五子衍宗丸对实验性少弱精子症大鼠的保护作用与机制研究

目的:观察五子衍宗丸对实验性少弱精子症大鼠的保护作用与机制研究。方法:取60只雄性SD大鼠,随机分成正常组、模型组、阳性药组(生精胶囊1.6 g/kg),五子衍宗丸低、中、高剂量组(1、2、4 g/kg),除正常组外,其他各组灌服雷公藤多苷30 mg/(kg·d),连续6周,建立少弱精子症模型。从造模的第3周开始,各组按剂量灌胃给药,连续给药4周后计算睾丸和附睾脏器指数,检测附睾精子质量、精子凋亡率、精子线粒体通透性转换孔(MPTP)开放情况,HE染色观察大鼠睾丸病理组织学改变,Hochest染色观察大鼠睾丸细胞凋亡情况。结果:五子衍宗丸能提高少弱精子症大鼠睾丸和附睾脏器指数,增加附睾精子浓度、精子活力和精子活率,降低精子凋亡率,抑制MPTP异常开放;HE染色显示五子衍宗丸能增加少弱精子症大鼠睾丸生精小管内各级生精细胞层次和数量,Hochest染色显示五子衍宗丸明显抑制睾丸生精小管内生精细胞凋亡。结论:五子衍宗丸能明显提高少弱精子症大鼠精子质量,降低少弱精子症模型大鼠的各级生精细胞(包括精子)凋亡率,其机制可能与抑制大鼠精子线粒体MPTP开放有关。     

雄激素与精子发生的关系

雄激素被认为在精子发生中具有重要作用.近年的动物实验以及临床研究提示,雄激素可以导致严重少精子或者无精子症,内源性睾酮可以引起生精细胞凋亡,与生精细胞阻滞高度相关.本文对近年的材料进行分析后,认为雄激素与精子发生的关系在于,雄激素可以引起生精细胞凋亡,造成细胞重排,对精子发生起到调节作用.     

生精细胞凋亡的分子机制研究

生精过程中细胞凋亡过程对维持正常的精子生成至关重要,该过程的失衡是导致少精子无精子症的重要机制之一,已受到广泛关注。哺乳动物生精细胞凋亡过程中通过胱门蛋白酶的主要涉及三条途径,分别是与细胞色素C相关的内源性凋亡通路、涉及死亡受体及其配体的外源性通路和与内质网(ER)相关的第三条途径。本文就睾丸生精细胞凋亡的分子机制的研究情况作一综述,并提出生殖细胞凋亡机制存在的问题及研究前景。     

生精障碍相关基因单核苷酸多态性研究进展

生精相关基因遗传多态性是生精障碍的一个重要的遗传病因.通过基因敲除技术现已鉴定出大量与精子发生密切相关基因.此类生精障碍基因包括表达酶类、受体类、细胞凋亡类、转录调控类等基因.上述基因的遗传易感性、感染和环境等因素共同作用导致男性非梗阻性无精子症和少精子症.生精障碍相关基因单核苷酸多态性(SNP)分析可从分子水平上阐述...     

原因不明少精子症睾丸生精细胞增殖与凋亡变化的研究

目的　探讨原因不明少精子症睾丸生精细胞增殖与凋亡的病理生理机制。　方法　 4 1例原因不明少精子症患者行睾丸穿刺活检 ,所取睾丸组织采用免疫组化技术观察生精细胞增殖细胞核抗原 (PCNA)及 p16的表达 ;采用原位 3′羟基末端标记法 (ISEL)观察生精细胞凋亡。 5例正常睾丸作为对照。　结果　原因不明少精子症患者睾丸生精细胞PCNA增殖指数 (2 1.6± 13.1) % ,明显低于对照组的 (45 .4± 5 .7) % ,P <0 .0 0 1;p16蛋白表达阳性率 (18.5± 8.9) % ,明显高于对照组的 (7.2± 2 .4 ) % ,P <0 .0 1;生精细胞凋亡指数 (1.7± 1.2 ) % ,明显高于对照组的 (0 .2± 0 .1) % ,P <0 .0 1,差别均有显著性意义。　结论　原因不明少精子症患者精子减少的主要原因之一是生精细胞增殖能力减少及凋亡增加造成增殖与凋亡平衡失调 ,此种失衡可能与 p16蛋白的异常表达有关。     

聚精丸治疗少精子症的实验研究

目的:观察聚精丸对少精子症患者精子超微结构和生精细胞凋亡的影响,探讨聚精丸对精子生成的作用机制。方法:50例少精子症患者口服聚精丸5g/次,3次/d,3个月为1个疗程,连续服用1~4个疗程,分别于治疗前、治疗1、3、6、12个月后,通过透射电镜和流式细胞仪(FCM)观察精子超微结构和生精细胞的凋亡、生精细胞倍体比例的变化。结果:①精子超微结构治疗6个月后顶体基质密度有所增加,治疗12个月后顶体膜形态完整性有明显改善;核的病理改变和尾部异常改变不明显。②生精细胞凋亡治疗后细胞碎片和凋亡细胞减少,治疗3个月后与治疗前比较差异有显著性(P<0.05),治疗12个月后与治疗前比较差异有极显著性(P<0.01)。③生精细胞倍体比例经聚精丸治疗3个月后,单倍体成熟精子增多,与治疗前比较差异有极显著性(P<0.01);脱落的精母细胞减少,与治疗前比较差异有显著性(P<0.05)。结论:聚精丸可改善少精子症患者精子顶体基质密度和顶体膜结构形态的病理性改变,提高顶体膜和顶体酶的质量;降低生精细胞及精子凋亡速率,提高单倍体精子的百分率,降低二倍体细胞的百分率。     

凋亡初级精母细胞凋亡小体形态学观察

细胞凋亡(apoptosis)或程序化细胞死亡(PCD),是多细胞有机体为调控机体发育,维护内环境稳定,由基因控制的细胞主动死亡过程,是一个正常的生理过程。细胞增殖和细胞死亡的平衡维持对多细胞有机体的发育与生命的维持至关重要。一般而言,细胞凋亡是一个形态学的概念,是对细胞凋亡时所见到的固定形式的形态学描述[1]。在对精液细胞学分析过程中,笔者发现许多少精子症(精子<20×106/ml)患者的精液中,存在着大量的、各种形态的凋亡生精细胞,特别是凋亡初级精母细胞在其形态学变化上更为丰富。正确认识这些凋亡的生精细胞对于分析病情、病理状况…     

Fas和FasL 系统在非梗阻性无精子症睾丸中的表达

目的：为探讨睾丸生精功能障碍与细胞凋亡的关系，研究Fas和FasL系统在非梗阻性无精子症睾丸支持、间质和生精细胞中的表达。方法：对20例非梗阻性无精子症患者行睾丸开放性活检，常规病理检查，按Johnson评分法评价精子发生和发生障碍的程度；采用免疫组化SABC法对睾丸支持、间质和生精细胞进行Fas和FasL表达的检测。结果：睾丸活检生精功能评为8分有14例，3分有2例，6、5、4和2分各有1例。在20例非梗阻性无精子症睾丸的间质、支持和生精细胞均有Fas和FasI。的表达；而支持细胞Fas和FasL的阳性和强阳性表达率明显高于间质和生精细胞。结论：非梗阻性无精子症的睾丸支持、间质及生精细胞Fas和FasL的高表达与精子生成障碍是一致的，非梗阻性无精子症可能与生殖细胞过度凋亡密切相关。     

精子发生相关基因VASA在正常和少精子症患者精子中的表达及意义

目的探讨生殖细胞高度特异性基因VASA和信号分子BMP-4在精子发生中的作用和相关机制。方法正常和少精子症患者精液通过Percoll梯度分离获得精子和未成熟生精细胞,采用RT-PCR、real-time PCR、Western Blot和免疫荧光方法分析基因转录产物表达。结果少精子症精子VASA基因转录产物是正常精子的1/5；两种样本精子中均检测到荧光信号,正常组信号强,与Western blot结果相一致；两种样本精子RT-PCR均未检测到BMP-4及其Ⅰ型受体Alk-3表达,但在分离的未成熟生精细胞中均表达。人正常睾丸组织可检测到BMP- 4及其Alk-3表达。结论少精子症患者精子发生过程中VASA基因及其产物发生变化；BMP-4及其受体Alk- 3并不直接上调VASA表达；睾丸组织包括精子所存在的部分转录产物,而精子转录产物并不完全等同于睾丸组织；睾丸组织内表达BMP-4和Alk-3的可能主要是精原和精母细胞。     

Ropporin在正常男性和弱精子症患者精液精子中的表达差异

目的 比较Ropporin在健康男性和弱精子症患者精液精子中的表达差异.方法 收集健康男性和弱精子症患者的精液精子,为了排除生精细胞和白细胞的污染,精液标本经非连续性Percoll梯度离心和分离纯化.采用荧光定量RT-PCR和免疫细胞化学方法,从基因和蛋白水平检测精子Ropporin的表达.结果 荧光定量RT-PCR显示,Ropporin mRNA在正常男性和弱精子症患者精液精子中均有表达.与正常男性相比,Ropporin在弱精子症患者精子中的表达显著降低.免疫细胞化学结果显示,Ropporin蛋白在正常男性精子的表达水平明显高于弱精子症患者,该结果与荧光定量RT-PCR结果相一致.结论 Ropporin在弱精子症患者精子中的表达显著降低,可能是导致精子运动能力低下的原因之一.     

FasmRNA在增生性瘢痕中的表达

目的：探讨FasmRNA在增生性瘢痕中的表达情况,方法：原位杂交法检测42例增生性瘢痕和42例正常皮肤组织中FasmRNA的表达,采用逆转录PCR检测42例增生性瘢痕中FasmRNA的表达。结果：原位杂交法检出42例增生性瘢痕和42例正常皮肤组织中FasmRNA表达率分别为23％和64％,差异有显著性（P＜0．01）;RT－PCR法检出42例增生性瘢痕中FasmRNA阳性表达25例,阳性率为59．5％,阳性表达组中无缺失突变,结论：FasmRNA在增生性瘢痕中表达明显减少,可能是瘢痕形成的重要原因之一。     

Association between FAS polymorphism and prostate cancer development

The role of FAS polymorphisms in prostate cancer has not been studied. Using the PCR-based restriction fragment-length polymorphism methodology, we evaluated FAS gene locus -670 genotypes in DNA from 904 men: 657 prostate cancer patients and 247 healthy controls. We found that carriers of AG or GG genotypes have a statistically significant protection (odds ratio (OR)=0.30; confidence interval (CI): 0.20-0.44 and OR=0.22; CI: 0.12-0.74, respectively) for disease with extra-capsular invasion. Taken together, a 72% protection was found for G allele carriers (OR=0.28; CI: 0.19-0.41). Fas exist as membrane-bound and soluble forms and with opposite roles. They derive from the same gene by alternative splicing. Membrane Fas receptors trigger apoptosis whereas, on the other hand, soluble Fas (sFas) bind to Fas ligand antagonizing Fas-Fas ligand apoptotic pathway. Our results suggest that G allele may reduce sFas levels preventing the apoptotic inhibition caused by the soluble form.     

睾丸免疫豁免细胞的分离及其功能测定

目的 探讨睾丸产生免疫豁免的机理。方法 应用胶原酶、胰蛋白酶及脱氧核糖核酸酶消化制备睾丸Ｓｅｒｔｏｌｉ细胞，体外与活性淋巴细胞共同培养，了解其对淋巴细胞的杀伤作用。并用ＳＡＢＣ法标记睾丸组织Ｓｅｒｔｏｌｉ细胞Ｆａｓ配体的表达。结果 Ｓｅｒｔｏｌｉ细胞可杀伤与之共培养的活性淋巴细胞，睾丸组织Ｓｅｒｔｏｌｉ细胞有明显的Ｆａｓ配体表达。结论 Ｆａｓ配体阳性的Ｓｅｒｔｏｌｉ细胞对活性淋巴细胞的杀伤作用可能     

阿仑膦酸盐诱导破骨细胞调亡FAS基因的表达

本研究采用１０－８Ｍ１，２５（ＯＨ）２Ｄ３诱导ＳＤ鼠骨髓细胞形成破骨细胞，通过检测细胞上ＦＡＳ基因的表达，探讨骨吸收因子阿仑膦酸盐的作用机制。骨髓细胞培养６天即有多核巨细胞形成，加入阿仑膦酸盐致终浓度为１００μＭ，继续培养４８小时后，发现用药组破骨样细胞及圆形单核细胞的前体细胞呈现凋亡的形态学特征：胞浆收缩，核固缩等。ＦＡＳ抗原是与细胞凋亡密切相关的细胞表面蛋白，用抗ＦＡＳ抗体免疫组化方法，检测凋亡的破骨细胞及其前体细胞上ＦＡＳ基因的表达，结果呈阳性，而未凋亡细胞呈阴性，提示阿仑膦酸盐导致的破骨细胞及其前体细胞的凋亡，可能与细胞表面的ＦＡＳ基因表达相关     

瘢痕疙瘩家系Fas基因死亡域突变的实验研究

目的 探讨瘢痕疙瘩家系标本中Fas基因（外显子7～9）有无突变以及Fas基因突变在瘢痕疙瘩形成中的意义。方法 实验标本来自南方医科大学南方医院整形外科2005年收集的A、B两个瘢痕疙瘩家系。采用PCR及基因测序技术，分别以A家系2例男性患者的瘢痕疙瘩组织为研究对象，以其周围正常皮肤及外周静脉血作为自身对照，其配偶的外周静脉血作为正常对照，并以B家系2例患者（母亲与儿子）的外周静脉血作为不同家系之间的对照，共检测10份标本中Fas基因外显子7～9基因序列。结果 10份瘢痕疙瘩家系标本Fas基因的7、8外显子均未发生突变，2例瘢痕疙瘩组织标本均在外显子9编码区的11bp和53bp两个位点上存在单个碱基基因突变或多态性改变。结论 瘢痕疙瘩Fas基因死亡域外显子9区段的基因结构异常，极有可能与Fas蛋白的功能改变有关，从而导致局部瘢痕疙瘩形成。     

The relationship between naming difficulty and FAS performance following traumatic brain injury

Primary objective: To investigate the relationship between naming difficulty (ND) and FAS performance in traumatic brain injury (TBI).

Methods and procedure: Sixty-three patients with a TBI were divided into two groups based on the presence of a ND and were compared with a control group on FAS performance.

Results: Whilst the group with a TBI performed more poorly than the control group on the FAS task, there was no difference between those participants who featured a ND and those who did not. The TBIs produced fewer words than the control group in the first time slice of the task, but there was no difference between the group with a ND and the non-ND group on this measure.

Conclusion: The results indicate that the effect of word finding deficits is not the principal cause of the diminution of phonemic verbal fluency performance in TBI, which is probably more likely due to compromise in speed of information processing associated with the injury.     

Apoptosis in the cryptorchidism. Role of the FAS protein in it's modulation

The cellular degeneration, present at the criptorchidism leads to a malfunction in the spermatogenosis and it's due to cellular apoptosis (programed cellular death). This process is turned on and modulated by different ways. One of then is mediated by Ag-Ac reactions and a protein called FAS seems to have an important role in it's modulation. We studied the relation between FAS an the increased apoptosis in undescended testics. Testicular biopsies were done in criptorchid patients during orchidopexy and FAS was measured by immune-techniques. Our results seem to dismiss FAS as a modulation apoptosis factor in the cryptorchidism.