温胆汤对肥胖大鼠血清瘦素及下丘脑STAT3和SOCS3表达的影响

目的探讨温胆汤治疗肥胖的可能作用机制。方法采用高脂饮食诱导肥胖大鼠模型,将造模成功大鼠随机分成模型组和温胆汤组,每组8只,另将8只健康大鼠设为正常组。造模成功后各组大鼠均采用基础饲料喂养,同时温胆汤组大鼠给予温胆汤15 g/(kg·d)灌胃,模型组和正常组均用等量蒸馏水灌胃,共持续6周。比较各组大鼠体重、Lee's指数、肥胖率,检测血清瘦素、血脂[包括总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)]及下丘脑组织信号转导和转录激活因子3 (STAT3)、细胞因子信号转导抑制因子3 (SOCS3) mRNA及蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠体重、血脂水平(除HDL-C外)、下丘脑STAT3 mRNA和蛋白表达升高,SOCS3 mRNA和蛋白表达降低(P 0. 01)。与模型组比较,温胆汤组Lee's指数、体重、血脂水平(除HDL-C外)、下丘脑STAT3 mRNA和蛋白表达明显降低,SOCS3 mRNA和蛋白表达则显著升高(P 0. 01)。模型组肥胖率为26. 36%,温胆汤组为1. 06%。结论温胆汤具有良好的降脂作用,可能通过调节JAK2/STAT3信号通路而调控机体瘦素水平,从而纠正机体代谢异常。     

温胆汤对肥胖痰湿证免疫及炎症细胞因子表达的影响

目的:探讨祛痰名方温胆汤对高脂饮食诱导的肥胖SD大鼠免疫及炎症细胞因子表达的影响。方法:根据文献方法建立肥胖痰湿证大鼠模型后采用温胆汤灌胃进行干预,比较用药前后大鼠肥胖率、体质量、Lee’s指数、血脂(TG、TC、LDL-C、HDL-C)、免疫T淋巴细胞(CD~+_3、CD~+_4、CD~+_8)及炎症细胞因子(TNF-α、IL-6、IL-17和IL-22)表达的变化。结果:高脂饮食可成功建立肥胖大鼠模型,造模组大鼠肥胖率大于20%,体质量、Lee’s指数明显增高,有显著性差异(P0.05);温胆汤干预可降低肥胖大鼠肥胖率、体质量和Lee’s指数(P0.05),改善血脂水平(P0.05),调整T淋巴细胞CD~+_3、CD~+_4、CD~+_8及CD~+_4/CD~+_8比值的表达,有效调节TNF-α、IL-6、IL-17和IL-22等相关炎症细胞因子的表达(P0.05)。结论:温胆汤改善肥胖效果明显,其机理可能是通过调控机体免疫机制来改善肥胖炎症反应状态,进而达到纠正肥胖痰湿病理的作用,这为"治痰"名方温胆汤干预肥胖痰湿证提供了科学依据。     

基于脂肪细胞自噬探讨温胆汤干预肥胖痰湿证炎症状态的作用机制

目的观察温胆汤对肥胖痰湿证大鼠肾周脂肪组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein 1,MCP-1)等相关炎症细胞因子,对自噬活性标志物B细胞淋巴瘤2结合蛋白-1(Beclin-1)、微管相关蛋白轻链(LC3) mRNA与蛋白水平表达,以及对脂肪细胞超微结构与自噬状态变化的影响,探讨温胆汤干预肥胖痰湿证炎症状态的作用机制。方法选用清洁级60 g左右雄性SD大鼠100只,随机分成造模组(70只)和空白组(30只),空白组采用普通饲料喂养,造模组采用高脂饲料喂养,持续喂养6周,借助文献方法制作肥胖痰湿证大鼠模型。造模成功后,按照体质量依序淘汰过轻者,共遴选出16只肥胖大鼠,随机分为模型组、温胆汤组(为本课题组前期实验已确定的最佳剂量组),每组8只;另在空白组中随机选取8只大鼠设为正常组。药物组以15 g·kg^-1生药量进行灌胃,模型组和正常组均予等量蒸馏水进行灌胃,1次/d,共6周。禁食不禁水12 h,麻醉后进行样本采集,检测并计算大鼠体质量、Lee’s指数和肥胖...     

白头翁皂苷B4对慢性子宫内膜炎大鼠的治疗作用及其相关因子的影响

目的:通过体内外实验研究白头翁皂苷B_4对子宫内膜炎大鼠的影响。方法:动物实验采用25%的苯酚胶浆制备子宫内膜炎模型,60只SD雌性大鼠随机分为空白组、模型组、苦参凝胶组(0. 005 g·kg~(-1)),白头翁皂苷B_4凝胶低、中、高剂量组(0. 005,0. 01,0. 02 g·kg~(-1)),每组10只,除空白组外,各组大鼠每2 d向其阴道内注入25%苯酚胶浆,造模持续30 d。造模后当天开始给药,白头翁皂苷B_4凝胶低、中、高剂量组每日直肠给药,苦参凝胶组每日阴道给药,空白组和模型组以同样的方法给予等量的生理盐水,给药连续30 d。末次给药后,取各组大鼠子宫及其附件,进行大鼠子宫形态、子宫指数分析;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠子宫组织病理变化;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组大鼠子宫组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(IL-6),信号转导蛋白130(gp130),信号传导及转录激活因子3(STAT3)mRNA的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠子宫组织中IL-6和STAT3蛋白的表达;细胞实验,以脂多糖(LPS)诱导大鼠子宫内膜上皮细胞制备体外炎症模型,Real-time PCR检测各组大鼠子宫内膜上皮细胞中IL-6,gp130和STAT3 mRNA的表达。结果:动物实验结果显示,与空白组比较,模型组大鼠子宫宫腔黏连不全,子宫内膜出现水肿及充血病变;与模型组比较,白头翁皂苷B_4凝胶高剂量组和苦参凝胶组大鼠子宫宫腔无黏连现象,子宫组织较为完整,子宫病理结构得到明显的改善。与空白组比较,模型组大鼠子宫指数明显升高(P0. 05),子宫组织中IL-1βmRNA表达明显升高(P0. 05),子宫组织中IL-6,STAT3的mRNA和蛋白表达明显升高(P0. 05);与模型组比较,白头翁皂苷B_4凝胶高剂量组中子宫指数明显降低(P0. 05),子宫组织中IL-6,STAT3的mRNA和蛋白表达水平明显降低(P0. 05),对TNF-α和IL-1β的mRNA表达与模型组比较差异无统计学意义。细胞实验结果显示,与空白组比较,模型组大鼠子宫内膜上皮细胞中IL-6和gp130的mRNA表达显著升高(P0. 01),STAT3的mRNA表达明显升高(P0. 05);与模型组比较,白头翁皂苷B_4高剂量组中IL-6,gp130和STAT3的mRNA表达水平明显下降(P0. 05)。结论:白头翁皂苷B_4可改善大鼠慢性子宫内膜炎的炎症反应,降低炎症因子IL-6的释放,其机制可能与IL-6/STAT3通路的下调有关。     

清金化痰颗粒对COPD急性期(痰热郁肺型)大鼠肺组织STAT1,STAT3的调控作用

目的:研究清金化痰颗粒对慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性期(痰热郁肺型)大鼠肺组织中信号转导与转录激活因子1,3(STAT1,STAT3)的调控作用。方法:采用烟熏+脂多糖(LPS)气管注射方法建立COPD痰热郁肺证大鼠模型(正常组除外),随机分为正常组,模型组,罗红霉素组(0.031 5 g·kg~(-1)),清金化痰颗粒低、高剂量组(9.4,37.6 g·kg-1),每组8只。每日ig给药1次,连续给药2周。观察各组大鼠的一般行为活动和病理学变化特点,采用大鼠肺功能检测仪测定各组大鼠相关肺功能指标:0.3 s用力肺活量(FEV0.3),用力肺活量(FVC),FEV0.3/FVC,肺活量(VC),采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)法测定肺组织白细胞介素-6(IL-6),STAT1及STAT3 mRNA表达,免疫组化法检测肺组织IL-6,STAT1及STAT3蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组肺组织中IL-6,STAT1及STAT3 mRNA表达显著升高(P0.01);与模型组比较,罗红霉素组、清金化痰颗粒低、高剂量组均能显著降低大鼠肺组织IL-6,STAT1及STAT3 mRNA表达(P0.01),罗红霉素组和清金化痰高剂量组减低更明显,二者之间无明显差异。各组大鼠肺组织中IL-6,STAT1及STAT3蛋白的表达中,与正常组比较,模型大鼠肺组织中的IL-6,STAT1及STAT3平均积分吸光度IA值显著升高(P0.01);与正常组比较,模型组大鼠肺功能参数FEV0.3,FVC,FEV0.3/FVC,VC值均降低(P0.01);与模型组比较,各给药组肺功能参数FEV0.3,FVC,VC值均有升高(P0.01,P0.05);与模型组比较,罗红霉素组、清金化痰颗粒低、高剂量组能显著降低大鼠肺组织IL-6,STAT1及STAT3平均IA值(P0.01),罗红霉素组和清金化痰颗粒高剂量组减低更明显,二者之间差异无统计学意义。结论:清金化痰颗粒可下调JAK/STAT信号通路中STAT1,STAT3的过度表达和持续活化,来抑制IL-6的水平的升高,减轻气道炎症,抑制COPD急性发作与加重。     

温经汤加味对EM肾虚血瘀型大鼠JAK2/STAT3信号通路及其下游因子的影响

目的:探讨温经汤加味对子宫内膜异位症(EM)肾虚血瘀型大鼠的治疗作用及其机制研究。方法:从105只SPF级雌性未孕健康SD大鼠中随机选取10只作为空白组,余采用复合因素法构建肾虚血瘀型大鼠模型,造模成功后随机抽取10只为假手术组,仅开腹,不缝内膜,余采用自体内膜移植法构建EM肾虚血瘀型大鼠模型。从造模成功的56只大鼠中随机选取50只大鼠随机分为模型组、达那唑组(63 mg·kg^-1)及温经汤加味低、中、高剂量组(5,10,20 g·kg^-1),每组10只,每日灌胃1次,连续4周。取各组内膜组织进行苏木素-伊红(HE)染色,观察组织病理变化;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测各组血清上清液中白细胞介素-10(IL-10),白细胞介素-17(IL-17)含量;测量治疗前后各造模组异位灶长(D1),宽(D2),高(D3),并计算异位灶体积;免疫组化(IHC)检测各组大鼠内膜组织中Janus激酶2(JAK2),信号转导与转录活化因子3(STAT3),磷酸化STAT3(p-STAT3),血管内皮生长因子(VEGF),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),血小板反应素-1(TSP-1)蛋白表达情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测VEGF,TNF-α以及TSP-1蛋白表达情况。结果:镜下病理观察可见空白组大鼠子宫内膜腺体细胞排列整齐,腺体及间质细胞生长良好;与空白组比较,模型组子宫内膜结构完整,呈子宫腔状或环形封闭式结构,内有囊肿形成,上皮为立方状或柱状上皮,大部分上皮细胞有分泌现象,间质致密,基质呈少许纤维化,血管增生密集,并可见到少量腺体及炎细胞浸润。与空白组比较,模型组血清中IL-10含量显著降低(P<0.01),IL-17含量显著升高(P<0.01);模型组内膜组织中JAK2,STAT3,p-STAT3,VEGF,TNF-α蛋白表达明显升高(P<0.05),TSP-1蛋白表达明显降低(P<0.05)。与模型组比较,温经汤加味各剂量组大鼠血清中IL-10含量显著升高(P<0.01),IL-17含量显著降低(P<0.01),异位灶体积显著减小(P<0.01);温经汤加味高、中剂量组内膜组织中JAK2,STAT3,p-STAT3,TNF-α,VEGF蛋白水平均明显降低(P<0.05),TSP-1蛋白水平明显升高(P<0.05)。结论:温经汤加味具有抑制EM肾虚血瘀型大鼠异位灶侵袭作用,其机制可能与干预JAK2/STAT3信号通路过度激活所介导的免疫屏障、阻断微血管新生功能有关。     

参苓白术散对NAFLD大鼠肝细胞mTORC1/STAT3信号通路的影响

目的:观察参苓白术散对高脂饮食饲养的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝细胞哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合体1(mTORC1)/细胞信号转导因子及转录激活因子3(STAT3)信号通路的影响,从炎症角度揭示参苓白术散抗大鼠NAFLD的作用机制。方法:取SD大鼠80只,随机分为4组,分别为正常组、模型组、参苓白术散高、低剂量组(30,10 g·kg^-1),每组20只。采用高脂饲料喂养大鼠8周,建立NAFLD大鼠模型,各药物干预组大鼠灌服相应剂量的参苓白术散,8周后取血和肝组织样本,全自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)定量;对肝组织进行油红O,苏木素-伊红(HE)染色;采用Ⅳ型胶原酶离体循环灌注法分离肝细胞;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测肝细胞肿瘤坏死因子(TNF)-α,白细胞介素(IL)-1β,IL-5及IL-6含量变化,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠肝细胞mTORC1,STAT3 mRNA及蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠病理组织学改变表明,肝组织炎症及脂肪蓄积显著,血清ALT,AST,TC,TG及LDL-C含量显著升高,HDL-C显著下降,肝细胞TNF-α,IL-1β,IL-5及IL-6水平显著升高,mTORC1,STAT3 mRNA及蛋白相对表达量显著升高(P<0.01)。与模型组比较,参苓白术散高、低剂量组肝组织脂质蓄积明显改善,血清ALT,AST,TC,TG及LDL-C含量明显下降,肝细胞TNF-α,IL-1β,IL-5及IL-6水平明显下降,肝细胞mTORC1,STAT3 mRNA及蛋白相对表达量明显降低;参苓白术散高剂量组在改善脂质蓄积,抑制肝组织炎症反应方面,效果优于参苓白术散低剂量组,mTORC1,STAT3 mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:参苓白术散能够改善高脂饮食诱导的NAFLD大鼠脂肪代谢紊乱、减轻肝脏脂质蓄积及炎症反应,其作用机制可能与抑制肝细胞内mTORC1/STAT3通路相关mRNA及蛋白表达有关。     

银杏叶提取物对哮喘大鼠STAT6及IL-13表达的影响

目的：研讨银杏叶提取物（Egb）对哮喘大鼠信号转导和转录激活因子6（STAT6）、IL-13表达的影响，探讨其治疗哮喘的机制。方法：28只清洁级大鼠随机分为3组，对照组、模型组和Egb组，以卵白蛋白注射致敏雾化吸入激发法复制哮喘模型。用免疫组织化学法分别检测肺组织中STAT6蛋白表达水平，用流式细胞分析测定STAT6阳性细胞的表达率；用双抗体夹心酶联免疫吸附试验法测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中IL-13浓度；对BALF进行细胞计数及嗜醵№垃细胞（EOS）分类计数。结果：①BALF中细胞总数和EOS占细胞总数的百分比（EOS％）模型组均显著高于对照组（P〈0．01），Egb组较模型组均显著降低（P〈0．01）；②BALF中IL-13的浓度模型组显著高于对照组（P〈0．01），Egb组较模型组显著降低（P〈0．01）；③模型组肺组织中STAT6蛋白表达和STAT6阳性细胞的表达率均较对照组明显增强（P〈0．01），Egb组较模型组明显减弱（P〈0．01）。结论：哮喘大鼠肺组织中STAT6蛋白有较强表达；Egb有抑制哮喘大鼠气道炎症的作用，其下调STAT6的表达、使IL-13分泌减少可能为其重要作用机制。     

刺蒺藜通过瘦素介导的JAK2/STAT3通路对肥胖性高血压大鼠肾脏的影响

目的研究刺蒺藜超微粉通过瘦素介导的JAK2/STAT3通路对肥胖性高血压大鼠肾脏影响的机制。方法由高脂饮食诱导肥胖性高血压大鼠模型,随机分为替米沙坦组(8只,3.4 mg/kg),刺蒺藜组(8只,17.2 mg/kg),模型组(8只,生理盐水2 m L/d),另设普通饲料喂养的10只大鼠为对照组(生理盐水2 m L/d),共给药12周,定期记录检测大鼠血压、体质量,实验结束时检测大鼠血脂水平,ELISA法检测大鼠血清血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)、β_2微球蛋白(β_2-MG)和瘦素(Lep)的水平,HE染色观察大鼠肾脏及脂肪组织的形态学变化,免疫组化法检测各组大鼠肾脏AT1和Lep R水平;q RT-PCR法和Western blotting法检测大鼠肾脏JAK、STAT的m RNA和蛋白水平的改变。结果经药物干预12周后,各组肥胖性高血压大鼠血清循环Ang Ⅱ、β_2-MG和Lep水平显著下降(P0.05),免疫组化显示,与模型组比较,刺蒺藜组肾脏Lep R1蛋白分布密度显著增加(P0.05)。RT-PCR及Western blotting显示,与模型组比较,刺蒺藜组肾脏的JAK、STAT的m RNA和蛋白表达降低(P0.05)。结论刺蒺藜通过调控瘦素介导的JAK2/STAT3通路,改善瘦素抵抗,治疗肥胖性高血压。     

基于JAK2/STAT3的龙胆苦苷通路调控溃疡性结肠炎小鼠巨噬细胞极化机制研究

目的 基于酪氨酸激酶2/信号转导及转录激活因子3（JAK2/STAT3）通路,探讨龙胆苦苷对硫酸葡聚糖（DSS）诱导的溃疡性结肠炎小鼠的保护作用及对巨噬细胞极化的调控。方法 BALB/c雄性小鼠按体质量随机分成对照组、模型组及龙胆苦苷低、中、高剂量（25、50、100 mg·kg^–1）组,每组各12只。采用DSS诱导结肠炎小鼠模型;检测并记录给予龙胆苦苷后小鼠体质量、稀便、血便、结肠长度、结肠厚度和小鼠死亡情况;通过酶联免疫吸附法（ELISA）检测小鼠结肠中炎症因子白细胞介素-4（IL-4）、IL-10、IL-6、IL-12水平;流式细胞术分析小鼠结肠中M1型巨噬细胞和M2型巨噬细胞的比例;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测结肠诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、巨噬细胞甘露糖受体CD206蛋白及巨噬细胞极化上游通路JAK2、3STAT3等蛋白的表达。结果 DSS诱导的溃疡性结肠炎模型小鼠出现严重的体质量下降和稀便、血便现象,疾病活动指数（DAI）评分明显升高（P<0.05）。与对照组比较,模型组小鼠结肠发生明显的缩短和肿胀（P<0.05）,IL-4、IL-10、iNOS、CD206、p-JAK2/JAK2和p-STAT3/STAT3表达水平明显上调（P<0.05）,IL-6和IL-12表达水平明显下调（P<0.05）。与模型组比较,龙胆苦苷给药组小鼠DAI评分显著降低（P<0.05）,结肠缩短和肿胀得到明显的改善（P<0.05）,IL-4、IL-10、CD206表达水平显著升高（P<0.05）,IL-6、IL-12、iNOS、p-JAK2/JAK2和p-STAT3/STAT3表达显著降低（P<0.05）。结论 龙胆苦苷能通过下调JAK2/STAT3通路的磷酸化表达,调节结肠巨噬细胞极化趋向于M2型巨噬细胞,从而改善DSS诱导急性结肠炎小鼠的结肠损伤。     

黄芪建中汤对脾胃虚寒型胃溃疡模型大鼠JAK2/STAT3信号通路的影响

目的:探讨黄芪建中汤对脾胃虚寒型胃溃疡(GU)模型大鼠Janus蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导和转录活化因子3(STAT3)信号通路的影响。方法:将60只SPF级Wistar大鼠随机分为正常组和模型组,模型组大鼠采用综合造模法复建脾胃虚寒型GU模型,将模型大鼠按随机数字表法分为模型组、安胃疡组和黄芪建中汤高、中、低剂量组,每组10只。正常组和模型组大鼠给予10 mL·kg-1·d-1蒸馏水灌胃,黄芪建中汤高、中、低剂量组分别给予16,8,4 g·kg-1·d-1黄芪建中汤灌胃,阳性药组给予0.14 g·kg-1·d-1安胃疡灌胃,持续治疗21 d。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测各组大鼠胃组织中白细胞介素-10(IL-10),白细胞介素-17(IL-17)含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测胃组织JAK2,STAT3 mRNA表达水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测胃组织JAK2,STAT3蛋白表达以及磷酸化水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠一般生存状况相对较差,胃组织匀浆液中IL-10含量明显降低,IL-17含量明显升高(P0.05),胃组织JAK2,STAT3蛋白表达水平升高不明显,而JAK2,STAT3 mRNA表达及蛋白磷酸化水平明显升高(P0.05);与模型组比较,治疗组大鼠IL-10含量升高,IL-17含量降低,JAK2,STAT3 mRNA表达及蛋白磷酸化水平均降低,其中尤以黄芪建中汤高剂量组明显(P0.05)。结论:黄芪建中汤具有改善脾胃虚寒型胃溃疡模型大鼠的生存状况的作用,其机制可能与干预JAK2/STAT3通路激活所介导的胃黏膜免疫屏障功能障碍有关。     

锯叶棕提取物通过阻断STAT3通路抑制U266细胞增殖及促凋亡

目的:探讨锯叶棕提取物对U266细胞增殖的影响以及锯叶棕提取物对IL-6介导的STAT3磷酸化效应。方法:①体外培养的U266细胞加入到不同浓度的锯叶棕提取物(0.5或1.0μl/ml)培养24小时,利用流式细胞仪测定位于前G1时期的细胞百分比以检测细胞凋亡;②体外培养的U266细胞加入到锯叶棕提取物(1.0μl/ml)培养24小时,应用Western Blot检测STAT3与P-STAT3表达;③血清饥饿培养24h的U266细胞暴露于IL-6(20ng/mL,30min),另一组用锯叶棕提取物1.0μl/mL预处理3小时的这些细胞,同时应用Western Blot检测STAT3与P-STAT3表达。结果:①锯叶棕提取物诱导U266细胞凋亡具有剂量依赖性(P0.05);②应用锯叶棕提取物预处理的U266细胞,STAT 3磷酸化水平较未经处理的STAT3磷酸化水平下降80.0%;③血清饥饿培养24h的U266细胞暴露于IL-6(20ng/mL,30min),STAT3磷酸化水平增加20倍;用锯叶棕提取物1.0μl/mL预处理3小时的这些细胞,可阻断STAT3磷酸化水平85.0%。结论:锯叶棕提取物可能通过下调IL-6介导的STAT3磷酸化水平,抑制U266细胞增殖并促凋亡。     

制何首乌中大黄素对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化模型中JAK2/STAT3通路的影响

目的:探讨制何首乌中大黄素抗动脉粥样硬化的作用机制并对两面神激酶2(JAK2)/信号转导及转录激活因子3(STAT3)信号通路及相关因子细胞因子信号传导抑制蛋白3(SOCS3)的影响。方法:雄性Apo E基因敲除(Apo E-/-)小鼠80只,随机均分为8组,分别为大黄素高、中、低剂量组、模型组、阳性药组、阴性组、正常组和大黄素中剂量+AG490组(DA组)。除正常组,余7组用高脂饲料饲养,并皮下注射脂多糖,9周后停注。第10周开始小鼠给药,6周后处死。酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定JAK2,p-JAK2,STAT3,p-STAT3及SOCS3的含量,苏木素-伊红(HE)染色检测胸主动脉病理变化,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)法检测肝脏JAK2,STAT3,SOCS3 mRNA的表达。结果:与模型组比较,大黄素高、中剂量组SOCS3含量显著增加,p-JAK2,p-STAT3含量显著减少(P0.01),低剂量组SOCS3含量明显增加(P0.05);JAK2,STAT3无变化;各指标DA组效果不如中剂量组且两组间存在明显差异(P0.01),但STAT3相对表达量中剂量组与DA组有差异(P0.05);各组SOCS3 mRNA表达明显增加,JAK2,STAT3 mRNA表达明显降低(P0.05,P0.01)。HE染色切片镜下观察,大黄素高、中剂量能有效延缓动脉粥样硬化斑块形成,而低剂量的效果不明显。结论:大黄素能明显作用于Apo E-/-小鼠动脉粥样硬化病变的发生发展,该作用机制可能与其抑制JAK2/STAT3信号通路有关。     

桂皮醛经JAK2/STAT3通路抑制VEGF诱导的内皮细胞增殖、迁移及成管

目的:为探讨桂皮醛对糖尿病视网膜病变新生血管的作用及机制,观察了桂皮醛对血管内皮生长因子(VEGF)诱导EA. hy926细胞增殖、迁移、成管以及Janus激酶2/信号传导与转录激活因子3(JAK2/STAT3)通路的影响。方法:将EA.hy926细胞分成空白组、模型组(7μg·L-1VEGF),VEGF+桂皮醛(60,90,120,150μmol·L-1)组,分别采用噻唑蓝(MTT)比色法和划痕实验检测桂皮醛对VEGF诱导EA. hy 926细胞增殖和迁移作用的影响;将EA. hy 926细胞分成空白组,模型组(7μg·L-1VEGF),VEGF+桂皮醛(90,150μmol·L-1)组,采用管腔形成实验检测桂皮醛对VEGF诱导EA. hy 926细胞成管作用的影响;将EA. hy 926细胞分成空白组,模型组(7μg·L-1VEGF),VEGF+AG490 (50μmol·L-1)组,VEGF+桂皮醛(90μmol·L-1)组,VEGF+桂皮醛(150μmol·L-1)组,VEGF+桂皮醛(150μmol·L-1)+AG490(50μmol·L-1)组,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测桂皮醛对VEGF诱导EA. hy 926细胞JAK2/STAT3通路的影响。结果:与空白组比较,模型组能够显著地促进EA. hy 926细胞增殖和迁移(P 0. 01)。与模型组比较,桂皮醛(60,90,120,150μmol·L-1)组能显著抑制VEGF诱导EA. hy 926细胞的增殖和迁移(P 0. 01)。与空白组比较,VEGF对EA. hy 926细胞成管具有一定的促进作用,成管的节点数、交叉点数、网眼数和血管分支数均有增加,但无统计学差异。与模型组比较,桂皮醛(90,150μmol·L-1)组对成管的节点数、交叉点数和网眼数均有明显抑制作用(P 0. 05,P 0. 01)。与空白组比较,模型组p-JAK2,p-STAT3,STAT3蛋白表达明显升高(P 0. 05,P 0. 01)。与模型组比较,桂皮醛(150μmol·L-1)能够显著抑制VEGF引起的p-JAK2,p-STAT3,STAT3蛋白表达升高(P 0. 01),桂皮醛(90μmol·L-1)能够显著抑制VEGF引起的p-STAT3,STAT3蛋白表达升高(P 0. 05,P 0. 01)。结论:桂皮醛对VEGF诱导EA. hy 926细胞的增殖、迁移、成管具有明显的抑制作用,该作用与抑制JAK2/STAT3通路的激活有关。     

Xanthotoxin and umbelliferone attenuate cognitive dysfunction in a streptozotocin‐induced rat model of sporadic Alzheimer's disease: The role of JAK2/STAT3 and Nrf2/HO‐1 signalling pathway modulation

The aim of the present study was to assess the neuroprotective effects of xanthotoxin and umbelliferone in streptozotocin (STZ)‐induced cognitive dysfunction in rats. Animals were injected intracerebroventricularly (ICV) with STZ (3 mg/kg) once to induce a sporadic Alzheimer's disease (SAD)‐like condition. Xanthotoxin or umbelliferone (15 mg/kg, i.p.) were administered 5 hr after ICV‐STZ and daily for 20 consecutive days. Xanthotoxin or umbelliferone prevented cognitive deficits in the Morris water maze and object recognition tests. In parallel, xanthotoxin or umbelliferone reduced hippocampal acetylcholinestrase activity and malondialdehyde level. Moreover, xanthotoxin or umbelliferone increased glutathione content. These coumarins also modulated neuronal cell death by reducing the level of proinflammatory cytokines (tumour necrosis factor‐alpha and interleukin‐6), inhibiting the overexpression of inflammatory markers (nuclear factor κB [NF‐κB] and cyclooxygenase II), and upregulating the expression of NF‐κB inhibitor (IκB‐α). Interestingly, xanthotoxin diminished phosphorylated JAK2 and phosphorylated STAT3 protein expression, while umbelliferone markedly replenished nuclear factor erythroid‐derived 2‐like 2 (Nrf2) and haem oxygenase‐1 (HO‐1) levels. The current study provides evidence for the protective effect of xanthotoxin and umbelliferone in STZ‐induced cognitive dysfunction in rats. This effect may be attributed, at least in part, to inhibiting acetylcholinestrase and attenuating oxidative stress, neuroinflammation and neuronal loss.     

复方藜芍片通过阻断JAK2/STAT3 通路抑制皮层神经炎症改善硝酸甘油致大鼠慢性偏头痛

目的：通过观察中药复方藜芍片（Fufang Lishao Pills,FFLSP）对硝酸甘油致慢性偏头痛模型大鼠皮层促炎因子、疼痛相关蛋白和JAK2/STAT3信号通路的影响,探索复方藜芍片对慢性偏头痛药理作用靶点和机制。方法：将SD雄性大鼠随机分成6组,每组10只：正常对照组（Control）、偏头痛组（Migraine）、复方藜芍片低（FFLSP-L,420 mg·kg-1）、中（FFLSP-M,840 mg·kg-1）、高（FFLSP-H,1680 mg·kg-1）剂量组和西比灵组（FH,1 mg·kg-1）。慢性偏头痛模型制作采用给予大鼠皮下注射硝酸甘油（10 mg·kg-1）每3天1次,共5次;复方藜芍片给予大鼠灌胃治疗,每天1次,共30天。采用Western blot检测皮层iNOS、COX-2、CGRP、c-Fos的蛋白表达和JAK2、STAT3的磷酸化水平;ELISA法检测皮层IL-1β和TNF-α的含量。结果：与正常组比较,模型组大鼠皮层iNOS、COX-2、CGRP、c-Fos蛋白表达（P ＜ 0.01）和IL-1β、TNF-α含量明显增加（P ＜ 0.05）,同时JAK2、STAT3的磷酸化水平明显升高（P ＜ 0.01）;与模型组比较,复方藜芍片治疗后大鼠皮层iNOS、COX-2、CGRP、c-Fos蛋白变化和IL-1β、TNF-α含量明显降低（P ＜ 0.01）,并且明显下调JAK2、STAT3的磷酸化水平（P ＜ 0.01）。结论：复方藜芍片改善慢性偏头痛的药理机制可能是通过阻断大鼠皮层JAK2/STAT3通路抑制神经炎症实现的。     

清肺化痰汤通过抑制JAK2/STAT3通路上调CFTR的表达治疗COPD

目的:探索清肺化痰汤对慢性阻塞性肺疾病(COPD)的治疗作用及其机制研究。方法:应用烟雾吸入联合脂多糖(LPS)灌肺复合素的方法,建立COPD大鼠模型,造模成功后将大鼠随机分为6组,分别为正常组,COPD模型组,清肺化痰汤低、中、高剂量组和氨溴索组。造模28 d后开始给药,清肺化痰汤低、中、高剂量7.5,15,30 g·kg~(-1),氨溴索35 mg·kg~(-1),连续给药14 d。免疫组化和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肺组织囊性纤维化跨膜转导调节因子(CFTR)蛋白和mRNA的表达。应用LPS诱导NCI-H292细胞建立黏液高分泌模型,实验分为8组,分别为空白组,LPS组,LPS+10%胎牛血清,LPS+生理血清,LPS+5%含药血清,LPS+10%含药血清,LPS+20%含药血清,LPS+AG490组。免疫荧光、蛋白免疫印迹法(Western blot)和Real-time PCR观察LPS刺激后的NCI-H292细胞中CFTR蛋白和mRNA的表达,Western blot检测LPS刺激后的NCI-H292细胞中Janus激酶2/信号转导与转录激活因子3(JAK2/STAT3)信号通路表达。结果:正常组大鼠肺组织管腔周围有大量棕褐色颗粒,COPD表达升高,与正常组比较,模型组大鼠肺组织管腔周围的棕褐色颗粒极少,COPD表达较低。与正常组比较,COPD模型组大鼠肺组织中CFTR mRNA和蛋白表达明显降低(P0.05);与模型组比较,清肺化痰汤低、中、高剂量组明显升高大鼠肺组织CFTR mRNA和蛋白表达水平(P0.05)。与空白组比较,LPS组NCI-H292细胞CFTR mRNA和蛋白表达显著降低(P0.01),p-JAK2,p-STAT3蛋白表达明显升高(P0.05);与模型组比较,清肺化痰汤5%,10%,20%含药血清组明显升高CFTR mRNA和蛋白表达,明显降低p-JAK2,p-STAT3蛋白表达(P0.05,P0.01)。结论:清肺化痰汤通过抑制JAK2/STAT3通路来上调CFTR治疗COPD。