲黄酮连续灌胃4周,...     

复方贞术调脂胶囊通过TLR4/NF-κB通路改善脂多糖诱导的小鼠急性肝损伤

目的 探讨复方贞术调脂胶囊(FTZ)对脂多糖(LPS)诱导的急性肝损伤的保护作用及机制。方法 将SPF级雄性BALB/c小鼠分为正常(Normal)组、模型(Model)组、FTZ低剂量(FTZ-L)组、FTZ中剂量(FTZ-M)组、FTZ高剂量(FTZ-H)组和阳性对照(Positive control)组,每组8只。Normal组和Model组灌胃给予0.5%CMC-Na,FTZ低、中、高剂量组分别给予0.5、1、2 g·kg^-1的FTZ混悬液,Positive control组给予1.3 mg·kg^-1的醋酸泼尼松龙。所有动物进行灌胃给药1周后,采用腹腔注射LPS(5 mg·kg^-1)建立急性肝损伤模型,造模6 h后取血和肝脏标本。采用酶标仪测定血清ALT、AST、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-17和内毒素水平;HE法观察肝组织病理学改变;免疫荧光法检测中性粒细胞(Ly-6G+)浸润情况;Western Blot检测TLR4、NF-κB、p-NF-κB、IκB和p-IκB的蛋白表达水平。结果 与...     

基于TLR4/NF-κB信号通路探讨益气通脉方对ApoE-/-小鼠主动脉粥样硬化的作用机制

目的 探讨益气通脉方调节Toll样受体4（TLR4）/核转录因子-κB（NF-κB）信号通路对载脂蛋白E-/-（ApoE-/-）小鼠动脉粥样硬化（AS）炎症反应的作用机制。方法 将8只C57BL/6J小鼠作为空白组,40只同周龄雄性ApoE-/-小鼠随机分为模型组、益气通脉方低、中、高剂量组[0.39、0.78、1.56 g/（kg·d）]和阿托伐他汀组[2.6 mg/（kg·d）],每组8只。除空白组外采用高脂饲料诱导AS模型,各给药组分别给予相应药物灌胃,空白组与模型组给予等体积0.9%氯化钠溶液灌胃,连续12周。采用酶标仪检测小鼠血脂水平;ELISA检测小鼠血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）水平;油红O染色观察小鼠主动脉斑块面积;HE、Masson染色观察小鼠主动脉窦内膜斑块病理变化;免疫组化（IHC）、免疫荧光（IF）法检测主动脉窦中TLR4、髓细胞分化初级反应蛋白88（MyD88）的表达;Western Blot检测小鼠主动脉中TLR4 / NF-κB信号通路相关因子蛋白表达。结果 与空白组比较,模型组小鼠血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）及低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平升高（P<0.01）,高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平下降（P<0.01）;血清TNF-α、MCP-1含量升高（P<0.01）;主动脉窦内膜斑块以及胶原面积增加（P<0.01）,MyD88表达升高（P<0.01）;主动脉TLR4、NF-κB、核因子κB抑制蛋白α（IκBα）、MyD88蛋白表达升高（P<0.01）。与模型组比较,益气通脉方中、高剂量组和阿托伐他汀组血清TC、TG、LDL-C水平下降（P<0.01）,血清中TNF-α、MCP-1含量下降（P<0.01）,主动脉窦斑块以及胶原面积均下降（P<0.01,P<0.05）,主动脉窦MyD88水平表达下降（P<0.01）,主动脉TLR4、NF-κB、MyD88、IκB蛋白表达下降（P<0.01,P<0.05）。结论 益气通脉方可改善血脂和炎症因子的水平,减少主动脉窦中斑块脂质堆积,其作用机制可能与下调TLR4/NF-κB信号通路有关。