RNA干扰作用--治疗HIV的新途径

RNA干扰作用(RNAi)是生物界一种古老且进化上高度保守的现象，是基因转录后沉默作用(PTGS)的重要机制之一，RNA干扰作为抑制基因表达的有利工具．首次在无脊椎动物和植物中对付外目的基因，主要通过短的干扰RNA(siRNA，大约21个核苷酸的RNA的复合物)有效地抑制同源性基因的表达。最近的研究表明，用siRNA抑制HIV-1的复制，即通过它抑制病毒或者细胞内的基因，取得了重要的成效。RNAi开辟了新的基因治疗药物研究途径，本文就RNAi用于抑制HIV作一综述。     

RNA 干扰技术及其在子宫内膜容受性研究中的运用

基因沉默（gene silencing）是指生物体内的特定基因由于种种原因不表达或者表达量极低,是真核细胞调节基因表达的重要手段。RNA 干扰（RNA interference,RNAi）是基因沉默技术的重要组成部分,现已成为在基因功能研究、基因表达调控、基因治疗等方面诱导下调、抑制特异性的基因表达不可或缺的工具。在探索子宫内膜容受性生物标记物的相关研究中,RNA 干扰对基因功能的定位也具有重要作用。本文概述 RNA 干扰技术的发展、作用机制及其方法学的研究进展,以及在子宫内膜容受性研究中运用基因沉默技术取得的研究进展。     

RNA干扰技术及其在胰腺癌研究中的应用

RNA干扰（RNA interference，RNAi）是指一些小的双链RNA（double stranded RNA，dsRNA）通过特异性降解与其同源的RNA而高效地阻断体内特定基因表达的现象。到目前为止，RNAi现象已经被发现广泛存在于植物、线虫、果蝇、哺乳动物等多种生物体细胞中，使这些生物能够抵御病毒的感染、阻断转座子的作用等。由于RNAi能特异性地抑制某一基因的表达，目前已经广泛应用于抗肿瘤、抗病毒等的治疗研究以及一些基础研究领域。现主要就近年来RNAi技术在胰腺癌研究中的应用进行综述。     

RNA干扰,一种征服人类疾病的新武器

RNA干扰(RNA interference，RNAi)是Fire和Mello创建的名词，指将双链RNA(dsRNA)导入细胞，其序列与靶基因同源，它在细胞内可与靶基因mRNA结合，并迅速将其降解，从而抑制该基因表达的过程。由于近几年RNAi研究取得的进展，RNAi名列2002年Science杂志评出的十大科技成就之首，并被描述为：“小RNA溅起大浪花(Small RNAs make big splash)。”     

RNA干扰在肝病治疗中的研究进展

RNA干扰(RNAi)是双链RNA(dsRNA)分子在mRNA水平关闭相应序列及基因的表达使其沉默的过程[1].RNAi最主要的功能特色在于它可调节和关闭基因的表达,促使mRNA降解或阻止蛋白产物合成,进而调控细胞的各种高级生命活动,其抑制基因表达作用具有高效性和特异性[2].RNAi作为一种快捷方便的工具广泛用于高通量的研究基因功能、基因敲除、基因治疗和基因表达调控领域的研究.现对RNAi在肝病治疗中的最新进展作一综述.     

RNA干扰技术在肥胖研究中的应用

在多种生物细胞中，外源或内源性双链RNA（doublestranded RNA，dsRNA）可触发细胞内同源mRNA的特异性降解，从而使该基因表达沉默，这种现象称为RNA干扰（RNA interference，RNAi）。RNAi现象在生物中普遍存在。首先在线虫中发现了RNAi现象，随后证实在果蝇、涡虫、水螅、锥虫、小鼠胚胎细胞及哺乳动物成体细胞中均存在dsRNA介导的RNAi现象。由于RNAi在动植物抵抗外源病毒、生长发育调控方面起着重要作用。而且在功能基因组研究、基因治疗方面有着广泛的应用前景，所以对其研究较多。现在RNAi已用于在体研究，并在抗病毒、肿瘤、免疫、药理、遗传等方面得到广泛地应用。基因有限公司和宝生物公司等已开发出RNAi试剂盒。目前RNAi数据库与表型blast也已建立。本就RNAi干扰技术在肥胖研究中的应用作一综述。     

RNA干扰在哺乳动物病毒感染中的作用

RNA干扰(RNAi)作为高效的基因阻断技术在抗病毒研究中已取得很大成果,内源性RNAi机制在低等生物中的病毒免疫作用已经明确,但在哺乳动物病毒感染中的研究仍处于探讨阶段,病毒编码小干扰RNA(siRNA)是否存在仍有争议,而由微小RNA(miRNA)介导的RNAi在调节病毒和宿主细胞相互关系中则发挥着重要作用.     

Rad51蛋白表达对骨肉瘤细胞γ-射线敏感性的影响

目的利用RNAi抑制Rad51蛋白表达来研究Rad51在骨肉瘤治疗中的作用。方法western blot和RT-PCR观察Rad51在骨肉瘤细胞中蛋白和RNA水平的变化。采用RNA干扰技术,构建shRNA-Rad51载体。用western blot和RT-PCR方法证实RNA干扰的有效性和可行性。用MTT和克隆形成实验研究RNAi抑制Rad51表达对γ-射线的敏感性。流式分析法观察RNAi抑制Rad51表达对细胞凋亡的影响。结果成功构建了shRNA-Rad51载体。RNAi抑制Rad51表达增强骨肉瘤细胞对γ-射线的敏感性。RNAi抑制Rad51表达促进骨肉瘤细胞的凋亡。结论RNAi抑制Rad51表达在骨肉瘤治疗中有作用,有望成为骨肉瘤治疗的新靶点。     

RNA干扰的基础研究和临床应用前景

RNA干扰（RNA interference，RNAi）是在mRNA水平关闭相应序列基因表达或使其沉默的过程。在哺乳动物中发现的21—23核苷酸的双链RNA（小干扰RNA）开肩了siRNA的治疗应用可能。目前RNA干扰对于病毒感染、癌症和基因病等表现出广阔的应用前景。就RNA干扰的作用机制、临床应用及应用中存在的障碍等方面综述该领域的研究进展。     

RNA干扰抗艾滋病病毒感染研究进展

RNA干扰(RNA interference，RNAi)是一种古老而保守的生物现象，它由21～23个核苷酸的双链RNA通过碱基互补靶向识别并降解mRNA，导致序列特异的基因沉默。体外证明小干扰RNA(small interfering RNA，siRNA)能对抗HIV-1感染。它主要作用于宿主细胞受体，如CD4或CCR5等相应的mRNA及HIV-1的mRNA，抑制病毒表达，阻抑病毒感染。RNAi有可能成为一种新的防治HIV-1感染的基因治疗方法。     

RNAi技术在肿瘤研究中的应用进展

RNA干扰（RNA interference,RNAi）现象是存在于真核生物体内的一种阻断外源基因表达的自我防御体系。随着近年RNA干扰的机制的阐明以及相关实验技术的改进,这项技术已经被广泛的应用于肿瘤研究的众多领域。本研究将对RNA干扰在研究肿瘤的多药耐药性,阻断肿瘤的侵袭与转移,调控肿瘤细胞凋亡,细胞信号转导,细胞周期,以及抑癌基因和原癌基因的相关肿瘤研究中的应用进展进行介绍。     

运用免疫受体基因进行RNA干扰对猪颗粒细胞发展的意义

在卵泡发育过程中颗粒细胞获得不同的功能，在细胞分化过程中颗粒细胞的基因是独特的。双链RNA（dsRNA）可以引起序列特异性的转录后基因沉默。此现象称为RNA干扰（RNAi）。长dsRNA经过处理产生的21～23mer的小干扰RNA（siRNA）片段是RNAi的介质。核酸复合体即RNA诱导的沉默复合体（RISC），以siRNA为向导，使同源序列的靶基因mRNA降解成片段，mRNA水平降低。RNAi也可用于对猪颗粒细胞发育过程中感兴趣的基因进行功能分析。在此研究中，用一种质粒编码的绿色荧光蛋白（GFP）作为靶基因，     

RNA干扰的基础研究和临床应用前景

RNA干扰(RNA interference,RNAi)是在mRNA水平关闭相应序列基因表达或使其沉默的过程.在哺乳动物中发现的21-23核苷酸的双链RNA(小干扰RNA)开启了siRNA的治疗应用可能.目前RNA干扰对于病毒感染、癌症和基因病等表现出广阔的应用前景.就RNA干扰的作用机制、临床应用及应用中存在的障碍等方面综述该领域的研究进展.     

RNAi表达载体对卵巢癌Bcl-2基因表达的抑制作用

目的:探讨Bcl-2基因的RNA干扰(RNA interference,RNAi)表达载体对卵巢癌SKOV3细胞Bcl-2基因表达的抑制作用。方法:构建针对Bcl-2基因的RNAi表达载体,脂质体法转染卵巢癌SKOV3细胞株,应用RT-PCR及流式细胞仪检测其对Bcl-2基因mRNA及蛋白表达的影响。结果:构建的两种表达载体均抑制了Bcl-2基因的mRNA及蛋白的表达,其中转染2号载体的SKOV3细胞Bcl-2基因mRNA表达仅相当于对照组的32.3%,蛋白抑制率达60.18%。结论:RNAi表达载体可以有效抑制Bcl-2基因的表达。     

RNA干扰hTERT基因对人乳腺癌细胞株MCF-7周期及凋亡影响的研究

目的 观察载体介导的RNA干扰技术能否有效抑制人乳腺癌细胞株MCF-7的hTERT的表达及其对细胞周期及凋亡的影响.方法 构建2个针对hTERT基因表达短发夹状siRNA的真核表达载体（pshRNA-hTERT）并转染人乳腺癌细胞株MCF-7,通过RT-PCR检测该基因mRNA,Western blot蛋白质检测,端粒酶活性检测,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡等方法检测RNAi效果,从中筛选出基因沉默效果好的靶位点.结果 转染乳腺癌细胞后,pshRNA - hTERT1,2质粒均能抑制hTERT基因表达,mRNA表达分别下调了54.6%,55.2% 蛋白表达分别下调46.6%,47.8%.端粒酶活性均明显下降.对乳腺癌细胞周期中S期细胞明显减少,G1/G0期细胞显著增加.结论 RNAi在体外明显抑制乳腺癌细胞中hTERT基因的表达和瘤细胞增殖.     

RNA干扰技术用于肝脏疾病治疗的研究进展

RNA干扰（RNAi）指通过导入由对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA（dsRNA），诱导受体细胞中与其有同源序列的特异性靶mRNA发生降解，阻止蛋白质的翻译过程，从而使其相应的同源基因沉默。     

RNA干扰与疾病的治疗

目前，RNA干扰（RNA interference，RNAi）已成为基础和应用研究领域最常用的手段：生命科学研究人员用RNA干扰确定基因功能，包括高通量筛选基因，特别是复杂信号转导系统中的关键基因；而在医药治疗领域，RNA干扰用于预防和治疗各种病毒等病原微生物引起的疾病和肿瘤，由于效果明显、特异性强，比反义核苷酸技术更适用于临床治疗。     

应用定量竞争RT-PCR筛选芳香烃受体基因RNA干扰片段

目的筛选对人气管上皮细胞株16HBE芳香烃受体基因mRNA表达有效抑制的特异RNAi片段。方法自行制备内参照为竞争模板,应用定量竞争RTPCR方法,分别检测转染有4个不同芳香烃受体基因RNA干扰位点的16HBE细胞芳香烃受体mRNA的表达,评价不同片段的RNA干扰效果。结果转染4种芳香烃受体基因RNA干扰片段的16HBE细胞的每40ng总RNA芳香烃受体基因mRNA平均表达量分别为5.65fg、14.78fg、3.14fg和0.68fg,mRNA表达平均抑制率分别为61.6%、-0.5%、78.6%和95.4%。结论应用定量竞争RTPCR准确地定量基因的mRNA表达水平,筛查出芳香烃受体基因RNA干扰有效序列,为进一步研究芳香烃受体基因的功能创造了条件。     

Smad3-siRNA真核表达载体的构建与鉴定

目的构建Smad3特异的RNA干扰质粒载体,为探讨抑制Smad3表达在肝纤维化治疗中的意义奠定基础。方法根据GenBank数据库提供的Smad3基因核苷酸序列,选择设计能转录小发夹结构RNA(small hairpinRNAs,shRNA)的DNA序列,并与pSilencer3.1-H1-hygro质粒载体连接,构建真核表达载体,使用限制性内切酶鉴定及测序鉴定是否为阳性克隆。结果成功构建pSilencer3.1-Smad3载体,拟进一步采用RNAi技术观察其对Smad3基因表达的抑制情况,从而研究其在肝纤维化治疗中的作用。结论 Smad3-siRNA真核表达载体被成功构建。