卡洛芬单克隆抗体的制备

目的:制备卡洛芬单克隆抗体,为研制卡洛芬的免疫学快速检测奠定基础。方法:通过活性酯法制备了以牛血清白蛋白(BSA)为载体的免疫抗原卡洛芬-BSA(Carprofen-BSA)和以卵清白蛋白(OVA)为载体的检测抗原卡洛芬-OVA(Carprofen-OVA)。通过免疫BALB/ c 小鼠、杂交瘤技术获得稳定分泌卡洛芬单抗的细胞株51C3,并通过变异系数及添加回收率的测定初步建立了卡洛芬的ELISA 检测方法。结果:将该细胞株注射BALB/ c 小鼠制备腹水单抗。腹水纯化后效价为1 .3.2*105 ,属于IgG1 型。卡洛芬单抗的灵敏度为0.32 ng/ ml,IC50 为0.882 ng/ ml。单抗与布洛芬、酮洛芬、萘普生、非诺洛芬、吲哚洛芬、芬布芬的交叉反应率均小于0.04%。且猪肉样品中卡洛芬的添加回收率在81.4% ~ 104.4% 之间,变异系数在16.3% ~25.8%之间。结论:本研究成功制备了卡洛芬单克隆抗体,该单抗可以成功应用于卡洛芬的ELISA 快速检测,为研制卡洛芬的胶体金快速检测奠定基础。     

蛙皮素的生物效应

目前已从两栖类皮肤中至少提取出了十九种生物活性肽,在这方面Erspamer及其同工(1980)进行了大量的工作;另外与其结构相似的物质在鸟类和哺乳类的脑和肠道中发现。对其中了解最多的首先是从一种欧洲铃蟾(Bombina bombina)皮肤中获得的十四肽——蛙皮素(Bombesin),其结构已被合成成功而证实。从另一种蛙(Alytes obstetricans)皮肤中提取出的与Bombesin在结构上极为相似的Alytesin,则对哺乳类平滑肌、血压、泌尿以及胃酸分泌具有相反的作用。相继从蛙或蟾蜍提取的肽类在结构上有相似点,例如所有这些     

抗KDR单克隆抗体的制备

目的：研制针对肿瘤新生血管内皮细胞生长因子受体（KDR）的特异性单克隆抗体（mAb）。方法：以谷胱甘肽转硫酶耦联的KDR（GST-KDR）可溶性融合蛋白免疫BALB／c小鼠,采用杂交瘤技术制备分泌抗KDRmAb的杂交瘤细胞。结果：获得1株稳定分泌抗KDRmAb的杂交瘤细胞株,命名为3E9B2G11。结论：成功获得能分泌抗KDRmAb杂交瘤细胞,为以后将该mAb改造成小分子酪氨酸激酶抑制剂,使其能进入细胞内与受体KDR特异性结合并阻断血管内皮细胞生长因子的强大生物学功能奠定了重要基础。     

单克隆抗体的制备和鉴定

单核吞噬细胞系统在特异性免疫中的主要作用,已增强了人们对此系统细胞成分的研究,利用单克隆抗体研究细胞表面结构是最可行的方法。现已经研制出一批抗单核吞噬细胞表面抗原的单克隆抗体,以及粒细胞表面抗原的单克隆抗体。这些抗体曾广泛地用于研究巨噬细胞和粒细胞的表面结构和功能上的异质性,还用于非淋巴细胞性白血病的鉴别诊断。在苏联关于制备单核吞噬细胞和粒细胞分化抗原的抗体的报道极少。     

抗G-CSF单克隆抗体的制备

<正> 粒系集落刺激因子(G-CSF)是在干细胞、祖细胞和成熟细胞不同水平上促进中性粒细胞和单核-巨噬细胞生成和功能的重要的调节因子。正常体内血清水平很低,国外业已证实多种病理情况下可升高。 我们用重组人G-CSF(rhG-CSF,日本爱知医科大学藤本教授惠赠)作免疫原,常规免疫BALB/6小鼠,建立了一株分泌抗rhG-CSF单抗的5F_4细胞株,其杂色体众数为91(79～101)。用5F_4细胞     

第二章 单克隆抗体的制备

动物免疫系统的细胞能识别的所有物质都可以制备单克隆抗体。如前所述,将一种物质或多种物质的混合物注入动物体内,则可产生识别抗原上某一部位的一组抗体。这种抗原部位叫做“抗原决定簇或表位”。多克隆抗体是识别很多抗原决定簇的免疫球蛋白的复杂体。     

仙台病毒的单克隆抗体Ⅱ、抗独特型单克隆抗体制备

众所周知,抗独特型抗体可作为免疫原诱导机体产生保护性免疫,且诱导产生的抗体具有与原始抗体相同或者类似的独特型,但不能和抗原结合。作者以仙台病毒HN分子特异的单克隆抗体A、B作为工具,成功地诱导出单克隆和多克隆抗独特型抗体。并且以此免疫动物,制备出较高滴度的能结合仙台病毒的抗仙台病毒抗体。以DE52纯化的抗仙台病毒单克隆抗体分别免疫同系的Lou鼠,同种源的BN、     

抗地高辛单克隆抗体的制备

抗地高辛单克隆抗体(以下简称单抗)对免疫化学的基础研究是一种有用的样品,可用于研究内源性地高辛样物质及对强心甙进行免疫测定。全部表型的特性鉴定对选择不同用途具有理想结合参数的抗体是不可缺少的。在两次融合试验中,获得22株高亲和性抗地高辛单抗。应用硫氰酸钾(KSCN)处理抗原抗体复合物和吸收ELISA可在杂     

仙台病毒的单克隆抗体Ⅰ.单克隆抗体制备及其特性

作者制备了12株抗仙台病毒单克隆抗体,并对其特异性、生物学功能和同种型等进行了研究。以100μg纯化的仙台病毒作为抗原加弗氏完全佐剂,腹腔注射Lou鼠,14和30天后分别以相同剂量的抗原加弗氏不完全佐剂再次注射,约10天后以放射免疫法(RIA)测试抗仙台病毒抗体滴度。取抗体滴度于1:200以上的Lou鼠,以200μg抗原加强免疫一次,4天后取其脾细胞与FO骨髓瘤细胞或Y3骨髓瘤细胞融合。经RIA筛选出     

蛙皮素的分布及其作用

<正> 近年来,由于免疫组织化学、放射免疫测定及电子显微镜等技术的广泛应用,使神经内分泌方面的研究进入一个新的阶段,成为当前神经科学发展的活跃领域。到目前,已相继在哺乳类和一些非哺乳类动物体内发现了多种肽类物质。它们对于机体的生理调节或病理改变都有着非常重要的作用。但对其中多数肽的了解还不十分深入。本文仅对蛙皮素的某些问题作一简要介绍。一、蚌皮素的概况蛙皮素(Bombesin,简作BBS)又称羚蟾素或羚蟾肽,它是由Anastasi等于1971年首先从两种欧州蛙的皮肤提取物中获得的。此后陆续发现在哺乳类和其它非哺乳类动物的神经     

SPA单克隆抗体的制备与纯化

以SPA作基础免疫BALB/C小鼠后,融合前三天直接脾内免疫,取脾细胞与SP_2/O瘤细胞常规融合,融合率100％;以快速EIISA检测抗体,阳性率60％。5次有限稀释法克隆化后获得7株杂交瘤细胞,作中和抑制试验,证实为SPA特异性抗体。经鉴定属IgG2a及IgG2b亚类。电镜观察细胞融合,发现细胞内含逆转录病毒。经MAPS—100法纯化单抗腹水,获得了高纯度McAb。     

孕酮单克隆抗体的制备与鉴定

孕酮是一个重要的女性激素,在生殖周期及早娠维持中起重要的作用。利用杂交瘤的技术制备孕酮单克隆抗体不仅将为孕酮的免疫测定法提供大量高特异性的匀质抗体,而将有助于进一步研究孕酮在生殖过程中的作用。并将促进我们了解甾体与大分子蛋白作用时结构与功能的关系。 我们用孕酮牛血清白蛋白做为抗原,免疫BALB/C小鼠。用聚乙二醇1500将脾细胞与NS_1细胞融合。在HAT选择性培养液培养约20天后。76％的孔有杂交瘤生     

抗人胃癌单克隆抗体的制备

分别以SGC-7901胃癌细胞以及MKN-28胃癌细胞无血清培养上清免疫Balb/c 小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合。此外,尚取荷胃癌裸小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合。经筛选及克隆化后获得六株分泌胃癌单抗的杂交瘤(RWS3,RWS4,RSD5,RSC12,RNE8,RNF11)。     

DNA免疫制备单克隆抗体的研究进展

DNA免疫是近年发展起来的一种新型抗体制备法。DNA免疫克服了传统蛋白质免疫方法的缺陷,能更为有效地激发机体的体液和细胞免疫应答。尤其是在仅知DNA编码而不能获得目的蛋白或获得的抗原蛋白为低免疫性的情况下,蛋白质免疫将很难得到特异性的抗体,但通过DNA免疫可制备高效价特异性的抗体,这为某些疾病如病毒性疾病和肿瘤等的诊断和免疫治疗开拓了新的途径。     

胃癌单克隆抗体的制备及应用

抗原来自一男性胃癌病人,癌组织经超声破碎,多次离心,制得胃癌粗抗原,免疫8周龄雌性BALB/c小鼠,取脾细胞与NS-1骨髓瘤细胞融合、经HAT培养液选择培养,ELISA检测,4次克隆化培养,得到一株杂交瘤细胞系,再经扩大培养和小鼠腹腔接种,生产出大量单克隆抗体,定名为G8511。     

抗鼻咽癌单克隆抗体FIO的制备

单克隆抗体技术为寻找鼻咽癌相关抗原提供了新的途径。尽管专一性的抗鼻咽癌单抗迄今尚未获得,但在基础及临床研究方面有应用价值的抗体己有不少报道。最近,我们用CNE_2细胞和鼻咽癌组织匀浆为免疫原经脾脏加强免疫后利用单克隆抗体技术获得的F 10单抗,用ABC免疫组化方法检测52例鼻咽癌组织冰冻切片,阳性率为100％,检测鼻咽癌外的其他组