P19细胞体外向脂肪细胞诱导分化的实验

目的 探讨应用96孔板悬浮法诱导P19细胞体外向脂肪细胞分化的可行性和有效性。方法 P19细胞使用96孔板悬浮培养法制备拟胚体（EBs）,其中第3天至第5天使用诱导剂全反式维甲酸（RA）。第7天挑取EBs用胰岛素和三碘甲状腺原氨酸诱导,继续贴壁培养20d后,油红O染色鉴定分化细胞的特征。
结果 使用96孔板悬浮培养法可以形成大小均一的EBs,诱导结束后EBs生长晕周围部分细胞分化为脂肪细胞。细胞形态趋于类圆或圆形,胞质中出现小脂滴,可被油红O染色清晰显示。 结论 使用96孔板悬浮法获得的P19细胞EBs在体外可诱导分化为脂肪细胞。     

电阻抗法监护小猪腹膜后出血的实验研究

目的 通过应用电阻抗成像系统(EIT)对腹膜后出血动物模型进行监护实验,验证EIT的成像效果且为EIT的临床应用提供必要的理论和实验依据.方法 首先应用细针在B超引导下体外穿刺全身肝素化后的小猪肾脏,制成腹膜后出血动物模型,然后用EIT对穿刺后的小猪进行监护成像.结果 5只小猪被穿刺后均存活3h以上,且均发生了肾脏出血,动物模型成功率为100%,出血量在100～180ml之间.EIT监护系统成像清楚,出血区与未出血区图像比较反差大,图像对比度明显,并随穿刺后监护时间的延长,图像灰度值明显变小,相应部位阻抗值变小.经解剖及CT验证,后腹膜完整.血液局限于腹膜后间隙内.结论 EIT监护系统成像清晰,使用EIT监护腹膜后出血是可行的.     

五个故事帮你参悟人生

<正>情况不同一只小猪、一只绵羊和一头乳牛被关在同一个牲畜栏里。有一次,牧人捉住小猪,小猪大声号叫,强烈地抗拒。绵羊和乳牛讨厌它的叫声,便说:“牧人也常常捉我们啊,我们却不大呼小叫的。”小猪听了回答说:“他捉你们和捉我不是一回事。捉你们,是要你们的毛和乳汁;捉我,却是要我的命啊!”     

悬浮床治疗褥疮的疗效观察

褥疮是长期卧床病人，尤其是老年病人、昏迷病人、截瘫病人的并发症，严重者可危及病人生命。自2005年5月我科引进美国生产的“KCI”空气射流悬浮床（以下简称悬浮床），对15例褥疮患者使用悬浮床进行治疗，与普通床相比，取得满意效果，现报告如下：[第一段]     

小猪腹腔内出血模型及电阻抗成像监护的初步研究

采用体质量在20～30 kg,腹围与人近似的小猪为实验动物,通过B超定位经腹腔穿刺置套管于小猪肝脏的下缘,用电子输液泵分别按恒定的速度注入同种异体血,以模拟肝脏区域出血,使用电阻抗成像技术进行监护,观察成像结果。注血结束后行B超和CT检查,并剖腹探查注血情况。结果显示:(1)B超、CT检查及剖腹探查均发现腹腔内存在大量血液;(2)随着血液的注入,电阻抗成像的目标区域象素值随之变化,成像结果明显。因此该动物模型能够很好的模拟腹腔内活动性出血,并能够控制出血速度,使用电阻抗成像技术监护该模型能够获得清晰的成像结果。     

膀胱癌T24中肿瘤干细胞样细胞的分离与鉴定

目的观察使用无血清培养基悬浮培养能否从膀胱癌T24中分离出微球体,并证实其是否有肿瘤干细胞的特点。方法使用无血清培养基DMEM/F12添加生长因子EGF、bFGF、胰岛素、B27对膀胱癌T24进行悬浮培养,并从长期增殖能力、克隆形成能力、自我更新能力、对放化疗的抵抗能力、迁移和侵袭能力等方面证实这些微球体是否有肿瘤干细胞的特点。结果从培养的第4天开始长出微球体,微球体细胞比普通贴壁T24细胞有更强的增殖能力和克隆形成能力,对放化疗的抵抗能力更强,有更强的迁移和侵袭能力,微球体有自我更新能力,具有肿瘤干细胞的特点。结论使用无血清悬浮培养可以从T24中分离出微球体,而且这些微球体细胞有肿瘤干细胞的特点。     

超顺磁性Fe2O3与Fe3O4用于磁共振胃肠造影剂的粒度比较

目的探讨应用超顺磁性Fe2O3与Fe3O4制备磁共振造影剂的可能性。方法根据超顺磁性理论推导出两种微粒显示超顺磁现象的临界尺寸理论值。根据磁学理论,分析了磁共振造影剂稳定的机理,推导出在磁共振磁场中,两者在造影剂中稳定悬浮的极限尺寸。结果超顺磁性Fe2O3与Fe3O4显示超顺磁现象的临界尺寸理论值分别为24．8nm和31．6nm,在1．5T磁共振磁场中的临界值为7．1nm和11．1nm;在造影剂中稳定悬浮的极限尺寸为13．3nm和14nm。结论超顺磁性Fe2O3与Fe3O4在造影剂中,既能稳定悬浮又具有超顺磁性的临界尺寸为7．1nm、11．1nm。     

川芎嗪和剪切率对悬浮血管内皮细胞凋亡的影响

目的 探讨川芎嗪和剪切率对悬浮血管内皮细胞凋亡的影响。方法 体外培养大鼠脑微血管内皮细胞(rCMEC)，以川芎嗪和锥一板旋转剪切方式共同作用于悬浮rCMEC，采用Annexinv-FITC／PI双染法，流式细胞仪检测川芎嗪和剪应力对rCMEC凋亡的影响。结果 方差分析表明，川芎嗪和剪切率对rCMEC凋亡率有显著影响，川芎嗪降低凋亡率；剪切率增加凋亡率，二者作用相反但无交互作用。组间t检验表明：单独使用川芎嗪时，在本实验剂量范围内(3l.5～126μg／m1)，川芎嗪对静态悬浮rCMEC凋亡率无显著影响。高剪切率(6000，8000s-1)可诱导rCMEC凋亡，川芎嗪对此具有显著抑制作用。结论 适当剂量的川芎嗪可用于抑制高剪切率诱导的血管内皮细胞凋亡。     

前列腺癌干细胞分离方法的对比及筛选********

背景：前列腺癌干细胞是前列腺癌复发侵袭的重要原因,目前研究难点在于前列腺癌干细胞分离技术效率较低。 目的：探索高效地从人前列腺癌PC-3及LNCap细胞株分离前列腺癌干细胞的方法。 方法：采用含血清贴壁培养法及无血清悬浮培养法培养PC-3及LNCap细胞株,然后利用流式细胞表面标记CD133及CD44检测两种细胞在不同培养条件下可获取前列腺癌干细胞的比例,同时采用诱导分化实验初步鉴定前列腺癌干细胞特性。 结果与结论：PC-3及LNCap细胞能在添加生长因子的无血清培养基中形成悬浮细胞球,接种在含血清培养基后可以诱导分化为贴壁细胞;无血清培养组的CD44+/CD133+细胞比例：PC-3为0.59%,LNCap为1.71%,含血清培养组中的CD44+/CD133+细胞比例：PC-3为0.32%,LNCap为0.73%,其中LNCap细胞采用两种方法所获的CD44+/CD133+细胞均高于PC-3所获的的细胞(P < 0.05),在两种细胞中无血清悬浮培养和含血清贴壁培养差异无显著性意义 (P > 0.05),但无血清悬浮培养周期长,获得细胞数相对较少,直接影响分选后肿瘤干细胞功能测定。因此可以证实含血清贴壁培养LNCap细胞较无血清悬浮培养法更能高效快捷的获取前列腺癌干细胞。     

虾青素抑制氧化应激改善陈旧红细胞保存质量

目的:观察虾青素能否抑制陈旧悬浮红细胞内的氧化应激,改善红细胞保存质量。方法:采集志愿者血液,制备去白悬浮红细胞,将其随机分为4组,对照组加入DMSO,另外3组悬浮红细胞的保存液内加入抗氧化剂虾青素使其终浓度分别为5、10和20μmol/L,悬浮红细胞于2℃~6℃内保存。保存至28 d、42 d采用倒置荧光显微镜观察悬浮红细胞内活性氧族的表达状况,采用荧光酶标仪测定红细胞内活性氧族的含量,采用硫代巴比妥酸比色法测定红细胞内丙二醛含量,扫描电镜观察红细胞的超微结构,采用化学比色法测定三磷酸腺苷含量,采用紫外测试法测定2,3-二磷酸甘油酸含量。结果:与各自对照组相比,加虾青素的三组储存28 d和42 d悬浮红细胞内活性氧族和丙二醛含量降低,三磷酸腺苷和2,3-二磷酸甘油酸水平升高,改善了红细胞的形态。结论:虾青素可以通过降低储存悬浮红细胞内的氧化应激水平改善红细胞保存质量。     

不同激活方式影响细胞因子诱导杀伤细胞的扩增与活性

目的：研究不同激活方式对CIK细胞(Cytoline-induced killer cells，CIK)体外扩增的影响。方法：使用植物血球凝集素(pHYTOHEMAGGLUTININ，PHA)或抗CD3单抗刺激细胞增殖，从脐血单个核细胞定向诱导CIK细胞，用乳酸脱氢酶(LDH)分析法分析细胞毒活性，用流式细胞分析法对不同培养条件下CIK细胞的纯度进行分析。结果:使用抗CD3 mAb刺激生成的CIK细胞在扩增能力、纯度和细胞毒性方面都优于使用PHA刺激生成的CIK细胞。在细胞因子和有丝分裂原加入3d后，将其洗脱，但仍加入IL-2，有利于提高细胞的扩增能力。另外，使用包被的方法将抗CD3 mAb固定在孔板上比悬浮加入效果好。结论：这一结果对于CIK细胞的大量扩增和临床应用具有指导意义。     

用磁铁矿铁磁流体进行人工高热处理

德国进行了悬浮在熔融的和凝固的凝胶中的超顺磁性和铁磁性磁铁矿颗粒由外磁场产生的比功率(SLP)损失的比较研究。磁性损失的磁场振幅依赖关系服从幂定律,对于铁磁性样的为3阶,对于超顺磁性样品为2价。将比色法数据与磁滞测定结果作了比较。讨论了用于人工高热的结果。实验发现,用超顺磁及铁磁性颗粒可达到差不多的热效应。颗粒悬浮介质对SLP的显著影响表明,至少对于铁磁性颗粒来说,重要的是产热机理不同。结果建议,要再检测经不同方法使用后生物组织中颗粒自由转动的能力。微结构对SLP的影响数据为优化磁性颗粒用于人工高热指出了方向…     

一种轴流血泵的磁液双悬浮支承系统

【摘 要】 目的:为解决第三代血泵中磁力和液力悬浮系统体积偏大、发热多、水力性能差、血损严重等问题,提出一种磁液双悬浮支承系统。 方法:磁液双悬浮支承系统轴向靠磁力、径向靠径向液力共同实现转子的稳定悬浮;分别利用ANSYS电磁模块和楔形动压承载原理对轴向磁力、径向液力进行分析,利用Fluent对磁液双悬轴流血泵的水力性能进行仿真分析。 结果:对悬浮系统轴向、径向承载力的分析以及悬浮实验结果表明该系统可以实现稳定的悬浮;Fluent仿真及水力实验表明当血泵转子转速为9 500 r/min以上时,能满足人体需要。 结论:磁液双悬浮支承系统具有较好的悬浮性、水力性能,可作为第三代血泵进一步改进的选择方向。     

胚体培养对小鼠ES细胞定向神经分化的影响研究

为了研究胚胎干细胞（ES细胞）的定向诱导分化过程中胚体的形成对其后分化的影响，通过悬滴培养、悬浮培养及两者结合的方法得到2～4d的胚体（EBs），利用全反视黄酸（RA）对其处理4d后，进行免疫细胞化学和兴奋性功能的检测，观察比较了不同培养方式和不同培养时间下EBs分化出来的神经细胞所占的比例。结果表明，用单纯悬浮3d或悬滴3d转悬浮1d的培养方法得到的胚体其神经分化的比例较高，这对进一步阐明胚胎干细胞自身内部调控诱导分化的机制有一定的参考意义。     

甘草悬浮培养细胞对芦荟大黄素的选择性糖基化

目的研究甘草悬浮培养细胞对芦荟大黄素的生物转化。方法将芦荟大黄素与甘草细胞悬浮培养细胞共孵育7 d后,培养液经由大孔吸附树脂处理,细胞用甲醇提取,合并两部分浸膏后依次采用Sephadex LH-20凝胶柱色谱、正相硅胶柱色谱、反相半制备HPLC等技术进行分离纯化,利用质谱和核磁共振波谱技术进行结构鉴定。结果分离得到了一个芦荟大黄素的选择性糖基化产物——芦荟大黄素-(3-羟甲基)-O-β-D-葡萄糖苷。结论甘草悬浮培养细胞对芦荟大黄素具有位置选择性糖基化能力。     

流道型轴流血泵支承结构设计与分析

目的:为了改善电磁轴承结构复杂、体积偏大,液力轴承承载力小、不能在较大负载下工作的弊端,提出一种流道型磁液悬浮轴流血泵,提高血泵承载能力。方法:流道型轴流血泵轴向采用永磁力进行支承,径向采用转子叶轮的流道结构产生的液力悬浮;利用Ansys对轴向瞬态磁场进行仿真,对磁力变化进行研究,利用Fluent对不同开槽方向、角度、深度的径向液力进行仿真,对液力变化进行研究。结果:根据轴向磁力随位移的变化,得出磁力最大为2.9 N,楔形开槽结构倾斜角为28°,开槽数为5,槽深0.36 mm,叶顶间隙为0.40 mm,性能达到最优,能满足人体使用。结论:流道型轴流血泵相对于普通磁液悬浮血泵有更高的承载力,较好的悬浮性能,为轴流血泵的优化研究提供了新的思路。     

MDCK细胞悬浮培养制备流感疫苗

每年的流感流行引起许多人患病 ,作为高危人群的老人和儿童被建议使用流感疫苗。迄今为止 ,流感疫苗由鸡胚制造。该作者报道了制备流感疫苗的新技术 :MDCK细胞悬浮培养增殖法 ,并对现行培养该细胞系的其它技术加以评估。细胞培养需要一个复杂的介质支持 ,其中的牛血清或血清成分 (牛或人蛋白 )被用来保护细胞免受胰酶影响 (胰酶是用于细胞传代时分散细胞并在活化病毒及宿主细胞时起作用 ) ,这些动物源性物质有潜在感染性 ,为了避免这些危险 ,作者创建了MDCK细胞悬浮培养法制备流感疫苗。在建立 MDCK悬浮细胞系 (330 16 )过程中 ,作者首…     

悬浮介质粘度对红细胞变形性测量的影响

用具有不同粘度的液体作为悬浮介质,观测了悬浮介质粘度对红细胞变形性测量的影响。所用仪器是北京医科大学物理教研室与北京地质仪器厂共同研制的激光衍射仪,试样为兔耳静脉血,肝素抗凝,红细胞用缓冲液冲洗3次后,加不同的缓冲液配制成浓度为2×10~3个/ml的悬浮液进行测量。悬浮液pH等于7.4,渗透压为295mOsm/kg,实验温度为27±1度。所有实验在取血后5小时内完成。缓冲液粘度变化范围为0.89cP-94.64cP。     

去胰岛素的乳腺癌干细胞培养及雌激素诱导的作用

 目的：探讨去除胰岛素的乳腺癌干细胞悬浮培养方法以及雌激素诱导的作用。方法：通过使用去除胰岛素的悬浮培养方法获得乳腺癌细胞系MCF7的肿瘤球细胞,并通过形态学观察、CD24-CD44+表达细胞的检测、醛脱氢酶1（ALDH1）蛋白的表达以及细胞多向分化能力对该干细胞模型的可靠性进行鉴定。给予10-10 mol/L 17β-雌二醇(E2β)对该干细胞模型处理7 d,观察上述相关指标的变化。结果：去除胰岛素的悬浮培养方法获得的瘤细胞球呈葡萄状,由30～60个细胞组成。细胞球显示细胞角蛋白18和CD10蛋白均表达阳性,CD44+CD24-细胞的含量及ALDH1蛋白表达量均较贴壁细胞明显增高（P<0.05）。使用10-10 mol/L E2β处理MCF7肿瘤球细胞7 d,肿瘤球细胞数及体积增大。使用10-10 mol/L E2β处理MCF7肿瘤球细胞24 h,CD44+CD24-细胞数量及ALDH1蛋白表达量较未处理组明显升高（P<0.05）。结论：去除胰岛素的悬浮培养方法可有效建立乳腺癌干细胞体外研究模型,并可用于E2β对乳腺癌干细胞生长调控的研究。     

两种血液保存箱的比较

目的通过临床验证评价血液保存箱在临床使用过程中的安全性和有效性。方法利用6探头的自动温控系统测试血液保存箱的降温速度、24h温度波动值、均匀性、稳定性、超温和断电报警等。制备悬浮红细胞,随机分配到两血液保存箱中。在6个时间点检测并比较两保存箱内悬浮红细胞的游离血红蛋白浓度。结果两保存箱报警功能正常;在空负载和满负载时,两血液保存箱间温度波动差异不显著（P〉0.05）,血液保存箱内部温度波动差异不显著;两保存箱内悬浮红细胞的游离血红蛋白浓度在同一时间点差异不显著,且浓度〈0.72g/L。结论两血液保存箱的性能良好,保存的血液在有效保存期内质量可靠。