甲氧沙林脂质体对小鼠黑素瘤细胞黑素生成影响的研究

目的:探讨甲氧沙林脂质体(8-MOPL)对小鼠B16F黑素瘤细胞增殖、黑素含量、酪氨酸酶活性的影响。方法:采用体外培养的小鼠B16F黑素瘤细胞株,以等浓度的甲氧沙林(8-MOP)为对照,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖情况;NaOH裂解法测定黑素合成;多巴氧化法测定酪氨酸酶活性。结果:与等浓度8-MOP相比,低浓度8-MOPL(10-25μmol/L)能显著提高酪氨酸酶活性和黑素含量(P<0.05)。高浓度8-MOPL(100-200μmol/L)对细胞的抑制作用更显著(P<0.05)。结论:用脂质体作为8-MOP的载体可以显著提高8-MOP对靶细胞的作用,为8-MOPL制剂治疗白癜风的临床应用提供了实验依据。     

复方甘草酸苷注射液对B16鼠黑素瘤细胞黑素生成的影响

目的：研究复方甘草酸苷注射液对B16鼠黑素瘤细胞黑素的影响及其机制。方法：通过CCK8、流式细胞术、NaOH裂解法、多巴氧化法和Western-blotting技术检测复方甘草酸苷对B16鼠黑素瘤细胞生长,黑素合成与转运及酪氨酸酶活性和蛋白含量的影响。结果：(1) 复方甘草酸苷注射液浓度低于30μl/ml,对B16鼠黑素瘤细胞生长无明显影响;浓度大于50μl/ml,细胞生长速率减慢;浓度达到500μl/ml,细胞生长明显受抑制。(2) 浓度在10μl/ml到200μl/ml之间,黑素的合成和酪氨酸酶的活性均增加。黑素的合成在复方甘草酸苷注射液浓度为50μl/ml时增加最明显;且酪氨酸酶活性呈浓度依赖性增加,在浓度为100μl/ml和150μl/ml时达到最高。结论：复方甘草酸苷注射液有促进黑素瘤细胞黑素的合成与转运及增加酪氨酸酶活性的作用。     

疏肝活血中药复方对B16小鼠黑素瘤细胞黑素合成的影响

目的探讨疏肝活血中药复方治疗黄褐斑的作用机制.方法以系列浓度的疏肝活血中药复方水煎剂作用于体外培养的B16小鼠黑素瘤细胞,测定细胞酪氨酸活性、黑素含量和细胞增殖率,琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡.结果疏肝活血中药复方水煎剂能剂量依赖性抑制体外培养的B16小鼠瘤细胞酪氨酸活性和黑素合成,抑制细胞增殖,但无细胞凋亡发生.结论疏肝活血中药复方可直接作用于黑素细胞,抑制细胞黑素合成,但无细胞毒作用,可用于治疗黄褐斑.     

血清药理学方法研究复方中药对B16黑素瘤细胞黑素合成的影响

目的运用血清药理学方法研究复方中药白斑一号对小鼠B16黑素瘤细胞黑素合成的影响.方法体外培养小鼠B16黑素瘤细胞,运用血清药理学、细胞学的方法,测定药物对B16黑素瘤细胞增殖情况,对酪氨酸酶活性调节作用及黑素含量的影响.结果复方中药白斑一号能促进黑素合成和激活酪氨酸酶,从而阐明了该方在白癜风治疗中的机制.     

黑素生成素对黑素瘤mel586细胞白癜风相关基因-1和酪氨酸酶表达的影响

采用MTT法测定黑素生成素对细胞增殖率的影响;多巴氧化法测定酪氨酸酶活性;半定量RT-PCR检测黑素生成素对黑素细胞白癜风相关基因-1（VIT-1）,酪氨酸酶（TYR）和酪氨酸酶相关蛋白-1（TRP1）基因表达的影响。结果：黑素生成素能促进黑素瘤细胞mel586的增殖,并与浓度呈正相关性,对TYR和TRP-1mRNA表达无明显促进作用;黑素生成素在浓度为6μg/mL和12μg/mL时对黑素瘤细胞mel586酪氨酸酶活性有促进作用（P〈0.05）。黑素生成素治疗白癜风有效的机制可能与提高VIT-1的表达量和促进细胞增殖有关。     

复方中药对小鼠B—16黑素瘤细胞株黑素合成和酪氨酸酶的激 …

目的 研究复方中药对小鼠Ｂ－１６黑素瘤细胞株细胞增殖、黑素合成的影响,及其对细胞内酪氨酸酶的激活作用。方法 四甲基偶氮唑蓝（ＭＴＴ）比色法测定中药对细胞增殖的影响;酶学方法研究中药对酷氨酸酶活性的作用;４７０ｎｍ比色标准曲线法测定黑素含量。结果 研究发现复方３号（补肝肾为主）促进黑素细胞增殖和色素合成的能力高于复方１号（光敏感性药物）或复方２号（活血化瘀）,而酶激活能力复方１号较为稳定。结论 在白     

抗白灵霜在黑素合成中对TYR和MITF的调节作用

目的：明确抗白灵霜(KBL)在黑素合成中对TYR和MITF的调节作用。方法：体外培养小鼠B16黑素瘤细胞,分为空白对照组和不同浓度KBL（5 mg/mL,10mg/mL和15mg/mL）用NaOH溶解法检测黑素合成量,Real time-PCR检测TYR和MITF基因mRNA表达,Western Blot检测KBL组TYR和MITF蛋白的表达。结果：各浓度KBL组黑素合成量及TYR和MITF基因的mRNA和蛋白表达的水平均高于空白对照组,且呈浓度依赖性。结论：KBL可能通过上调MITF基因的表达,激活参与黑素合成的TYR以促黑素合成。     

18味中药乙醇提取物对小鼠B16黑素瘤细胞增殖及黑素生成的影响

目的研究中药乙醇提取物对小鼠B16黑素瘤细胞增殖及黑素合成的影响。方法以MTT法测定培养的B16黑素瘤细胞的增殖活性:NaOH法测定黑素生成量;体外氧化多巴反应方法测定酪氨酸酶活性。结果与空白对照组相比,18种中药乙醇提取物中,有9种提取物对1种以上指标有显著性作用(P<0.05或P<0.01)。沙苑子、甘草、山慈姑、薄荷、苦参、夏枯草、黄芩、黑芝麻、墨旱莲可明显促进B16黑素瘤细胞增殖,甘草、山慈姑、薄荷、苦参、夏枯草、何首乌、黑芝麻、墨旱莲明显增加黑素含量,山慈姑、薄荷、苦参、夏枯草、黑芝麻、墨旱莲明显增加酪氨酸酶活性,山慈姑、薄荷、苦参、夏枯草、黑芝麻和墨旱莲的提取物对3种指标均有显著性作用(P<0.05或P<0.01)。结论山慈姑等6种中药的乙醇提取物具有促进黑素细胞增殖和合成黑素的作用。     

补骨脂素和女贞子对小鼠B16黑素瘤细胞c-KIT表达的影响

目的探讨中药补骨脂素和女贞子对小鼠B16黑素瘤细胞c-KIT表达的影响及意义。方法体外培养小鼠B16黑素瘤细胞,用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)测定补骨脂素和女贞子对小鼠B16黑素瘤细胞c-KIT表达的影响,用Transwell小室法检测补骨脂素和女贞子对小鼠B16黑素瘤细胞迁移功能的影响。结果补骨脂素与女贞子用药组迁移到膜下层的每视野细胞个数分别较对照组多(P0.05),并呈剂量依赖关系;用药组c-KIT m RNA、c-KIT蛋白表达分别比对照组增加,差异均有统计学意义(P0.05)。结论补骨脂素和女贞子可能是通过促进小鼠B16黑素瘤细胞c-KIT的表达而促进其迁移功能,从而对白癜风产生治疗作用。     

复方木尼孜其颗粒对小鼠B16黑素瘤细胞酪氨酸酶活性及黑素合成的影响

目的 研究复方木尼孜其颗粒对小鼠B16黑素瘤细胞酪氨酸酶活性及黑素合成的影响.方法 培养小鼠B16黑素瘤细胞,采用MTT法测定不同浓度复方木尼孜其颗粒对细胞增殖的影响,采用L-DOPA氧化法测定其对细胞酪氨酸酶活性的影响,采用NaOH裂解法检测细胞黑素含量.结果 复方木尼孜其颗粒高剂量组能明显抑制小鼠B16黑素瘤细胞黑素的合成,但是对酪氨酸酶活性无影响.结论 复方木尼孜其颗粒能抑制小鼠B16黑素瘤细胞黑素的合成,在治疗色素性皮肤病中有一定前景.     

复方中药白癜冲剂对B16黑素瘤细胞生物学特性影响的实验研究

目的：观察复方中药白癜冲剂对体外培养的B16黑素瘤细胞生物学特性的影响。方法：体外培养B16黑素瘤细胞,测定不同浓度白癜冲剂对B16黑素瘤细胞增殖、对酪氨酸酶活性和黑素含量的影响。结果：低浓度剂量组白癜冲剂对B16黑素瘤细胞较对照组有明显促增殖作用,黑素合成增多,酪氨酸酶活力增加,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论：复方中药白癜冲剂能促进B16黑素瘤细胞的黑素合成,提高酪氨酸酶活力。     

栀子苷、黄芩苷、华蟾酥毒基对体外培养的B16恶性黑素瘤细胞细胞增殖的抑制作用

目的观察栀子苷、黄芩苷、吴茱萸内酯、穿心莲内酯、华蟾酥毒基等5种中药单体成分抗恶性黑素瘤的活性。方法以系列浓度的上述5种药物作用体外培养的B16恶性黑素瘤细胞72h,顺铂为对照,MTT法测定细胞增殖抑制率。结果在5种中药单体中,栀子苷、黄芩苷、华蟾酥毒基对体外培养的B16恶性黑素瘤细胞增殖有抑制作用。其中栀子苷对细胞增殖的抑制率呈量效关系,最大抑制率达62.9%;黄芩苷仅在最高浓度时(80μg/mL)对细胞增殖有抑制作用,抑制率为42.8%;华蟾酥毒基浓度≥20μg/mL时表现出对细胞增殖的抑制作用,但无明显量效关系,最大抑制率仅为24.1%(40μg/mL);80μg/mL的栀子苷对细胞增殖的抑制作用与2μg/mL的顺铂无明显差异;穿心莲内酯、吴茱萸内酯则对细胞增殖无明显影响。结论栀子苷、黄芩苷、华蟾酥毒基具有抗恶性黑素瘤的作用,可以做为治疗恶性黑素瘤的备选药物。     

Antimelanogenesis effect of Tunisian herb Thymelaea hirsuta extract on B16 murine melanoma cells

Skin pigmentation is the result of melanogenesis that occurs in melanocytes and/or melanoma cells. Although melanogenesis is necessary for the prevention of DNA damage and cancer caused by UV irradiation, excessive accumulation of melanin can also cause melanoma. Thus, we focused on the antimelanogenesis effect of an extract from Thymelaea hirsuta, a Tunisian herb. Murine melanoma B16 cells were treated with T. hirsuta extract, and then cell viability and synthesized melanin content were measured. We found that the T. hirsuta extract decreased the synthesized melanin content in B16 cells without cytotoxicity. Tyrosinase is a key enzyme of melanogenesis and extracellular signal-regulated kinase (ERK)-1/2 phosphorylation is known to be related to melanogenesis inhibition. To clarify its mechanism, we also determined ERK1/2 phosphorylation and tyrosinase expression level. ERK1/2 was immediately phosphorylated in cells just after treatment with the extract. The tyrosinase expression was inhibited after 24 h of stimulation with the extract. The T. hirsuta extract was fractionated, and we found that one fraction considerably decreased the melanin synthesis in B16 cells and that this fraction contains daphnanes as the main component. This indicates that our findings might be attributable to daphnanes.     

Celecoxib抑制人黑素瘤A375细胞增殖及对Cox-2/MMP-1蛋白表达的影响

目的研究Celecoxib(塞来考昔)对人黑素瘤A375细胞增殖抑制、凋亡诱导和周期阻滞作用及对A375细胞表达Cox-2和分泌型MMP-1蛋白的影响。方法MTT法测定Celecoxib对A375细胞的增殖抑制作用,流式细胞术检测药物诱导细胞凋亡及周期阻滞作用;细胞爬片SABC免疫细胞化学检测Celecoxib对A375细胞Cox-2蛋白表达的影响,ELISA法分析Celecoxib对A375细胞分泌型MMP-1蛋白表达的影响。结果80μmol/L的Celecoxib明显抑制人黑素瘤A375细胞增殖,并诱导凋亡(凋亡率35.91%)和G2/M期阻滞,减少A375细胞表达Cox-2蛋白和分泌型MMP-1蛋白。结论人黑素瘤A375细胞表达Cox-2蛋白和MMP-1蛋白,Celecoxib是一种有潜力的抑制黑素瘤增殖的药物。     

6味中药乙醇提取物对B16黑素瘤细胞酪氨酸酶及其相关蛋白-1、-2 mRNA表达的影响

目的 研究墨旱莲(旱莲草)等6味用于治疗白癜风中药的乙醇提取物对小鼠B16黑素瘤细胞酪氨酸酶及酪氨酸酶相关蛋白-1、-2(TRP-1、-2)mRNA表达的影响.方法 半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定酪氨酸酶及TRP-1、-2 mRNA的表达,并与阳性对照甲氧沙林(8-MOP)进行比较.结果 山慈姑(毛慈姑)、苦参、黑芝麻和墨旱莲的乙醇提取物显著上调细胞酪氨酸酶mRNA的表达(P<0.05);除苦参对TRP-2 mRNA有明显上调作用外(P<0.05),其他中药对TRP-1和TRP-2 mRNA的表达无明显作用(P>0.05).结论 山慈姑、苦参、黑芝麻和墨旱莲有上调酪氨酸酶mRNA的作用,苦参还可上调TRP-2 mRNA的表达.