生物传感器及其在药物分析中的应用进展

<正> 生物传感器(Biosensors)是近年来发展起来的一类应用生物反应的新型传感器。目前,这类传感器已在药物分析、生物化学、临床药学以及细胞化学、免疫学等领域中获得应用。本文主要综述生物传感器及其在药物分析中的应用进展。用于药物分析的生物传感器制备酶电极用于药物分析的酶电极,根据测定原理分为两类:一类为应用酶催化反应的酶电极,一类系应用酶与抑制剂特异反应的酶电极。关于这两类电极的反应原理及其制备笔者已作了报道。生物组织膜电极用于药物分析的生物组织膜电极,主要是有猪肾组织膜电极、木瓜组织膜电极、菠萝组织膜电极和黄瓜组织膜电极等。 SP+P_0 被测定药物S(底物)经生物催化剂B的催化反应生成对电极响应产物P和其他产物P_o。对电极响应的产物使电极产生响应,根据电极电位的变化即可求得药物的含量。     

生物技术文摘

B33- 19　通过流动注入分析来连续监测 D-葡萄糖和 L-乳酸　 Haouz A等 [Enzyme Microb Technol,2 0 0 2 ,30 (1) :12 9]D-葡萄糖或 L-乳酸氧化酶通过戊二醛与牛血清共聚交联 ,再镶嵌在氧电极的表面而制成酶电极 ,可将此酶电极装配到一个 L achat Quik Chem(R) 80 0 0流动注入分析 (FIA)系统。用这系统可以同时测定浓度范围为 0～ 4 0 g/ L 的葡萄糖和 L-乳酸。该酶膜每 2 min测量一次 ,能连续使用 3个月。这种酶电极存放在 4°C和干燥状态 ,其稳定性大于 1年。这种FIA系统可用来同时监测生物加工工业中的 D-葡萄糖和 L-乳酸的浓…     

T2毒素的放射免疫测定

合成了T2毒素的人工抗原T2-BSA和[~3H]T2。用T2-BSA免疫家兔,获得高质量的抗血清,与[~3H]T2的亲和常数为3.2×10~9M~(-1),终滴度1:2000。测定水中T2的最小检测值为0.10ng(1.0ng/ml),测定血和尿的样品时最小检测值为0.20ng(2.0ng/ml)。批内精密度 CV<9％,批间精密度CV<12％。乙酰T2,HT2和T2三醇的交叉反应率为190％,20％和0.13％,T2四醇和疣孢菌素A无交叉反应。     

太原市城区苯丙酮尿症发病情况调查及八例苯丙酮尿症患儿饮食干预

<正>苯丙酮尿症(phenylketonuria,PKU)是先天性、遗传性代谢病之一,属于常染色体、单基因隐性遗传病,是由于苯丙氨酸(phenylalanine,Phe)代谢途径中酶缺陷所致[1]。PKU的发病率有种族和地区差异,我国平均为8.84/105[2]。患儿出生时一般正常,通常在3~6个月时出现症状,1岁左右症状明显。早期出现呕吐、易激惹、生长迟缓等现象。未经治疗者在4~9个月开始有明显智力发育迟缓,约60%属     

槲皮素对血管紧张素Ⅱ致培养乳鼠心肌细胞肥大的抑制作用

目的:研究槲皮素(Quercetin,Que)对血管紧张素Ⅱ(Aug Ⅱ)诱发培养乳鼠心肌细胞肥大的抑制作用及机制。方法:分别用[~3H]胸苷、[~(14)C]尿苷和[~3H]酪氨酸标记测定DNA、RNA和蛋白质合成;用Lowry法测定蛋白质含量;用组蛋白ⅢS、[γ-~(32)P]ATP与蛋白激酶C(PKC)酶液一起保温测定PKC活性;用聚谷氨酸·酪氨酸(4:1)多肽、[γ-~(32)P]ATP与酪氨酸蛋白激酶(TPK)酶液一起保温测TPK活性。结果:Aug Ⅱ作用于心肌细胞24h后,心肌细胞总蛋白含量明显增加(P<0.01),[~(14)C]尿苷和[~3H]酪氨酸掺入量明显增加(P<0.01),而[~3H]胸苷掺入量未见增加(P>0.05);Aug Ⅱ作用30min后,心肌细胞PKC和TPK活性明显增加。Que(1-100μmol/L)能剂量依赖性地抑制Ang Ⅱ所致心肌细胞总蛋白含量、[~(14)C]尿苷和[~3H]酪氨酸掺入量、PKC及TPK活性的增加。结论:Que可抑制Aug Ⅱ致培养乳鼠心肌细胞肥大,该作用与抑制PKC及TPK活性有关。     

猪肠碱性磷酸酶的一步法分离

在酶的分离工艺中,免疫亲和层析法是项很有前途的新技术~[1～4]。它是利用抗原抗体反应的高度特异性,若以酶的抗体为配基制成免疫吸附剂,可从稀的酶提取液中,一步获得高纯度精酶制品。其精度主要依赖于抗体的质量。此外,根据免疫学中交叉反应的原理,使用同一     

45例急性胰腺炎的护理体会

急性胰腺炎是多种病因导致胰酶在胰腺内被激活后引起胰腺组织自身消化、水肿、出血甚至坏死的炎症反应[1]。临床以急性上腹痛、恶心、呕吐、发热和血胰酶增高等为特点。其发病急,变化快,病情轻重不一,且死亡率较高,是常见的急腹症之一。如得不到及时有效和彻底的治疗,可迁延成慢性     

西咪替丁中间体4-羟甲基-5-甲基咪唑的制备

西咪替丁(Cimetidine)生产的中间体5-甲基-4-咪唑羧酸乙酯(1)还原成4-羟甲基-5-甲基咪唑(2)的方法很多,文献报道有用氢化锂铝~[1～3]、金属钠-液氨~[4,5]、金属钠-甲醇~[6]、钾硼氢-三氯化铝~[7]、电解~[8,9]及三烷基铝~[10]等几种还原法。这些方法中只有少数适于工业生产,如钾硼氢-三氯化铝法的还原、缩合二步连乘收率达68～70％~[7]。我们采用金属钠-液氨-叔丁醇的体系进行还原,     

酶电极与药物研究

<正> 酶电极是近年来发展的一种新技术,是分析工作者的探针。酶电极自60年代后期问世以来。在很多学科中得到应用,并在应用中发展完善(固相酶→电化学的酶分析→酶电极60年代→生化电极70年代→生物电极80年代)。不管生化电极还是生物电极,其工作原理皆同于酶电极。一、酶电极及其原理     

两种方法检测血糖和尿素的结果比较

血浆葡萄糖 (Glu)和尿素 (U rea)测定在临床上具有重要意义 ,常用的方法有分光光度法、缩合法、酶偶联速率法和终点法 [1 ,2 ]等。但近几年 ,随着新的电极技术的发展 ,除电解质外 ,更多的生化指标可应用电极法进行分析。美国NOVA公司生产的 UL TRA- M急诊血气生化一体分析仪 ,即采用酶膜电极技术测定血中的葡萄糖和尿素 ,为了了解电极法与常用方法的关联性 ,我们将其与终点法作了比较。1　材料和方法1.1　材料1.1.1　仪器 :日本 OL YMPUS- AU 6 0 0型全自动生化分析仪 ;美国 N OVA公司生产 U L TRA- M急诊血气生化一体分析仪。…     

注射用门冬酰胺酶中可见异物检查方法的可行性探索*

目的：了解注射用门冬酰胺酶中可见异物的基本情况,分析其产生的原因,并对其检查方法进行探索性研究。方法：对收集的不同来源注射用门冬酰胺酶,采用灯检法进行可见异物检查,对检测结果进行汇总分析;对存在乳光的样品,采用浊度仪测定其浊度值;同时重点考察外源性影响因素(如光照、高温、高湿、复溶溶剂种类等)对可见异物检查结果的影响。结果：部分样品中检出有纤维状不溶物;部分样品复溶后呈现有乳光,其浊度值范围为2~20NTU。影响因素分析发现高温对注射用门冬酰胺酶可见异物有较明显影响。结论：可以采用灯检法来检测注射用门冬酰胺酶中“纤维状不溶物”,采用测定浊度值来解决注射用门冬酰胺酶中“乳光”问题。     

儿茶素对小鼠巨噬细胞VCAM-1表达的影响

<正>血管细胞黏附因子介导的血管炎性病变是很多疾病[如动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)[1]、风湿病、肾病等]共同的病理基础。研究发现[2]AS的血管壁中有VCAM-1的大量表达。过量表达的VCAM-1介导的炎症反应参与了AS发生发展的全过程[3]。儿茶素(catechin)是从茶叶中提取的酚类物质,有良好的     

从阿拉伯艾蒿分离到两种对苯并二氮杂和α_1肾上腺素能受体有亲和力的黄酮化合物(英文)

干燥阿拉伯艾蒿的酒精提取物对体外[~3H]地西泮和大鼠大脑皮质细胞膜结合产生抑制作用,两种化合物被分离纯化,其化学结构为毛地黄黄酮和玄参黄酮(IC_(50)分别为1.3±s0.1和22.7±S2.5μmol·L~1),两种化合物在体外还能抑制[~3H]哌唑嗪和大鼠脑皮质细胞膜结合,但不能改变[~3H]蝇蕈碱乙酰胆碱受体,[~3H]蝇蕈醇,[~3H]SCH 23390和[~3H]螺哌隆和膜的结合,Scatchard plot分析提示两种化合物对[~3H]地西泮和膜结合的抑制作用是通过竟争性和非竞争性混合机理而实现的。     

2—羟基—3—氨基—4—苯丁酸的合成

2-羟基 - 3-氨基 - 4-苯丁酸 (1 )是制备二肽免疫增强剂类抗癌新药乌苯美司的关键中间体 ,有多种合成方法 ,如 α-氨基苯乙酮法 [1]、α-氨基苯丙醛法 [2 ]、α-氨基苯丁腈法[3] 、苯丁烯酸甲酯法 [4 ] 、苯丙氨酸法 [5]和苹果酸二乙酯法 [6]等。以上各法均存在不同缺点 ,如α-氨基苯乙酮法 ,总收率不到 1 0 % ;α-氨基苯丙醛法和α-氨基苯丁腈法 ,均用剧毒氰化钾(钠 ) ;苯丁烯酸甲酯法用爆炸性的过氧化物 ;苯丙氨酸法合成步骤长 ,且用氢化铝锂和氰化钠等试剂 ;苹果酸二乙酯法中的烃化反应需在 - 78℃的低温下进行。上述各法均不适合工业化…     

建议改进门冬酰胺酶效价测定方法

门冬酰胺酶为抗肿瘤药,用于治疗白血病.[1]中国药典2000年版二部收载了其原料和制剂.[2]酶活力测定原理是基于门冬酰胺酶水解门冬酰胺产生氨,氨与碱性碘化汞钾反应生成黄棕色物用比色法测定,根据氨量计算酶的效价.实验中发现,药典采用0.001mol/L硫酸铵为对照,反应生成物吸收值偏低,造成样品效价偏高.     

21-羟化酶缺乏症患儿的生长发育及治疗

先天性肾上腺皮质增生症(congenital adrenal hyper-plasia, CAH)是一组常染色体隐性遗传疾病,由肾上腺皮质激素合成途径中酶的缺陷所引起。最常见的酶缺陷类型为21-羟化酶缺乏(21-hydroxylase deficiency, 21-OHD),占酶缺陷类型的90%,根据酶的缺陷程度又分为经典型及非经典型两种临床类型,儿童中主要为经典型。经典型21-OHD又分为完全缺乏和不完全缺乏两类。前者酶活性为0,皮质醇及醛固酮皆不足,临床表现为失盐性(salt-wasting, SW);后者酶活性为1%~10%,皮质醇及醛固酮的分泌量大致正常,在一般情况下能维持生理功能不发生失盐症状,仅表现为因高雄激素血症所引起的女性假两性畸形及男性假性性早熟,临床表现为单纯男性化型(simple virilizing, SV)。主要的治疗方法是皮质醇(糖皮质激素和盐皮质激素)替代治疗。如患儿未能及时治疗或者治疗不足,由于雄激素分泌过多,生长过快、骨成熟提前,使骨骺早闭,导致患儿身材矮小;但如患儿使用皮质激素过量,也常引起患儿矮小[1]。正常情况下,生理性糖皮质激素分泌量约为4.8~8.7 mg/ (m2·d),临床上最常用是的是生理性糖皮质激素氢化可的松片剂,常用剂量为10~20 mg/(m2·d),每日3次。超生理量的糖皮质激素能在下丘脑、垂体和靶器官水平干扰生长激素/胰岛素样生长因子-Ⅰ(growth hormone/insulin-like growth factor-I, GH/IGF-I)信号传导通路、抑制生长激素的释放、信号和基因传导与mRNA的加工等,从而抑制生长中儿童的线性生长[2]。为维持CAH 患儿理想的线性生长,治疗上应该以最低剂量的糖皮质激素适当替代,同时也能抑制肾上腺雄激素的过度分泌[3]。Nebesio T D 等[4]指出,线性生长是反映糖皮质激素治疗不当的最好指标。笔者经过查阅文献对经典型21鄄羟化酶缺乏患儿的生长发育及糖皮质激素对生长的影响进行了综述。     

血必净注射液治疗脓毒症的系统评价

目的 评价血必净注射液对脓毒症患者炎症指标、凝血功能及预后的影响.方法 检索中国学术期刊全文数据库 （CNKI）、万方数据库、维普中文科技期刊全文数据库 （VIP）、美国国家图书馆（PubMed）、Cochrane临床试验数据库 2008年 1月 -2013年 3月发表的有关血必净注射液治疗脓毒症的随机对照试验 （RCT）文献.根据纳入及排除标准选择文献,语种限定为中文或英文,并采用RevMan5.0进行 Meta分析.结果 按照入选标准,共纳入 13项临床随机对照研究,为中文发表且均为低质量文献.对患者 28 d病死率、急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ （APACHE Ⅱ ）评分、凝血功能[血小板计数 （PLT）、凝血酶原时间 （PT）、活化部分凝血活酶时间 （APTT）]及炎症指标[白细胞计数 （WBC）、降钙素原 （PCT）、C反应蛋白 （CPR）]等进行分析.Meta分析结果显示,血必净治疗组 28 d病死率[优势比 （OR）=0.39,95%CI（0.27~0.58）,P〈0.00001],APACHE Ⅱ评分[加权均数差 （WMD）=-3.43,95%CI（-4.72~ -2.15）,P〈0.00001],凝血功能指标 PT[WMD=-1.72,95%CI（-2.38~ -1.06）,P〈0.00001],APTT[WMD=-4.59,95%CI（-6.69~-3.50）,P〈0.00001],以及炎症指标WBC[WMD=-2.94,95%CI（-3.49~ -2.38）,P〈0.00001]明显低于对照组;PLT[WMD=40.63,95%CI（14.09~67.16）,P=0.003]显著高于对照组.血必净治疗组的炎症指标PCT[WMD=-7.25,95%CI（-16.58~2.08）,P=0.13]以及 CRP[WMD=-9.81,95%CI（-21.51~1.90）,P=0.10]与对照组相比差异均无统计学意义.结论 血必净注射液对于改善脓毒症患者炎症反应、凝血功能,以及降低病死率,改善 APACHEⅡ评分方面有一定作用.     

动物组织膜L-维生素C电极的研究

本文以猪肝组织切片偶合氧电极制成了维生素C生物电极。测试了电极的响应特性,当Cu²⁺)离子存在下,在21.14～352.3μg/ml的维生素C浓度范围,电极的动力学响应与维生素C浓度的对数呈线性关系。研究了激活剂的浓度、缓冲介质、温度等因素对电极性能的影响。测得该条件下酶促反应的米氏常数8.0×10^-4mol/L。将电极用于药物中Vc含量分析,结果令人满意。     

石墨炉原子吸收光谱法测定食品样品中微量铬

<正>上世纪六十年代即有研究发现人体铬缺乏与某些慢性病有关[1]。建立一套完整、可靠、快速的微量铬测定方法势在必行。但可能由于样品基质不同对微量铬的测定有较大影响,目前尚无适用于大部分样品的分析方法。铬元素测定方法主要有原子吸收石墨炉法[2-11]、示波极谱法、二苯碳酰二肼分光光度法[12]、荧光分析法[13]等。本文采用微波消解作为前处理方法从石墨炉最佳条件选取、基体改进剂选取及用量等方面对食品中微量铬的缝隙方法进行研究,期望为食品样品微量铬分析提供可靠的参考数据。     

59例急性胰腺炎的护理体会

急性胰腺炎(acute pancreatitis)是多种病因导致胰酶在胰腺内被激活后引起胰腺组织自身消化、水肿、出血甚至坏死的炎症反应。临床以急性上腹痛、恶心、呕吐、发热和血胰酶增高等为特点[1]。其发病急,变化快,病情严重,预后较差,如治疗不及时,可危及生命,做好其护理工作对于疾病的预后及防止复发有重要意义。现将我院近年来收治的59例急性胰