细胞外无钙条件下锂诱发海马去甲肾上腺素释放

在细胞外无钙条件下,Li~ 能诱发海马脑片释放去甲肾上腺素(NE)。佛波醇基酯(PDB)能加强这一诱发释放,而河豚毒素能抑制它,Ca~(2 )螯合剂BAPTA-AM对它无作用。如先用3,4-二氨基吡啶诱发NE释放,并用PDB加强这一释放,则Li~ 诱发NE释放的作用被抑制。结果提示:内源性Ca~ 释放并不参与Li~ 诱发NE释放的机制。     

细胞外无钙条件下锂诱发海马去甲肾上腺素释放

在细胞外无钙条件下，Ｌｉ＾＋能诱发海马脑片释放支甲肾上腺素（ＮＥ）。佛波醇基酯（ＰＤＢ）能加强这一诱发释放，而河豚毒素能抑制它，Ｃａ＾２＋螯合剂ＢＡＰＴＡ－ＡＭ对它无作用。如先用３，４－二氨基吡啶诱发ＮＥ释放，并用ＰＤＢ加强这一释放，则Ｌｉ＾＋诱民ＮＥ释放的作用被抑制。结果提示：内源性Ｃａ＾２＋条件下观察Ｌｕ＾＋对海马ＮＥ释放的影响。     

海马胞外钙不依赖去甲肾上腺素释放及蛋白激酶C的调制作用

在细胞外无钙时，佛波醇基酯能加强３，４－二氨基吡啶、藜芦定或哇巴因所诱发的去甲上腺素（ＮＥ）释放，但对莫能星（Ｍｏｎ）诱发的ＮＥ释放无作用。河豚毒素能阻断前３种物质诱发的ＮＥ释放，但对Ｍｏｎ诱发的释放无作用。钙螯合剂ＢＡＰＴＡ－ＡＭ能抑制这４种物质诱发的ＮＥ释放。结果提示蛋白激酶Ｃ仅调制由膜去极化因素诱发的ＮＥ释放。     

小檗胺对高钾,去甲肾上腺素及咖啡因引起大鼠心肌细胞内钙动拮？…

AIM: To study the effects of berbamine (Ber) on intracellular calcium concentration ([Ca2+]i) mobilized by KCl depolarization, norepinephrine (NE), and caffeine. METHODS: [Ca2+]i was measured with fluorescent intensity (FI) by confocal microscope in single cultured cardiomyocytes of newborn rats loaded with Fluo 3-AM 2 mumol.L-1. RESULTS: FI value of [Ca2+]i in control level was 248 +/- 70 in the presence of extracellular calcium 1.5 mmol.L-1 and was not changed by Ber 3-30 mumol.L-1. KCl (60 mmol.L-1)- and NE (30 mumol.L-1)-induced [Ca2+]i mobilizations were inhibited (P < 0.01) by Ber 30 mumol.L-1, similar to that of verapamil (Ver). The inhibitory effect of Ber on [Ca2+]i induced by KCl was further increased (P < 0.05) in the presence of egtazic acid 3 mmol.L-1, but that on [Ca2+]i induced by NE was not changed. The [Ca2+]i mobilized by caffeine 80 and 160 mumol.L-1 in D-Hanks' solution was not affected (P > 0.05) by Ber and Ver. CONCLUSION: Ber possessed the antagonistic effects on [Ca2+]i increases via voltage-dependent Ca2+ channel and receptor-operated Ca2+ channel in newborn rat cardiomyocytes, but without effect on intracellular Ca2+ release.     

胞内储备钙参与3,4—二氨基吡啶诱发去甲肾上腺素释放

目的：用大鼠海马脑片研究３，４－二氨基吡啶（ＤＡＰ）诱发去甲肾上腺素胞外钙－不依赖释放的机制，方法：大鼠海马脑片用（＾３Ｈ）ＮＥ孵育后，进行表面灌流，测（＾３Ｈ）ＮＥ释放。结果：在胞外无镍条件下，ＤＡＰ能显著加强（＾３Ｈ）ＮＥ释放，当用利血平使囊泡（＾３Ｈ）ＮＥ排空，则ＤＡＰ作用消失，用高浓度地昔帕明刺激ＩＰ３－敏感的胞内Ｃａ＾２＋储备库，能有力地增强（＾３Ｈ）ＮＥ释放，而高浓度咖啡因对（＾３Ｈ）     

吗啡依赖与阿片受体和去甲肾上腺素能神经的适应

吸毒是当今全球性公害。我国2001年登记在册的海洛因依赖者有60.1万，目前吸毒人员仍呈增长的趋势。戒毒治疗是减少需求，减少伤害的有效手段[1，2]，对于海洛因依赖来讲，其核心问题是为什么依赖者由简单的用药发展到强迫性的用药行为？为什么戒断后又很容易回到原有的强迫性用药状态？并随着停药时间的延长，病人用药后的快感逐渐减轻的同时对药物的渴求可以保留或与日俱增。在导致依赖的起初阶段，药物引起的奖赏效应是不断用药的主要动机，而显形性特征，如持续的心理渴求和戒断后复吸行为，涉及到依赖的长程适应[3，4]。海洛因身体依赖…     

海马胞外钙不依赖去甲肾上腺素释放及蛋白激酶C的调制作用(英文)

在细胞外无钙时,佛波醇基酯能加强3,4-二氨基吡啶、藜芦定或哇巴因所诱发的去甲上腺素(NE)释放,但对莫能星(Mon)诱发的NE释放无作用。河豚毒素能阻断前3种物质诱发的NE释放,但对Mon诱发的释放无作用。钙整合剂BAPTA-AM能抑制这4种物质诱发的NE释放。结果提示蛋白激酶c仅调制由膜去极化因素诱发的NE释放。     

蛋白激酶C与血管平滑肌α_1肾上腺素受体触发Ca~（2＋）内流的关系

在酶新鲜分离的犬肠系膜上动脉平滑肌细胞，蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）的激活剂佛波二丁酯（ＰＤＢ）引起的胞内Ｃａ２＋增高作用可被ＰＫＣ抑制剂１－（５－异喹啉磺酰）－２－甲基哌嗪（Ｈ７）所阻断，而哌唑嗪和普萘洛尔则不能阻断ＰＤＢ的这一作用；１０μｍｏｌ·Ｌ－１苯福林引起的胞内Ｃａ２＋增高作用可被１０和２０μｍｏｌ·Ｌ－１Ｈ７部分阻断；在无Ｃａ２＋液，Ｈ７可部分抑制苯福林引起的内Ｃａ２＋释放和外Ｃａ２＋内流，两者分别被抑制了３３±３％和５８±６％；ＫＣｌ（２０－１００ｍｍｏｌ·Ｌ－１）可浓度依赖性地引起胞内钙升高，这一作用可被１０和２０μｍｏｌ·Ｌ－１Ｈ７不同程度地阻断；ＰＤＢ引起的胞内Ｃａ２＋增高也可分别被１．２５和２．５μｍｏｌ·Ｌ－１维拉帕米部分和全部阻断。上述结果提示ＰＫＣ参与苯福林引起的部分内Ｃａ２＋释放和外Ｃａ２＋内流，但以参与外Ｃａ２＋内流为主；这一作用可能与ＰＫＣ激活，引起电压依赖性Ｃａ２＋通道开放有关。     

II、III组亲代谢型谷氨酸受体激动剂对脂多糖抑制C6胶质瘤细胞摄取谷氨酸的影响

目的：探讨II、III组亲代谢型谷氨酸受体（metabotropic glutamate receptors，mGluRs）激动剂对脂多糖（LPS）抑制C6胶质瘤细胞摄取谷氨酸（glutamate，GIu）的影响。方法：应用同位素标记法测定C6胶质瘤细胞对[^3H]-D，L-Glu的摄取。应用Hoechst染色法、噻唑蓝比色法（MTT）分别检测C6胶质瘤细胞的亡、细胞活力。结果：LPS（4、6μg／mL）显著抑制C6胶质瘤细胞摄取[^3H]-D，L-Glu，抑制率分别达17．6％和22．2％。Ⅱ组mGluRs激动剂DCG-IV100μmol／L和III组mGluRs激动剂L-AP4 100pznol／L逆转LlX3对C6胶质瘤细胞摄取[^3H]．D，L-GIu的抑制作用，这种逆转作用分别被Ⅱ、ⅡI组mGluRs拮抗剂APICA和MSOP取消。结论：DCG-IV和L-AP引起的C6胶质瘤细胞Glu摄取抑制，提示II、III组mGluRs激动剂通过促进Glu摄取，降低细胞外Glu浓度，从而发挥神经保护作用。     

Ⅱ、Ⅲ组亲代谢型谷氨酸受体激动剂逆转1-甲基-4-苯基吡啶离子抑制C6胶质瘤细胞摄取谷氨酸

目的：探讨Ⅱ、Ⅲ组亲代谢型谷氨酸受体(metabotropic glutamate receptors，mGluRs)激动剂对1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-metyl-4-phenylpyridinium，MPP~ )抑制C6胶质瘤细胞摄取谷氨酸(glutamate，Glu)的影响。方法：应用同位素标记法测定C6胶质瘤细胞对培养液中[~3H]-D，L-谷氨酸的摄取。结果：Ⅱ组mGluRs激动剂(2S，2’R，3’R)-2-(2’，3’-di-carboxycyclopropyl)glycine(DCG-Ⅳ)和Ⅲ组mGluRs激动刺L( )-2-amino-4-phosphonobutyric acid(LAP4)100μmol·L~(-1)可以逆转MPP~ 抑制C6胶质瘤细胞摄取Glu的作用，而Ⅱ组mGluRs拮抗剂(RS)-1-Amino-5-phosphonoinan-1-carboxylic acid(APICA)和Ⅲ组mGluRs拮抗剂(RS)-α-methvlserine-O-phosphate(MSOP)可以完全阻断其激动剂的逆转作用。 结论：激活C6胶质瘤细胞上的Ⅱ、Ⅲ组mGluRs可以通过促进谷氨酸转运体摄取Glu、进而降低细胞外液的Glu浓度。     

Supersensitivity of the noradrenergic system in the spinal cord following intracisternal injection of 6-hydroxydopamine

The intracisternal administration of 6-hydroxydopamine (6-OHDA; 100 micrograms on two consecutive days) resulted in a 90-95% depletion of norepinephrine (NE) in the spinal cord 3-60 days following administration of the drug. At 90 days following injection of 6-OHDA, the depletion was only 60% suggesting the regrowth of NE-containing fibers. Consistent with the depletion of NE, 3-60 days after the injection of 6-OHDA a 50-80% decrease in the uptake NE occurred with only a 25% decrease 90 days after administration of 6-OHDA. Associated with decreases in NE and its uptake was a 100-200% increase in the accumulation of NE-stimulated cyclic AMP in slices of spinal cord tissue from 6-OHDA-treated rats. The increased response was evident at 3-60 days after injection of 6-OHDA decreasing on day 90 to 40% above control. No shift in the EC50 for NE was evident and the specificity of agonists for this response was limited to agents with alpha and/or beta-adrenergic receptor activation properties. Radioligand receptor binding techniques, utilizing [3H]prazosin for alpha1 receptors and [3H]dihydroalprenolol for beta receptors demonstrated that increases in the Bmax of response of alpha1 (30-50%) and beta (15-20%) receptors in spinal cord may mediate the enhanced response of NE-stimulated cyclic AMP following the administration of 6-OHDA. This is indicated by similar time-dependent patterns of onset and termination of increased receptor binding and the accumulation of NE-stimulated cyclic AMP.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)     

地昔帕明对脑胶质瘤C6细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用

目的研究地昔帕明（ＤＭＩ）对大鼠脑胶质瘤Ｃ６的增殖抑制和凋亡诱导作用,为三环类抗抑郁药作为肿瘤辅助治疗提供新的理论和实验依据。方法用ＭＴＴ比色法测定Ｃ６细胞活力,用透射电镜、流式细胞术（ＦＣＭ）检测细胞凋亡,用免疫组化法分析ｂｃｌ－２蛋白的表达。结果ＤＭＩ对Ｃ６细胞的增殖具有明显的浓度依赖性抑制作用, ＩＣ５０（ ９５ ％置信区间）为２０．７（１７．３～２４．２）μｍｏｌ·Ｌ－１,细胞阻滞于Ｇ０～Ｇ１期。ＤＭＩ（４０μｍｏｌ·Ｌ－１）使细胞发生典型的凋亡形态改变,ＤＮＡ含量分析显示 Ｇ０峰左侧出现亚二倍体细胞凋亡峰,呈浓度依赖性,蛋白合成抑制剂ＣＨＸ可显著抑制ＤＭＩ诱导的细胞凋亡。同时,ＤＭＩ（１０ μｍｏｌ·Ｌ－１）可下调细胞 ｂｃｌ－２蛋白的表达。结论ＤＭＩ体外对Ｃ６细胞的增殖具浓度依赖性抑制作用,并诱导细胞凋亡。     

扩张型心肌病大鼠经药物处理后左心室内皮素系统和钙调节蛋白的变化

目的：研究扩张型心肌病(DCM)大鼠心肌钙调节蛋白和内皮素系统的变化及培多普利和比索洛尔干预的影响．方法：二肾-夹制备高血压糖尿病大鼠模型,部分大鼠用培多普利及比索洛尔治疗．3个月后检测大鼠LV／BW及左室β1AR、钙调节蛋白、内皮素受体(ETR)等mRNA表达,ETR及亚型Bmax和KD值的变化．结果：与正常组相比,DCM大鼠LV／BW增高,SERCA表达下降,活力降低,β1AR及IP3—1R上调,ETR数量降低,ETAR降低为主．培多普利及比索洛尔治疗逆转心室肥厚同时改善钙调节蛋白及内皮素系统的失调．结论：DCM大鼠心室肥厚阶段存在心肌细胞钙调节蛋白及内皮素系统的失调,用培多普利及比索洛尔治疗后可逆转．     

在地昔帕明诱导胶质瘤C6细胞凋亡过程中caspase 3基因表达和[Ca~(2 )]_i稳态(英文)

目的:研究抗抑郁药地昔帕明(Des)对胶质瘤C6细胞的凋亡诱导作用以及对凋亡关键效应分子caspase3和凋亡早期信号[Ca~(2 )]_i的调控作用.方法:采用流式细胞术(FCM)和凝胶电泳观察Des对C6细胞凋亡的DNA裂解作用,RT-PCR分析。caspase 3基因的表达以及激光扫描共聚焦显微镜测量单个活细胞[Ca~(2 )]_i浓度.结果:Des(10,20,40μmol/L)处理C6细胞24 h后,FCM图的G_1峰左侧出现凋亡特征性亚二倍体细胞峰,凋亡细胞百分率分别为5.2％,21.9％和 41.9％.同时,凝胶电泳显示典型的DNA“梯带”.DeS 20 μmol/L处理C6细胞24 h可明显增强caspase 3基因的表达,而未经Des处理的C6细胞则检测不到caspase 3基因的表达.此外,Des 40 μmol/L可使 C6细胞[Ca~(2 )]_i迅速升高并维持超过28 min,而钙螯合剂依他酸可显著降低C6细胞[Ca~(2 )]_i增高幅度,提示Des致C6细胞[Ca~(2 )]_i增高主要与细胞外钙内流有关.结论:Des诱导C6胶质瘤细胞凋亡可能与caspase 3基因表达的上调以及细胞内钙稳态的失衡有关.     

DL型丁胱亚磺酰亚胺对大鼠C_6神经胶质瘤细胞放射增敏效应研究

目的　研究有氧及乏氧状态下DL型丁胱亚磺酰亚胺(DL BSO)对大鼠C6神经胶质瘤细胞的放射增敏效应。方法　以60 Coγ射线为放射源 ,分有氧和乏氧状态下单纯照射组、加药照射组。采用细胞克隆形成方法观察DL BSO对神经胶质瘤细胞的放射增敏效应。结果　有氧状态下 ,DL BSO的放射增敏作用和药物作用时间有关。 0 1mmol·L-1DL BSO用药 2、6、12h ,未能观察到放射增敏作用 ,放射增敏作用仅在用药后 2 4、4 8h出现。乏氧状态下 ,0 1mmol·L-1DL BSO用药后 ,各时间点 (2～ 4 8h)均可见放射增敏效应。有氧、乏氧状态下不同浓度DL BSO的放射增敏作用和药物浓度有关。结论　DL BSO对有氧及乏氧状态下的大鼠C6神经胶质瘤细胞均有放射增敏作用。离体状态下 ,DL BSO主要表现出乏氧增敏作用 ,并呈现一定的时间、浓度依赖关系。     

缓激肽对C6胶质瘤细胞IL-1β表达的影响

目的探讨缓激肽对大鼠C6胶质瘤细胞内白细胞介素-1β(IL-1β)表达水平的影响,为进一步研究缓激肽开放血肿瘤屏障的机制提供实验依据。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量技术和放射免疫法分别检测缓激肽作用C6胶质瘤细胞后,胶质瘤细胞IL-1β mRNA及细胞培养液中IL-1β的含量。结果RT-PCR结果显示缓激肽作用15min后,IL-1β mRNA的表达水平较对照组升高(P<0.05),然后逐渐下降;放射免疫法结果亦证明了C6胶质瘤细胞在缓激肽作用15min后,其细胞培养液中IL-1β的含量最高。结论缓激肽可刺激大鼠C6胶质瘤细胞中IL-1β的分泌增强,IL-1β的表达上调可能在缓激肽增加血肿瘤屏障通透性的过程中发挥一定作用。     

大鼠海马β-肾上腺素受体和烟碱受体亚型在烟碱激活p44/42MAPK中的作用

目的　为探讨烟碱对海马脑片p4 4/ 4 2MAPK磷酸化的影响 ,以及 β 肾上腺素受体 (β AR)、烟碱受体亚型在其中的作用。方法　将 4 0 0 μm厚的海马脑片置于预先经 95 %O2 和 5 %CO2 饱和的 2 8℃人工脑脊液中预孵 90min后分别加入普萘洛尔、α 银环蛇毒素和美卡拉明 ,30min后再加入烟碱 ,使其终浓度分别为 1和 10 0 μmol·L- 1。于烟碱作用 90min时 ,运用免疫印迹法检测这 3个受体阻断剂对烟碱引起的p4 4/ 4 2MAPK磷酸化的抑制效果。结果　烟碱对p4 4/ 4 2MAPK磷酸化的作用与烟碱浓度有关 ,10 0 μmol·L- 1烟碱比 1μmol·L- 1烟碱作用强。美卡拉明单独作用可阻断 1μmol·L- 1烟碱和部分阻断10 0 μmol·L- 1烟碱引起的p4 2MAPK磷酸化 ;α 银环蛇毒素只能阻断 10 0 μmol·L- 1烟碱引起的p4 2 /4 4MAPK磷酸化 ;但同时使用这两种烟碱受体阻断剂时 ,两种浓度烟碱引起的p4 4/ 4 2MAPK磷酸化均可被完全阻断 ;普萘洛尔对 1μmol·L- 1烟碱引起的p4 4MAPK磷酸化和 10 0 μmol·L- 1烟碱引起的p4 2MAPK磷酸化仅有部分阻止作用。结论　在烟碱激活的p4 4/ 4 2MAPK中 ,不同烟碱受体亚型在不同烟碱浓度中起作用 ;β AR仅参与烟碱引起的p4 4/4 2MAPK部分磷酸化。