河南息县2010-2012年健康儿童肠道病毒71型血清流行病学调查

目的分析2010—2012年河南省信阳息县〈6岁健康儿童肠道病毒71型（EV71）中和抗体水平,了解河南省近几年EV71流行趋势,为防控EV71引起的手足口病流行提供科学依据。方法挑选2010—2012年信阳息县〈6岁健康儿童血清标本254份,进行EV71标准毒株（阜阳毒株）的微量中和试验,用SPSS17．0统计学软件分析EV71中和抗体阳性率、构成比和几何平均滴度,样本率的比较用χ^2检验。结果2010—2012年信阳息县〈6岁健康儿童EV71抗体总阳性率为68．90%,3年分别为75．56％、61．22％和71．21％,与当年本地区手足口病发病率呈正相关。〈1岁、1～岁组EV71抗体阳性率和几何平均滴度均低于3～岁、5～6岁组,差异有统计学意义（χ^2=18．59,P〈0．01;t=0．47,P〈0．05）。1～岁组几何平均滴度最低,为1：25．18。结论〈2岁婴幼儿更易感染EV71,健康儿童血清EV71抗体阳性率与当年手足口病的发病率呈正相关。     

2012年贵阳地区住院患儿手足口病的病原学研究

目的：了解2012年贵阳地区儿童手足口病住院患者的病原体分布情况,为手足口病的诊断、治疗及预防提供依据。方法收集3179例手足口病患儿资料,用荧光定量PCR法进行肠道病毒通用型、肠道病毒71型（EV71）和柯萨奇病毒A组16型（CA16）定量分型。结果共检测手足口病病例标本3179份,CA16阳性151份,占4．75％;EV71型331份,占10．41％;CA16和EV71混合感染7份,占0．22％;其他型肠道病毒897份,占28．22％。全年有2个发病高峰,分别为4～7月及10～11月,发病年龄主要集中在5岁以下儿童,其中0～3岁发病最高;男性患儿多于女性。结论2012年贵阳地区儿童手足口病住院患者的病原学分布以其他型肠道病毒和EV71型为主。     

ELISA法检测肠道病毒EV71抗体临床应用

目的 分析酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血清中的肠道病毒71型IgM（EV71-IgM）抗体对诊断手足口病的意义.方法 用酶联免疫法对86例（其中5例重症患儿）临床诊断为手足口病患儿血清标本进行IgM抗体检测.结果 86例血清标本中EV71-IgM抗体检出率为86.1%,5例重症患儿EV71的检出率100%.结论 酶联免疫法检测血清中肠道病毒71型IgM抗体灵敏度高,耗时短,成本低,应用范围广,有利于EV71感染的早期诊断.     

长江中下游三所城市143例71型肠道病毒的基因特征分析

目的 了解长江中下游三城市肠道病毒71型（EV71）基因型的分布状况.方法 利用逆转录半巢式PCR的方法检测三所城市143份临床诊断为手足口病患儿的血清和咽拭子标本.结果 143份标本中检测到阳性EV71 RNA33份（23％）;经过测序证实33份标本均为EV71 C4型.结论 三所城市的手足口病主要由C型EV71病毒引起.不同城市间EV71病毒存在一定的变异.     

湘潭市手足口病原学流行特征分析

目的：针对湘潭市20102013年手足口病监测实验室检测结果分析该病病原学流行特征,为本市手足口病防控提供参考依据。方法：收集湘潭市20102013年国家疾病监测报告管理系统手足口病疫情基本资料及实验室检测结果进行统计分析;实验室检测采用 RT-PCR 实时荧光法检测肠道病毒、肠道病毒71型（EV71）、柯萨奇病毒 A 组16型（CoxA16）.结果：20102013年,检样1079份,肠道病毒阳性569例,阳性率52.73％;EV71型阳性211份,占37.08％,;CoxA16阳性110份,占19.33％;其他型阳性248份,占43.59％;997份轻症病例中 EV71阳性率30.12％、CoxA16阳性率22.09％、其他型阳性率47.79％;重症病例67份,EV71阳性率84.48％、其他型率15.52％;死亡病例15份,EV71阳性率92.31％、其他型率7.69％。结论：2010-2013年,湘潭市手足口病以 EV71型和其他型为优势流行株;重症、死亡病例主要由 EV71引起;EV71型引起的手足口病比其他肠道病毒更容易引起流行,导致重症的比例也较高。     

免疫层析法与酶联免疫吸附试验检测手足口病肠道病毒71型-免疫球蛋白M抗体的阳性率比较

目的对比观察免疫层析法(GICA)与酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测手足口病患儿肠道病毒71型-免疫球蛋白M(EV71-IgM)抗体的阳性率。方法选取我院于2017年7月至2018年7月收治的83例手足口病患儿为研究对象,分别使用GICA法和ELISA法检测患儿末梢血,比较检测EV71-IgM抗体的阳性率。结果 GICA法检测阳性率为47%(39/83),ELISA法检测阳性率为27%(22/83)。临床诊断一致性检测显示Kappa值为0.529,P<0.05,这表明2种方法检测EV71-IgM抗体一致性存在差异。2种检测方式McNemarχ~2检验结果显示:P<0.05,认为GICA法检测EV71-IgM抗体阳性结果高于ELISA法。结论 GICA法对手足口病患儿血液标本中抗EV71-IgM抗体的检出率高于ELISA法,在手足口病的早期诊断中应尽早推广。     

深圳市社区人群EV71和CoxA16隐性感染的流行病学分析

目的为了解肠道病毒71型（EV71）和柯萨奇病毒A16型（CoxA16）在深圳市健康人群中的隐性感染情况,进一步探讨隐性感染在儿童手足口病（HFMD）中的传播特征及危害性。方法实验采用酶联免疫（ELISA）法检测不同年龄层（0～59岁之间）的健康人群血清中抗肠道病毒71型（EV71）和柯萨奇病毒A16型（CoxA16）的IgM和IgG抗体水平,并采用荧光定量PCR检测IgM阳性的样本中病毒核酸的阳性率。结果抗EV71和CoxA16 IgG抗体的阳性率都随着年龄段的增长呈下降趋势,0～5岁儿童组的IgG抗体阳性率最高,其中抗EV71的IgG抗体阳性率为79.7%,抗CoxA16的IgG抗体阳性率为91.93%。30岁以下者,两种病毒的抗体阳性率在70%以上,显著高于30岁以上人群,P〈0.01。5岁以下儿童抗EV71抗IgM抗体阳性率达15.9%。49份抗EV71 IgM阳性样本中有42份EV71的核酸阳性,阳性率为85.7%;31份抗CoxA16 IgM阳性样本中有25份CoxA16核酸阳性样本,阳性率为80.6%。结论人群对EV71和CoxA16普遍容易感染,健康人群中存在较高的隐性感染,隐性感染率与人群的年龄分布存在相关性,因此隐性感染人群也是病原体传播的传染源之一。     

托幼机构健康儿童EV71和CoxA16隐性感染的现况调查及危险因素分析

目的为了解肠道病毒71型（EV71）和柯萨奇病毒A组16型（CoxAl6）在深圳市幼儿园健康儿童中的隐性感染情况,进一步探讨儿童手足口病（HFMD）隐性感染的危险因素。方法采用酶联免疫（ELISA）法检测某幼儿园所有健康儿童血清中抗EV71和CoxAl6的IgM抗体水平,同时采用病例对照研究分析EV71和CoxAl6病毒隐性感染的危险因素。结果调查的350名健康儿童中,32名儿童感染了EV71或CoxAl6病毒,隐性感染率为9．1％,其中CoxAl6病毒感染率为7．4％,EV71病毒感染率为3．1％,同时感染CoxAl6和EV71两种病毒的感染率为1．4％;暴发班级的感染率为17．0％,非暴发班级的感染率为6．5％。每天洗手3次及以上（OR=0。40,95％CI：0．19～0．85）、洗手使用清洁剂（OR=0．33,95％CI：0．16—0．68）为EV71、CoxAl6病毒隐性感染保护因素;所在班级出现HFMD的聚集性病例（OR=3．80,95％CI：1．81—7．99）和儿童有咬玩具、咬手指习惯（OR=2．29．95％CI：1．06。4．92）为EV71、CoxAl6病毒隐性感染危险因素。结论隐性感染在一定程度上影响着HFMD的流行,加强病人的密切接触者管理和宣传教育,尽可能降低隐性感染者的比例,对控制HFMD的暴发及流行有着重要的意义。     

肠道病毒71型VP1基因的表达纯化及初步应用

摘　要：目的 表达纯化肠道病毒71型（EV71）VP1蛋白,初步建立人血清中抗EV71 IgG间接ELISA检测方法。方法 通过化学法合成肠道病毒EV71型VP1全基因序列,构建重组质粒pET-43.1a(+)/VP1,转化大肠杆菌Bl21（DE）3 ,IPTG诱导表达,镍金属亲和层析纯化目的蛋白,产物经SDS-PAGE和Western blot鉴定。以目的蛋白作为包被抗原,初步建立间接ELISA 检测方法。结果 成功构建重组质粒pET-43.1a(+)/VP1,表达纯化出较高纯度的EV71 VP1融合蛋白,初步建立人血清中抗EV71 IgG间接ELISA 检测方法。检测77份6-10岁健康儿童、手足口病现症患儿血清中抗EV71 VP1 IgG抗体阳性率分别为51.22%、61.11%。结论 表达产物具有较好的免疫原性,可用于肠道病毒EV71抗体检测试剂盒的研制。     

珠海市手足口病流行病学分析

目的探讨珠海市手足口病的流行病学特点。方法利用荧光PCR检测手足口病临床诊断标本和健康人群标本柯萨奇病毒A组16型（coxsackievims A16,CoxA16）、肠道埃可病毒71型（enterovims 71,EV71）以及非EV71和CoxA16其他肠道病毒阳性率。采用描述性流行病学研究方法进行流行病学特征分析。结果319份临床样本EV71、CoxA16以及非EV71和CoxA16其他肠道病毒阳性率分别为26．02％,6．90％和30．09％;180份健康人群样本Ev71和CoxA16均阴性,非EV71和CoxA16其他肠道病毒阳性率2．78％。在105份手足口病实验室诊断病例中,男性68例,女性37例。1～5岁感染病例数最多,占实验室诊断病例的86．67％。病例主要集中在3～7月,占诊断总数的85．71％,高峰在6月。病例以散居婴幼儿为主。结论珠海市手足口病临床诊断病例中EV71、CoxA16以及非EV71和CoxA16其他肠道病毒阳性率显著高于健康人群。实验室诊断病例以1～5岁托幼儿童为主,男性多于女性,病例发生有明显的季节性。     

EV71型重症手足口病患儿的临床特征及危险因素的相关性分析

目的探讨人肠道病毒71 型（EV71）重症手足口病（HFMD）患儿的临床特征及其感染发生的危险因素,为预防、临床诊治提供参考依据。方法回顾性分析2013 年1 月-2015 年12 月67 例重症手足口病患儿的病例资料,用描述性方法进行流行病学分析;同时对患儿的一般资料、症状、体征、辅助检查进行回顾性分析,收集患儿发生感染的部位、细菌种类、药敏实验结果,分别采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）方法对人肠道病毒普通型（EV）、EV71、柯萨奇病毒A16 型（A16）进行检测。结果67 例EV71 型重症HFMD 患儿以单一感染最多,占50.7％（34 例）;EV71 型的混合感染占49.3％（33 例）。继发感染最常见部位是下呼吸道（26.5%）。临床分离病原体46 株,其中革兰阳性菌11 株（23.9%）,革兰阴性菌35 株（76.1%）。对病原体进行药敏实验,头孢曲松、亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦普遍对G-性菌敏感,头孢唑林钠、哌拉西林、万古霉素普遍对G+性菌敏感。EV71 型重症HFMD以3 岁内的男性患儿多见,5 岁以上儿童发病率较低,春夏季为发病高峰期,患儿临床症状以高热、皮疹、嗜睡、易惊、肢体抖动、病理征阳性为主,常伴有胸片、头颅CT 异常,实验检查结果显示心肌酶谱、肝功能、白细胞、血糖升高、体液免疫及降钙素原等异常;3 岁以下的男性患儿、农村住宿条件差、不良卫生习惯、对该疾病不了解未采取预防措施的监护人的散居儿童为该疾病的高发人群,EV71 为其感染的常见病原体。结论四川部分地区重症HFMD患儿主要由EV71 及其混合型人肠道病毒感染引起,了解EV71型HFMD重症临床特征,掌握本地区EV71 型重症HFMD的高危因素对于HFMD防治具有重要意义。     

EV71型手足口病疫苗的效果评价

目的了解EV71型手足口病疫苗的效果。方法收集2009～2018年手足口病疫情资料,资料来源于国家疾病监测信息管理系统。2016年8月开始购进疫苗,2016～2018年疫苗接种数由各县区上报,病原学结果自2012年开始检测,收集2012～2018年病原学结果。回顾性分析手足口病资料。通过观察2016～2018年EV71型手足口病疫苗的接种数与发病情况的关系,评价疫苗的效果。结果发病年龄主要集中在1岁组和2岁组,分别占40.44%和25.72%。2012年EV71构成比为24.42%,2013年65.57%,2014年22.03%,2015年59.29%,2016年18.70%,2017年32.20%,2018年10.29%,2013年、2015年、2017年EV71是优势菌株。2016年病例数5333例,发病率62.74/10万,2017年病例数是3991例,发病率46.29/10万,2018年病例数4823例,发病率55.21/10万。2017年EV71型重症病例仅有5例,比2013年15例下降66.7%,比2015年19例下降73.68%。2012～2018年手足口病重症病例中EV71型平均阳性率是81.67%。结论 5岁以内特别是1～2岁组是发病的高峰期,2017年EV71是优势菌株。2017年发病率和发病数均低于2016年和2018年。EV71病毒易致重症,2017年EV71流行强度和重症数低于2013年和2015年。虽然接种EV71型手足口病疫苗不能预防所有类型的手足口病,只对EV71型手足口病有效,但能降低发病率和重症率,是目前最经济、最有效的预防手段。     

银川市某医院体检人群EV71型和ECHO病毒感染率的调查

目的了解银川市不同年龄组人群肠道病毒71型(EV71型)和埃克病毒(ECHO)感染率情况及IgG抗体阳性率分布情况。方法采集宁夏银川市某医院204份不同年龄组体检人群血清,用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中的EV71型和ECHO IgG抗体。结果 204例受检人群血清中EV71型和ECHO IgG阳性率分别为32.4%和15.1%,其中1岁以内婴幼儿EV71抗体阳性率低,1岁～组EV71 IgG抗体阳性率最高达48.3%,但与其他组比较差异无统计学意义。1岁以内婴幼儿ECHO抗体阳性率低,随着年龄增长,抗体阳性率增高,15～65岁组ECHO IgG抗体阳性率最高,为22.3%,与其他组比较差异无统计学意义。结论普通人群中可能存在EV71型和ECHO隐性感染者,成人EV71隐性感染率较低,儿童是EV71的主要感染者,15岁以下儿童为ECHO感染的高危人群,人群通过自然感染获得免疫保护。     

在园儿童携带EV71和CoxA16的调查研究

目的了解手足口病的流行期和非流行期在园儿童肠道病毒EV71与柯萨奇病毒CoxA16携带水平。方法采用随机整体抽样方法．对3家幼儿园5岁以下儿童采集咽拭子,进行实时荧光PCR检测。结果非流行期176名在园儿童有4名CoxA16阳性,阳性率为2．3％,2名EV71阳性,阳性率为1．1％。流行期216名在园儿童有7名CoxA16阳性,阳性率为3．2％,5名EV71阳性,阳性率为2．3％。结论深圳某地手足口病在流行期和非流行期,在园儿童病原体携带无显著差异;应采取措施加强对手足口病的预防和控制工作。     

手足口病EV71型中和抗体变化的研究

目的评价手足口病(HFMD)患儿急性期和愈后的血清EV71型中和抗体变化。方法对安徽阜阳2008年4～8月因HFMD住院的患儿采集急性期和愈后1年血样,采用微量细胞病变中和试验方法检测EV71型中和抗体滴度。结果共调查到急性期组患儿83人和愈后1年组患儿57人。对这些病例的血清中和试验研究发现:急性期组和愈后组中和抗体阳性率差异分别为96.4%和82.5%,差异具有统计学意义(χ2=7.784,P<0.05)。急性期组和愈后组抗-EV71中和抗体GMT值分别为388.3和540.0,差异无统计学意义(t=0.907,P>0.05)。结论患儿愈后可以产生较高的抗-EV71中和抗体,且抗体可持续至少1年。     

肠道病毒71型特异性单克隆抗体的制备及其在病毒鉴定中的应用

目的：建立肠道病毒71型（ EV71）特异性检测的免疫荧光方法用于病毒分离培养后的EV71鉴定,为EV71生物学特征研究和疫苗株的筛选奠定基础。方法：以EV71 VP1为免疫原制备单克隆抗体,用经测序鉴定的肠道病毒毒株建立EV71特异性免疫荧光方法;将不同地区收集的手足口病患儿的临床标本进行病毒分离,利用EV71特异性单抗进行分离培养后的病毒鉴定。结果：制备获得2株单抗,经鉴定其中1株3 E12为EV71特异性单抗;以此单抗建立的免疫荧光方法对EV71感染细胞呈阳性反应,而与柯萨基病毒A16和埃可病毒6等非EV71肠道病毒不反应。从104份手足口病临床标本中共分离到35株病毒,产生肠道病毒典型的细胞病变;用3E12特异性单抗免疫荧光鉴定分离病毒,其中29株为EV71,与RT-PCR验证结果完全一致。结论：成功制备获得EV71特异性单克隆抗体,以此单抗建立的EV71特异性免疫荧光方法敏感性高、特异性强,可用于分离培养EV71的鉴定。     

安康市2010—2012年手足口病重症病例流行病学分析

目的分析安康市2010—2012年重症手足口病流行病学特点,为进一步预防和控制手足口病提供科学依据。方法对2010—2012年安康市报告的所有重症手足口病病例进行个案调查和样品采集,用RT—PCR法对患者标本进行总肠道病毒、肠道病毒71型（EV71）和柯萨奇病毒A组16型（CoxA16）的特异性核酸检测。结果2010—2012年安康市共报告手足口病病例5998例,年均报告发病率为74．72／10万,其中重症病例52例,死亡1例。重症病例主要集中在4—7月和11～12月,年龄主要集中在3岁以下儿童（占78．85％）,居住地为农村的40例（76．92％）;从发病到初次就诊平均时间0．54d,从发病到诊断为重症2．86d;初次就诊者32例未诊断出手足口病,村（个体）诊所和乡镇（社区）医院占81．26％;临床表现以发热和皮疹为主;实验室EV71检测率为42．31％,其他肠道病毒检测率为9．62％,CoxA16检测率为1．92％。结论加强基层培训、改善农村的环境卫生、加强疾病的监测、做好重症手足口病救治工作是防治重症手足口病的关键。     

2009~ 2012 年湖北省武穴市手足口病疫情分析简

目的 分析湖北省武穴市2009~2012年间手足口病流行特征以及临床资料,探讨适宜的合理有效防控措施.方法 收集国家疾病监测信息报告管理系统手足口病个案资料,采用描述性流行病学统计方法对其进行分析比较.结果 2009~2012年间武穴市共报告手足口病976例,年平均发病率36.48/10万,2009~2012年间分别报告129例、191例、278例、378例,报告发病率分别为18.74/10万、27.65/10万、43.15/10万、57.98/10万,年发病率逐年上升,4~7月为发病高峰,8月份回到较低水平,2011和2012这两年的10~12月出现第2个小高峰;发病人群中以散居儿童为主,占84.83%（828/976）;发病年龄主要分布在5岁以下儿童,占98.05%（957/976）,无死亡病例.2009~2012间手足口病病原体均以肠道病毒71型（EV71）为主,病原学诊断阳性者中71型（EV71）占46.88%,Cox16和其他肠道病毒有一定的感染比例.结论 2009~2012间武穴市手足口病发病流行强度逐年升高,手足口病流行有明显的季节性,主要分布在5岁以下儿童,病原学以EV71型为主,应关注流行高峰季节和重点人群,制定科学规范的防控方案,加强疫情监测,减少发病和死亡.     

小儿手足口病849例流行病学特征及临床分析

目的:探讨小儿手足口病流行病学特征及临床特点,总结诊断和治疗经验,提高手足口病的疗效。方法:对2009年收治住院的849例手足口病病例进行流行病学、临床表现、治疗、转归分析。结果:发病年龄集中在5岁以下(97.29%),尤以3岁以下患儿发病率最高;男女比例为1.43∶1,男性患儿明显多于女性;发病从4～11月,高峰为7～9月;实验室诊断病例中,EV71占45.08%,CoxA16占38.34%;死亡病例均为EV71感染。结论:手足口病高发季节应做好疾病的防控工作,降低发病率,早期诊断和早期治疗是提高小儿手足口病疗效的关键。