贯众水提物对体外培养人肝癌细胞增殖及代谢的影响

目的 研究中药贯众（ＤＣＮ）提取和对体外培养的人肝癌细胞的抑瘤活性。方法 ＤＣＮ经粉碎、浸提、超速离心、减压浓缩、冷冻干燥得ＤＣＮ提取物。人肝癌ＳＭＭＣ－７７２１细胞经ＤＣＮ提取物处理不同时间后以ＭＴＴ法测其对人肝癌细胞线粒体代谢活性的影响，以细胞计数法观察了其对细胞增殖的影响。结果 （１）ＤＣＮ提取物能明显抑制人肝癌细胞的生长，降低线粒体代谢活性；（２）经ＤＣＮ提取和处理２４ｈ后的人肝癌细胞，既     

胎肝造血基质细胞条件液对WEHI_3细胞增殖分化的影响

采用体外液体培养法，观察不同浓度及不同胎龄人胎肝造血基质细胞条件培养液（ＨＦＬＳＣ－ＣＭ）对ＷＥＨＩ＿３细胞增殖与分化的影响。结果表明：５月龄ＨＦＬＳＣ－ＣＭ能促进ＷＥＨＩ＿３细胞增殖与分化；７月和９月龄ＨＦＬＳＣ－ＣＭ抑制ＷＥＨＩ＿３细胞增殖，促进分化。文中讨论了人胎肝造血基质细胞与造血的关系以及不同时期造血基质细胞的作用。     

冬虫夏草对人成纤维细胞的形态及细胞外基质合成功能的影响

冬虫夏草（虫草）具有良好的抗肝纤维化作用,然而其抗肝纤维化机制尚不清楚。作者经动物实验证实,虫草能使纤维化肝组织中细胞外基质成份明显减少,可能与其抑制储脂细胞合成细胞外基质（ＥＣＭ）功能有关［１］。作者观察虫草对人成纤维细胞的形态及合成ＥＣＭ的功能影...     

姜黄素对人肝癌细胞SMMC-7721的抑制作用

目的 研究姜黄素对人肝癌细胞ＳＭＭＣ－７７２１生长的影响。方法 应用ＭＴＴ方法、流式细胞术及透射是超微结构观察来分析姜英素对ＳＭＭＣ－７７２１细胞生长的作用及细胞周期的形态学改变。结果 姜黄素明显抑制人肝ＳＭＭＣ－７７２１细胞的生长,半数旧（ＩＣ５０）为５．４ｍｇ．Ｌ＾－１、流式细胞术证实,姜黄素能将肿瘤细胞聚集Ｓ期,透射电镜超微结构观察发现姜黄素可使肿瘤细胞超微结构改变。结论 姜黄素通过改变ＳＭ     

肝纤维化的实验与临床研究

目的：研究肝纤维化的发生机制和诊断方法，为治疗提供理论依据。方法：分离动物肝间质和实质细胞，观察细胞因子、细胞外间质（ＥＣＭ）、中药等对细胞及动物肝脏中胶原ｍＲＮＡ表达的影响；提纯ＥＣＭ成分，制备抗体并建立检测方法，以血清中ＥＣＭ含量变化判断早期肝纤维化的形成。结果：肝纤维化发生时，肝内细胞胶原ｍＲＡＮ表达增强，细胞因子有重要调节作用。血清中ＥＣＭ水平与肝细胞纤维增生变化相平行。结论：肝纤维化大一     

基质金属蛋白酶-2与肝细胞癌侵袭转移性的关系

揭示基质金属蛋白酶－２（ＭＭＰ－２）与肝细胞癌（ＨＣＣ）侵袭转移性的关系。并探索以ＭＭＰ－２来判断肝细胞癌侵袭转移性的可能性及方法。方法通过酶谱法和免疫组织化学法对正常肝、ＨＣＣ及其癌旁肝组织中的ＭＭＰ－２表达进行定量和细胞来源的研究，并与ＨＣＣ侵袭转移的病理指标进行统计学分析。结果正常肝、ＨＣＣ及其癌旁肝组织均有ＭＭＰ－２表达；ＨＣＣ组织中ＭＭＰ－２含量升高及其活性形式的出现与ＨＣＣ侵袭转移性有关；ＨＣＣ癌组织ＭＭＰ－２含量高于其癌旁肝组织含量，是通过ＭＭＰ－２判断ＨＣＣ侵袭转移性的重要指标；ＭＭＰ－２阳性细胞可见于正常肝细胞、胆管上皮细胞、Ｉｔｏ细胞、再生肝细胞、新生胆管细胞和ＨＣＣ细胞。结论ＭＭＰ－２与ＨＣＣ侵袭转移有关；ＨＣＣ癌组织ＭＭＰ－２含量是否高于其癌旁肝组织含量可作为通过ＭＭＰ－２判断ＨＣＣ侵袭转移性的指标。     

人肝癌细胞的HLA—Ⅰ类抗原表达

为了为肝癌细胞毒性Ｔ细胞疫苗设计、构建及免疫治疗策略的决策提供体外实验研究依据,采用免疫细胞化学ＬＳＡＢ法及流式细胞术观察了体外培养人肝癌细胞的ＨＬＡ－Ⅰ类抗原表达情况。结果显示,人肝癌细胞株Ａｌｅｘａｎｄｅｒ、ＨｅｐＧ２、ＳＭＭＣ－７７２１、ＱＧＹ－７７０３都有较强的ＨＬＡ－Ⅰ类抗原表达,这使细胞毒性Ｔ细胞杀伤肝癌细胞成为可能。     

P53,P16基因联合抑制人肝癌细胞生长的实验研究

目的;研究Ｐ５３、Ｐ１６基因联合抑制人肝癌细胞生长的效果。方法：利用基因重线的方法构建Ｐ５３、Ｐ１６的融合表达载体ＰｃＤＮＡ１６－５３,利用磷酸钙沉淀法半ＰｃＤＮＡ１６－５３融合表达载体转染到人肝癌细胞系ＳＭＭＣ７７２１细胞中,用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印染、,Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印染及Ｗｅｓｔｅｒｎ印地检测Ｐ５３、Ｐ１６基因在人肝癌细胞中的转移、转录及表达,应用ＭＴＴ法检测Ｐ５３、Ｐ１６基因在人肝癌细胞中的     

β—榄香烯诱导人肝癌细胞株SMMC—7721凋亡的研究

目的：探索榄香烯对体外培养人肝细胞株的作用及其机制。方法：应用ＭＴＴ方法分析榄香烯对肝癌细胞株ＳＭＭＣ－７７２１生长的影响。结果：榄香烯能明显抑制肝癌细胞生长,其半数生长抑制剂量为３７．４μｇ／ｍｌ;流式细胞术证实榄蚝烯能阻滞肝癌细胞从Ｇ０／Ｇ１期进入Ｓ期,并诱发细胞凋亡,透射电镜超微结构证实榄香烯能诱发肿瘤细胞凋亡的典型形态变化;免疫组化ＳＰ法及流式细胞术定量分析榄香烯能使肝癌细胞癌基因ｂｃｌ－     

肝纤维化发病机理的研究进展

肝纤维化是慢性肝病共有的病理改变 ,其共同的病理改变是以胶原蛋白为主的细胞外基质 (ＥＣＭ )各成分合成增多 ,降解相对不足 ,过多沉积在肝内引起肝纤维化。若进一步发展引起肝小叶改建、假小叶和结节形成 ,则进入肝硬化。肝纤维化尚属可逆性病变 ,病情如不断发展则为肝硬化 ,肝硬化属不可逆病变。肝脏合成ＥＣＭ的细胞 ,主要是被激活的肝星形细胞 (ＨＳＣ)。ＨＳＣ位于肝窦Ｄｉｓｓｅ间隙内 ,胞浆富含类维生素Ａ脂滴 ,肝受损时被激活 ,转化为肌成纤维样细胞 (ＭＦＢＬＣ) ,大量增殖 ,大量合成ＥＣＭ。提示ＨＳＣ的激活是肝纤维化发生的中…     

大鼠急性肝功衰竭模型的建立及肝再生刺激因子的救治

作者采用D畔乳糖胺(D-GL)制备大鼠急性肝衰竭(FHF)模型,并观察了肝再生刺激因子(HSS)对大鼠FHF的救治效果.结果表明:D-GL诱发Wistar大鼠FHF的最适剂量为1.6g/kg;大鼠中毒后20h经腹腔注射HSS(总蛋白量为26mg)或生理盐水4ml,治疗组(n=12)大鼠2周存活率为33.3％,与对照组(0,n=12)相差显著(P<0.05)。提示人胎HSS可有效地提高FHF大鼠的存活率,有希望成为一种新的治疗FHF的有效药物。     

人肝刺激因子的提取及其保肝作用的初步观察

采用水囊引产眙儿(胎龄4～6个月),提取肝刺激因子(hHSS),用~3H—胸腺嘧啶核苷测其活性,观察到 hHSS 可使34%肝切除的大鼠对~3H—胸腺嘧啶核苷掺入再生肝 DNA 率明显增加。将 hHSS 预先注入半乳糖胺损伤的小鼠体内,结果观察到:hHSS 极明显地降低半乳糖胺中毒的死亡率(P<0.01),明显地抑制半乳糖胺所致的血清 GPT 和 GOT 的高水平。电镜检查表明,hHSS 可保护肝细胞的超微结构(线拉体、内质网等)免受半乳糖胺的损伤。这些结果证明,从人胎肝中可提取 hHSS,而 hHSS 具有保护肝脏免受肝毒剂—半乳糖胺的毒害作用。     

The Effects of Human Fetal Liver Cells on Experimental Fulminant Hepatic Failure in Rats

The beneficial dffects of human fetal liver cells on the D-galactosamine-inducedfulminant hepatic failure were observed in rats and the mechanisms of the effects investi-gated.The survival rate of the rats intraperitoneally injected with liver cell suspensionand cytosol was 47.37% and 42.11% respectively which was significantly higher than5.26% of the controls(P<0.05).There was no statistical significance between the differ-ence of the survival rates due to two preparations.The administration of cytosol two hours before the intoduction of D-galactosamine re-sulted in a significant lowering of the plasma level of endotoxin and hepaticmalondialdehyde in rats and a marked increase of ~3H-thymindinc incorporation intohepatic DNA(DPM/OD_(260))as compared with the parameters of the controls.These re-sults suggest that there might be some biological active substance in human fetal liver cellswhich is responsible for thc effects to increase the survival rate.     

胎肝再生刺激因子治疗小鼠中毒性肝坏死的实验观察

O’Neill等用鼠胎肝细胞体外培养上清液和肝切除后的再生性胞质液治疗大鼠急性肝衰竭获得满意的效果,说明增生的肝细胞对损伤肝有保护和治疗作用。断乳鼠及人胎肝提取液都含有丰富肝再生刺激因子(Hepatic stimulator sub-stance,HSS)可启动肝细胞的再生。为探讨其应用价值,我们用四氯化碳(CCI_4)复制小鼠中毒性肝坏死模型,观察HSS对鼠死亡率,血清酶及组织学的影响,以评价其对损伤肝的治疗作用。     

肝刺激因子对实验性急性肝损伤小鼠的保护作用

大鼠肝刺激因子(HSS)是否有保肝作用?这一问题的阐明不仅有理论意义还有潜在的临床意义。本工作采取初断乳大鼠的肝提取HSS,用CCl_4和半乳糖胺损伤小鼠肝脏,结果观察到:(1)HSS明显降低CCl_4和半乳糖胺所致小鼠血清GPT和GOT升高的幅度;(2)HSS的保肝作用具有量效关系;(3)HSS抗CCl_4损伤肝的时程在72h以上;(4)肝组织切片检查表明,HSS可减轻CCl_4和丰乳糖胺损伤肝的程度。上述生化学和组织形态学的指标表明,HSS对实验性急性肝损伤小鼠确有保护作用。     

Studies on the effect of liver cytosol on experimental acute hepatic failure in the rat

This paper reports that dog regenerating liver cytosol (DRLC) and human fetal liver cytosol were found capable of increasing the survival rate of rats with liver failure induced by D-galactosamine (Ga1N). It was noted that the potential substances for hepatic failure are not species specific. Nevertheless this is a characteristic of the growing liver. The experimental results suggested that the effects of growing liver cytosol on liver regeneration were through three ways: 1. Hepatocytes DNA synthesis was increased. 2. Phagocytosis function of Kupffer cells was elevated which might prevent damage of liver cells by intestinal endotoxin. 3. Insulin secretion and its combination with hepatocytes were increased.     

肝细胞生长刺激因子的实验研究

将人胎肝肝细胞生长刺激因子(HSS)用于硫代乙酰胺(TAA)引起急性肝中毒的小白鼠,通过观察SGPT及肝脏组织学的变化来评价HSS的治疗作用。预先使用HSS能减轻TAA对肝细胞的损害。预防组与对照组的SGPT水平有显著性差异(P〈0.01),肝细胞的变性坏死程度亦较轻。将HSS用于TAA中毒小鼠能很快地降低SGPT,与对照组比较有明显差异(P〈0.01)。同时可见肝细胞变性坏死程度逐渐减轻,肝细胞增生象逐日增多。实验结果表明,人胎肝HSS具有保护肝细胞及促进肝细胞增生的作用。     

Effects of human HSS on hepatocyte and hepatoma cell proliferation and D-GAL induced acute liver failure.

Human hepatic stimulator substance (HSS), an organ-specific and heat-stable factor which differs from insulin, glucagon and EGF, has been partially purified from aborted human fetal livers. It was found to stimulate DNA synthesis of human hepatocytes. AH22 hepatoma cells responded dose-dependently. HSS was also found to enhance the survival of D-GAL intoxicated rats as compared to control (62.5% vs. 26.1%). Our results suggest that human HSS is very similar to that in animals.     

人胚胎肝细胞移植治疗大鼠急性肝衰竭的效果分析

目的 探讨人胚胎肝细胞移植治疗急性肝衰竭(ALF)的疗效及能否成为移植细胞源.方法 采用四甲基偶氮唑盐法检测人胚胎肝细胞增殖情况;免疫细胞化学检测其ALB、细胞角蛋白-18(CK-18)的表达; D-氨基半乳糖(D-gal)药物诱导ALF的实验动物模型;人胚胎肝细胞移植治疗ALF的动物模型,包括移植组与对照组在肝功能指标[ALT、AST、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBIL)]的差异性比较.免疫组织化学法检测植入脾脏中的人胚胎肝细胞ALB及CK-18的表达.结果 培养第5天左右细胞数量达到最高峰,每天完成4～5次分裂,胚胎肝细胞的生长曲线呈抛物线型.免疫细胞化学检测提示其具有表达ALB、CK-18的功能; D-gal 1.6 g/kg腹腔注射72 h后大鼠ALF模型制备成功;移植第3～5天后,移植组与对照组比较,肝功能(ALT、AST、ALP、TBIL)指标差异有统计学意义(P<0.01).植入脾内的肝细胞具有分泌并表达CK-18、ALB的功能.结论 人胚胎肝细胞脾内移植能有效治疗ALF,并可能成为肝细胞移植的靶细胞源.