5-炔基-2′-脱氧尿苷的合成及其对掺入到寡核苷酸中的影响

目的为寻找具有较好反义活性的药物 ,设计并合成了一类 2′ 脱氧尿苷 5 位修饰的寡核苷酸。方法以 5′ O (4,4′ 二甲氧三苯甲基 )脱氧碘苷为起始原料 (Ⅰ ) ,用双 (三苯基膦 )氯化钯和碘化亚铜偶合末端炔烃 ,得到一系列相应的 5 炔基脱氧尿苷 (Ⅱ )。化合物Ⅱ的 3′ 位经 (2 氰乙基N ,N 二异丙基 )氯化亚磷酰胺缩合后 ,应用标准固相DNA合成法掺入到寡核苷酸中。结果共合成了 4条 2′ 脱氧尿苷 5 位带炔基修饰的寡核苷酸 ,考察了它们的杂交性质 ,测定了与互补DNA的解链温度Tm 值。结论此类修饰的寡核苷酸与对照的天然寡核苷酸杂交亲和力有一定的提高 ,其中丙炔基修饰的寡核苷酸解链温度Tm 值上升约 2 2℃。     

N4-烷基-5-甲基-2''''-脱氧胞苷的合成及其掺入到寡核苷酸中对杂交亲和力的影响

目的为寻找具有较好反义活性的药物，设计并合成脱氧胞苷5-甲基-N^4-烷基修饰的寡核苷酸。方法以胸苷为起始原料，合成了一系列N^4-烷基取代的5-甲基-5’-O-（4，4＇-二甲氧三苯甲基）-2’-脱氧胞苷-3’-O-（2-氰乙基-N，N-二异丙基）氨基亚磷酸酯，并把它们掺入到寡核苷酸中。结果与结论共合成了4条5-甲基-N^4-烷基修饰的寡核苷酸，考察了它们的杂交性质，测定了它们与互补DNA的解链温度Tm值。脱氧胞苷的5-位甲基取代物能够增加寡核苷酸双链的稳定性，而N^4-位的修饰则使双链稳定性下降。     

N~4-烷基-5-甲基-2′-脱氧胞苷的合成及其掺入到寡核苷酸中对杂交亲和力的影响

目的为寻找具有较好反义活性的药物,设计并合成脱氧胞苷5-甲基-N4-烷基修饰的寡核苷酸。方法以胸苷为起始原料,合成了一系列N4-烷基取代的5-甲基-5′-O-(4,4′-二甲氧三苯甲基)-2′-脱氧胞苷-3′-O-(2-氰乙基-N,N-二异丙基)氨基亚磷酸酯,并把它们掺入到寡核苷酸中。结果与结论共合成了4条5-甲基-N4-烷基修饰的寡核苷酸,考察了它们的杂交性质,测定了它们与互补DNA的解链温度Tm值。脱氧胞苷的5-位甲基取代物能够增加寡核苷酸双链的稳定性,而N4-位的修饰则使双链稳定性下降。     

含亚甲基缩醛键的寡脱氧核苷酸的合成及杂交性质的初步研究

目的本文设计合成了一类新型混合骨架的寡脱氧核苷酸(MBO)。方法3′-O-(二苯膦酰氧)甲基缩醛核苷(1)在三甲基硅三氟甲磺酸酯(TMSOTf)条件下,与3′-位保护的脱氧核苷(2或6)缩合。得到的二聚(3)或三聚体(7)的5′-位经4,4′-二甲氧三苯甲基(DMTr)保护,3′-位与(2-氰乙基N,N-二异丙基)氯化亚磷酰胺缩合,然后应用标准固相DNA合成法掺入到寡核苷酸中。结果本文合成了6条带亚甲基缩醛键的寡核苷酸(ODN-II～ODN-VII),考察了它们的杂交性质,测定了与互补DNA的解链温度T_m值。结论此类寡核苷酸平均每个亚甲基缩醛键的修饰,解链温度T_m值下降约0.8～1.2 ℃,杂交亲和力与对照的天然磷酸二酯键的寡核苷酸相当。     

钯—铜催化偶合碘苷与末端炔烃的反应

经保护的5－碘脱氧尿苷与末端炔烃以二甲基甲酰胺作为溶剂,用双9三苯基膦）氯化钯和碘化亚铜进行偶合得到相应的5－（炔－1－基）脱氧尿苷,收率：85－92％。另外,5－碘脱氧尿苷与2分子的丙炔酸甲酯反应得到一个新化合物4－O－（反式－丙烯酸甲酯－1－基）－5－（丙炔酸甲酯－1基）－脱氧尿苷     

DNA阵列芯片上的DNA二聚体并行热力学研究及其在SNP基因分析中的应用

目的用DNA阵列芯片进行SNP的探测。方法根据DNA二聚体的热力学性质,在DNA阵列芯片上测定其解链曲线,用数学的方法获得其解链温度(Tm)值,再根据Tm值进行SNP分析。结果用特殊设计的寡聚DNA阵列芯片进行并行热力学研究,测得其DNA二聚体的解链曲线,计算出Tm值,并进行了SNP分析。结论可用DNA阵列芯片成功地进行高通量的SNP基因分析。     

N^4—烷基—5—甲基—2‘—脱氧胞苷的合成

3‘,5‘-O-二苯甲酰胸苷在三氯氧磷存在的条件下与1,2,4-三唑缩合可得到1-（3‘,5‘-O-二苯甲酰-β-D-呋喃核糖）-4-（1,2,4-三唑-1-基）-5-甲基-嘧啶-2-（1H）-酮,再用不同的胺取代核苷C4上的三唑基团可制备一系列全新的N^4-烷基取代的5-甲基胞苷。方法简便,收率高。     

新的前列腺癌治疗剂17—（5‘—异恶唑基）雄甾—4，16—二烯—3—酮合成方法的改进

17-(5‘-异恶唑基）雄甾－4，16－二烯－3－酮（4，L－39）是最有希望的P45017α和5α－还原酶的双重抑制剂，对前列腺癌及前列腺肥大具有潜在的治疗作用。对其合成路线进行改进，收率极大提高。首先，Claisen缩合物2用羟胺在乙醇中环和得到纯5‘－异恶唑3a，用Swern氧化反应直接氧化3a，然后在在酸中异构化后得到L－39（4）。或者，化合物2在无水甲酸中与羟胺环和得到3－甲酯物（6），后者以改良奥氏氧化法直接氧化生成4－烯－3－酮物（4）。     

酶法合成2’—脱氧—5—氟尿苷

本文采用大肠杆菌核苷磷酸化酶，以5-氟尿嘧啶（FU）、2’-脱氧尿苷（dU)和磷酸盐为底物酶法合成2’-脱氧-5-氟尿苷，实验结果表明，含10mmol/L dU、30mmol/L FU、10-30mmol/L磷酸盐的混合物加入5%培养24h的大肠杆菌湿菌体于pH7.0反应3h，底物dU的转化率可达45.9%。     

1，6—亚己基二缩水甘油酸酯的不对称合成

光学活性的缩水甘油酸钾（4）是不对称合成的重要试剂,在设计和合成新的神经肌肉阻断剂过程中,用1,6－亚己基二甲磺酸酯和（4）（1：2）在18－冠醚－6和HMPA中反应,分别制得光学活性的对称1,6－亚己基缩水甘油酸酯（6b)和（6c),不对称的1,6－亚己基缩水甘油酸酯（6a)的合成分二步进行,首先用（4a)和1,6－亚己基二磺酸酯（1：1）和TEBA和二氯甲烷中反应制得（5）,（5）再和（4b)在18－冠醚－6和HMPA中反应制得（6a)。在合成过程中,若将（5)和（4b)在TEBA和二氯甲烷中反应,除得到（6a)外,还得到一个手性的氯代亚己基单缩水甘油酸酯（7）。     

2，5—二甲氧基—4—丙硫基—β—硝基苯乙烯的合成方法改进

报道了2，5－二甲氧基－4－丙硫基－β－硝基苯乙烯的合成，以2，5－二甲氧基苯甲醛为起始原料，经溴代、丙硫醇取代及与硝基甲烷缩合反应，合成了2，5－二甲氧基－4－丙硫基－β－硝基苯乙烯。     

HCMV蛋白酶抑制剂的研究(Ⅱ)杂环类抑制剂的设计与合成

目的 人巨细胞病毒（HCMV）是一种普遍存在的机会病原体。HCMV蛋白酶在装配蛋白产生和病毒壳体成熟中具有重要作用，抑制基作用可产生抗疱疹病毒药物。对杂环类HCMV蛋白酶抑制剂进行研究。方法 根据HCMV蛋白酶和拟肽类抑制剂复合物的晶体结构数据，借助计算机辅助药物设计手段，运用Docking(分子对接）技术，从MDDR库中筛选挑出35个预计可能与HCMV蛋白酶相互较好结合的杂环化合物。首先选择目标物2-（香豆素-3-基）-5-氟-4H-3,1-苯并恶嗪-4-酮（I）和3-（2-羟基-4-甲基-苯甲酰基）-2-（4-甲氧基-苯基）-2，3-二氢-异吲哚-1-酮（Ⅱ）为合成和检验对象。结果 设计并完成了目标物I和Ⅱ的合成路线。结论 所得产物的结构经MS，IR，^1H-NMR及元素分析确证与目标物I和Ⅱ相符。     

8—氯腺苷抗肿瘤作用研究

（Sp)-8-氯腺苷3‘,5‘-环磷酸辛酯（OCC）是8－氯腺苷3‘,5‘－环磷酸的新衍生物，对人白血病细胞HL－60有很强的抑制作用和诱导分化作用，用细胞流式光度术发现OCC阻断HL－60细胞周期于G1期，OCC对HL－60－细胞DNA合成有显著抑制作用。但不影响RNA和蛋白质合成。OCC能激活HL－60细胞浆中蛋白激酶A，8－氯腺苷是OCC的活性代谢产物，能在体外和体内实验中明显抑制肿瘤的生长。8－氯腺苷也能诱导人胃癌MGc80-3细胞分化和人T淋巴母细胞MOTL－4的凋亡，本文讨论了8－氯腺苷抗肿瘤作用的机理。     

1,6-亚己基二缩水甘油酸酯的不对称合成(英)

光学活性的缩水甘油酸钾（4）是不对称合成的重要试剂。在设计和合成新的神经肌肉阻断剂过程中,用1,6-亚己基二甲磷酸酯和（4）（1：2）在18-冠醚-6和HMPA中反应,分别制得光学活性的对称1,6-亚己基缩水甘油酸酯（6b）和（6c）。不对称的1,6-亚己基二缩水甘油酸酯（6a）的合成分二步进行,首先用（4a）和1,6-亚己基二碳酸酯（1：1）在TEBA和二氯甲烷中反应制得（5）,（5）再和（4b）在18-冠醚-6和HMPA中反应制得（6a）。在合成过程中,若将（5）和（4b）在ThBA和二氯甲烷中反应,除得到（6a）外,还得到一个手性的氯代亚己基单缩水甘油酸酯（7）。     

新霉胺类似物的合成与RNA结合和生物活性评价

为了提高新霉胺对16S rRNA的亲和力，合成了Ⅱ环5位修饰的新霉胺类似物。以新霉素B为原料，经水解，保护，亲核取代，脱保护，叠氮还原多步反应得到氨基或氨基链修饰的新霉胺类似物。用表面等离子共振法测定了所合成的化合物与大肠杆菌（E.coli．）核糖体A位点rRNA（16S RNA）的相互作用。合成了6个Ⅱ环5-位修饰的新霉胺类似物，发现Ⅱ环5位氨基链修饰可以增强化合物对16S RNA的亲和力，其中一些化合物在10^-3M有体外细菌抑制活性。在新霉胺的Ⅱ环5位引入氨基或脂肪胺可以增加与16S RNA的亲和力。Ⅱ环5位上羟基的构型改变对于药物／16S RNA复合物稳定性的影响较低。     

中性胞苷脂材包载部分磷硫代反义核酸的生物活性评价及作用机制初探

目的反义核酸是一段与靶基因互补的单链寡核苷酸序列,通过与细胞内核酸杂交成双链结构抑制靶基因转录和翻译过程,从而调控基因表达。然而,无载体递送反义核酸跨膜能力较差且寡核苷酸磷酸二酯键易被核酶水解。为提高反义核酸入胞效率,并对活性作用的发挥进行进一步优化,本课题主要从寻求高效低毒的载体系统及优化修饰策略入手对其进行研究。方法本研究利用中性胞苷脂材(DNCA)混合阳离子脂质体(CLD)对反义核酸G3139包载递送,结合部分位点磷硫代(PS)修饰方式,考察不同修饰位点的序列活性与作用机制。结果与结论采用混合脂材包载能显著提高反义核酸G3139的抗MCF7/ADR细胞增殖能力,并发现9～16位(5′-端计算)区域内多位点(≥4)修饰物抗肿瘤活性较高。此外,G3139部分位点PS修饰物有效激活RNase H降解靶mRNA,并降低杂交双链Tm(DNA的熔解温度)值。结合转录组学与蛋白组学研究,确证减少PS修饰位点数可以降低反义核酸与非特异性靶标结合,从而降低毒副作用。     

新化合物 A-失碳-17β-羟基-17α-乙炔基-Δ3(5),9(10)-雌甾二烯-2-酮的合成

报道新化合物A-失碳-17β-羟基-17α-乙炔基-Δ^3(5),9(10)-雌甾二烯-2-酮2的合成。文中探讨了用炔钾粗品对A-失碳-Δ^3(5),9(10)-雌甾二烯-2，17-二酮１和Ａ-失碳-６β，１９-环氧-Δ³-雄甾-2，17-二酮3的选择性炔化，分别得标题化合物2（44%）及Ａ-失碳-17β-羟基-17α-乙炔基-６β，１９-环氧-Δ³雄甾-2-酮４（６５％），４经还原性破开环氧、去羟甲基和去醋酰氧基合成了标题化合物２。四步总收率为３４％。     

3—吡唑烷酮类的结构与抗惊活性关系的研究

对以前合成的1－取代和1，5－二取代－3吡唑烷酮类化合物应用Hansch方法研究结构与抗惊活性的定量构效关系。相关分析表明：1，5－二取代－3－吡唑烷酮类化合物的1－取代基为n－丙基而不是苄基，1－位和5－位取代基的疏水性常数和（∑π）等于4.5时（最适宜）具有最强的抗惊活性。在此相关分析的基础上，合成了11个5－取代和1－正丁基－5－取代－3－吡唑烷酮类化合物。药理测定结果表明Hansch分析的预测结果是相当正确的。将此11个化合物包括在一起的Hansch分析结果与最初得到的结果几科一样。     

手性二价钌络合物催化不对称转移氢化合成左旋-(S)-1-(2—呋喃基)乙醇

在手性二价钌络合物（6）催化下经不对称转移氢化合成了左旋－（S）－1－（2－呋喃基）乙醇（8）。催化剂（6）由均三甲苯经Birch还原后，与三氯化钌反应转化成二聚均三甲苯二氯化钌（3），再与（1S，2S）－N－（对甲苯磺酰基）－二苯乙二胺（5）络合而得。     

5’（S）-1，1-亚乙二氧基-5-氧代-（5’-乙基-5’-羟基-2’H,5’H，6＇H-6-氧代吡喃）-[3’-4’-f]-△^6（8）-四氢中氮茚的合成研究

目的合成20（S）-喜树碱类抗肿瘤药物关键中间体5’（S）-1，1-亚乙二氧基-5-氧代-（5’-乙基-5，-羟基-2’H，5＇H，6＇H-6-氧代吡喃）-[3’，4＇-f]-△^6（8）-四氢中氮茚。方法以1，1-亚乙二氧基-5-氧代-（5’-乙基-2’H，5＇H，6＇H-6-氧代吡喃）-[3’，4＂-f]-△^6（8）-四氢中氮茚为原料，经碘催化氧化、动力学拆分、碱水解3步得到光学纯目标化合物。结果与结论该合成路线操作简单，总收率15．7％，ee值96％。