葛根素、齐墩果酸及其配伍对T2DM大鼠氧化应激和炎症反应的影响

目的:观察葛根素、齐墩果酸及其配伍对2型糖尿病大鼠血糖、血脂、血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、糖基化终末产物(AGEs)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)及胰腺病理组织学的影响.方法:以高糖、高脂饮食联合链脲佐菌素(30 mg·kg-1)ip法建立2型糖尿病大鼠模型,随机分为模型(M)组、二甲双胍(D)组(100 mg·kg-1·d-1)、葛根素(P)组(30 mg·kg-1·d-1)、齐墩果酸(OA)组(10 mg·kg-1·d-1)、葛根素+齐墩果酸(POA)组(40 mg·kg-1·d-1),同期设正常对照组(K).各治疗组分别ig给予相应药物治疗.治疗前及治疗2,4,6周分别测定各组大鼠空腹血糖(FBG)及餐后2h血糖(P2hPG),并于给药6周后,测定大鼠总胆固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),hs-CRP,血清SOD,MDA,AGEs水平,光镜下观察胰腺病理组织学变化.结果:M组大鼠FBG,P2hPG,CHOL,TG,LDL-C,hs-CRP,MDA,AGEs较K组升高,HDL-C和血清SOD水平明显下降,有统计学差异,对胰腺胰岛细胞有一定损伤.各治疗组大鼠FBG,P2hPG,CHOL,TG,LDL-C,hs-CRP,MDA,AGEs较M组降低,HDL-C和血清SOD水平增加,对胰腺胰岛细胞损伤有不同程度改善.POA组LDL-C水平较P组、OA组降低明显(P＜0.05),对胰腺胰岛细胞损伤明显改善.结论:葛根素、齐墩果酸及其配伍可改善实验性2型糖尿病大鼠的糖、脂代谢,其作用机制可能与抗氧化、抑制炎症反应有关.其中葛根素配伍齐墩果酸在降低LDL-C水平、改善胰岛细胞结构方面优于单纯葛根素、齐墩果酸.     

丹皮酚联合三七总皂苷对大鼠糖尿病心肌纤维化的影响

目的:探讨丹皮酚联合三七总皂苷对大鼠糖尿病心肌纤维化的影响,探讨其作用机制。方法:采用高脂高糖饲喂联合腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病心肌病模型。按照二因素五水平均匀设计法,以心肌组织马松(Masson)染色测定的心肌胶原容积分数为观测指标,采用多元回归分析确定丹皮酚联合三七总皂苷对糖尿病心肌病大鼠最佳组合剂量。运用2×2析因设计试验分析两者之间有无交互作用,设空白组,模型组,丹皮酚(80 mg·kg-1)组,三七总皂苷(100 mg·kg-1)组,丹皮酚(80 mg·kg-1)+三七总皂苷(100 mg·kg-1)组,二甲双胍(157.5 mg·kg-1)组。检测体质量,心重指数(HWI),血糖(FBG),乳酸脱氢酶(LDH),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)的含量,心肌组织中的丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD)活性变化,观察Masson染色心肌胶原分布。结果:发现丹皮酚(80 mg·kg-1)和三七总皂苷(100 mg·kg-1)联合抗糖尿病心肌病作用最佳并有协同作用。与正常组比较,模型组HWI,FBG,LDH,AST,CK-MB,MDA的含量升高,SOD活性降低,体质量显著下降(P0.05),Masson染色显示心肌胶原纤维明显增高(P0.05)。与模型组比较,丹皮酚组,三七总皂苷组,联合用药组的HWI,FBG,LDH,AST,CK-MB,MDA的含量下降,SOD活性升高,体质量显著增高(P0.05),Masson染色显示心肌胶原纤维明显减少(P0.05),而联合用药组与单味用药组比较有显著差异(P0.05)。结论:丹皮酚联合三七总皂苷具有协同降低心肌纤维化作用,可能与抗氧化应激作用有关。     

三七总皂苷对糖尿病大鼠肾脏结缔组织生长因子表达的影响

目的观察三七总皂苷对糖尿病大鼠肾脏CTGFmRNA表达的影响及其对肾脏的保护作用,以探讨三七总皂苷防治DN的可能作用机制.方法用STZ诱导大鼠DM模型,并将成模大鼠随机分为糖尿病模型组(DM组),三七总皂苷组(PNS组)和氨基胍组(AG组),同时建立正常对照组(NC组).PNS组给予三七总皂苷100mg·kg-1·d-1灌胃,AG组给予氨基胍100mg·kg-1·d-1灌胃,DM组及NC组给予生理盐水1mL·100g-1·d-1灌胃,共8周.观察各组大鼠的血糖,24h尿蛋白定量,肾脏肥大指数及肾小球体积的变化,肾脏CTGFmRNA表达的变化.结果①SD大鼠用STZ造模后,血糖明显升高(P＜0.01),而PNS组、AG组及DM组比较血糖无显著差异(P＞0.05).②DN组24h尿蛋白定量与NC组相比有明显增高(P＜0.01),PNS组、AG组与DN组比较,24h尿蛋白定量减少(P＜0.01),PNS组与AG组比较差异不明显(P＞0.05).③DM组与NC组比较,肾重/体重明显增加(P＜0.01),PNS组、AG组与DN比较,肾重/体重显著降低(P＜0.01),PNS组与AG组比较差异不明显(P＞0.05).DM组大鼠的MGA与MGV均较NC组增大(P＜0.05);PNS组、AG组的MGA、MGV则较DM组小(P＜0.05),PNS组与AG组比较差异不明显(P＞0.05).④与NC组比较,DM组大鼠肾脏CTGFmRNA表达明显增高(P＜0.01),PNS组、AG组大鼠肾脏CTGFmRNA表达较DM组降低(P＜0.05),PNS组与AG组比较差异不明显(P＞0.05).结论三七总皂苷具有降低糖尿病大鼠尿蛋白,减轻糖尿病大鼠肾脏肥大,下调肾脏结缔组织生长因子表达的作用,与西药氨基胍相比无明显差异.     

三七总黄酮对高血脂大鼠血脂的影响

目的:研究三七总黄酮的降血脂作用及机制。方法:Wistar大鼠建立高血脂动物模型,随机分为正常组,高血脂模型组,三七总黄酮高、中、低剂量组(200,100,50 mg·kg-1),辛伐他丁组(8 mg·kg-1),连续ig给药6周,生化法检测大鼠血液和肝脏组织中总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的含量。采用脂肪乳诱导肝L-02细胞脂肪变性,分为正常组、模型组、三七总黄酮低、中、高剂量组(100,300,500μmol·L-1)和辛伐他汀(100μmol·L-1)组,共培养24 h,生化法测定TG和TC含量,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测二脂酰甘油酰基转移酶(DGAT),羟甲基戊二酸单酰辅酶(HMG-Co A),胆固醇7α-羟化酶(CYP7A),肝脏甘油三脂脂肪酶(HTGL)含量。结果:大鼠实验中,与正常组比较,模型组大鼠的血脂升高(P0.01);与高血脂模型组比较,三七总黄酮高剂量能抑制大鼠肝脏指数(P0.05),高、中剂量能明显降低血清TC,TG,LDL-C含量(P0.05,P0.01),提高HDL-C含量(P0.05,P0.01),并且能够抑制大鼠肝组织TC,TG的含量(P0.05)。细胞实验中,三七总黄酮中、高剂量可明显降低脂肪化细胞TC,TG含量(P0.05,P0.01);降低DGAT,HMG-Co A活性(P0.01);明显升高CYP7A,HTGL活性(P0.05,P0.01)。结论:三七总黄酮具有较好的降血脂作用,可能与其降低DGAT,HMG-Co A活性,升高CYP7A,HTGL活性有关。     

川木通对大鼠利尿作用及其物质基础研究

采用LC-MS与利尿活性评价相结合的方法,寻找川木通利尿活性部位并确定活性部位的主要化学成分。口服给予生理盐水负荷正常大鼠不同剂量的川木通75%乙醇提取物及其不同极性溶剂的萃取物,记录6 h尿量,测定尿液的p H及电解质Na+,K+,Cl-的含量,并采用UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS对活性部位化学成分进行分离分析。结果与对照组相比,川木通75%乙醇提取物57. 74,28. 8 mg·kg-1剂量组大鼠尿量分别增加44%(P0. 01),34%(P0. 05),Na+排泄量分别增加52%(P0. 01),45%(P0. 05),Cl-排泄量分别增加101%(P0. 01),85%(P0. 05);石油醚萃取物70. 98 mg·kg-1组大鼠尿量及Na+,Cl-排泄量分别增加50%(P0. 01),58%(P0. 05),65%(P0. 05);正丁醇萃取物194. 18 mg·kg-1组大鼠尿量及Na+,Cl-排泄量分别增加42%(P0. 01),41%(P0. 05),97%(P0. 01);其余萃取部位利尿活性不明显,各组K+排泄量均没有统计学差异。经LC-MS分析,从石油醚萃取物中鉴定了6个化合物,包括2个甾醇、1个色原酮和3个脂肪酸;从正丁醇萃取物中鉴定了14个化合物,包括6个三萜皂苷、6个木脂素苷、1个甾醇苷和1个酚苷。结果表明川木通乙醇提取物具有显著的利尿作用,其利尿活性成分为甾醇、三萜皂苷和木脂素苷类成分。     

人参皂苷Compound K对动脉粥样硬化大鼠氧化应激、炎症因子和血管活性物质的影响

目的观察人参皂苷Compound K(CK)对动脉粥样硬化大鼠氧化应激、炎症因子和血管活性物质的影响。方法将50只大鼠随机选取10只为正常对照组,其余40只大鼠予高脂饲料+维生素D3灌胃方法制备动脉粥样硬化大鼠模型。造模后将大鼠随机分为模型组及人参皂苷CK低、中、高剂量组,每组10只。人参皂苷CK低、中、高剂量组大鼠分别予2、4、8 mg/kg的人参皂苷CK灌胃,正常对照组、模型组予等容积0. 9%氯化钠注射液灌胃,每日1次,连续灌胃6周。采集各组大鼠血清,分别检测血脂指标[总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),计算动脉粥样硬化指数]、氧化应激指标[超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)]、炎症因子[白细胞介素10(IL-10)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-6、IL-1β]、血管活性物质[内皮素1(ET-1)、一氧化氮(NO)]水平。结果与正常对照组比较,模型组大鼠TC、TG、LDL-C及动脉粥样硬化指数均升高(P 0. 05),HDL-C降低(P 0. 05);与模型组比较,人参皂苷CK低、中、高剂量组TC、TG、LDL-C及动脉粥样硬化指数均降低(P 0. 05),HDL-C均升高(P 0. 05);与人参皂苷CK低剂量组比较,人参皂苷CK中、高剂量组TC、TG、LDL-C及动脉粥样硬化指数均降低(P 0. 05),HDL-C升高(P 0. 05);与人参皂苷CK中剂量组比较,人参皂苷CK高剂量组TC、TG、LDL-C及动脉粥样硬化指数均降低(P0. 05),HDL-C升高(P 0. 05)。与正常对照组比较,模型组大鼠MDA升高(P 0. 05),SOD、CAT、GSHPx均降低(P 0. 05);与模型组比较,人参皂苷CK低、中、高剂量组MDA均降低(P 0. 05),SOD、CAT、GSH-Px均升高(P 0. 05);与人参皂苷CK低剂量组比较,人参皂苷CK中、高剂量组MDA均降低(P 0. 05),SOD、CAT、GSH-Px均升高(P 0. 05);与人参皂苷CK中剂量组比较,人参皂苷CK高剂量组MDA降低(P0. 05),SOD、CAT、GSH-Px升高(P 0. 05)。与正常对照组比较,模型组大鼠TNF-α、IL-6、IL-1β均升高(P 0. 05),IL-10降低(P 0. 05);与模型组比较,人参皂苷CK低、中、高剂量组大鼠TNF-α、IL-6、IL-1β均降低(P 0. 05),IL-10均升高(P 0. 05);与人参皂苷CK低剂量组比较,人参皂苷CK中、高剂量组大鼠TNF-α、IL-6、IL-1β均降低(P 0. 05),IL-10均升高(P 0. 05);与人参皂苷CK中剂量组比较,人参皂苷CK高剂量组大鼠TNF-α、IL-6、IL-1β降低(P 0. 05),IL-10升高(P 0. 05)。与正常对照组比较,模型组大鼠NO降低(P 0. 05),ET-1升高(P 0. 05);与模型组比较,人参皂苷CK低、中、高剂量组大鼠NO升高(P 0. 05),ET-1降低(P 0. 05);与人参皂苷CK低剂量组比较,人参皂苷CK中、高剂量组大鼠NO升高(P 0. 05),ET-1降低(P 0. 05);与人参皂苷CK中剂量组比较,人参皂苷CK高剂量组大鼠NO升高(P 0. 05),ET-1降低(P 0. 05)。结论人参皂苷CK能够改善动脉粥样硬化大鼠血脂异常、氧化应激和炎性反应,调控血管活性物质释放,具有抗动脉粥样硬化作用,且给药剂量越大,药效越好。     

玉米须总皂苷对肥胖大鼠脂肪组织的调节作用研究

目的观察玉米须总皂苷对高脂饮食诱导的肥胖大鼠脂肪组织中G0/G1期开关基因(G0S2)和脂肪甘油三酯脂酶(ATGL)表达的影响。方法将40只适应性喂养7 d后雄性清洁级SD大鼠随机分为正常组、模型组、玉米须总皂苷低剂量和玉米须总皂苷高剂量组,每组10只。除正常组外,其余3组均给予高脂高糖饮食12周建立肥胖大鼠模型。造模成功后均给予普通饲料喂养,同时玉米须总皂苷低剂量组和高剂量组分别给予玉米须总皂苷100 mg/(kg·d)和200 mg/(kg·d)灌胃,正常组和模型组给予生理盐水1m L/(kg·d)灌胃,均1次/d,连续12周。12周后腹主动脉取血,检测各组大鼠空腹血糖(FPG)和血脂指标[三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]、血清ATGL以及空腹胰岛素(FINS)水平,计算大鼠体脂比,HE染色观察脂肪组织病理学变化,RT-PCR法和Western Blot法检测脂肪细胞中G0S2和ATGL mRNA及蛋白表达水平。结果模型组大鼠体质量、内脏脂肪湿质量、体脂比及FPG、TG、TC、LDL-C、FINS水平均明显高于正常组(P均0. 05),而玉米须总皂苷低剂量组和玉米须总皂苷高剂量组均明显低于模型组(P均0. 05);模型组大鼠HDL-C、ATGL水平均明显低于正常组(P均0. 05),而玉米须总皂苷低剂量组和玉米须总皂苷高剂量组均明显高于模型组(P均0. 05)。HE染色显示玉米须总皂苷低剂量组和玉米须总皂苷高剂量组脂肪细胞体积明显减小,数量明显增多。模型组大鼠脂肪组织中G0S2mRNA和G0S2蛋白表达水平均明显高于正常组(P均0. 05),ATGL mRNA和ATGL蛋白表达水平均明显低于正常组(P均0. 05);玉米须总皂苷低剂量组和玉米须总皂苷高剂量组G0S2 mRNA和G0S2蛋白表达水平均明显低于模型组(P均0. 05),而ATGL mRNA和ATGL蛋白表达水平均明显高于模型组(P均0. 05),玉米须总皂苷低剂量组和玉米须总皂苷高剂量组组间比较差异均无统计学意义(P均 0. 05)。结论玉米须总皂苷能够明显下调脂肪组织中G0S2 mRNA和蛋白表达、上调ATGL mRNA和蛋白表达,进而促进肥胖大鼠脂肪分解,降低大鼠体质量。     

葛根黄连有效成分降糖作用对比及其血清化学研究

目的:对比葛根有效成分异黄酮和黄连有效成分总生物碱单用及配比后降糖作用及其血清化学成分差异。方法:灌胃给以葛根异黄酮800mg/kg、黄连总生物碱60mg/kg和葛根异黄酮黄连总生物碱8:3配比860mg/kg,比较灌胃葛根异黄酮组、黄连总生物碱组和葛根异黄酮黄连总生物碱配比组降糖作用;采用HPLC梯度洗脱方法对比葛根异黄酮和黄连总生物碱配比与含药血清化学成分的差异。结果:葛根异黄酮与黄连总生物碱单用及合用均能明显降低四氧嘧啶致高血糖大鼠血糖,改善血清甘油三酯(TG)和胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),葛根异黄酮黄连总生物碱配比组优于葛根异黄酮组和黄连总生物碱组;葛根异黄酮黄连总生物碱配比组血清中有12个成分来源于原配比组,包括有葛根素、大豆苷、黄连碱、药根碱、巴马汀和小檗碱,有22个成分来源于代谢产物,其中6个代谢产物由葛根异黄酮代谢,5个代谢产物由黄连生物碱代谢,11个代谢产物来源于葛根异黄酮和黄连总生物碱的相互作用,同时2个原配比组中成分未在血清中检出。结论:葛根异黄酮与黄连总生物碱合用降糖效果优于其有效成分单用,原因可能因为主要有效成分入血后相互作用引起含量变化、新生有效代谢中间体造成。     

复方丹参方与穿山龙总皂苷配伍对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的:观察复方丹参方所含成分丹参提取物、三七总皂苷、冰片与穿山龙总皂苷配伍对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用.方法:SD大鼠70只,随机分为10组:假手术组、模型组、丹参提取物300 mg· kg-1、三七总皂苷100 mg·kg-1、穿山龙总皂苷100 mg·kg-1、配伍(丹参提取物+三七总皂苷+冰片+穿山龙总皂苷)3个剂量组(300 +100 +10 +50),(300+ 100+ 10+ 100),(300+100+10+200) mg·kg-1、复方丹参片组300 mg·kg-1、阳性药组(通心络胶囊)300 mg·kg-1,各组ig给药,连续7d,末次给药1h后,结扎冠状动脉左前降支复制心肌缺血再灌注损伤模型,试剂盒测定血清超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性,TTC染色法测定心肌梗死面积,TUNEL染色法检测细胞凋亡.结果:配伍(300+ 100+ 10+ 100) mg·kg-1与模型组比较,可显著增强SOD的活性(P＜0.01),降低大鼠心肌中LDH和CK-MB的活性(P＜0.01);与各成分和原方相比,心肌梗死范围为20.78％,明显低于丹参提取物34.04％ (P＜0.05)、三七总皂苷34.62％ (P ＜0.05)、穿山龙总皂苷36.19％ (P ＜0.05)、复方丹参片26.47％;细胞凋亡指数为16.53％,明显低于丹参提取物25.08％(P＜0.05)、三七总皂苷22.12％ (P ＜0.05)、穿山龙总皂苷24.45％ (P ＜0.05)、复方丹参片18.14％.结论:复方丹参方与穿山龙总皂苷配伍后可对心肌缺血再灌注损伤起到保护作用,且效果优于各组分及复方丹参方.此种配伍的方式可以作为研究中药新复方的一种方法.     

复方地归胶囊对糖尿病大鼠糖脂代谢紊乱的影响

目的探讨复方地归胶囊对糖尿病大鼠糖脂水平紊乱的影响。方法大鼠腹腔注射链佐菌素(50mg·kg-1)造成糖尿病模型,复方地归胶囊高、中、低剂量组分别以2.4,1.2,0.6g·kg-1d-1灌胃,连续90d,测定全血血糖、糖化血红蛋白以及血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)和一氧化氮(NO)、总抗氧化能力(T-AOC),并测定胰岛素和进行胰腺组织学观察。结果给药后2h复方地归胶囊可降低糖尿病大鼠血糖水平,给药90d后能降低血红蛋白糖化率,对TG、LDL-C、NO水平有明显的降低作用,对T-AOC有显著的升高作用;并促进胰岛细胞修复增生,对胰岛素的分泌也有一定促进作用。结论复方地归胶囊有降低糖尿病大鼠血糖、调节血脂紊乱、保护和修复胰岛细胞的作用。     

人参-三七-川芎提取物延缓高糖诱导的小鼠血管衰老的机制探讨

目的:从单磷酸腺苷活化蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(AMPK/mTOR)通路探讨人参-三七-川芎提取物对高糖诱导的小鼠血管衰老的保护作用。方法:130只雄性C57BL/6小鼠先随机分为空白组和高糖组,高糖组腹腔注射链脲佐菌素(STZ),并用高脂饮食连续性喂养7个月后再次随机分组,分为模型组、人参-三七-川芎提取物低剂量组(0.819 g·kg~(-1))、人参-三七-川芎提取物高剂量组(1.638 g·kg~(-1))及二甲双胍组(150 mg·kg~(-1)),灌胃给药,每天1次,连续9周,期间检测小鼠体质量和血糖变化。给药结束后,苏木素-伊红(HE)染色检测小鼠胸主动脉形态,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠胸主动脉周期蛋白依赖激酶抑制因子2A(p16),周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(p21),AMPK,p-AMPK,mTOR,pmTOR,肝激酶B1(LKB1),p-LKB1,核糖体蛋白s6激酶(p70s6k),p-p70s6k蛋白表达情况。结果:与空白组相比,模型组小鼠体质量显著降低、血糖显著升高(P0.01),在药物干预9周后,各给药组小鼠体质量无明显差异,血糖值较模型组明显下降(P0.05,P0.01)。与空白组相比,模型组内膜损伤严重且有增生,中膜明显增生且排列不整齐,给药各组内膜损伤不明显,中膜少量增生,p16,p21,mTOR,p-mTOR,p70s6k,p-p70s6k蛋白表达明显升高(P0.05,P0.01),AMPK,p-AMPK,LKB1,p-LKB1蛋白表达明显下降(P0.05,P0.01)。药物干预后,各给药组p16,p21,mTOR,p-mTOR,p70s6k,p-p70s6k蛋白表达明显下降(P0.05,P0.01),AMPK,p-AMPK,LKB1,p-LKB1蛋白表达明显升高(P0.05,P0.01)。结论:高糖能够诱导小鼠主动脉衰老,人参-三七-川芎提取物可能通过AMPK/mTOR通路改善由高糖诱导的小鼠主动脉衰老。     

黄连与人参配伍后生物碱的含量变化

目的:探讨黄连与人参不同配伍剂量对水煎液中盐酸小檗碱、盐酸药根碱含量的影响。方法:人参黄连分别按1∶0,2∶1,1.5∶1,0.5∶1比例配伍,煎煮制备水煎液,采用HPLC测定不同配伍剂量水煎液中黄连生物碱的含量。结果:人参-黄连不同配伍样品中盐酸小檗碱质量分数分别为36.68,39.41,44.33 mg·g-1,盐酸药根碱分别为8.607,8.349,10.790 mg·g-1,二者含量随人参用量的减少而增加。结论:黄连-人参配伍后不利于盐酸小檗碱和盐酸药根碱的溶出,按0.5∶1配伍时黄连中2种生物碱含量均最高。     

柴胡总皂苷对小鼠抑郁样行为及学习记忆障碍的改善作用

目的:研究柴胡总皂苷连续给药抗抑郁作用起效时间及作用维持时间,以及柴胡总皂苷对皮质酮损伤引起的小鼠抑郁样行为及认知功能障碍的影响。方法:ICR雄性小鼠随机分为正常组(蒸馏水)、柴胡总皂苷低剂量组(12.5 mg·kg~(-1)),柴胡总皂苷中剂量组(25 mg·kg~(-1)),柴胡总皂苷高剂量组(50 mg·kg~(-1))。每周称体重,给药13 d后,进行空场实验。给药14 d后1 h,3 d,6 d观察柴胡总皂苷对强迫游泳实验不动时间的影响。C57BL/6J雄性小鼠随机分为正常组,皮质酮组(CORT组),西酞普兰组(10 mg·kg~(-1))和柴胡总皂苷(25 mg·kg~(-1))组。CORT组、西酞普兰组和柴胡总皂苷组饮用皮质酮。造模3周后,ig给予柴胡总皂苷,给药时间为2周,至第5周结束,西酞普兰ig,给药时间同柴胡总皂苷。给药结束后1 d,进行强迫游泳实验和水迷宫实验。行为学实验结束后,各组各取3只小鼠,断头,取海马,蛋白质免疫印迹(Western blot)进行脑源性神经营养因子(BDNF)和酪氨酸激酶B(Trk B)蛋白表达检测。结果:柴胡总皂苷连续给药14 d,与正常组比较,对体重和空场实验运动路程及速度无影响。停药后1 h和3 d,柴胡总皂苷各剂量组均可缩短小鼠强迫游泳不动时间(P0.01,P0.05);停药后6 d,柴胡总皂苷25,50 mg·kg~(-1)仍可缩短小鼠强迫游泳实验不动时间(P0.05)。柴胡总皂苷25 mg·kg~(-1)连续给药14 d,可缩短皮质酮损伤小鼠强迫游泳不动时间(P0.01),缩短水迷宫实验寻台潜伏期(P0.05),提高穿台次数(P0.05),并增加皮质酮损伤小鼠海马BDNF和Trk B蛋白表达(P0.01)。结论:柴胡总皂苷连续给药产生较快而持久的抗抑郁作用,逆转皮质酮损伤引起的小鼠抑郁样行为及学习记忆障碍。其作用机制可能与增加小鼠海马BDNF及Trk B表达有关。     

三七总皂苷、红景天苷、黄芪有效组分对心肌梗死大鼠模型骨髓间充质干细胞动员作用研究

目的:探讨三七总皂苷、红景天苷、黄芪有效组分对心肌梗死大鼠模型骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)动员作用。方法:选取SPF级SD大鼠,参考Olivette方法建立急性心肌梗死模型,造模成功大鼠随机分为活血组、益气组、益气活血组、模型组和正常组,各组再随机按1,3,7,14,28 d时间点再进行分组。活血组8 mg·kg-1血塞通软胶囊、益气组5 mg·kg-1黄芪颗粒、益气活血组7 mg·kg-1诺迪康胶囊,模型组予生理盐水ig,正常组不给药,正常组和模型组以等量生理盐水ig,1次/d,共28 d。流式细胞仪检测不同时间点血液和骨髓中CD54,CD106,CD105,CD117阳性细胞百分数,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测不同时间点血液和骨髓中干细胞因子(SCF)变化。结果:模型组外周血和骨髓中CD105,CD117,SCF从1 d开始升高,14 d到高峰,其后外周血和骨髓中CD105,CD117,SCF含量降低;活血组、益气活血组、益气组外周血和骨髓中CD105,CD117,SCF含量上升优于模型组(P0.05)。活血组CD105,CD117,SCF上升优于益气活血组、益气组。模型组外周血和骨髓中CD54,CD106在1 d到高峰,其后逐渐降低,活血组外周血中的CD54,CD106降低明显较模型组相比(P0.05)。益气组与模型组相比变化不明显,但活血化瘀方药降低CD54,CD106最明显。结论:三七总皂苷、红景天疳、黄芪有效组分均有动员骨髓间充质干细胞作用,但活血化瘀方药动员效果明显。     

人参三七川芎提取物对衰老大鼠免疫器官及行为学的影响

目的:观察人参三七川芎提取物对老龄大鼠免疫器官功能及行为学的影响。方法:选取100只SD大鼠,饲养至18~19月龄,建立自然衰老大鼠模型。按体重水平分层后将成模大鼠随机分为5组,分别为衰老模型组、人参三七川芎中药低、中、高剂量组(2 305.64,1 152.82,576.41 mg·kg-1)和白藜芦醇组(50 mg·kg-1),另设2月龄SD大鼠做为青年对照组。干预3个月后,进行旷场实验,记录大鼠跨越方格总数和总行径距离,检测大鼠血清活性氧族(reactive oxygen species,ROS)含量,胸腺系数和脾脏系数。结果:与青年组大鼠比较,自然衰老组大鼠跨格总数减少(P0.01),总行径距离减少(P0.05),血清ROS含量增高(P0.01),胸腺系数和脾脏指数下降(均P0.01)。与衰老模型组比较,中药各组和白藜芦醇组大鼠的跨格次数和总行径距离均有增加(P0.05);血清活性氧族(ROS)含量降低(P0.05);中药高剂量组和白藜芦醇组可以增高大鼠的胸腺系数和脾脏系数(均P0.01),中药中剂量组可以增高大鼠的胸腺系数(P0.05)。结论:人参三七川芎提取物可以改善自然衰老大鼠精神迟缓状态,增强其空间探索性,同时能够提高免疫器官功能和降低血清活性氧含量。     

阴离子交换树脂纯化三七发酵产物中总皂苷的工艺优选

目的:为了得到高纯度的三七总皂苷,利用阴离子交换树脂对三七发酵产物进行纯化,优选纯化工艺参数。方法:选用三七发酵产物为研究对象,以总皂苷含量或纯度为指标,采用单因素试验考察树脂型号、径高比、上样液质量浓度、上样流速、吸附时间、洗脱剂种类、洗脱液用量、洗脱流速、上样液p H等条件对洗脱液中总皂苷含量的影响。结果:选取D301型阴离子树脂,径高比1∶8.3,上样液质量浓度0.25 g·m L~(-1),树脂干重-生药量(1∶0.64),上样流速2 BV·h~(-1),上样液p H 9,吸附时间15 min,洗脱流速2 BV·h~(-1),加水5 BV洗脱杂质,加60%乙醇4 BV对目标成分进行洗脱。三七发酵产物中总皂苷纯度90%。结论:利用阴离子交换树脂纯化三七发酵产物中总皂苷的方法简便可行,纯化效果好,能满足于工业生产的要求,为该有效部位的新药及相关产品开发提供参考。     

黄连总生物碱与小檗碱对嗜水气单胞菌细胞膜损伤机制的研究

为探索黄连总生物碱及小檗碱对嗜水气单胞菌的抑菌活性及作用机制,测定了黄连总生物碱和小檗碱对嗜水气单胞菌的最小抑菌浓度、膜通透性、膜流动性、膜蛋白构象及毒力因子的影响.结果显示,黄连总生物碱和小檗碱对嗜水气单胞菌均有抑菌活性,其最小抑菌浓度分别为62.5,125 mg·L^-1.黄连总生物碱和小檗碱能增加膜脂流动性,改变膜蛋白构象,并使菌体膜通透性分别增加24.52%,19.66%.此外,黄连总生物碱和小檗碱显著性地抑制菌体外毒素的溶血活性及aerA和hlyA mRNA的表达(P <0.05,P <0.01),同时降低嗜水气单胞菌内毒素的分泌量和LpxC mRNA 的表达(P <0.05,P <0.01).结果表明,黄连总生物碱和小檗碱对嗜水气单胞菌的抑菌作用可能与细胞膜损伤有关,通过改变膜脂流动性和膜蛋白构象使菌体膜通透性增加从而抑制了细菌生长;同时降低了细菌的毒力因子的分泌,使得菌体的致病性降低.     

威灵仙提取物对糖尿病肾病大鼠的作用

目的:研究威灵仙提取物对糖尿病肾病大鼠模型的治疗作用。方法:SD大鼠,随机分为正常组,模型组,卡托普利组(10 mg·kg-1),威灵仙提取物高、低剂量组(500,250 mg·kg-1),除正常组外,其余各组大鼠ip链脲佐菌素(STZ)制备成糖尿病大鼠模型,ig给药,1次/d,连续给药12周,观察威灵仙提取物对大鼠肾功能尿素氮(BUN),血清肌酸酐(SCr),肌酸酐清除率(CCr),尿白蛋白,尿白蛋白排泄率(UAER),肾肥大指数指标,空腹血糖(FBG),血脂甘油三酯(TG),总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和氧化指标白细胞介素-6(IL-6),丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的影响,以及肾组织病理形态学的变化。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清BUN,SCr,CCr,IL-6,尿白蛋白,UAER,肾肥大指数和FBG的水平明显升高,TG,TC和LDL-C的水平明显升高,HDL-C的水平明显降低,肾脏MDA含量明显升高,SOD和GSH-Px的水平明显降低,均具有明显统计学差异(P0.05,P0.01),病理组织显示肾小球基膜和肾小管增厚和膨胀;与模型组比较,威灵仙提取物明显降低糖尿病模型大鼠血清BUN,SCr,CCr,IL-6,尿白蛋白,UAER,肾肥大指数和FBG的水平(P0.05),降低TG,TC和LDL-C的水平(P0.05),升高HDL-C的水平(P0.05),降低肾脏MDA的含量(P0.05),升高SOD和GSH-Px的水平(P0.05),同时显著减轻了糖尿病大鼠肾小球基膜和肾小管增厚和膨胀的程度。结论:威灵仙提取物对糖尿病肾病引起的肾损伤有显著的抑制作用。     

基于"异类相制"的雷公藤复方对小鼠精母细胞凋亡及凋亡蛋白表达的影响

目的:探讨雷公藤复方单体成分对小鼠精母细胞凋亡及凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),半胱天冬蛋白酶-3(Caspase-3)表达的影响。方法:建立体外培养小鼠精母细胞体系,实验分为空白组,雷公藤甲素3.5 mg·L~(-1)组,雷公藤甲素3.5 mg·L~(-1)+梓醇3 mg·L~(-1)组,雷公藤甲素3.5 mg·L~(-1)+三七总皂苷12 mg·L~(-1)组,雷公藤甲素3.5 mg·L~(-1)+草酸铵1.5 mg·L~(-1)组,雷公藤甲素3.5 mg·L~(-1)+青藤碱0.75 mg·L~(-1)组。流式细胞仪测定药物作用24 h后精母细胞凋亡率,Western blot测定精母细胞Bax,Bcl-2,Caspase-3蛋白表达情况。结果:梓醇、三七总皂苷可减轻雷公藤甲素对小鼠精母细胞凋亡的诱导作用,与雷公藤甲素比较有明显差异(P0.05),草酸铵和青藤碱组与雷公藤甲素组相比无明显差异;雷公藤甲素促使Bax,Caspase-3蛋白表达上调,Bcl-2蛋白表达下调,与正常比较差异显著(P0.01),雷公藤甲素配伍梓醇、三七总皂苷后Bax,Caspase-3蛋白表达下调,Bcl-2蛋白表达上调,与雷公藤甲素比较较有明显差异(P0.05)。而配伍草酸铵及青藤碱则差异不明显。结论:雷公藤甲素可引起精母细胞凋亡,并通过Bax/Bcl-2,Caspase-3系统启动精母细胞凋亡。而雷公藤复方组成中其他药物组分可不同程度抑制雷公藤甲素引起的精母细胞凋亡,减轻其雄性生殖毒性。     

虎杖不同配伍对糖尿病肾病大鼠糖、脂代谢及血液流变学指标的影响

目的: 观察虎杖分别与黄芪、益母草配伍对糖尿病肾病模型大鼠糖、脂代谢及血液流变学指标的影响,初步探讨其对糖尿病肾病早期干预作用机制。方法: 运用链脲佐菌素诱发SD大鼠糖尿病肾病(DN)模型。成模大鼠随机分为模型组、开博通组、虎杖-益母草配伍组、虎杖-黄芪配伍组。空白组10只,模型组15只,其余3组每组13只。虎杖与益母草配伍、虎杖与黄芪配伍合煎液灌服剂量为3 g·kg^-1,开博通组灌服博通剂量为6.25×10^-3g·kg^-1,模型组和空白组灌服同体积10 mL·kg^-1的生理盐水,每天给药1次,连续给药8周。以血糖、甘油三酯(TG)、胆固醇(Chol)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-L)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、血流变学等为观察指标。结果: 虎杖-黄芪组、虎杖-益母草组在用药第4,8周能明显降低DN模型大鼠血糖水平(P<0.05),明显降低TG水平(P<0.05),对模型大鼠全血黏度、血浆黏度有明显减轻作用,具有显著性差异。其中,虎杖-益母草组对血浆黏度减轻明显(P<0.01)。结论: 虎杖分别配伍黄芪、益母草①对糖尿病肾病糖、脂代谢及血流变具有调节作用;②可能通过降低血糖、甘油三酯等水平,降低全血与血浆黏度,改善微循环,发挥其对糖尿病肾病干预作用。