内质网应激在糖尿病肾病中的研究进展

内质网（ endoplasmic reticulum,ER）广泛存在于真核细胞中,是细胞内合成蛋白质并进行折叠、寡聚化加工和细胞内钙储存的重要场所。病理生理条件,包括营养不足、营养过剩、蛋白质糖基化变化、ER钙含量改变和氧化应激等,均可干扰正常蛋白质折叠,错误折叠或未折叠蛋白质在内质网腔内积聚诱发细胞毒性反应[1]。因此,细胞进化出了复杂的信号系统来处理积聚的未折叠蛋白质、调节ER膜结构和分泌蛋白。     

内质网应激与细胞增殖关系研究进展

目的了解内质网应激在细胞增殖中的研究进展,为组织的损伤修复、器官的增殖再生等研究找到可靠的循证资料依据。方法复习近年来关于内质网应激相关的多条信号通路在细胞增殖和损伤修复中研究进展的相关文献并加以综述。结果内质网应激通过未折叠蛋白反应的3条途径在与白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α、血管内皮生长因子、Wnt等多种信号分子发生作用后,通过不同的途径参与了肠上皮细胞、骨骼肌细胞、肝细胞、胰岛细胞等多种不同组织细胞的增殖再生过程。结论尽管内质网应激在决定细胞命运这一领域的研究中众说纷纭,但通过近年来有关内质网应激对维持细胞存活和促进细胞增殖这一方面的研究进行回顾后分析发现了内质网应激在促进细胞增殖这一过程中的复杂性、多样性和重要性,它既能通过与Wnt蛋白这种经典的信号通路促进细胞增殖,也能独立于Notch通路之外通过与RNA结合蛋白Musashi蛋白作用发挥其修复组织、促进增殖的作用,这种复杂的反应通路在不同的细胞中与不同的促因子相互作用,为细胞增殖、损伤修复和器官再生的研究提供了研究的方向和探索的可能,让我们看到了内质网应激在细胞增殖中的巨大作用。     

调节内质网应激反应抑制肿瘤细胞自噬的研究进展

目的了解调节内质网应激反应抑制肿瘤细胞自噬的研究进展。方法对国内外有关内质网应激反应抑制肿瘤细胞自噬的文献进行综述。结果在Ca2+释放及未折叠蛋白聚集而诱发的内质网应激反应中,自噬可被多种通路激活,并调节生理及病理过程。结论在肿瘤细胞内质网应激反应中,调节其反应通路因子进而抑制自噬的发生仍需进一步研究。     

线粒体内质网耦联在糖尿病肾病足细胞损伤中的作用及机制

糖尿病肾病（diabetic kidney disease,DKD）为糖尿病常见的微血管并发症,蛋白尿是其特征性标志,而足细胞损伤是DKD蛋白尿发生发展的中心环节。线粒体内质网耦联（mitochondria-associated endoplasmic reticulum membranes,MAMs）指真核细胞内线粒...     

糖尿病肾病和糖尿病视网膜病变应激相关关键基因的生物信息学分析

目的:通过生物信息学方法分析共同影响糖尿病肾病(diabetic nephropathy, DN)和糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy, DR)发生发展的应激相关关键基因。方法:从DisGeNET、CTD、Genecards数据库收集DN和DR的共致病基因数据,通过STRING数据库和Cytoscape软件构建蛋白互作网络图,进行共致病基因的GO和KEGG富集分析。同时,利用“limma”包筛选出GEO数据库中DN和DR数据集的共同差异基因,通过MCC插件筛选出Top20基因,并对两个芯片数据集进行GSEA富集分析。筛选出上述两组基因数据共同的应激相关关键基因,对其进行相关性和富集分析。最后,借助GeneMANIA、NetworkAnalyst 3.0、DGIdb数据库,构建蛋白互作网络以及TF-miRNA-gene网络,并预测应激相关关键基因的靶向治疗药物。结果:我们发现了5个高度正相关的应激相关关键基因(CCL2、THBS1、PECAM1、SPARC、POSTN),在高糖环境下,它们可通过介导应激反应影响肾脏以及视网膜的细胞外基质重构和炎症。同时,我们预测了...     

调节内质网应激对糖尿病小鼠肾脏SET7/9表达的影响

目的 探讨调节内质网应激对小鼠肾组织组蛋白甲基转移酶(HMT) SET7/9表达的影响及意义.方法 db/db小鼠按随机数字表法分为糖尿病肾病(DN)组和甜菜碱治疗(DN+B)组;db/m小鼠作为正常对照(NC)组,每组各18只.实验第4、8、12周末分别采用实时定量PCR和(或)Western印迹法测定小鼠肾组织SET7/9、葡萄糖调节蛋白(GRP)78、H3K4me2和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)表达水平;ELISA法测定24 h尿蛋白排泄率(UPER)和尿MCP-1浓度;全自动生化分析仪检测血糖(BG)、血肌酐、血尿素氮的动态改变;PAS染色观察肾脏病理改变.结果 与NC组比较,DN组BG、BUN、UPER、MCP-1均显著升高(均P＜0.05),且呈时间依赖性.DN组小鼠第4周末开始出现肾小球基底膜增厚、系膜细胞增生改变,第12周末出现明显系膜基质积聚.与NC组比较,DN组肾组织GRP78、SET7/9的mRNA和蛋白质表达水平均显著升高,H3K4me2蛋白水平也显著升高,且呈时间依赖效应.与DN组比较,甜菜碱治疗组小鼠肾小球病变明显减轻,GRP78、SET7/9的mRNA及蛋白表达水平显著降低,BG、BUN、UPER、MCP-1、H3K4me2水平显著降低(均P＜0.05).结论 内质网应激可能是介导糖尿病小鼠肾脏SET7/9表达的上游机制.     

全身麻醉药引发的内质网应激和线粒体功能障碍对阿尔茨海默病影响的研究

背景 阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是一种常见的神经退行性病变,以大脑特定区域蛋白蓄积以及神经元缺失为特点.有研究证实全身麻醉药物可引发内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)和线粒体功能障碍,进而引起细胞凋亡,而AD的发病及进展与ERS和线粒体功能障碍密切相关. 目的 探究全身麻醉药引发的ERS和线粒体功能障碍对AD的影响. 内容 介绍ERS及其与线粒体功能障碍之间的联系以及全身麻醉药对AD发病及病程影响. 趋向 ERS、线粒体功能障碍及ERS-线粒体之间的联系近年来成为AD临床治疗的重要靶点,也为全身麻醉药物合理选择及配伍提供新思路.     

大鼠急性脊髓损伤后内质网应激相关蛋白CHOP的表达及其意义

目的:探讨内质网应激相关蛋白CHOP在急性脊髓损伤中的表达及其意义.方法:48只健康SD大鼠随机分为实验组与对照组(每组24只),实验组采用Allen法制作急性脊髓损伤模型,对照组只切开椎板不损伤脊髓.分别十伤后3h、1d、3d、7d时(每个时间点6只)应用改良Tarlov评分法评价其神经功能;然后处死动物,取受损节段脊髓行HE染色及免疫组化染色,观察形态学变化和CHOP在脊髓组织中的分布特点;并应用TUNEL方法检测神经细胞凋亡情况.其量的评定借助于IPP(Image-Pro Plus 6.0)软件,结果分别用累积光密度(integrated optical density,IOD)及平均光密度(mean density)表示.结果:对照组大鼠均末见明显瘫痪,实验组出现不同程度的下肢功能障碍,对照组各时间点的Tadov评分均高于实验组(P<0.01).对照组各时间点未见明显坏死细胞和细胞凋亡,实验组出现不同程度的细胞坏死和凋亡.实验组CHOP表达各时间点均明显高于对照组(P<0.01),实验组内CHOP表达1d增加,3d达到高峰,7d减少.实验组内细胞凋亡1d时增加,3d达到高峰,7d减少,且3h<1d<3d>7d(P<0.01).CHOP表达与细胞凋亡在时间上具有一致性,相关系数为0.644.结论:急性脊髓损伤能够诱导CHOP表达,CHOP表达的增高可能与内质网应激诱导的神经细胞凋亡有关.     

内质网应激介导的细胞凋亡与急性肺损伤的研究进展

内质网应激(ERS)介导的细胞凋亡是继死亡受体活化、线粒体损伤途径后新发现的一条重要的细胞凋亡途径,参与多种疾病的发病机制.越来越多的研究表明内质网应激介导的细胞凋亡参与急性肺损伤的发病过程.     

内质网应激分子伴侣GRP78在大鼠缺血再灌注损伤肝脏中的表达

目的:观察内质网应激相关分子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在大鼠缺血再灌注损伤肝脏组织中的表达水平.方法:将24只健康雄性SD大鼠随机均分为假手术组,单纯肝缺血组(肝缺血30 min+再灌注0h),再灌注6h组(肝缺血30 min+再灌注6h)和再灌注12h组(肝缺血30 min+再灌注12h).分别检测各组血清丙氨酸转氨酶(ALT)和门冬氨酸转氨酶(AST)水平;肝组织病理学、凋亡情况及GRP78 mRNA表达水平.结果:与对照组比较,各实验组大鼠肝缺血后出现明显的肝组织损伤,且随着再灌注时间的延长损伤加重,表现为血清ALT和AST水平升高,明显的肝组织病理学改变,肝细胞凋亡率增加,各组间计量指标的差异均有统计学意义(均P＜0.05).大鼠肝组织GRP78 mRNA变化趋势与上述指标一致,缺血后表达明显上调,且随着再灌注时间延长而逐渐升高,各组间差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论:缺血再灌注损伤肝脏组织中GRP78表达上调,但其具体作用还有待于探明.     

线粒体融合蛋白2在高糖诱导的足细胞内质网应激与凋亡中的作用

目的:探讨线粒体融合蛋白2（mitofusion 2,Mfn2）在高糖诱导的足细胞内质网应激（endoplasmic reticulum stress,ERS）与凋亡中的作用及分子机制。方法:（1）构建链脲菌素（streptozocin,STZ）诱导大鼠糖尿病（diabetes mellitus,DM）模型。HE染色观...     

小窝蛋白3在小鼠糖尿病心肌病中的作用：与内质网应激的关系

目的评价小窝蛋白3(Cav-3)在小鼠糖尿病心肌病中的作用及其与内质网应激的关系。方法在体实验:清洁级健康成年雄性野生型小鼠16只, 体质量18～20 g, 采用随机数字表法分为2组(n=8):对照组(Control组)和糖尿病心肌病组(DCM组), 另取Cav-3 KO小鼠8只为Cav-3 KO+糖尿病心肌病组(Cav-3 KO+DCM组)。采用高脂饮食联合腹腔一次性注射链脲佐菌素100 mg/kg的方法制备小鼠2型糖尿病模型, 8周时采用心脏超声测定小鼠左心射血分数(EF)、左室短轴缩短率(FS)、左室收缩末期容积(LVESD)、左室舒张末期容积(LVEDD)。随后处死小鼠取心脏, HE染色观察心肌组织形态学结果。离体实验:小鼠来源的HL-1心肌细胞, 采用随机数字表法分为3组(n=6):正常糖培养组(NG组)、高糖组(HG组)和高糖+甲基-β-环糊精组(HG+β-CD组)。高糖模型采用专用培养基加入50%葡萄糖至终浓度达到30 mmol/L, 持续培养36 h。采用LDH、CCK8试剂盒评估细胞损伤情况。采用Western blot法检测心肌组织与HL-1细胞内质网应激相关蛋白结...     

内质网应激与肥胖、胰岛素抵抗、2型糖尿病

细胞应激涉及线粒体、内质网、细胞核等细胞器的应激，它们既相对独立，又相互作用。内质网（endoplasmic reticulum，ER）是细胞合成、加工蛋白质和贮存Ca^2＋的主要场所，对应激极为敏感，其功能紊乱时出现错误折叠与未折叠蛋白在腔内聚集以及Ca^2＋平衡紊乱的状态，称为ER应激。ER应激对决定应激细胞的结局如抵抗、适应、损伤或凋亡有重要作用，近年来有关其信号通路与效应的研究非常活跃。包括肥胖、胰岛素抵抗（IR）、2型糖尿病（DM）在内的代谢综合征已经成为危害人类健康的最严重的疾病之一。2型DM中超过85％的人表现为肥胖，同时，全球肥胖人口的增加又大大提高了代谢综合征尤其是IR和2型DM的发病率。但是这些疾病代谢紊乱的分子机制以及其彼此之间的相互关联仍未完全阐明。     

内质网应激在肾小球疾病中的研究进展

内质网是胞内合成加工修饰蛋白质及储存钙离子（Ca^2＋）的主要场所,并可通过影响蛋白质聚集、构象、折叠、转运保证蛋白质稳态。当细胞对内质网的需求超过自身能力时（如必需营养物缺乏、氧化应激、缺血缺氧、毒素等）,内质网合成蛋白质速率降低,出现蛋白质的错误折叠,     

LncRNA HCG18调控miR-185-5p/AGER轴影响糖尿病肾病内质网应激和自噬

目的:本研究旨在探讨LncRNA HCG18调控miR-185-5p/AGER轴对糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）内质网应激和自噬的影响。方法:收集DN患者肾脏组织,建立高糖（high glucose,HG）诱导的足细胞损伤模型。检测DN患者肾组织与DN细胞模型中HCG18的表达。确定HCG...     

内质网应激在白蛋白诱导肾小管上皮细胞凋亡中的作用

目的 探讨内质网应激在白蛋白超负荷诱导肾小管上皮细胞凋亡中的作用和分子机制。 方法 Western印迹法检测肾小管上皮细胞（HKC）内质网伴侣蛋白糖调节蛋白78（GRP78）和内质网应激蛋白CHOP（CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白,也称为GADD153）表达与人血清白蛋白（HSA）作用时间和浓度的关系。实时荧光定量PCR法检测CHOP siRNA对CHOP基因转录的抑制情况。Western印迹法检测CHOP siRNA转染后CHOP蛋白水平的变化。膜联蛋白V和碘化丙锭（Annexin V-FITC和PI）双染的流式细胞术检测白蛋白诱导HKC凋亡的变化以及CHOP siRNA对HKC凋亡的影响。 结果 （1）分别以0、5、10、20 g/L白蛋白作用于HKC 24 h,GRP78、CHOP蛋白表达及细胞凋亡均随白蛋白浓度的增加而上调,各组间差异有统计学意义（P ＜ 0.01）;以20 g/L白蛋白分别作用于HKC 0、6、12、24、36 h,GRP78蛋白表达在6 h即显著增加,CHOP蛋白表达及HKC凋亡则在12 h显著增加,各组间差异有统计学意义（P ＜ 0.01）。（2）CHOP siRNA显著抑制白蛋白诱导的CHOP 基因转录及蛋白表达（P ＜ 0.01）,对白蛋白诱导的HKC凋亡有显著抑制作用（P ＜ 0.01）。 结论 白蛋白超负荷可诱导肾小管上皮细胞发生内质网应激,并通过上调促凋亡因子CHOP表达引起肾小管上皮细胞内质网相关的细胞凋亡,这可能是蛋白尿引起肾小管间质病变的重要机制。     

氧化应激与糖尿病肾病的研究进展

氧化应激主要是通过自由基对体内的DNA、蛋白质和脂肪的氧化修饰导致组织损伤。越来越多的证据表明,糖尿病引起的氧化应激是导致糖尿病慢性并发症的最根本原因之一。深入研究糖尿病中的氧化应激产生机制,研究和开发新的抗氧化药物,将为糖尿病慢性并发症的预防和治疗提供新的方向和途径。     

4-苯基丁酸对糖尿病肾病大鼠的作用

目的 探讨化学分子伴侣4-苯基丁酸（4-PBA）对糖尿病肾病（DN）大鼠的治疗作用及其机制。 方法 54只大鼠随机分为正常对照组（NC）、糖尿病肾病组（DN）和4-PBA治疗组（4-PBA）,每组各18只。在治疗第4、8及12周末分别检测各组大鼠肾质量指数（KI）、24 h尿蛋白排泄率（UAER）、血肌酐（Scr）、尿素氮(BUN)、尿丙二醛（MDA）含量和超氧化物岐化酶（SOD）活性;观察肾脏病理改变;实时荧光定量PCR法检测各组大鼠肾组织p47phox mRNA的表达变化;Western印迹检测p47phox和硝基酪氨酸（NT）的蛋白表达变化。 结果 与NC组大鼠比较,在4、8和12周时,DN大鼠的KI显著增高（P < 0.05）,UAER（mg/24 h）也显著增高（4.92±0.70 比 0.26±0.07、 5.29±0.83 比0.28±0.08、5.54±0.81比0.29±0.04,均P < 0.05）。12周时病理显示DN大鼠肾小球系膜细胞增生,系膜基质积聚;而与DN组大鼠比较,4-PBA治疗组大鼠KI显著降低（P < 0.05）,UAER（mg/24 h）亦显著降低（4、8和12周分别为3.71±0.37、3.47±0.36和3.28±0.40,P < 0.05）,4-PBA能显著减轻肾脏的病理变化。在4、8和12周,与NC组大鼠比较,DN大鼠肾组织p47phox mRNA表达分别升高了154.72%、148.60%和91.95%（均P < 0.05）;p47phox蛋白表达分别升高了118.00%、140.10%和177.82%（均P < 0.05）;硝基酪氨酸蛋白表达分别升高了45.29%、59.13%和89.28%（均P < 0.05）;尿MDA含量分别增加了2.05倍、2.26倍和2.43倍;尿SOD活性分别下降了64.78%、71.29%和79.32%。与DN组比较,在8和12周时,4-PBA治疗组DN大鼠肾组织p47phox mRNA和蛋白表达均显著减少（均P < 0.05）;硝基酪氨酸蛋白表达显著减少（P < 0.05）,且与NC组差异已无统计学意义。另外,在4~12周,4-PBA治疗可显著减少DN大鼠尿中MDA含量,增加尿SOD活性（均P < 0.05）。 结论 4-PBA能显著抑制糖尿病大鼠肾脏病理变化,其机制可能与抑制肾组织氧化应激有关。