谷氨酸与代谢型谷氨酸受体1亚型、2／3亚型、4亚型在参环毛蚓的分布——免疫细胞化学研究

目的 探讨谷氨酸与其代谢型谷氨酸受体在参环毛蚓（P.aspergillum）的存在与否及分布情况。方法 用免疫细胞化学染色技术,在光学显微镜下观察谷氨酸与代谢型谷氨酸受体1亚型、2／3亚型、4亚型阳性细胞的形态与分布。结果 发现谷氨酸存在于参环毛蚓的脑、咽下神经节、腹部神经节的神经细胞、肌间神经细胞,以及肠上皮和体表上皮的非神经细胞。在围咽神经环与腹神经链及腹神经链所发出侧支的切面可见深染的细密的阳性神经纤维束。同型谷氨酸受体1亚型、4亚型仅存在于参环毛蚓的脑。未观察到代谢型谷氨酸受体2／3亚型阳性细胞的存在。结论 参环毛蚓中枢神经系统谷氨酸阳性神经细胞的部分细胞突起显著,形态成熟,围咽神经环与腹神经链所发出侧支的阳性神经纤维是它们的投射纤维;部分细胞无突起,形态幼稚,谷氨酸在此不是作为神经递质作用于其受体阳性神经细胞。     

豚鼠小肠壁神经丛的形态学观察

本文应用光镜和电镜对成年豚鼠小肠壁神经丛,粘膜下丛和肠肌神经丛进行了形态学的观察。神经丛是由AchE阳性反应的神经细胞组成不规则形状的神经节,以节间神经束连接构成,在铺片上显示为不规则的网状图案。肾上腺素能神经纤维成花篮状包围无荧光性的神经细胞体并在小血管,主要是小动脉周围形或致密的血管周神经丛,少数神经纤维直接分布于平滑肌。电镜观察显示,肠壁神经节不同于其它植物性神经节,节外无厚的结缔组织被膜而仅被以一层薄的均质性的基板,再外为成纤维细胞的纤长的突起。神经节是由神经细胞和神经胶质细胞以及它们的突起组成的实体,内不含其它细胞或组织成份。神经细胞被部份包埋于错综交织的神经纤维网中。神经纤维网很少包围整个神经细胞体。因此,常可见到神经细胞的部份胞膜直接露于节外间隙,中仅隔以一层基板。在神经节内还可见到含有不同类型突触小泡的神经终末支及其形成的突触(以轴体和轴树突触为多见)。本文实验观察表明,肠壁神经节的结构在许多方面与中枢神经系统相似而明显区别于其它植物性神经节。与中枢神经系统的主要不同点在于同一肠壁神经节内的神经细胞在形态上显示的不均一性。     

人小肠肌间神经丛的形态学观察

用镀银染色铺片法及常规电镜技术，对人小肠肌间神经丛进行了形态学观察。结果表明：人小肠肌间神经丛由神经纤维束和神经节组成呈与肠管共同始终的连续网格状态结构。神经节细胞形态呈高度的异南性、体积变异大，自１７９．８－３６８１７．６μｍ＾３，神经细胞平均密度为１３７５个／ｃｍ＾２。电镜下可见神经节为神经细胞与神经胶质细胞组成的实体，神经细胞胞体包埋于神经细胞与神经胶质细胞突起组成的神经纤维网中，仙含多种没     

婴儿结肠肌间神经丛及神经节细胞的形态学观察

目的用镀银染色铺片法对婴儿结肠肌间神经丛进行了形态学观察,为结肠的ENS发生以及生理、病理学研究就及肠神经异常性疾病诊治提供形态学依据。方法大体解剖新鲜婴尸,取结肠各段应用镀银染色铺片法观察,测量神经节分布密度及体积。结果婴儿结肠各部神经节形态分布无显著差异,婴儿结肠肌间神经丛由神经纤维束和神经节组成,呈与肠管共同始终的连续网格状结构,神经节细胞形态呈高度的异质性,未见巨细胞,神经细胞平均密度为327.32个/cm2。结论婴儿结肠肌间神经丛的形态和其他实验动物及成人基本相似,但从神经细胞的形态来看,则存在明显的异质性。婴儿结肠肌间神经元数低于成人和其他实验动物。婴儿结肠肌间神经元形态学改变与肠神经异常性疾病具有紧密联系。     

大鼠小肠嗜银、亲银细胞的分布及形态学观察

本文用肠卷石蜡切片的嗜银反应(黄荫乔法)、亲银反应(Singh法),对11只大鼠小肠的嗜银、亲银细胞的分布及形态学作了初步观察,结果如下。 1.大鼠小肠的嗜银、亲银细胞的密度,在十二指肠最高,从空肠到回肠逐渐减少。 2.嗜银、亲银细胞在肠腺基底部着色较浅,在腺上部着色加深,在绒毛顶端为深染。嗜银细胞基底部有突起,穿过基膜到达固有层。在固有层内,于突起附近有嗜银颗粒和突起相延续。嗜银颗粒到达细胞顶端较为多见,有时可见到嗜银颗粒释放到腺腔内。因此我们认为,嗜银、亲银细胞兼有内、外分泌双重功能。 3.在小肠固有层的结缔组织内,发现有嗜银细胞,细胞形状不规则,有突起,胞质和突起都充满嗜银颗粒,有时可见嗜银颗粒到达细胞外。颗粒的形态、致密度及染色特点,与上皮细胞之间的嗜银细胞相同,故这些细胞可能属于内分泌细胞。     

软组织网状神经束膜瘤1例报道并文献复习

目的 探讨软组织网状神经束膜瘤的临床病理特点和鉴别诊断。方法 对1例网状神经束膜瘤进行光镜、免疫组化和电镜观察。结果 肿瘤位于左尺骨远端软组织。长而纤细的肿瘤细胞突起网状、格子样、吻合状生长，排列于黏液水肿性、纤维性和胶原化的背景中，细胞纺锤状，胞质弱嗜酸性，核星形，无核分裂象。免疫表型：肿瘤细胞EMA和Vim阳性。电镜：肿瘤细胞可见长形的纤细的胞质突起，突起上有较多的吞饮小泡。结论网状神经束膜瘤是软组织神经束膜瘤的富有特征性的亚型，预后良好，诊断主要依靠常规病理、免疫组化和超微结构的综合观察。     

人胎小肠氮能神经元发育的研究

本研究用 NADPH-d组织化学法对人胎小肠氮能神经元的发育进行了观察。结果显示 :5个月胎龄时 ,肌间神经节处的圆形细胞中部分细胞分化成氮能神经细胞 ,细胞核不染色 ,胞质极少 ,呈浅蓝色 ,有的神经细胞有短小的突起。 6个月胎龄时 ,氮能神经元胞体明显增大 ,核大 ,胞质少 ,染色增深 ,在外纵肌层与内环肌层之间形成肌间神经节。由神经元胞体发出的神经纤维在肌间形成网状神经丛。同时 ,在内环肌层肌纤维之间出现氮能神经纤维分布。有的神经纤维穿过粘膜下层分布到粘膜肠腺基部。7个月胎龄时 ,肌间神经节细胞数目增多 ,胞质由少到多 ,染色强度增加 ,肌层神经纤维分布密度增加 ,在粘膜下层有时可见有 1～ 2个氮能神经元细胞体或小的神经节分布。8～ 10个月胎龄时 ,肌间神经节细胞和粘膜下层氮能神经元胞体及神经纤维呈深蓝色 ,内环肌层神经纤维分布密度增加。以上结果提示 :人胎小肠氮能神经元是由胚胎早期肌间神经节处的圆形细胞 ,通过细胞分化、增殖、生长发育而形成的     

人直肠肌间神经丛透射电镜的观察

目的研究人直肠肌间神经丛形态学的微观结构。方法采用国人成年直肠标本,经LKB-V型超薄切片机制成半薄切片,在直肠半薄切片上定位肌间神经丛后,进行超薄切片,厚度为50～70nm。醋酸铀、柠檬酸铅染色,JEOL-100CX透射电镜观察。结果在典型的肌间丛神经节可观察到3种细胞成分,即被囊细胞、胶质细胞和神经节细胞。根据神经节细胞间电子密度不同,可将神经节细胞分为明细胞和暗细胞两类。结论人直肠肌间神经丛含有与中枢神经系统相似的细胞成分,神经节内含有丰富神经胶质细胞,其与神经元的比例为2∶1,神经元发出“翼翅”状突起。     

μ阿片受体在大鼠结肠肠肌丛的神经化学特性

目的:探索μ阿片受体(MOR)在大鼠结肠肠肌丛的分布及化学神经解剖学特性。方法:取大鼠结肠右曲和左曲之间肠管行全层铺片,剥离粘膜层、粘膜下层和环形肌层,保留纵行肌层。运用免疫荧光组织化学双重标记技术染色,共聚焦显微镜下观察MOR在大鼠结肠肠肌丛的分布及与一氧化氮合酶(NOS)、肠血管活血肽(VIP)、P物质(SP)或降钙素基因相关蛋白(CGRP)等在肠神经细胞的共存关系。结果:免疫荧光组织化学染色显示:在大鼠结肠肠肌层,MOR阳性细胞聚集形成神经节,其阳性突起穿行于神经节之间形成网格状神经丛。在肠肌丛神经细胞内,可见MOR分别与NOS、VIP、SP、CGRP共存。MOR阳性神经纤维和终末分布于NOS阳性神经细胞周围,也可见部分NOS、VIP阳性神经纤维和终末分布于MOR阳性神经细胞表面。有大量SP和CGRP阳性神经纤维穿行于MOR阳性神经细胞之间并包绕于MOR阳性神经细胞的胞体周围。结论:在结肠的肠肌丛,MOR与抑制性和感觉性神经递质在肠神经细胞有共存,且相互之间有纤维联系,推测MOR可能介导了阿片类调节肠神经细胞内抑制性神经递质的释放,并可能对肠感觉信息的传递有调节作用。     

婴儿小肠肌间神经丛及神经节细胞的形态学观察

目的用镀银染色铺片法对婴儿小肠肌间神经丛进行了形态学观察,为小肠的肠道神经系统发生以及生理、病理学研究提供形态学依据。方法大体解剖新鲜婴尸5具,取小肠应用镀银染色铺片法观察小肠肌间神经丛。结果婴儿小肠肌间神经丛由神经纤维束和神经节组成,呈与肠管共同始终的连续网格状结构,神经节细胞形态呈高度的异质性,神经细胞平均密度为878个/cm2。结论婴儿小肠肌间神经丛的形态和其他实验动物及成人基本相似,但从神经细胞的形态来看,则存在明显的异质性。婴儿小肠肌间神经元数低于成人和其他实验动物。     

P2X2受体在大鼠胃肠系统肌间神经节中的分布

目的:研究P2X2受体在大鼠胃肠系统肌间神经节中的分布,为研究ATP作为神经递质对胃肠道肌间神经节节细胞的作用提供形态学基础。方法:免疫组织化学。结果:从胃到结肠均有P2X2受体阳性神经元和神经纤维分布,胃、小肠和结肠分别约60％、70％和50％的肌间神经节节细胞为P2X2受体阳性。结论:胃肠道系统多数肌间神经节节细胞都能通过ATP受体特别是P2X2受体对ATP产生反应。     

Comparison of enteric neuronal morphology as demonstrated by DiI-tracing under different tissue-handling conditions

 The aim of this study was to determine locations and morphologies of enteric neurons innervating the small intestinal mucosa of the pig after application of the carbocyanine tracer DiI onto a single villus. The tissue was processed in two ways: incubation (1) of fixed material (postmortem tracing) for several months and (2) of living specimens within organotypic culture in vitro for several days (supravital tracing). In both procedures DiI-labelled neurons were found in the three ganglionated plexuses, the internal and external submucous plexus as well as the myenteric plexus. Postmortem tracing revealed different neuronal morphologies. Adendritic type II neurons were present in all three plexuses, type IV neurons with short, scarcely branched, polarly emerging dendrites were mainly found in the myenteric plexus and small dendritic neurons were mainly present in the internal submucous plexus. The latter may correspond to minineurons hitherto described only immunohistochemically. Tracing within tissue culture showed somata of neurons and, partly, proximal segments of processes to be labelled. Subsequent immunohistochemistry using general neuronal markers revealed some neurons to be adendritic type II neurons. Visualization of dendrites was less clear, hampering an accurate morphological classification of dendritic neurons. Our results suggest that neurons of all ganglionated enteric nerve plexuses of the pig participate in the innervation of the mucosa, and that postmortem tracing revealed enteric neuronal morphology more clearly than supravital tracing. Since the former method cannot be applied for deciphering the chemical coding of enteric neurons, combination of both methods will extend our knowledge of the morphological substrate for the intrinsic neuronal microcircuits in the gastrointestinal tract. Accepted: 15 July 1998     

The tight junction component protein, claudin-4, is expressed by enteric neurons in the rat distal colon

The expression of a tight junction (TJ) component protein, claudin-4, in the enteric neurons was investigated in the rat distal colon by immunohistochemistry and RT-PCR. Claudin-4 immunoreactivity was detected in almost all neurofilament-positive enteric neurons both of the submucosal and the myenteric plexuses, and both of the cell bodies and the neurofibers. The immunoreactivity of enteric neurons for claudin-4 was divided into two types: strongly and weakly positive neurons. Especially in the myenteric plexus, the stained neurons were classified by Dogiel's morphological classification of enteric neurons. The strongly stained claudin-4 positive neurons show Dogiel type II morphology, while the weakly stained claudin-4 positive neurons show Dogiel type I morphology. These immunohistochemical data were supported by mRNA expression in the muscle plus submucosa preparation containing the submucosal and myenteric plexuses, as well as mucosa preparation. The physiological function of claudin-4 expressed on enteric neurons is unclear up to now. It is however suggested that claudin-4 expressed on enteric neurons might play roles for the neural activity, for example as insulation between neurofibers. In conclusion, the present study clearly shows that claudin-4 is expressed by enteric neurons. This is the first evidence that the neuron itself expresses the TJ component protein, claudin-4, in the nervous system.     

Neurons with 5-hydroxytryptamine-like immunoreactivity in the enteric nervous system: Their projections in the guinea-pig small intestine

Changes in the distribution of 5-hydroxytryptamine-like immunoreactivity have been examined in enteric neurons at various times after microsurgical lesions of the enteric plexuses. In the myenteric plexus, varicose immunoreactive nerve fibres disappeared or were reduced in number in ganglia anal to an interruption of the myenteric plexus. Up to about 2 mm on the anal side, all varicose immunoreactive fibres disappeared from the ganglia. At about 14–16 mm below an interruption, there were about 50% of the normal number of fibres in the myenteric ganglia and at about 24 mm the innervation was normal. In the submucosa, fibres immunoreactive for 5-hydroxytryptamine were absent from an area on the anal side following interruption of the myenteric plexus. From consideration of the pattern of disappearance, it is deduced that some myenteric nerve cell bodies send immunoreactive axons in an anal direction to supply submucous ganglia. The axons run for about 8 mm in the myenteric plexus, enter the submucosa and then run for a further 4 mm approximately.Thus, varicose fibres immunoreactive for 5-hydroxytryptamine, which occur around the enteric ganglion cells of both plexuses arise from nerve cell bodies in the myenteric ganglia that send their axons in an anal direction.     

人胚胎结肠肠神经系统发育的观察

目的　研究人胚胎结肠肠神经系统的发育过程 ,为进一步研究先天性巨结肠的发病机制提供参考。　方法　采用一抗为蛋白基因产物 (protein gene product9.5 ,PGP9.5 )和 S- 10 0蛋白抗体的免疫组织化学 PAP法 ,显示结肠肠神经系统中的神经元和神经胶质。　结果　人胚胎结肠肠神经系统发育有明显的阶段性。在胚胎发育早期 (胎龄 2～ 3月 ) ,肠管壁发育差 ,以后出现菲薄的平滑肌层和低平的肠粘膜 ,此期偶在原始肌间神经丛位置见S- 10 0蛋白免疫反应性神经 ;至发育中期 (胎龄 4～ 5月 ) ,肠壁分化出 4层结构 ,出现相当发达的绒毛 ,肌间神经丛中细胞明显增多 ,呈弥散分布于整个肌层间并逐渐迁移到粘膜下层和粘膜层 ,由初级和次级突起构成复杂的神经网络 ;至晚期 (6～ 9月 ) ,肠壁各层均增厚 ,肌间神经丛成簇分布 ,神经纤维构成的网络出现更为细小的 3级突起 ,粘膜下神经丛分化形成浅丛和深丛。　结论　结肠神经系的发育具有明显的阶段性。发育早期神经开始在肠壁肌间丛位置出现 ,发育中期神经成分在肠壁各层中出现并发育增生 ,晚期肠壁各层神经已分化和成熟 ,而在不同的发育阶段 ,原始病因可导致临床表现不一的先天性巨结肠症     

豚鼠胃肠道粘膜下神经丛的形态差异

使用NADH黄递酶组化法和自制的测试方格描绘法探讨胃肠道各段粘膜下神经丛的形态差异.结果发现,胃粘膜下神经丛神经节很少,主要存在于胃底和幽门窦.三段小肠粘膜下神经丛形态基本类似,神经网格较小较密,神经节较多较小.大肠各段的粘膜下神经丛呈现明显的差异.盲肠粘膜下神经丛的网格是胃肠道中最大最稀的.升结肠粘膜下神经丛神经节最大,节间束最粗,并出现神经节与神经节直接相连现象.此外,在小肠和盲肠,可见粘膜下神经丛与血管伴行现象.     

猪食管神经支配的神经化学研究——一氧化氮类及肽类成分在平滑肌中的分布(英文)

采用免疫荧光组织化学技术及迷走神经切断术,探讨猪食管一氧化氮类及肽类神经支配的神经化学特性。在光学显微镜下可观察到肌间神经丛及粘膜下神经丛中有部分神经元呈nNOS、VIP、GAL、NPY、PACAP、L-ENK、SP、5-HT及CB免疫阳性,但未见CGRP及SOM阳性神经元。nNOS及CB免疫阳性产物主要分布于不同的神经元胞体内。将PGP9.5作为神经元胞体的标记物,并采用免疫荧光免疫组织化学双重染色方法,分别观察了PGP9.5与nNOS、VIP、SP的双标情况。结果如下:(1)nNOS免疫阳性神经元约占PGP9.5标记神经元总数的63%,而VIP免疫阳性神经元约占36%,SP免疫阳性神经元约占28%;(2)神经节内神经元的平均数量呈现吻尾方向的递增趋势,且食管腹段神经丛内神经节数量明显高于食管其他部位;(3)食管肌层内VIP/GAL/NPY免疫阳性纤维分布最广,其中部分阳性纤维同时呈nNOS或PACAP免疫阳性;SP和/或L-ENK免疫阳性纤维在粘膜肌层的分布明显多于平滑肌层。CGRP阳性纤维非常少见,这一点不同于对其他动物的观察结果;(4)经一侧迷走神经切断后,肌间神经丛内PACAP及5-HT免疫阳性纤维明显减少,提示这些纤维可能来源于迷走神经;而平滑肌中VIP/GAL/NPY和/或nNOS免疫阳性纤维数量未发现明显变化,可能为内源性来源。