RhIL—2对人骨髓CFU—GM,CFU—E和BFU—E的影响

采用甲基纤维素体外半固体培养法证明，５０－１０００Ｕ／ｍｌ ｒｈＩＬ－２单用对人骨髓造血祖细胞的ＣＦＵ－ＧＭ〉ＣＦＵ－Ｅ及ＢＦＵ－Ｅ无直接刺激增生作用；当与ＧＭ－ＣＳＦ联用，１００－４００Ｕ＝ｍｌｒｈＩＬ－２其ＣＦＵ－ＧＭ集落形成率明显高于单用ＧＭ－ＣＳＦ的对照组；当与ＥＰＯ联用时，其ＣＦＵ－Ｅ及ＢＦＵ＝Ｅ集落形成率 于单用ＥＰＯ对照组，而１０００Ｕ／ｍｌｒｈＩＬ－２期 ３咱集落形成数目呈下降趋势     

用小鼠骨髓内皮细胞条件培养液代替造血刺激因子培养CFU— …

利用大于１０ｋＤ组分的小鼠骨髓内此细胞条件培养液（ｍＢＭＥＣ－ＣＭ）作刺激物体外琼脂培养ＣＦＵ－ＧＭ,与ｍＧＭ－ＣＳＦ合用培养ＨＰＰ－ＣＦＣ获得成功。就培养ＣＦＵ－ＧＭ和ＨＰＰ－ＣＦＣ而言,用细胞因子作刺激物与并用大于１０ｋＤ组分的ｍＢＭＥＣ－ＣＭ作刺激物相比较,以后者的ＣＦＵ－ＧＭ及ＨＰＰ－ＣＦＣ产率最高。     

骨髓内皮细胞无血清条件培养液对CFU-E和BFU-E生成的影响

利用本室建立的小鼠骨髓内皮细胞株作传代培养 ,收集其无血清条件培养液 ,离心超滤 ,观察分子量(MW) >1 0 0 0 0组分及分子量 <1 0 0 0 0组分对红系生成的影响。结果表明 :分子量 >1 0 0 0 0组分对CFU E和BFU E有明显刺激作用 ,且在 2 %～ 6% (V/V ,下同 )范围内集落产率随浓度增加而增加 ;而分子量 <1 0 0 0 0组分对CFU E ,BFU E有明显抑制作用 ,且在 1 0 %～ 40 %范围内集落产率随浓度增加而降低     

P物质体外对骨髓CFU—GM和CFU—C21的影响

目的：探讨Ｐ物质与造血的关系。方法：采用甲基纤维素半固体造血祖细胞培养法检测正常血浓度的ＳＰ以及不同浓度的ＳＰ对骨髓ＣＦＵ－ＧＭ和ＣＦＵ－Ｃ２１的作用。结果：１０＾－１０ｍｏｌ．Ｌ＾－１和１０＾－１１ｍｏｌ．Ｌ＾－ＳＰ组ＣＦＵ－ＧＭ的产率分别为１９３±１９和２０６±４０,与对照相比具有显差异;１０＿１６－ｍｏｌ．Ｌ＾－１和１０＾－１１ｍｏｌ．Ｌ＾－１ＳＰ对ＣＦＵ－Ｃ２１也有明显刺激作用,前ＣＦ     

用WEHI3—条件培养液代替肺—条件培养液培养CFU—GM

用ＷＥＨＩ３－条件培养液（ＷＥＨＩ３－ＣＭ）代替肺－条件培养液（Ｌ－ＣＭ）对小鼠粒单系集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ）生长的影响进行研究，结果表明，ＷＥＨＩ３－ＣＭ对体外小鼠ＣＦＵ－ＧＭ的形成具有明显的刺激作用，ＷＥＨＩ３－ＣＭ与Ｌ－ＣＭ均订刺激混合型集落生长，提示ＷＥＨＩ３－ＣＭ内可能含粒单集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）活性。     

骨髓内皮细胞无血清条件培养液对WEHI-3细胞生长的影响

该实验收集小鼠骨髓内皮细胞条件培养液（ｍＢＭＥＣ－ＣＭ）预留分原液外,其作用阻遏分子量为１００００ｄａｌｔｏｎｓ（１０ＫＤ）和３０００ｄａｌｔｏｎｓ（３ＫＤ）的超膜眼滤,获得分子量〉１０ＤＫ、３－１０ＫＤ、〈３ＫＤ的超滤液,分别检测不同组分越滤液及原液对小鼠白血病细胞系（ＷＥＨＩ－３）细胞集落生长的影响,发现小鼠骨髓内皮细胞无血清条件培养中分子量以上结果表示：小鼠骨髓内皮细胞无血清条件培养中可能存     

rhGM—CSF和rhG—CSF对急性白血病骨髓CFU—F形成的影响

应用人骨髓ＣＦＵ－Ｆ体外培养技术,观察ｒｈＧＭ－ＣＳＦ、ｒｈＧ－ＣＳＦ对急性白血病骨髓ＣＦＵ－Ｆ生成的影响。结果表明,上二者对ＣＦＵ－Ｆ的形成均有明显促进作用及协同效应,用ｒｈＧＭ－ＣＳＦ的作用大于ｒｈＧ－ＣＳＦ。提示二者可能通过这种促进作用和改善骨髓微环境而更有效地发挥造血调节机能。     

小鼠骨髓内皮细胞条件培养液支持卵黄囊造血干/祖细胞的体外生长

目的;观察小鼠骨髓内皮细胞条件培养液（mBMEC-CM)对卵黄囊造血干／祖细胞体外生长的支持作用。方法：取妊娠第8．5天的卵黄囊,经消化后获得卵黄囊细胞,取卵黄囊非贴壁细胞加入含10％mBMEC-CM和10％FBS的DMEM中培养24h后,收集细胞做半固体培养。结果：mBMEC-CM在液体培养体系中能扩增卵黄囊造血干／祖细胞使粒－巨噬系集落形成单位（granulocyte-macrophage colony forming unit,CFU-GM)和高增殖潜能集落形成细胞（high proliferative potential-colony forming cell,HPP-CFC)的产率增加,经24h液体培养后的CFU－GM和HPP－CFC的数目分别为培养0h对照组的119．5％和130．8％（P＜0．05）;mBMEC-CM联合flt3配基（flt3 ligand,FL)和血小板生成率（,TPO)后,其扩增CFU－GM和HPP－CFC的能力明显增加,mBMEC-CM联合FL和TPO经24h液体培养后的CFU－GM和HPP－CFC的数目分别为培养0h对照组的132．0％和176．9％（P＜0．01）。结论：mBMEC-CM对卵黄囊造血干／祖细胞的维持和扩增有促进作用,mBMEC-CM联合FL和TPO对卵黄囊造血干/祖细胞的扩增作用明显增强。     

骨髓内皮细胞条件培养液对巨核系细胞体外增殖的影响

目的: 探讨骨髓内皮细胞条件培养液（E-CM）对巨核系细胞体外增殖的调节作用。方法: 分离纯化骨髓内皮细胞和骨髓成纤维细胞,分别收集其无血清条件培养液,比较两种无血清条件培养液对体外扩增成熟巨核细胞和巨核系祖细胞的作用。结果: E-CM和骨髓成纤维细胞条件培养液（F-CM）对成熟巨核细胞及巨核系祖细胞有体外扩增作用;E-CM对巨核系祖细胞的扩增作用明显优于F-CM（P<0.05）;对成熟巨核细胞的扩增作用弱于F-CM（P<0.01）。结论: E-CM对巨核系细胞, 主要是巨核系祖细胞有体外扩增作用。     

骨髓巨噬细胞条件培养液对巨核系细胞体外生长的影响

骨髓基质细胞是骨髓造血微环境的重要组成部分,能持续产生IL-3,IL-6,SCF,FL,TGFβ等多种细胞因子调节造血。骨髓巨噬细胞是组成骨髓基质细胞的重要成分,研究发现体外培养的巨噬细胞单层不支持造血岛生成,但它能分泌SCF,IL-6,EPO等造血因子,关于巨噬细胞对巨核细胞生成的影响目前尚未见报道。本研究观察骨髓巨噬细胞条件培养液(M-CM)对体外培养条件下成熟巨核细胞和巨核系祖细胞生长的作用,以阐明骨髓巨噬细胞对巨核系细胞生长的影响。     

碱性成纤维细胞生长因子对小鼠骨髓内皮细胞增殖的促进作用

目的以内皮细胞培养基(Endo-M)培养小鼠骨髓内皮细胞,观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对骨髓内皮细胞增殖的影响。方法用Endo-M培养小鼠骨髓内皮细胞,通过Wright’s Giemsa染色计数内皮细胞集落,免疫荧光法观察内皮细胞表型;加入不同浓度的bFGF,通过集落形成率、MTT法和流式细胞仪检测内皮细胞生长周期,观察bFGF对内皮细胞体外扩增的影响。结果Endo-M诱导的骨髓细胞可以生成内皮细胞,vWF检测阳性。加入不同浓度的bFGF,集落计数及MTT法均证实了bFGF对内皮细胞的增殖具有明显的促进作用,比较实验组(bFGF组)和对照组细胞的生长曲线,两者有明显差异(P<0.05)。结论bFGF对内皮细胞的增殖具有促进作用。     

小鼠颌下腺组织培养上清液对造血干细胞和骨髓细胞增殖影响的实验研究

本实验采用脾集落形成法和流式细胞术等技术,研究了小鼠颌下腺组织培养上清液（ＳＧＣＭ）对造血干细胞和骨髓细胞增殖的影响。结果表明：正常雄性和雌性ＳＧＣＭ对小鼠造血干细胞增殖和分化有明显促进作用：ＳＧＣＭ能能效促进小鼠骨髓细胞（ＢＭＣ）由相对静止期（Ｇ０／Ｇ１）进行增殖活跃期（Ｓ＋Ｇ２／Ｍ）,并能提高骨髓有核细胞数。研究提示,正常小鼠颌下腺可能通过分泌造血生长因子样物质促进小鼠造血干细胞增殖和全化并加     

用条件培养液代替重组因子培养小鼠高增殖潜能集落形成细胞

利用富含ＩＬ－３的ＷＥＨＩ－３细胞条件培养液（ＷＥＨＩ３－ＣＭ）和富含Ｍ－ＣＳＦ的Ｌ９２９细胞条件培养液（Ｌ９２９－ＣＭ）代替重组因子在体外用单层琼脂法培养小鼠ＨＰＰ－ＣＦＣ获得成功。在合用ＷＥＨＩ３－ＣＭ和Ｌ９２９－ＣＭ的基础上，联合ｒｈＩＬ－１，ｒｈＩＬ－６和ｒｍＧＭ－ＣＳＦ，ＨＰＰ－ＣＦＣ的产率有所提高。用５－ＦＵ处理小鼠２天后，骨髓细胞中ＨＰＰ－ＣＦＣ得以浓集。产生的ＨＰＰ－ＣＦＣ集落直径     

The murine submandibular gland conditioned medium induce the development of CFU-GM and CFU-meg]

OBJECTIVE: Our purpose is to determine whether murine submandibular gland produce hematopoietic growth factors or not and which hematopoietic growth factor are produced by murine submandibular gland. METHODS: By using the techniques of culture of hematopoietic progenitor cells(CFU-GM, CFU-Meg) ex vivo, flow-cytometry, the effects of murine submandibular gland conditioned medium(SGCM) on the development of CFU-GM and CFU-Meg in mice was studied. RESULTS: SGCM can stimulate the development of CFU-GM and CFU-Meg (without any exogeneous HGF), almost no colony in control (without any exogeneous HGF and SGCM); the promoting activity of male SGCM is higher than female SGCM's in augmenting colony formation of CFU-Meg (P < 0.05), there is no difference of CFU-GM(P > 0.05). The stimulating activity of anemic mice SGCM is higher normal mice SGCM's (P < 0.05). IL-3 can collaborate with female SGCM to stimulate proliferation of CFU-Meg. SGCM can promote bone morrow cell entiring the active proliferative phase(S/G2). CONCLUSION: Submandibular gland can stimulate the development of CFU-GM and CFU-Meg by secreting hematopoietic growth factor-like activities. Our study provide the experimental evidences for clarifying the relationship between submandibular gland and hematopoiesis.     

骨髓成纤维细胞条件培养液对巨核系细胞体外增殖和血小板体内生成的影响

目前,临床上化疗、放疗及造血干细胞移植已广泛开展,由于化疗和放疗对病人的造血系统,特别是巨核系产生严重损害,从而导致病人体内较长时期血小板数目减少、止血功能障碍,甚至危及生命[1]。因此,许多学者致力于研究、开发一些具有体内升血小板效应的药物。骨髓基质细胞是造血微环境的重要组成部分,能分泌多种细胞因子调节造血[2],而纯的骨髓成纤维细胞能分泌SCF,IL-11,IL-1,IL-6,GM-CSF,FGF等因子刺激巨核细胞生长和成熟[3~5]。湘雅医学院血液生理研究室的前期工作表明,骨髓成纤维细胞条件培养液(F-CM)对巨核系成熟细胞和祖细胞的体…     

骨髓内皮祖细胞移植对假孕大鼠黄体促血管生长因子表达的影响

目的 观察骨髓内皮祖细胞(EPC)移植对假孕大鼠黄体促血管生长因子(VEGF)表达的影响,探讨骨髓EPC促进假孕大鼠黄体血管新生的作用机制.方法 雌性大鼠经137Cs全身照射后,尾静脉移植雄性大鼠骨髓EPC行造血重建,然后制备假孕模型为移植假孕组;分别于假孕第3、7、11、15天应用real time PCR法检测黄体VEGF、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)mRNA的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测黄体VEGF、bFGF蛋白表达;CD31免疫组织化学法检测黄体微血管密度.结果 假孕对照组(输注等量培养液)及移植假孕组VEGF、bFGF表达在第7天达到最高;黄体微血管密度在第7、11天均高于第3天组水平(P＜0.01);移植假孕组VEGF、bFGF表达在第7、11天均高于同期假孕对照组(P＜0.05),且黄体微血管密度在第7、11天较同期假孕对照组高(P＜0.05).结论 骨髓EPC移植后黄体VEGF、bFGF mRNA及其蛋白表达水平升高,促进假孕大鼠黄体血管新生.