跨膜型肿瘤坏死因子-α的研究进展

在哺乳动物体内有两型肿瘤坏死因子α(TNFα)共同存在,一种是以细胞膜结合分子的形式表达于细胞表面的跨膜型TNFα(tmTNFα),另一种是广泛分布的可溶性TNFα(sTNFα)。tmTNFα作为sTNFα的前体,在适当的条件下被金属蛋白酶切割而释放至体液中形成sTNFα。研究发现tmTNFα虽然是     

TNF-α诱导人肺微血管内皮细胞凋亡Caspase-3活性的研究

目的：探讨凋亡“核心蛋白酶”-半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)在肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导人肺微血管内皮细胞(HPMVECs)凋亡中的作用。方法体外培养HPMVECs,空白对照组置于CO2培养箱中常规培养, TNF-α组分别以10 ng/mL、20 ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL浓度刺激HPMVECs,使用MTT比色法检测各组细胞活性,AnnexinⅤ/PI双染色联合流式细胞术检测细胞凋亡率,流式细胞术检测Caspase-3的活性。结果空白对照组的细胞凋亡率及Caspase-3活性最低;空白对照组和TNF-α组(10 ng/mL、20 ng/mL、50 ng/mL)比较,100 ng/mL TNF-α组的相对细胞活性最低,而细胞凋亡率及Caspase-3活性最高,TNF-α诱导HPMVEC凋亡时呈现出浓度依赖性,随着时间的延长,Caspase-3活性逐渐升高(P<0.05)。结论 TNF-α诱导人肺微血管内皮细胞凋亡呈现浓度依赖性,Caspase-3可能参与了这一细胞凋亡过程的调控。     

ω-3脂肪酸对脓毒症大鼠骨骼肌20S蛋白酶体活性的影响

目的 分析ω-3脂肪酸对脓毒症大鼠骨骼肌20S蛋白酶体的活性.方法 50只SD大鼠随机分组,模型组采用盲肠结扎穿刺(CLP)方法复制脓毒症模型,假手术组仅翻动盲肠,不做结扎处理,在试验期间,大鼠禁食不禁水,试验组给予加用ω-3脂肪酸的肠外制剂,药物对照组除了ω-3脂肪酸外,其余成分相同.其余仅给予生理盐水肠外注射.在模型复制前5d即开始连续给相应治疗.造模第16小时,无菌操作下取双侧伸趾长肌,放入液氮中保存.高效液相色谱法测定伸趾长肌内3-甲基组氨酸(3-MH)含量.荧光法检测伸趾长肌内20S蛋白酶体活性.结果 测定各组一侧伸趾长肌湿重,差异无统计学意义(P＞0.05),与空白组比较,脓毒症组16h点伸趾长肌降解率升高明显,差异有统计学意义(P＜0.05).空白组及假手术组的20S酶体活性差异无统计学意义(P＞0.05).与空白组比较,模型组20S蛋白酶体活性明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05).与模型组比较,TPN组活性下降,但差异无统计学意义(P＞0.05);ω-3脂肪酸组20S活性下降明显,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 脓毒症时存在骨骼肌高分解代谢,ω-3脂肪酸可以通过降低20S蛋白酶体活性减轻骨骼肌高分解代谢状态.     

ω-3脂肪酸和谷氨酰胺对机械通气患者营养状况及免疫功能的影响

目的 探讨营养支持对机械通气患者免疫功能及临床疗效的影响.方法 将56例机械通气患者随机分为两组,观察组28例,对照组28例,在治疗原发病和生命支持的同时,观察组给予ω-3脂肪酸和谷氨酰胺+常规肠内营养,对照组单纯常规肠内营养.对比两组患者治疗前后营养代谢、免疫指标的变化、机械通气时间及28 d病死率.结果 治疗后两组...     

ω-3多不饱和脂肪酸对胃癌BGC-823细胞凋亡的影响

目的 利用人胃癌BGC-823细胞体外培养实验,观察不同含量ω-3多不饱和脂肪酸合成的二十碳五烯酸（eicosapentaenoic acid,EPA）和二十二碳六烯酸（docosahexaenoc acid,DHA）对肿瘤细胞凋亡的影响。方法采用MTT法、凋亡形态学检查和流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡情况。结果 30和45mg／L的EPA或DHA可显著降低肿瘤细胞存活率（P＜0.01）。透射电镜可见细胞凋亡现象,流式细胞检测bcl-2和Ga基因蛋白表达明显下降（P＜0.05,P＜0.01）。结论ω-3多不饱和脂肪酸可诱导人胃癌BGC-823细胞凋亡,细胞增殖受到抑制。     

2-甲基-3-羟基蒽醌诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的机制

为探讨2-甲基-3-羟基蒽醌抗肿瘤作用及其机制,本研究采用锥虫蓝法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞周期变化、细胞凋亡率、线粒体膜电位及细胞内游离钙的变化,Western blot方法检测凋亡相关蛋白caspase-4、caspase-7、caspase-9、Bcl-2、Bax、JNK、细胞色素C的表达。结果发现：2-甲基-3-羟基蒽醌时间依赖性地抑制乳腺癌细胞的生长,升高细胞内游离钙含量,降低线粒体膜电位并诱导其凋亡;药物上调Bax并下调Bcl-2蛋白的表达;诱导caspase-4、caspase-7、caspase-9、calpain的活化及细胞色素C的释放。结果提示2-甲基-3-羟基蒽醌可能通过Ca²⁺/calpain/caspase-4途径诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡。     

ω-3脂肪酸及膳食纤维在肠内营养中的作用

1肠内营养中ω-3脂肪酸的作用 ω-3脂肪酸属多不饱和脂肪酸（PUFA），包括α亚麻酸（C18：3）、20碳5烯酸（EPA，C20：5）和22碳6烯酸（DHA，C22：6）。海洋鱼油中含有丰富的EPA和DHA，是肠内营养ω-3脂肪酸的主要来源。ω-3脂肪酸与ω-6脂肪酸具有同样的代谢路径和催化酶。α亚麻酸可竞争性抑制D-6去饱和酶，减少花生四烯酸（AA，ω6）的合成。     

毛冬青提取物对大鼠脑缺血再灌注损伤后TNF-α及Caspase-3表达的影响

目的 研究毛冬青提取物对大鼠脑缺血再灌注损伤后TNF-α及Caspase-3表达的影响.方法 将健康SD大鼠随机分为:假手术组、模型组、毛冬青三个剂量组.采用线栓法栓塞大鼠右侧大脑中动脉1 h,再灌注24 h,制备大鼠脑缺血再灌注模型.用免疫组化SABC法染色,观察25,50,100 mg·kg-1毛冬青提取物对脑缺血再灌注大鼠的脑组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达的影响.结果 与假手术组比,CIRI模型组脑组织TNF-α及Caspase-3的表达增加;与CIRI模型组比,各剂量毛冬青提取物均能使脑组织TNF-α及Caspase-3的表达下降.结论 毛冬青提取物能减少脑缺血再灌注损伤后TNF-α及Caspase-3表达的表达,并对脑组织产生一定的保护作用.     

ω-3脂肪酸对重症监护中外科术后患者炎症及护理策略的影响

目的：探讨ω-3脂肪酸对外科重症监护病房（ICU）患者的免疫和炎症调节效果和护理策略。方法：选取大手术后住进ICU病房的38例患者进行研究,对照组（18例）中PN给以中长链甘油三酸酯油混合物,观察组（20例）中PN给中长链甘油三酸酯油混合物和ω-3脂肪酸,同时给以人性化的护理。结果：观察组中的感染并发症发生率显著低于对照组（P〈0.05）。结论：术后患者行胃肠外营养支持补充ω-3脂肪酸可显著降低患者的炎性和感染率,人性化护理策略显示显著效果,值得临床推广应用。     

富含ω-3脂肪酸的饮食可预防阿尔茨海默病

据报道,存在于大豆、鱼和其他油类中的已知可提供多种健康益处的ω-3脂肪酸有助于阿尔茨海默病的预防。     

α-双炔失碳酯诱导阿霉素抗药的MCF-7乳癌细胞凋亡

目的 :研究α 双炔失碳酯 (α anordrin ,ANO)对阿霉素抗药的MCF 7乳癌细胞 (MCF 7adr细胞 )的凋亡诱导作用。方法 :采用形态学、DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术等方法。结果 :ANO 10～ 5 0 μmol/L作用 4 8h明显抑制MCF 7adr细胞的生长 ,诱导MCF 7adr细胞核碎裂 ,染色质凝缩 ,电泳显示核小体之间DNA断裂。流式细胞术检测发现经ANO作用后约有 2 6%的细胞出现在“亚G1期”。结论 :ANO能够诱导MCF 7adr乳癌细胞凋亡 ,提示ANO与阿霉素之间无交叉抗药性     

ω-3多不饱和脂肪酸摄入对1型糖尿病高危儿童胰岛细胞自身免疫的影响

既往有一项前瞻性研究发现，婴幼儿补充鱼肝油可降低1型糖尿病的发病风险。为了明确儿童摄入ω-3和ω-6脂肪酸是能否引发胰岛细胞自身免疫（islet autoimmunity，IA），来自美国科罗拉多大学预防医学与生物识别系的Jill M．Norris博士及其同事于1994年1月至2006年12月在美国科罗拉多州丹佛地区开展了一项名为“青壮年糖尿病自身免疫研究（DAISY）”的纵向观察性研究，其结果发表于近期出版的JAMA杂志上（JAMA，2007，298，1420—1428）。     

n-3 PUFA依赖的跨膜型肿瘤坏死因子-α真核表达载体的构建

目的构建n-3多不饱和脂肪酸依赖的跨膜型肿瘤坏死因子-α(tmTNF-α)真核表达载体.方法设计并合成包含PPRE增强子的tk启动子序列,与人突变型tmTNF-α真核表达载体pcDNA3-TNF(△1-12)WB重组,构建pPPRE-tk-tmTNF-α表达载体,转染人乳腺癌MCF-7细胞,经EPA处理后,应用免疫荧光技术检测tmTNF-α蛋白的表达.结果经琼脂糖凝胶电泳分析和测序鉴定证明pPPRE-tk-tmTNF-α真核表达载体构建成功,转染此重组表达载体的MCF-7tmTNF-α细胞tmTNF-α表达受EPA正调控,两者之间呈时间、剂量-效应关系.结论成功构建受n-3 PUFA正调控的tmTNF-α真核表达载体.     

研究证实ω-3脂肪酸具有抗抑郁和自杀的作用

ω-3脂肪酸(一种多不饱和脂肪酸,已知有助于预防心血管疾病)的主要成分是DHA(二十二碳六烯酸)和EPA(二十碳五烯酸)。目前,越来越多的证据表明含有ω-3脂肪酸的食物亦或能预防抑郁症。根据美国食品药品管理局(FDA)的最新规定,抗抑郁剂必须在其外包装上黑框标注该药     

rhTIMP-3与TAM联合应用对乳腺癌细胞MCF-7生长与凋亡的影响

目的:探讨重组金属蛋白酶组织抑制因子-3(rhTIMP-3)和三苯氧胺(tamoxifen,TAM)联合应用对乳腺癌细胞株MCF-7(ER )生长和凋亡的影响。方法:分别或联合应用不同浓度的rhTIMP-3、TAM作用于MCF-7细胞,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法分析细胞生长抑制作用,应用流式细胞技术测定细胞周期分布和凋亡率。结果:rhTIMP-3与TAM均可抑制MCF-7细胞增殖,呈时间、浓度依赖性,并可诱导凋亡。rhTIMP-3使细胞阻滞在S和G2/M期;TAM可造成细胞G0/G1期的阻滞,当两者联合时对MCF-7的生长抑制明显增加,在诱导凋亡方面有明显协同作用。结论:rhTIMP-3、TAM均可抑制MCF-7细胞的增殖,并可诱导其凋亡;二者联合应用不仅能增加细胞生长的抑制作用,而且在诱导细胞凋亡方面有协同作用。     

TNF-α对足细胞损伤的影响

目的:构建肿瘤坏死因子(TN F-α)诱导的足细胞损伤模型,观察不同浓度、相同浓度和不同诱导时间对足细胞Synaptopodin、14-3-3β、RhoA相关蛋白的影响.方法:将0 ng/mL,5 ng/mL,10 ng/mL,20 ng/mL,30 ng/mL,40 ng/mL浓度的TNF-α加入已分化培养6.5 d的足细胞中,诱导培养24 h;给予相同浓度的TNF-α10 ng/ml作用时间分别为6、12、24、36、48 h;给予相同浓度的TNF-α20 ng/ml,作用时间分别为6、12、24、36、48 h.通过Western Blot检测足细胞相关蛋白Synaptopodin、14-3-3β、RhoA的表达,鉴定足细胞的损伤.结果:足细胞在加入10 ng/mL TNF-α时,足细胞开始发生损伤,给予TNF-α浓度为10 ng/mL和20 ng/mL,作用6 h时足细胞均已经发生损伤,且随着作用时间越长,损伤越严重.在损伤足细胞中Synaptopodin、14-3-3β、RhoA蛋白表达下调.结论:随着TNF-α作用浓度及作用时间的增加,足细胞受损严重,相关蛋白表达量明显降低.     

ω-3多不饱和脂肪酸对人胆囊癌细胞GBC-SD增殖的影响及机制的研究

目的研究二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)和花生四烯酸(arachidonic acid,AA)对人胆囊癌细胞GBC-SD增殖的影响,通过相关蛋白质指标,探讨可能的分子机制。方法 MTT法检测不同浓度(10~80 ug/mL)DHA和AA对胆囊癌细胞GBC-SD存活率的影响;免疫印迹检测β-catenin、c-myc、cyclinD1三种蛋白表达量的变化。结果当DHA浓度达到60 ug/mL时可明显抑制胆囊癌细胞GBC-SD存活并随着浓度升高抑制作用增强,呈剂量依赖(P<0.05),而相同浓度AA无明显作用。同时β-catenin、c-myc、cyclinD1三种蛋白表达量均下降。结论 DHA可抑制人胆囊癌细胞GBC-SD增殖,使β-catenin、c-myc、cyclin D1表达减少。     

阿克拉霉素对Hela细胞染色体形成及细胞凋亡的影响

①目的探讨阿克拉霉素对Hela细胞染色体形成的影响机制及与细胞凋亡的关系。②方法　MTT测定阿克拉霉素对Hela细胞的IC50值。不同浓度阿克拉霉素作用于Hela细胞24h后,制备染色体,Giemsa染色、观察。应用吖啶橙和嗅乙啶双荧光染色及DNA凝胶电泳检测细胞凋亡。Western-blot分析丰胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)含量变化。③结果　阿克拉霉素对Hela细胞的IC50值为6.83μg/ml。染色体分析表明,阿克拉霉素作用于Hela细胞一定时间后,染色体凝集不规则.正常M期染色体形成受阻。细胞凋亡检测可见不同药物组差异显著。Western-blot分析表明,高浓度药物处理组Caspase-3表达比对照组显著增加。④结论　阿克拉霉素能够阻止Hela细胞染色体形成与分离.导致细胞G2/M期阻滞,诱导细胞凋亡。Caspase-3在Hela细胞凋亡中发挥重要作用。     

干扰素-α对体外培养子宫肌瘤细胞凋亡的研究

目的 探讨干扰素-α(IFN-α)对体外培养子宫肌瘤细胞凋亡的影响.方法 体外培养子宫肌瘤细胞并传代;MTT比色法检测干扰素-α对子宫肌瘤细胞抗增殖的影响;MTT染色法,共聚焦显微镜观察凋亡细胞;Caspase-3凋亡试剂盒定量检测干扰素-α诱导肌瘤细胞凋亡的情况.结果 干扰素-α抑制了子宫肌瘤细胞生长;MTT染色法及共聚焦显微镜下见干扰素-α作用子宫肌瘤后发生细胞凋亡;干扰素-α上调了Caspase-3表达,促进子宫肌瘤细胞凋亡.结论 干扰素-α引起体外培养的子宫肌瘤细胞的凋亡,呈剂量依赖性.     

ω-3鱼油脂肪乳剂对感染性休克患者TNF-α、IL-6水平的影响

1临床资料收集我院2008年8月—2011年8月感染性休克患者52例,其中男31例,女21例,年龄25~68岁,平均46.9岁;病因:重症肺炎22例,败血症23例,弥漫性腹膜炎3例,创伤合并感染4例。所有患者均符合