PCR检测乙型肝炎患者血清HBV DNA

ＰＣＲ检测乙型肝炎患者血清ＨＢＶＤＮＡ湖南省儿童医院（４１０００７）李梨平湖南中医学院第一附属医院（４１０００７）王伟华本文应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术直接检测病毒性肝炎患者血清中的ＨＢＶＤＮＡ，以探讨ＰＣＲ技术在ＨＢＶ感染诊断中的应用以及ＨＢＶＤ...     

聚合酶链反应标记输血传播病毒(TTV)地高辛素探针的初步应用

用聚合酶链反应法（ＰＣＲ）制备地高辛素标记的输血传播病毒（ＴＴＶ）探针，并与巢式ＰＣＲ法（ｎＰＣＲ）比较。结果该探针具有ＴＴＶ特异性，其灵敏度为１０ｐｇＤＮＡ。应用该法检测１０８份非甲～庚型肝炎病人的血清标本，ＴＴＶＤＮＡ阳性率为１８５％（２０／１０８）；检测２２份病人的粪便标本，ＴＴＶＤＮＡ阳性率为２７３％（６／２２）。该法与ｎＰＣＲ法的总符合率为９６９％（１２６／１３０）。结论：用ＰＣＲ法直接制备地高辛素标记ＤＮＡ探针简便、快速、灵敏度高，特异性好。应用该法从６名病人的粪便中检出ＴＴＶＤＮＡ，提示ＴＴＶ有可能通过粪口途径传播。     

应用连接介导PCR法于线粒体DNA的测序

目的 简化ＤＮＡ测序方法，优化条件，以适用于线粒体ＤＮＡ的测序。方法 应用Ｍａｘａｍ Ｇｉｌｂｅｒｔ化学断反应和连接介导ＰＣＲ（Ｌｉｇａｔｉｏｎ Ｍｅｄｉａｔｅｄ ＰＣＲ，ＬＭＰＣＲ）来测定线粒体ＤＮＡ的序列。结果 读取的１４０ｂｐ的核苷酸序列，输入基因库，确定为线粒体ＤＮＡ重链８０５１～８１９０片段的序列，符合率为７０．７％（９９／１４０）。结论 该方法改进的成功，对进一步进行线料体ＤＮＡ氧化损     

多聚酶链反应技术及其临床应用

多聚酶链反应技术及其临床应用江西省九江市传染病医院（江西３３２０００）魏孟贵，陈春晖１多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术原理分子探针技术相当敏感，可以测到Ｐｇ水平；但是，最近发展起来的ＰＣＲ更为敏感，可以使ＤＮＡ检测的灵敏度达到Ｆｇ水平。ＰＣＲ扩增ＤＮＡ的过...     

美国THMP·TRONIC型PCR仪的性能及应用

美国ＴＨＭＰ·ＴＲＯＮＩＣ型ＰＣＲ仪的性能及应用浙江省义乌市人民医院设备科吕群随着现代生命科学技术的进步，多聚酶链式反应（简称ＰＣＲ）技术在近几年得到了很大发展．ＰＣＲ技术是一种体外扩增特异ＤＮＡ片段的技术，其原理是在模板ＤＮＡ、引物和四种脱氧核糖苷...     

肾综合征出血热病毒分型的研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法对４株肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）病毒进行了分型。ＨＦＲＳ病毒的ＲＮＡ经逆转录为ＣＤＮＡ后用ＮＴＮ（野鼠型）、ＳＥＯ（家鼠型）两种引物进行体外扩增，经琼脂糖凝胶电泳，ＰＣＲ产物的ＮＤＡ片段与Ｍａｒｋ对照，证实扩增出的产物为ＨＦＲＳ病毒ＤＮＡ片段。ＰＣＲ分型与物异性单克隆抗体（ＭｃＡｂ）间接免疫荧光法分型作比较，结果相符合。     

庚型肝炎病毒PCR产物直接序列测定方法的建立及应用

以ＰＣＲ产物为测序模板，γ３２ＰＡＴＰ标记的ＰＣＲ扩增引物为测序引物，用ＴａｑＤＮＡ聚合酶为测序酶，建立了庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）ｃＤＮＡ序列分析方法。应用本法测定１份ＰＣＲ阳性产物的ＨＧＶｃＤＮＡ序列，图谱呈清晰的序列梯，其序列与ＧＢＶＣ（Ｕ３６３８０）和ＨＧＶ（Ｕ４４４０２）的相应片段序列比较，同源性分别为８５６５％（１９１／２２３）和８５２％（１９０／２２３）。与用荧光法测定的另一株ＨＧＶ序列有高度一致性。对同一样品两端测序，重叠部分序列完全一致。表明ＰＣＲ产物直接测序法可用于ＨＧＶ核酸序列分析。     

用Logistic回归模型预测血清中HBV－DNA的活动性

多聚酶链反应（简称ＰＣＲ）技术检测血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ的活动性具有很高的敏感性，但因自身的特点，应用受到限制．结合乙肝三系检测结果，用Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归模型配合ＰＣＲ检测结果具有较好的配合适度，在没有条件开展ＰＣＲ检测项目的情况下根据乙肝三系检测结果用Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归模型预测血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ的活动性。     

应用PCR技术对我院环境HBVDNA的调查

应用ＰＣＲ技术对我院环境ＨＢＶＤＮＡ的调查文细毛，徐秀华，任南，王曼平为了解我院环境乙型肝炎病毒（乙肝病毒）污染情况，我们于１９９４年１０月采用聚合酶链反应（Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）技术检测和寻找我院环境中存在的乙型肝...     

HIV-1基因亚型分型:异源双链泳动分析法

应用套式ＰＣＲ（ｎｅｓｔｅｄＰＣＲ）对２４份ＨＩＶ感染者外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）样品进行扩增，从样品中获得了ＨＩＶ１膜蛋白（ｅｎｖ）基因的核酸片段，然后与已知各标准亚型的对照质粒的相同片段ＰＣＲ产物进行杂交，使样品ＤＮＡ与质粒ＤＮＡ同源部位配对形成异源双链体，根据其在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的泳动率可确定其亚型。并将这种异源双链泳动分析法（ｈｅｔｅｒｏｄｕｐｌｅｘｍｏｂｉｌｉｔｙａｓａｙ，ＨＭＡ）的结果与ＤＮＡ序列测定结果比较。实验证明，ＨＭＡ是一种快速、简便、特异和可靠的ＨＩＶ亚型的分析方法     

聚合酶链式反应技术在肺科中的应用

聚合酶链式反应技术在肺科中的应用山东省潍坊市人民医院（２６１０４１）王连云聚合酶链式反应（ＰＣＲ）是近年发展起来的一种特定ＤＮＡ片段体外定向扩增法，已渗透到生命科学的各个领域。这种方法需时短，操作简单，能在普通实验室中完成，结果可靠。因此，ＰＣＲ技术...     

多聚酶链反应在阿米巴病流行病学研究中的应用

用两对引物扩增（ＰＣＲ）溶组织内阿米巴带囊者粪便中的ＤＮＡ，以鉴别感染虫株的致病性，致病和非致病性ＰＣＲ均为阳性者１人（３．１％），仅一项阳性者分别为６人（１８．８％）和２５人（７８．１％）。７例致病性ＰＣＲ阳性者中，６人有腹泻症状（ＯＲ＝３１．５）。各种对照标本均呈ＰＣＲ阴性反应。以ＰＣＲ法对一小样本人群进行阿米巴病调查，致病和非致病虫株的感染率均为１０％。结果表明，在阿米巴病流行病学调查中，可     

PCR-SSCP-DNA序列分析法检测人肺癌中K-ras基因突变

应用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）－单链构象多态性（ＳＳＣＰ）－ＤＮＡ序列分析法，对４０例肺癌样品中Ｋ－ｒａｓ基因突变进行检测。ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染分析，突变检出率为３０％（１２／４０），发现于肺腺癌的Ｋ－ｒａｓ基因突变率为４４％（１２／２７）；ＤＮＡ序列分析，１２例筛选突变阳性样品中的１１例检出了突变位点，９０％的突变发生于１２密码子，其突变谱以Ｇ→Ｔ颠换（占４０％）和Ｇ→Ａ转换（占６０％）为主。本研究结果显示ＳＳＣＰ银染分析对大量样品进行阳性筛选有很好的应用价值，ＰＣＲ－ＳＳＣＰ－ＤＮＡ序列分析法是检测基因突变的有效手段。     

应用聚合酶链反应（PCR）检测乙型肝炎患者的HBV一DNA

应用聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）检测１０８例乙型肝炎患者血清中ＨＢＶ一ＤＮＡ，在不同类型的ＨＢＶ感染标志物（ＨＢＶＭ）的血清中结果有所不同：（１）在ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和抗ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率８６．１１％（３１／３６）；（２）在ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｅ和抗ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率５５．８８％（１９／３４）；（３）在抗ＨＢｓ、抗ＨＢｅ和ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率为２０％（２／１０）；（４）在抗ＨＢｅ和抗ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率为２５％（２／８）；文中就ＰＣＲ检测的结果及临床意义作了扼要的讨论。     

应用聚合酶链反应（PCR）检测乙型肝炎患者的HBV—DNA

应用聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ Ｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）检测１０３例乙型肝炎患者血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ，在不同类型的ＨＢＶ感染标志物（ＨＢＶＭ）的血清中结果有所不同：（１）在ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和抗ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率８６．１１％（３１／３６）；（２）在ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｅ和抗ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率５５．８８％（１９／３４）；（３）在抗ＨＢｅ和ＨＢｃ阳性血清     

用聚合酶链反应研究乙型肝炎病毒的灭活

建立测定乙肝病毒脱氧核糖核酸（ＨＢＶ ＤＮＡ）的聚合酶链反应－溴乙锭法（ＰＣＲ－ＥＢ），该方法特异性好，灵敏度为１ｐｇＨＢＶ ＤＮＡ，可能检出ＨＢＶ敏感动物黑猩猩的最小感染量。应用ＰＣＲ－ＥＢ法测定氯消毒剂对ＨＢＶ的灭活作用表明，有效氯１２５０ｍｇ／Ｌ作用６０分钟或２ ５００ｍｇ／Ｌ作用３０分钟可使１０倍ＰＣＲ灵敏度的纯化ＨＢＶ ＤＮＡ转阴；有效氯２ ５００ｍｇ／Ｌ作用３０分钟或１ ２５０ｍｇ／     

聚合酶链反应技术诊断念球菌的进展

多聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测无菌源（血液、脑脊液、腹腔液）标本诊断念 球菌病方面局长迅速。本文阐述了念球功物引物设计、破和ＤＮＡ技术，ＰＣＲ及其产物检测方法，ＰＣＲ的注意事项等方面的研究进展。     

PCR技术在卫生微生物检测中的应用

ＰＣＲ技术在卫生微生物检测中的应用叶怀庄，吴丽丽浙江医科大学公卫学院卫生检测中心杭州多聚酶链式反应（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）［１］是近年来分子生物学领域中一项具有革命性的技术突破，是基于天然ＤＮＡ复制的规律而设计的一种...     

聚合酶链反应检测HBV DNA在HBV不同血清免疫学标志组合中的应用价值

乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染是一种世界性传染病，我国为高流行区，约1亿人口为乙型肝炎表面抗原携带者。随着聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术的推广应用，对患者体内ＨＢＶ复制及传染性有了更深刻的认识，现将本研究应用ＰＣＲ检测ＨＢＶＤＮＡ在ＨＢＶ不同血清免疫学标志中的分布结果报告如下。一、材料与方法：（1）标本来源：135份血清均来自本站实验室门诊，凡采用聚合酶链反应检测ＨＢＶＤＮＡ且同时检查ＨＢＶ血清免疫学标志者，静脉采血2ｍｌ，分离血清置-20℃备用。（2）试剂及方法：ＨＢＶＤＮＡ（ＰＣＲ法）购自复旦大学希格尔有限公…     

聚合酶链反应技术诊断念球菌的进展

多聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测无菌源（血液、脑脊液、腹腔液）标本诊断念球菌病方面发展迅速。本文简述了念球菌的引物设计、破壁和ＤＮＡ提取技术，ＰＣＲ及其产物检测方法，ＰＣＲ的注意事项等方面的研究进展。