兔下颌骨髁状突软骨细胞体外培养及生物学特性的研究

为探讨兔下颌骨髁状突软骨细胞的体外培养方法及其生物学特性，用胰酶及胶原酶联合消化法获取软骨细胞，并在ＤＭＥＭ培养基中进行原代及传代培养；通过形态学观察及免疫组织化学染色对软骨细胞的贴壁率、生长曲线及表型等细胞生物学特性进行了研究。结果：所获软骨细胞主呈多角形，第３代软骨细胞１２ｈ贴壁率达９５％，软骨细胞倍增时间约５５．１ｈ，６代以内软骨细胞的Ⅱ型胶原蛋白稳定表达。结果表明：本方法获软骨细胞具有稳定     

兔下颌骨髁状突软骨细胞的分离,培养和鉴定

获得均一性的兔髁状突软骨细胞。     

颞下颌关节骨关节病髁状突软骨细胞体外培养及细胞生物学特性研究

目的:从兔的颞下颌关节骨关节病模型动物获得髁状突软骨细胞并行体外培养.方法:采用部分关节盘手术切除的方法制造颞下颌关节骨关节病模型,组织大体观察、超微结构观察和组化检测方法确定骨关节病的存在.在此基础上,通过机械分离、胰蛋白酶和胶原酶联合消化的方法从骨关节病髁状突软骨组织中获得软骨细胞,进行体外环境下的贴壁培养;通过软骨细胞特异性蛋白的免疫组化方法进行细胞鉴定.四甲基偶氮唑盐法比较病理模型细胞与正常细胞的增殖能力差异.结果:上述颞下颌关节骨关节病模型全面地模拟了骨关节病变关节软骨组织的特征;利用机械分离、胰蛋白酶胶原酶联合消化的方法成功地从骨关节病髁状突软骨组织中分离出软骨细胞并在体外贴壁条件下培养成活;应用特异性的Ⅱ型胶原多克隆抗体和聚合性糖胺多糖单克隆抗体对培养细胞进行免疫组化检测鉴定,均显示阳性.骨关节病髁状突软骨细胞的增殖能力高于正常细胞.结论:成功地建立了骨关节病髁状突软骨细胞的体外模型;骨关节病早期的髁状突软骨细胞表现出增殖活跃的特性.     

兔髁状突软骨细胞藻酸盐凝胶三维培养体系的建立

目的:建立兔髁状突软骨细胞的藻酸盐凝胶三维培养体系.方法:利用机械与酶消化的方法获得均一性的兔髁状突软骨细胞,在二维贴壁培养条件下增殖至P2代;将P2代细胞高密度条件下转入藻酸盐凝胶培养介质,进行三维培养;分别对培养细胞凝胶微球行石蜡包埋与树脂包埋切片,对三维培养条件下的软骨细胞行组织化学、免疫组织化学检测和超微结构观察.藻酸盐凝胶三维体系培养6周后,以EDTA分解凝胶,收获培养的软骨细胞,免疫组化法检测三维体系中收获的软骨细胞的蛋白合成能力.结果:藻酸盐凝胶三维培养体系中的髁状突软骨细胞生长状态良好;培养6周后从凝胶体系中收获细胞的软骨特异性功能蛋白表达水平较转入三维体系前未见降低,培养细胞保持了良好的分化表型.结论:成功地建立了髁状突软骨细胞的藻酸盐凝胶三维培养体系,在该体系中,软骨细胞生长状态与功能蛋白分泌能力良好.     

压力对体外培养下颌髁状突软骨细胞基质中蛋白多糖合成的影响

[目的]探讨机械压力对体外培养兔下颌髁状突软骨细胞基质中蛋白多糖合成的影响.[方法]利用自制压力装置对体外培养兔下颌髁状突软骨细胞施以不同压力,收集细胞基质中的蛋白多糖,以硫酸咔唑法测定蛋白多糖代谢产物葡萄糖醛酸的含量,间接反映软骨细胞基质中蛋白多糖合成变化情况.[结果]-0.05 MPa组中葡萄糖醛酸含量高于其余各组(P＜0.05),持续作用10 min后,葡萄糖醛酸含量最高;而0.1 MPa组葡萄糖醛酸含量低于其余各组(P＜0.05).[结论]-0.05 MPa 的压力持续作用10 min,能促进兔下颌髁状突软骨细胞蛋白多糖的合成代谢,可用于软骨组织工程种子细胞的培养.     

雌二醇对兔髁突软骨细胞增殖与分化的影响

采用机械分离及胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶联合消化的方法，获得兔髁突软骨细胞。应用MTT四唑盐比色法，同位素掺入法检测不同剂量71-β雌二醇（E2）（10^-12～10^-6mol/L）对兔髁突软骨细胞生长、DNA、胶原及蛋白多糖合成的影响，旨在观察雌二醇对外体培养的兔髁突软骨细胞增生与分化的影响。结果表明：10^-10～10^-8mol/L及10^-1～10^-8mol/L17β-E2对体外培养的兔髁突软骨细胞生长及DNA合成具有刺激作用，且呈剂量依赖性，最大效应浓度分别为10^-8mol/L及10^-9mol/L。但进一步增加E2浓度则刺激作用减弱。10^-6mol/L具有明显抑制性。E2对蛋白多糖合成具有相似的作用，最大刺激效应浓度为10^-8mol/L。而10^-6mol/L E2具有显著抑制作用。E2对胶原蛋白的合成无明显作用。结果显示：17β-E2对外培养的兔髁突软骨细胞增殖及分化具有双向性作用。随其剂量不同，既具有促进效应又具有抑制效应。表明雌激素对维持关节的正常功能具有重要意义，可能在颞下颌关节某些疾患的发生及进展中起一定作用。     

雌二醇对兔髁突软骨细胞增殖与分化的影响

采用机械分离及胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶联合消化的方法,获得兔髁突软骨细胞。应用MTT四唑盐比色法,同位素掺入法检测不同剂量17-β雌二醇（E2）（10-12～10-6mol/L）对兔髁突软骨细胞生长、DNA、胶原及蛋白多糖合成的影响,旨在观察雌二醇对体外培养的兔髁突软骨细胞增生与分化的影响。结果表明10-10～10-8mol/L及10-11～10-8mol/L17β-E2对体外培养的兔髁突软骨细胞生长及DNA合成具有刺激作用,且呈剂量依赖性,最大效应浓度分别为10-8mol/L及10-9mol/L。但进一步增加E2浓度则刺激作用减弱。10-6mol/L具有明显抑制性。E2对蛋白多糖合成具有相似的作用,最大刺激效应浓度为10-8mol/L。而10-6mol/LE2具有显著抑制作用。E2对胶原蛋白的合成无明显作用。结果提示17β-E2对体外培养的兔髁突软骨细胞增殖及分化具有双向性作用。随其剂量不同,既具有促进效应又具有抑制效应。表明雌激素对维持关节的正常功能具有重要意义,可能在颞下颌关节某些疾患的发生及进展中起一定作用。     

静压力对新生SD大鼠髁状突软骨细胞增殖影响的体外实验研究

目的：探讨不同静压力对髁状突软骨细胞增殖的影响。方法：对培养到第三代的新生SD大鼠髁状突软骨细胞加载0、12、24、36kPa的静压力1h后立即收集样本，用流式细胞仪分析各样本各增殖周期DNA含量变化，计算细胞增殖活性指数。结果：12、36kPa静压力能降低髁状突软骨细胞的增殖活性，24kPa静压力能增加髁状突软骨细胞的增殖活性。结论：静压力对髁状突软骨细胞的增殖活性具有双重效应，即压力过大过小均不利于软骨细胞的增殖，适当静压力能促进软骨细胞的增殖。     

两种培养基对软骨细胞体外培养影响的对比研究

目的：研究不同培养基中兔关节软骨细胞生物学行为的差异，为软骨组织工程中软骨细胞的培养寻找最合适的培养基。方法：取3个月龄新西兰兔关节软骨消化获取软骨细胞，以相同密度分别用两种培养基(F-12、1640)进行培养，观察其形态、生物学行为、增生速度、特征性产物分泌量及黏附能力。分析两种培养基培养结果，对比其对体外培养关节软骨细胞的影响。结果：软骨细胞在1640培养基中贴壁、生长较快，细胞形态均一，特征性产物分泌旺盛。结论：在两种培养基中1640培养基更适合进行关节软骨细胞体外培养。     

关节软骨细胞的分离、培养及表皮细胞生长因子对其影响

目的：研究关节软骨细胞的原代分离及体外培养，了解表皮细胞生长因子（ＥＧＦ）对其生长和去分化趋势的影响。方法：（１）用自制消化瓶分离原代软骨细胞并培养、传代；（２）锥虫蓝染色测定细胞存活率，测定克隆率；（３）比较ＥＧＦ对软骨细胞增殖以及去分化趋势的影响。结果：（１）自制消化瓶能在３ｈ内将软骨碎块消化完毕；（２）细胞存活率为８８．４％，克隆率为２９．４％；（３）ＥＧＦ显著促进软骨细胞增殖（Ｐ〈０．０５     

国人小肠长度的测量

本文报道和分析测量了139具尸体的小肠长度。成年男性54例,均长414.30±9.60厘米;成年女性47例,均长345.87±8.19厘米;男女两性小肠均长382.48±6.40厘米,且两性小肠长度存在非常显著性差异。男性胎儿13例,均长218.46±8.76厘米;女性胎儿25例,均长211.60±7.31厘米;胎儿两性小肠均长213.95±5.68厘米,两性间无差异。求相关系数表明,r=0.039,小肠长度与身高完全无关。     

国人下颌孔的定位研究

用200例(男124、女76)长春市郊出土的干燥成人下颌骨进行了下颌孔定位的研究。所测得的数据,均通过统计学处理。结果发现下颌孔的位置是变化的,但下颌孔主要位于冠突最高点与下颌角连线的上五分之三与下五分之二交界处。同时进行了男、女性别之间及同一性别两侧之间的对比研究。从研究结果看,除下颌孔至下颌角的距离在男、女性别之间存在着明显性别差异以外,其余各项未看出明显性别差异。     

国人腹主动脉不成对脏支起点高度的观察

在162例成年尸体上观察的结果如下:腹腔动脉起点的高度,以平L_1上1/3者最多,平Th_(12)下1/3者次之,平均在L_1上1/3上部。肠系膜上动脉起点的高度,以平L_1上1/3者最多,平L_1下1/3者次之,平均在L_1中1/3下部。肠系膜下动脉起点的高度,以平L_3下1/3者最多,平L_3中1/3者次之,平均在L_3下1/3上部。腹腔动脉起始部下缘与肠系膜上动脉起始部上缘间的距离,以在0.1～0.5厘米之间者最多,平均距离为0.41厘米。肠系膜上动脉起始部下缘与肠系膜下动脉起始部上缘间的距离,以在5.0～7.0厘米之间者最多,平均距离为6.36厘米。腹腔动脉、肠系膜上动脉和肠系膜下动脉起始部下缘与腹主动脉分叉角顶之间的距离,分别以在12.0～14.0厘米、10.0～13.0厘米和3.0～5.0厘米之间者最多,它们的平均距离分别为13.03厘米、11.28厘米和4.21厘米。     

猫直肠的初级传入和传出神经元节段性分布(HRP法研究)

本文用成年猫8只,向直肠壁浆膜下层和肌层内多点注入10％HRP溶液200微升,研究结果证明①猫直肠初级传入神经来自双侧(?)_1至腰_5和骶_1至尾_1的脊神经节,其高峰节段是腰_2和骶_2节段。②脊神经节内直肠的初级传入神经元胞体多为圆形和椭圆形,少数是梭形和不规则形。③直肠初级传入神经元的中枢突经李氏束深面进入骶髓_(13)节段,围绕后角形成较大的外侧束和较小的内侧束。两束沿后角外侧阳内侧缘行向腹侧,其终末均终止于灰质Ⅱ,Ⅲ层和Ⅴ、Ⅶ层.④直肠副交感节前神经元位于双侧骶_1至尾_1节段的中间带外侧核,并在网状核、侧素、后外侧核、中界核和前角后外侧核也见到标记细胞。     

兔胰腺器官内淋巴管

本文对家兔胰腺器官内的淋巴管进行了光镜和电镜观察。胰腺毛细淋巴管和淋巴管存在小叶间和被膜下。毛细淋巴管的超微结构与其他器官所见相同。     

弱视治疗中的有关因素分析

本文报导了83例119眼弱视治疗及随访情况,其中经随访一个月以上的93眼中,56眼(60%)视力恢复三排以上或达1.0以上。 视力恢复与开始治疗的年龄有明显的关系,5岁以前开始治疗者疗效较5岁以后开始治疗者显然好得多。非中心凹注视者疗效不一定比中心凹注视者差,而大多数非中心凹注视眼视力提高者转变为中心凹注视。定期随访,严格认真地遮盖健眼,及强迫多使用弱视眼是治疗弱视的重要原则。     

头孢吡肟中间体合成条件考察

目的：在现有的实验室务件下以7-ACA为原料合成头孢吡肟中间体，并在一定程度上提高收率。方法：与国外文献报道的相关方法具有一致性，同时，采用正交实验设计方法考察了一些关键步骤(时间、温度、剂量)对中间体收率的影响。结果：中间体收率为32．7％。结论：该方法使中间体的合成更易于控制，避免了一些繁杂的操作，并降低了实验成本。     

血小板聚集活动脉粥样硬化发生中的作用

为查明血小板聚集活性在动脉粥样硬化发生中的作用,在造成动粥模型前测定血小板对ADP的聚集性,分为高敏感性血小板组和低敏感性血小板组。结果表明,高敏感组的动粥斑块病变比低敏感组明显加重(P<0.05)。但是,两组脂质和脂蛋白变化,除胆固醇有明显差异外,其它各项指标比较均无差异(P<0.05)。