艾灸“肾俞”“足三里”穴对类风湿关节炎大鼠滑膜组织中Ras-MAPK信号通路的影响(英文)

目的:观察艾灸对类风湿关节炎(RA)模型大鼠滑膜组织中Ras、细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase1/2,ERK1/2)和Raf蛋白表达的影响,探讨艾灸治疗类风湿性关节炎的分子作用机制。方法:选取30只Wistar大鼠,随机分为正常组、模型组、艾灸组,每组10只。采用风、寒、湿环境因素+生物因子(弗氏完全佐剂)复合造模。造模后第3天进行治疗,艾灸组取双侧 "肾俞""足三里"穴悬灸,20 min/次,1次/d,连续治疗15 d。于造模前、造模后及治疗第15天分别测量各组大鼠右后足趾容积。Western blot法检测滑膜组织中Ras蛋白、ERK1/2、磷酸化ERK1/2(phosphor-ERK1/2,p-ERK1/2)及Raf蛋白的相对表达量。结果:造模后大鼠右后足趾容积较正常组明显增大(P<0.01);经过15 d治疗,艾灸组大鼠的跖围小于模型组(P<0.01)。模型组Ras、Raf、ERK1/2、p-ERK1/2蛋白表达较其他各组增加(均P<0.01);艾灸组Ras、Raf、ERK1/2、p-ERK1/2蛋白表达明显低于模型组(均P<0.01)。结论:艾灸能降低类风湿性关节炎模型大鼠滑膜组织中Ras、Raf及ERK1/2的过度表达,进而抑制Ras-MAPK信号通路的异常活化,推断这可能是艾灸减轻滑膜炎性反应的分子机制之一。     

人参三七组方对大鼠缺血心肌Ras信号通路的影响

目的探讨人参三七组方对急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)大鼠缺血心肌Ras、细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase1/2,ERK1/2)和C-Raf-1蛋白及mRNA表达的影响。方法采用Wistar大鼠冠状动脉左前降支结扎的心肌缺血模型,并设空白组、假手术组、模型组、倍他乐克组和人参三七组方大、小剂量组。通过Western blot法检测缺血心肌的Ras、ERK1/2、磷酸化ERK1/2(phosphor-ERK1/2,p-ERK1/2)及C-Raf-1的蛋白含量,Real-time PCR法检测缺血心肌Ras、ERK1、ERK2及C-Raf-1mRNA表达情况。结果模型组Ras、C-Raf-1、p-ERK1/2蛋白及其mRNA表达较空白组、假手术组增加(P<0.05);人参三七组方大、小剂量组及倍他乐克组Ras、C-Raf-1、p-ERK1/2蛋白及其mRNA表达均显著高于模型组(P<0.05);人参三七组方大剂量组较小剂量组Ras、C-Raf-1、p-ERK1/2蛋白及其mRNA表达增高更明显(P<0.05)。各组ERK1/2蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论人参三七组方能够促进缺血心肌Ras信号通路上的关键靶点Ras、C-Raf-1及ERK1/2表达,提示人参三七组方可能通过Ras信号通路来促进血管新生,具有一定剂量依赖性。     

逍遥散加减方对高催乳素血症肝郁脾虚型模型大鼠下丘脑多巴胺能神经元细胞程序性坏死的影响

目的 探讨逍遥散加减方治疗肝郁脾虚型高催乳素血症（HPRL）的可能作用机制。方法 96只SD雌性大鼠随机分为正常组16只,造模组80只。造模组大鼠采用慢性不可预知应激联合甲氧氯普胺腹腔注射构建HPRL肝郁脾虚型模型大鼠。将80只造模成功的大鼠随机分为模型组,逍遥散加减方高、中、低剂量组和甲磺酸溴隐亭组,每组16只。逍遥散加减方高、中、低剂量组分别给予逍遥散加减方60、30、15 g/（kg·d）灌胃,甲磺酸溴隐亭组予以甲磺酸溴隐亭片1 mg/（kg·d）灌胃,正常组及模型组给予生理盐水10 ml/（kg·d）灌胃,连续给药14天。ELISA法检测血清催乳素（PRL）含量;免疫组化测定大鼠下丘脑肿瘤坏死因子α(TNF-α)和酪氨酸羟化酶（TH）表达;采用Western blot法检测下丘脑肿瘤坏死因子受体1 (TNFR1)蛋白表达;RT-PCR法检测下丘脑受体相互作用蛋白激酶3 (RIP3) mRNA表达;免疫荧光法检测RIP3和多巴胺能神经元的共表达情况。结果 与正常组比较,模型组血清PRL含量升高,下丘脑TNF-α、TNFR1、RIP3mRNA及RIP3与多巴胺能神经元共表达阳性细胞...     

铁皮石斛多糖对糖尿病性白内障大鼠氧化应激及ERK信号通路的影响

目的探讨铁皮石斛多糖(DOP)对糖尿病性白内障大鼠血清氧化应激产物及晶状体组织ERK1、ERK2、MEK、Raf、Ras mRNA水平的影响。方法将Wistar大鼠50只随机分为5组:对照组(CG)、模型组(MG)、铁皮石斛多糖低(DOPL)、中(DOPM)、高(DOPH)3个剂量组。以腹腔注射链脲菌素制备糖尿病大鼠模型。铁皮石斛多糖各剂量分别灌胃,对照组和模型组按相同容量生理盐水灌胃,每日2次,连续12周。检测各组大鼠血清丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量及晶状体组织中ERK1、ERK2、MEK、Raf、Ras mRNA水平。结果 (1)晶状体混浊评定:对照组晶状体混浊评定几乎都在C0N0,保持透明;模型组绝大多数晶状体混浊程度在C3-4和N1-2,几乎完全混浊;DOP组晶状体混浊程度评定大部分在C1-2和N0-1,DOPH组晶状体出现絮状、片状等部分混浊,混浊程度较模型组明显减轻,3组之间差异有统计学意义(χ_(皮质)~2=49.401,χ_核~2=43.914,均P=0.000);(2)氧化应激指标:(1)MDA含量,模型组MDA含量较对照组明显升高(t=4.615,P=0.000),DOP作用后MDA较模型组明显下降,且存在量效关系(t_(DOPL)=4.046,t_(DOPM)=6.504,t_(DOPH)=6.587,均P=0.000);(2)SOD活力,模型组SOD活力较对照组明显降低(t=9.809,P=0.000),DOPM、DOPH组均较模型组升高(t_(DOPM)=2.914,P=0.007;t_(DOPH)=13.305, P=0.000);(3)GSH-Px活力,DOPH组GSH-Px较DOPL组和对照组明显升高(t_(CG)=2.728,P=0.011;t_(DOPL)=2.068,P=0.048);(3)ERK1、ERK2、MEK、Raf、Ras基因表达:模型组ERK1、ERK2、MEK、Raf、Ras mRNA表达均较对照组增高(P0.05);随着DOP浓度增高,ERK1、ERK2和Raf mRNA表达水平逐渐降低,其中DOPH组的ERK1较模型组显著降低,差异有统计学意义(t=7.849,P=0.000);与对照组比较,DOP3个剂量组的MEK mRNA表达增强,差异均有统计学意义(t_(DOPL)=4.046,P=0.001;t_(DOPM)=4.493,P=0.000;t_(DOPH)=4.403,P=0.000)。结论 DOP延缓糖尿病性白内障可能是通过降低糖尿病大鼠血清中MDA含量,提高血清中SOD的活力,增强其抗氧化能力实现的,其中氧化应激介导的ERK/Raf信号通路可能是DOP延缓糖尿病性白内障的重要机制。     

基于疏肝健脾法探讨Zn2+对HPRL大鼠DAT的调控机制

目的 以疏肝健脾法为核心,探讨逍遥散加减方对高催乳激素血症(HPRL)模型大鼠Zn²⁺的表达影响,进一步讨论Zn²⁺对其中枢多巴胺转运体(DAT)的调控机制。方法 将96只大鼠随机分6组：正常组、模型组、西药组(溴隐亭,0.001g·kg ^-1·d^-1)、逍遥散加减方高、中、低剂量组(逍遥散加减方60,30,15 g·kg^-1·d^-1)。制作HPRL动物模型的方法采用ip甲氧氯普胺联合慢性复合应激。给药14d后,通过酶联免疫法(ELISA)检测各组大鼠血清催乳素(PRL)水平;锌离子荧光探针检测各组大鼠下丘脑多巴胺能神经元Zn²⁺表达的情况;蛋白免疫印迹法(WB)检测各组大鼠下丘脑多巴胺转运体(DAT)蛋白表达的情况。结果 模型组PRL、DAT表达与正常组相比,显著升高(P<0.01),模型组Zn²⁺表达与正常组相比,显著降低(P<0.01);中药中剂量组、西药组的PRL、DAT表达与模型组相比,均显...     

逍遥散加减方对高催乳素血症大鼠多巴胺转运体的影响

目的:运用逍遥散加减治疗高催乳素血症(HPRL)模型大鼠,探讨逍遥散加减对HPRL大鼠模型中枢多巴胺转运体(DAT)蛋白激酶C(PKC)依赖信号通路的影响.方法:采用慢性复合应激联合甲氧氯普胺腹腔注射,制作HPRL大鼠模型.将96只大鼠随机分成6组,分别为正常组、模型组、西药组(溴隐亭组,0.001 g·kg-1·d-...     

芪藤消浊颗粒对慢性肾小球肾炎大鼠Syk/Ras/c-Fos信号通路的调控作用

目的:研究芪藤消浊颗粒对慢性肾小球肾炎大鼠Syk/Ras/c-Fos信号通路关键基因表达的调控作用,探讨其可能的机制。方法:采用尾静脉注射阿霉素复制慢性肾小球肾炎大鼠模型,芪藤消浊颗粒(21.6,10.8,5.4g/kg)组和黄葵胶囊1.0 g/kg给药30天后,HE染色观察慢性肾小球肾炎大鼠肾小球病变情况,测定24h尿蛋白含量,血清中尿素氮和肌酐含量,RT-q PCR检测Syk、Ras、MEK1/2、ERK1/2和c-Fos mRNA表达情况,免疫组化法和Western blot法检测p-Syk、Ras、p-MEK1/2、p-ERK1/2和c-Fos蛋白表达。结果:芪藤消浊颗粒(10.8,21.6g/kg)组可明显降低慢性肾小球肾炎大鼠24h尿蛋白,血清尿素氮和肌酐,肾脏组织中Syk、Ras、MEK1/2、ERK1/2、c-Fos mRNA和p-Syk、Ras、p-MEK1/2、p-ERK1/2、c-Fos蛋白表达量。各治疗组肾脏病变程度较模型组有明显减轻。结论:芪藤消浊颗粒对慢性肾小球肾炎具有治疗作用,其机制可能通过抑制Syk/Ras/c-Fos通路活化,进而减轻肾小球组织炎性反应有关。     

齐墩果酸对阿尔茨海默病模型大鼠海马区MAPK/ERK通路相关蛋白表达的影响

目的探讨MAPK/ERK信号转导通路在阿尔茨海默病中的变化,以及中药女贞子有效成分齐墩果酸治疗阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的部分作用机制。方法将30只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和齐墩果酸组,采用侧脑室注射聚集态β-淀粉样蛋白25-35建立AD大鼠模型。齐墩果酸组大鼠予20mg·kg-1齐墩果酸,假手术和模型组予等体积蒸馏水,各组均每日灌胃1次,共灌胃4周。采用Western blot法检测各组大鼠海马区Ras、Raf-1、B-Raf、MEK1/2、ERK1/2和p-ERK1/2蛋白表达的变化。结果与假手术组比较,模型组Ras、Raf-1、MEK1/2、ERK1/2、pERK1/2相对表达量和p-ERK1/2与ERK1/2相对表达量比值均显著增加,B-Raf表达量显著下降,差异具有统计学意义(P0.05);与模型组比较,齐墩果酸组Raf-1、MEK1/2、p-ERK1/2表达量和p-ERK1/2与ERK1/2相对表达量比值均显著下降,B-Raf表达量显著增加,差异具有统计学意义(P0.05)。结论 MAPK/ERK通路在AD模型大鼠脑中被过度激活,齐墩果酸可能是通过调控MAPK/ERK通路活性,从而达到治疗AD的作用。     

逍遥散加减方对高催乳素血症大鼠卵巢自分泌及旁分泌机制的影响

目的:探讨逍遥散加减方对高催乳素血症大鼠模型卵巢自分泌及旁分泌机制的影响。方法:采用腹腔注射甲氧氯普胺制成高催乳血症大鼠模型,随机分为6组:空白组、模型组、逍遥散加减方高、中、低剂量组(分别予以逍遥散加减方60、30、15g·kg^-1·d^-1)、溴隐亭组0.001g·kg^-1·d^-1,药物治疗30d后通过免疫组化检测大鼠卵巢组织胰岛素样生长因子1(IGF-1)、胰岛素样生长因子2(IGF-2)阳性结果的表达;采用MTT检测卵巢颗粒细胞存活率及增殖率;采用ELISA法测定卵巢抗苗勒试管激素(AMH)的含量;采用PCR检测血清促卵泡激素受体(FSHR)的含量。结果:与空白组比较,模型组IGF-1、AMH、FSHR、卵巢颗粒细胞存活率、细胞增殖显著减少(P<0.05,P<0.01);逍遥散加减方中、低剂量组IGF-1显著降低(P<0.01),逍遥散加减方低剂量组AMH及卵巢颗粒细胞存活率显著降低(P<0.05),溴隐亭组IGF-1、卵巢颗粒细胞存活率显著降低(P<0.05);与模型组比较,逍遥散加减方高剂量组AMH、IGF-1、卵巢颗粒细胞存活率显著升高(P<0.01,P<0.05),逍遥散加减方高剂量组细胞增殖率及FSHR升高(P<0.05,P<0.01)。结论:逍遥散加减方高剂量组通过提高IGF-1、FSHR及AMH的含量调节卵巢自分泌/旁分泌机制,进而提高动物模型卵巢颗粒细胞存活率。     

复心合剂对心衰大鼠信号通路Raf-MEK-ERK的影响

目的:初步探索复心合剂对信号通路Raf-MEK-ERK的影响。方法:75只Wistar雄性大鼠,随机分为5组,对照组、卡托普利组、复心合剂低剂量组、复心合剂高剂量组均为15只。实验过程中阿霉素干预4周后测定大鼠心功能;6周后应用Western blot法检测大鼠心肌组织中Raf、MEK、ERK蛋白表达情况。结果:(1)与正常对照组比较,模型组大鼠BNP值显著升高(P0.01),心衰模型成功建立。(2)与正常对照组相比,模型组大鼠心肌组织Raf水平显著升高(P0.01),复心合剂高剂量组、卡托普利组大鼠心肌组织Raf水平显著降低(P0.01),与卡托普利组相比,复心汤高剂量组大鼠心肌组织Raf无统计学意义(P0.05)。(3)与正常对照组相比,模型组大鼠心肌组织MEK水平显著升高(P0.01),复心合剂高剂量组、卡托普利组大鼠心肌组织MEK水平显著降低(P0.01)。(4)与正常对照组相比,模型组大鼠心肌ERK蛋白表达明显升高(P0.01),卡托普利组及复心合剂高剂量组ERK蛋白表达无显著差异性(P0.05),与模型组相比,复心合剂高剂量组、卡托普利组大鼠心肌组织ERK水平显著降低(P0.01)。结论:复心合剂对心衰大鼠信号通路Raf-MEK-ERK的蛋白激活具有一定的抑制作用,延缓心衰进程。     

加味逍遥散对HPRL大鼠多巴胺受体cAMP/PKA信号转导通路的研究

目的： 探讨以肝脾为核心,运用逍遥散加减方治疗实验性高催乳激素血症（HPRL）模型大鼠下丘脑多巴胺受体环磷酸腺苷（cAMP）/蛋白激酶A（PKA）信号转导通路机制的影响。 方法： 腹腔注射甲氧氯普胺,制作HPRL大鼠模型。随机分成6组：空白对照组、阴性对照组、阳性对照组（溴隐亭组）、逍遥散加减方高、中、低剂量组。给药30 d后,采用免疫组化法测定大鼠下丘脑PKA阳性表达的数量;采用酶联免疫的法测定大鼠血清cAMP的含量、采用免疫组化法及RT-PCR检测大鼠下丘脑多巴胺D1,D2受体。 结果： 与阴性对照组相比较,逍遥散加减各剂量组下丘脑PKA活性明显降低（P < 0.01）;下丘脑cAMP活性显著降低 （P < 0.01）、下丘脑多巴胺D1受体数量有增高趋势、D2受体数量显著增加（P < 0.01）。 结论： 逍遥散加减方对能通过多巴胺受体cAMP-PKA信号转导通路调节泌乳素水平。     

华蟾毒配基联合索拉非尼通过AURKA/Ras/Raf/ERK信号通路对肝癌Huh7细胞增殖与凋亡的影响

目的研究华蟾毒配基联合索拉非尼对肝癌Huh7细胞增殖与凋亡的影响及作用机制。方法 MTT法检测Huh7细胞增殖;Hoechst33342/PI荧光双染法检测Huh7细胞凋亡形态变化;流式细胞仪检测细胞周期;免疫细胞化学法检测Ki67蛋白表达;Western blotting法检测Bax、Bcl-2、Caspase-8、极光激酶A(AURKA)、Ras、Raf、细胞外调节蛋白激酶(ERK)和p-ERK蛋白的表达变化。结果华蟾毒配基、索拉非尼及联合用药对Huh7细胞的增殖均有抑制作用,联合用药组的增殖抑制作用更明显,具有协同效应;荧光染色可见细胞凋亡形态变化;索拉非尼引起Huh7细胞周期S期阻滞,华蟾毒配基和联合用药引起Huh7细胞周期G2/M期阻滞,联合用药组G2/M期阻滞较单药组更明显;华蟾毒配基和索拉非尼均能减弱Ki67表达,联合用药组的作用更为显著;华蟾毒配基、索拉非尼及联合用药上调Bax和Caspase-8蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达,上调Bax/Bcl-2比例,对ERK蛋白表达无明显影响,显著下调AURKA、Ras、Raf和p-ERK蛋白表达,联合用药组的作用更为显著(P0.05)。结论华蟾毒配基联合索拉非尼通过AURKA/Ras/Raf/ERK信号通路抑制肝癌Huh7细胞增殖,诱导其凋亡。     

四逆散对心理应激肝郁证模型大鼠ERK1/2-CREB信号通路的影响

[目的]探讨四逆散对心理应激肝郁证模型大鼠应激相关激素、神经递质及海马和下丘脑部位细胞外信号调节蛋白激酶1/2(ERK)1/2-c AMP反应元件结合蛋白(CREB)信号通路的影响。[方法]采用慢性束缚制动结合孤养的方法制备心理应激肝郁证大鼠模型,根据大鼠一般状态、体质量增长情况、高架十字迷宫实验验证模型成功。将120只大鼠随机分为正常对照组、模型空白组、模型+四逆散组(四逆散组)、模型+艾司唑仑组(艾司唑仑组),各30只。采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠血浆及脑脊液促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)的含量,半定量PCR法检测大鼠海马和下丘脑部位丝裂原活化蛋白激酶激酶1/2(MEK1/2)、ERK1/2、CREB、c-fos m RNA的表达,蛋白印迹(Western blot)法检测大鼠海马和下丘脑部位磷酸化(p-)MEK1/2、p-ERK1/2、p-CREB、c-fos蛋白的表达。[结果]与正常对照组比较,模型空白组大鼠血浆和脑脊液中CRH、ACTH、E、NE的含量明显增加(P0.05),5-HT的含量明显减少(P0.05),海马和下丘脑部位MEK1/2、ERK1/2、CREB m RNA及p-MEK1/2、p-ERK1/2、p-CREB蛋白的表达明显降低(P0.05)。与模型空白组比较,四逆散和艾司唑仑均可降低血浆和脑脊液中CRH、ACTH、E、NE的水平(P0.05),升高5-HT的水平(P0.05),上调海马和下丘脑部位MEK1/2、ERK1/2、CREB m RNA及p-MEK1/2、p-ERK1/2、p-CREB蛋白的表达(P0.05)。各组之间大鼠海马和下丘脑部位c-fos m RNA和蛋白质的表达差异无统计学意义(P0.05)。[结论]四逆散能降低心理应激肝郁证模型大鼠血浆和脑脊液CRH、ACTH、E、NE的水平,增加5-HT的含量,提高应激反应能力,其机制可能与上调ERK1/2-CREB信号通路活动有关。     

逍遥散加减方对高催乳激素血症大鼠卵巢颗粒细胞增殖和细胞周期的影响

目的:探讨以肝脾为核心,运用逍遥散加减方治疗高催乳素血症(HPRL)模型大鼠,观察逍遥散加减方对体外培养HPRL大鼠卵巢颗粒细胞增殖及细胞周期的影响。方法:选用SD雌性大鼠120只,随机分为正常组、模型组、阳性药溴隐亭组(1 mg·kg^-1)、逍遥散加减方高、中、低剂量组(55,22.5,13.75 g·kg^-1)。采用ip甲氧氯普胺,制作HPRL大鼠模型。给药30 d后,采用MTT检测各组细胞培养24,48,72,96 h细胞增殖情况;采用流式细胞仪分析细胞周期各时相的变化及细胞凋亡指数。结果:与正常组比较,模型组24,48,72,96 h大鼠卵巢颗粒细胞增殖明显降低,细胞凋亡指数显著增高,S期的细胞增殖明显降低,G₀/G₁期细胞相对比例明显增加(P<0.05);与模型组比较,溴隐亭组、逍遥散加减方高、中、低剂量组明显增加大鼠卵巢颗粒细胞增殖(P<0.05),逍遥散加减方高剂量组降低卵巢细胞凋亡指数,使S期的细胞增殖显著增多,G₀/G₁期细胞相对比例减少(P<0.05),其中加味逍遥散高剂量组的作用与溴隐亭组相近。结论:逍遥散加减方促进卵巢颗粒细胞增殖,降低细胞凋亡指数,其作用机制可能是通过促进颗粒细胞从G₀期向S期转化,増加S期细胞比例完成。     

中药抗肿瘤血管生成的信号通路研究

血管生成是肿瘤发生和转移的基本条件。调控肿瘤血管生成相关的信号通路包括PI3K/Akt/mTOR、Ras/Raf/MEK/ERK、Notch转导通路等。中药抗肿瘤血管生成的信号通路研究越来越受关注。调控PI3K/Akt/mTOR通路的中药多集中于抑制Akt的磷酸化,且清热药居多。调控Ras/Raf/MEK/ERK通路的中药多集中于抑制ERK的磷酸化,且活血化瘀药居多。调控Notch转导通路的中药多集中于抑制Notch1的表达,对配体的表达不一。对中药抗肿瘤血管生成的信号通路进行综述,旨在寻求新的血管生成抑制剂,阐明作用靶点,为肿瘤研究提供方向。     

Effect of Chaihushugan San on expression of the Raf/mitogen-activated protein kinase/extracellular signal-regulated kinase pathway in the hippocampi of perimenopausal rats induced by immobilization stress

OBJECTIVE: We wished to study the impact of Chaihushugan San(CSS) on the behavior of perimenopausal rats with liver-Qi stagnation(LQS) and to investigate the effect of CSS on signal transduction of the Raf/mitogen-activated protein kinase(MEK)/extracellular signal-regulated kinase(ERK) cascade in the hippocampi of rats induced by immobilization.METHODS: Twenty 52-week-old female rats were divided into two groups by the random number table method: model control group(MCG) and CSS group(CSSG), with 10 rats in each group.Ten-week-old female rats were used as the normal control group(NCG). CSS effects were assessed using rats exposed to immobilization stress by measuring body weight and sucrose consumption, serum hormone levels, and observing performance in the open field test(OFT). Molecular mechanisms were examined by measuring the effect of CSS on expression of Raf1, MEK1/2 and ERK1/2 m RNA in hippocampi using quantitative real-time polymerase chain reaction and by measuring levels of these proteins and related phospho-proteins using Western blotting.RESULTS: Perimenopausal rats with LQS had decreased locomotor activity; reduced sucrose consumption; and increased serum levels of corticotropin releasing hormone(CRH) and corticosterone(CORT). Activation of hippocampal Raf/MEK/ERK cascade was suppressed significantly in the MCG,and activation was increased after 21 days of CSS treatment.CONCLUSION: CSS has significant effects upon relief of the symptoms of LQS in immobilization-induced rats. The mechanism underlying this action might(at least in part) be mediated by reversal of disruption of the Raf/MEK/ERK pathway.     

参归仁合剂对产后抑郁大鼠行为学及雌激素介导下ERK1/2通路中MEK1的影响

目的:探讨参归仁合剂对产后抑郁模型大鼠行为学的影响,及测其海马、额叶、下丘脑神经元内胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)通路上丝裂原活化细胞外调节激酶1(MEK1)蛋白表达量。方法:150只雌性大鼠分为正常组,模型组,参归仁高、中、低剂量组(7,3.6,1.8 g·kg-1·d-1),阳性药组(舍曲林4.5 mg·kg-1·d-1和苯甲酸雌二醇0.01 mg·kg-1·d-1),除正常组外,其余各组ih苯甲酸雌二醇和黄体酮造成抑郁模型。观察其行为学指标变化;蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测其额叶、海马、下丘脑中p-MEK1,MEK1的蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组体重、食欲、活动能力、兴趣等明显降低,额叶、海马、下丘脑细胞内的p-MEK1蛋白表达显著升高(P0.01);参归仁合剂能改善抑郁模型组体重、食欲、活动能力、兴趣等行为学指标,抑郁模型组额叶、海马、下丘脑细胞内的p-MEK1,MEK1蛋白表达量明显下降,参归仁高、中、低组额叶、海马、下丘脑细胞内的p-MEK1,MEK1蛋白表达量显著增加,尤其以参归仁中、低组增加较为明显(P0.01)。结论:参归仁合剂能改善产后抑郁大鼠的行为学指标,在一定程度上调ERK1/2信号通路p-MEK1,MEK1的蛋白表达量,且中、低组效果显著,提示该药作用机制为调控ERK1/2通路并改善抑郁症状。     

Xiaoyaosan improves depressive-like behaviors by regulating the NLRP3 signaling pathway in the rat cerebral cortex

ObjectiveTo observe changes in the molecular expression of the NLR Family Pyrin Domain Containing Protein 3 (NLRP3) pathway in depressed rats after treatment with Xiaoyaosan, and identify the regulatory mechanism of this compound.MethodsMale Sprague–Dawley rats were randomly divided into five groups with 12 rats in each group, including the control group, model group, Fluoxetine group, Xiaoyaosan group, and MCC950 group. A depression model was generated by chronic immobilization stress (induced by 3 h of restraint immobilization every day), and the drugs were administered at the same time in each group for 21 days. The effects of Xiaoyaosan on behavioral changes of depressed rats were observed through macroscopic characterization, body mass, open field experiments, and a sucrose preference test. The mRNA and protein expression of the NLRP3 signaling pathway was examined by fluorescence real-time quantitative PCR and Western blot assays.ResultsThe Xiaoyaosan group, Fluoxetine group, and MCC950 group rats showed improved depressive behavior and an increased weight of sucrose water consumption. The protein and mRNA expression levels of NLRP3, Caspase-1, and IL-1β were also decreased in the Fluoxetine, Xiaoyaosan, and MCC950 groups.ConclusionNLRP3, Caspase-1, and IL-1β protein and mRNA expression levels were increased in the cortex of depressed rats, while Xiaoyaosan protected cortical tissue in these rats by decreasing NLRP3, Caspase-1, and IL-1β protein and mRNA expression.     

龙葵碱体外诱导人结肠癌SW480细胞凋亡及其对相关因子的影响

  目的：观察龙葵碱对人结肠癌SW480细胞凋亡及ERK/MEK、PI3K/AKT信号通路中相关因子的影响。  方法：SW480结肠癌细胞培养后共设5组,分别为空白对照组、培养液对照组及龙葵碱不同剂量(4、8、16 mmol/L)组,各组进行相应干预。采用MTT法检测龙葵碱对结肠癌细胞株的增殖作用,流式细胞法检测龙葵碱对结肠癌细胞凋亡的影响,RT-PCR及Western blotting法检测龙葵碱处理的SW480细胞中ERK/MEK和PI3K/AKT的表达水平。  结果：MTT生长曲线显示,龙葵碱能抑制结肠癌SW480细胞株增殖。流式细胞仪检测显示,龙葵碱能够促进SW480的凋亡。RT-PCR结果显示,龙葵碱可以抑制ERK1/2 mRNA的表达。Western blotting结果表明,龙葵碱可以降低MEK/ERK和PI3K/AKT信号通路中相关蛋白的表达。  结论：龙葵碱可以抑制结肠癌细胞增殖,其对肿瘤的诱导凋亡作用可能是通过MEK/ERK和PI3K/AKT信号途径实现的。