红藻氨酸致痫大鼠海马突触素的表达变化及辛醇的干预作用

目的 观察红藻氨酸(kainic acid,KA)致痫大鼠海马突触素(synaptophysin,SYP)表达的动态变化及辛醇的干预作用.方法 将65只健康雄性SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、辛醇干预组、二甲基亚砜(DMSO)组,空白对照组5只,余各组20只.采用KA注射于大鼠右侧杏仁核方法制备癫痫模型.造模前30 min给予大鼠腹腔注射辛醇进行干预,并观察辛醇干预前后大鼠行为学改变,采用免疫组化检测造模后不同时间点海马区SYP的表达水平.结果 辛醇干预组大鼠出现湿狗样摇动(WDS)的潜伏期明显长于模型组(P＜0.01),Patel评分显著低于模型组(P＜0.01);模型组大鼠海马区SYP的表达于造模后1周逐渐升高,3周时达高峰,4周后开始下降;辛醇组大鼠海马区SYP的表达在各时间点均明显低于模型组(P＜0.01).结论 辛醇可抑制KA致痫后大鼠海马区SYP表达的增高,具有明显的抗痫效应,提示辛醇抗痫机制可能与抑制SYP表达有关.     

红藻氨酸诱导大鼠癫痫发作的电生理机制研究

目的　探讨红藻氨酸 ( KA)诱导大鼠复杂部分性癫痫发作的 EEG特点以及可能的电生理起搏点位置。方法　在立体定位指引下 ,将 EEG记录电极植入 1 2只大鼠双侧海马、额叶皮质或杏仁核中 ,其中 8只为实验组 ,4只为对照组。手术后 1周在大鼠清醒状态下 ,连续描记 KA或盐水注射后 EEG 1 2 0 min,观察 EEG波形、波幅以及频率的变化特点并记录每次电发作的起搏点位置。结果　 ( 1 ) KA注射后大鼠 EEG表现出多种形式的放电波形 ,典型波形有单棘波、多棘波、多相棘波、正相棘波、棘节律、节律性慢波、棘慢波等。 ( 2 )大鼠在凝视发作以及自动症发作时海马、杏仁核和额叶皮质均有异常放电。 ( 3) KA注射后大鼠电发作起搏点不固定。 ( 4 )各导放电频率多数情况下一致 ,偶有不一致现象。 ( 5 )存在亚临床放电。结论　 ( 1 ) KA注射后大鼠 EEG表现为多种形式的电发作活动 ;( 2 )大鼠在复杂部分性发作过程中不仅有边缘系统参与 ,也有边缘外额叶皮质参与 ;( 3)KA模型中 ,电发作起搏点不固定 ,KA注射后大鼠脑内可能存在一个异常的神经元网络 ,在网络中存在放电不均衡现象。     

红藻氨酸诱导大鼠癫痫发作脑组织HSP70表达的免疫组化？…

目的探讨热休克蛋白（ＨＳＰ）７０在癫痫发作后的表达及作用。方法 用免疫组化免疫免印迹分析法观察红藻氨酸诱导大鼠癫痫发作后ＨＳＰ７０的表达及其动态演变过程。     

缝隙连接蛋白32(CX32)在癫痫发病中的作用

目的初步探讨由CX32组成的缝隙连接与癫痫之间的关系。方法利用免疫组织化学方法、West-ernblot方法测定KA致痫后大鼠不同脑区、不同时程的CX32的分布及表达。结果KA致病后大鼠的大脑皮层及海马均有CX32阳性表达。KA注射致痫后的早期CX32的表达明显增强,第3天达到高峰,中、后期其表达逐渐减弱,表达量也逐渐减少。上述变化在海马比皮层明显。结论神经元上的由CX32组成的GJ可能在癫痫的始动和发生上有一定的作用,但在长期的、慢性的癫痫过程中其对癫痫的发生和发展的作用是逐渐减弱的。     

红藻氨酸所致癫痫大鼠海马阿片受体表达的动态观察

目的研究红藻氨酸癫痫大鼠海马神经元阿片受体表达动态变化。方法利用红藻氨酸颈部皮下注射,诱发大鼠癫痫发作,用Westernblotting方法,检测不同时间段大鼠海马神经元阿片受体表达情况。结果在诱发4,5级癫痫发作后1周后海马mu型阿片肽受体（MORs）表达开始上调,至4周时达到高峰。结论红藻氨酸诱导的癫痫发作促进海马MORs表达,这种变化对进一步深入了解海马mu型阿片肽受体介导大鼠癫痫发作敏感性形成具有一定的意义。     

神经生长因子对红藻氨酸诱导癫痫发作大鼠海马神经细胞凋亡的影响

目的　探讨外源性神经生长因子 (NGF)对癫痫发作所致海马神经细胞凋亡有无抑制作用。方法　采用红藻氨酸 (KA)诱导癫痫大鼠模型 ,以原位末端标记法 (TUNEL)标记 DNA片段 ,检测凋亡细胞在大鼠海马CA1区的动态变化及 NGF对其的影响。结果　海马 CA1区凋亡细胞在实验 2 4 h出现 ,4 8h明显增多 ,于 72h达高峰 ,7d时最少。给予 NGF脑室内注射后 ,在各相应时间点凋亡细胞数均明显减少 (P<0 .0 1)。结论　外源性 NGF能抑制癫痫发作所致的海马神经细胞凋亡 ,NGF对癫痫脑损伤有保护作用。     

辛醇预处理对红藻氨酸诱导的癫疒间大鼠海马神经元凋亡和胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的观察缝隙连接阻断剂辛醇预处理对红藻氨酸(KA)诱导的癫疒间大鼠海马神经元凋亡和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。方法 160只雄性SD大鼠随机分为KA组、辛醇组、生理盐水(NS)组和二甲基亚砜(DMSO)组,应用KA右侧杏仁核注射制作癫疒间大鼠模型;制模前30 min辛醇组腹腔注射辛醇溶液;制模后3 h、6 h、12 h、24 h和7 d应用原位末端标记(TUNEL)法和免疫组化染色法分别检测各组大鼠海马CA3区TUNEL和GFAP阳性细胞数。结果 KA组制模后6 h海马CA3区有TUNEL阳性细胞表达,并逐渐增多,7 d达高峰;辛醇组制模后在6 h～7 d TUNEL阳性细胞数明显少于KA组(均P<0.01);KA组海马CA3区GFAP阳性细胞数随时间而逐渐增多,各时间点明显多于辛醇组(均P<0.01)。结论辛醇神经保护作用的机制可能与抑制细胞缝隙连接间通讯,切断凋亡信号传播,以减少神经元凋亡有关。     

辛醇对红藻氨酸致痫大鼠的保护作用及其对海马组织连接蛋白43的影响

目的 研究辛醇对红藻氨酸(kainic acid,KA)致痫大鼠海马组织连接蛋白43(connexin43,CX43)表达的影响及其抗痫效应.方法 采用行为学评分评价KA致痫及辛醇腹腔注射后致痫大鼠的痫性发作程度和潜伏期,应用免疫组织化学方法检测海马CX43的表达.结果 KA组CX43的表达较正常对照组明显增高(P<0.01);辛醇组CX43的表达也较正常对照组明显增高(P<0.01),但较KA组明显下降.致痫后3h内辛醇组痫性发作评分较KA组明显下降(P<0.01),潜伏期明显延长(P<0.01).结论 反复痫性发作后CX43的表达增加.辛醇能够减少CX43表达,降低痫性发作的评分,延长痫性发作的潜伏期,具有较明显的抗癫痫效应.

Abstract：

Objective To study the effects of octanol on the expression of connexin 43 in the brain of epilepsy-rats induced by kainic acid and the anti-epileptic effect of octanol. Methods The epilepsy-rats induced by kainic acid and treated by octanol was assessed by behavior score. The expression of CX43 in the hippocampal tissue was measured by immuno-histochemistry. Results The expression of CX43 in the group of epilepsy-rats induced by kainic acid was higher than that in control group( P <0. 01) ;the expression of CX43 in the group treated by octanol was higher than that in control group( P <0. 01) ,but lower than the group of epilepsy-rats induced by kainic acid;the Patel score of the rats in the group treated by octanol was lower than the group only induced by kainic acid within 3 hours after the induction (P <0. 01) ,and the latency was longer (P <0.01). Conclusions After the epileptic seizure repeatedly, the expression of CX43 was upregulated. Octanol could reduce the expression of CX43, decrease the Patel score,and extend the latency of epileptic seizure. It has obviously anti-epileptic effect.     

辛醇预处理对红藻氨酸诱导的癫(癎)大鼠海马神经元凋亡和胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的 观察缝隙连接阻断剂辛醇预处理对红藻氨酸(KA)诱导的癫(癎)大鼠海马神经元凋亡和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响.方法 160只雄性SD大鼠随机分为KA组、辛醇组、生理盐水(NS)组和二甲基亚砜(DMSO)组,应用KA右侧杏仁核注射制作癫(癎)大鼠模型;制模前30 min辛醇组腹腔注射辛醇溶液;制模后3h、6h、12 h、24 h和7d应用原位末端标记(TUNEL)法和免疫组化染色法分别检测各组大鼠海马CA3区TUNEL和GFAP阳性细胞数.结果 KA组制模后6h海马CA3区有TUNEL阳性细胞表达,并逐渐增多,7d达高峰;辛醇组制模后在6 h～7 d TUNEL阳性细胞数明显少于KA组(均P＜0.01);KA组海马CA3区GFAP阳性细胞数随时间而逐渐增多,各时间点明显多于辛醇组(均P＜0.01).结论 辛醇神经保护作用的机制可能与抑制细胞缝隙连接间通讯,切断凋亡信号传播,以减少神经元凋亡有关.     

癫痫大鼠海马缝隙连接蛋白43的表达及生胃酮的保护作用

目的研究癫痫大鼠海马星形胶质细胞缝隙连接蛋白43(Connexin43,CX43)表达及缝隙连接蛋白阻滞剂生胃酮对其表达的影响。方法用免疫组化法检测癫痫发作后各时间点大鼠海马星形胶质细胞CX43免疫反应阳性表达。同时观察致痫前给予不同剂量生胃酮对大鼠海马星形胶质细胞CX43免疫反应阳性表达的影响。结果对照组大鼠海马星形胶质细胞CX43可见少量散在表达。癫痫组大鼠海马星形胶质细胞CX43表达1h即可见增加,并随时间延长而增加,72h达高峰。生胃酮各组大鼠海马星形胶质细胞CX43免疫反应阳性表达较同一时间点癫痫组低(P<0.01),且与生胃酮剂量呈负相关(P<0.01)。结论癫痫大鼠海马缝隙连接蛋白43的表达与癫痫发病机制密切相关。缝隙连接蛋白阻滞剂生胃酮影响缝隙连接蛋白43表达,具有肯定的神经保护作用。     

红藻氨酸诱导癫(癎)发作大鼠海马星形胶质细胞C-FOS基因表达的研究

目的研究癫发作大鼠海马星形胶细胞C-FOS基因表达的变化,探讨其对癫发作的维持与复发的影响。方法将83只成年雄性SD大鼠随机分为实验组58只,对照组25只。实验组在海马CA3区注射红藻氨酸(Kainicacid,KA)建立癫模型,对照组在相同部位注射等量生理盐水。利用免疫组织化学双重染色技术,分别在癫发作后1h、3h、6h、12h和24h观察大鼠海马星形胶质细胞C-FOS基因的表达。结果与对照组大鼠比较,癫模型鼠海马CA1区CFAP/C-FOS双标记阳性细胞百分率于癫发作后1h(12.70±0.03)、3h(17.10±0.05)、6h(24.92±0.04)明显升高(P<0.01),在6h达到高峰,在12h下降,但是仍较对照组高(10.71±0.06;1.59±0.02,P<0.01),在24h下降至对照组水平(2.00±0.02;2.08±0.03,P>0.05)。结论KA诱导大鼠癫发作,导致海马星形胶质细胞C-FOS基因相对持续的高表达,从而激活星形胶质细胞,产生高致性的病理环境,可能是癫发作的维持以及复发的病理生理机制之一。     

川芎嗪对大鼠前脑缺血再灌注后MMP-9的影响

目的观察大鼠前脑缺血再灌注后MMP-9的变化及川芎嗪对其表达的影响。方法用夹闭双侧颈总动脉30min的方法,制备缺血再灌注大鼠模型,应用明胶酶谱法(SDS-PAGE enzymograph)测各组脑组织不同时间点MMP-9的表达。结果假手术组各个时间段大鼠前脑组织少量表达MMP-9;缺血再灌注6h组大鼠脑组织即有MMP-9的表达,缺血再灌注24h组、48h组大鼠脑组织大量表达MMP-9;缺血再灌注3d、5d组大鼠脑组织亦可见MMP-9的表达,但较缺血再灌注24h、48h组相比MMP-9表达减少;除川芎嗪6h组不具统计学意义外,其它时间段川芎嗪治疗组与缺血再灌注组相比MMP-9含量均降低。结论脑缺血再灌注后MMP-9的表达可上调;川芎嗪对大鼠前脑缺血再灌注后对MMP-9的表达有干预作用。     

α-细辛醚对KA致癫痫大鼠空间学习记忆功能的影响

目的探讨不同浓度的α-细辛醚(α-asarone)对侧脑室注射红藻氨酸(kainic acid)致癫痫大鼠空间学习记忆功能的影响。方法将50只雄性SD大鼠随机分为两组,分别为正常对照组(n=10)和癫痫模型组(n=40)。模型组再随机分为4组,每组10只,分别为KA组、α-细辛醚低浓度组(6mg/kg)、中浓度组(12mg/kg)和高浓度组(24mg/kg)。α-细辛醚组连续给药10d,每天经腹腔注射给药一次。分别在24h、10d、30d观察各组大鼠在斜板试验、悬吊试验、水迷宫试验中行为运动的改变。结果 KA组大鼠的转体能力、悬吊能力和空间学习记忆能力较正常对照组明显下降(P<0.05),α-细辛醚低浓度组次之,α-细辛醚中、高浓度组与正常对照组比较无明显差异(P>0.05)。结论 KA癫痫大鼠存在空间学习记忆能力障碍,α-细辛醚可部分改善癫痫大鼠的空间学习记忆能力。     

海人酸颞叶癫痫大鼠海马组织中细胞骨架蛋白的差异表达

目的 研究海人酸颞叶癫痫大鼠海马组织中差异表达的细胞骨架蛋白,为阐明癫痫的发病机制提供线索,为新型抗癫痫药物的研发提供分子靶点.方法 利用双向荧光差异凝胶电泳(2D-DIGE)、DeCyder分析软件、基质辅助激光解吸附电离串联飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF-MS)对海人酸诱导颞叶癫痫大鼠海马组织中的差异蛋白进行分离、分析及鉴定.结果 有5个差异蛋白点被鉴定为3种细胞骨架蛋白,其中微管蛋白α-1B和胶质纤维酸性蛋白表达上调,埃兹蛋白表达下调.结论 细胞骨架蛋白表达变化导致的细胞骨架受损可能与癫痫的发生发展相关,可能成为抗癫痫治疗新靶点.     

辛伐他汀抑制海人酸模型大鼠癫痫发作

目的 研究辛伐他汀(Sim)抑制海人酸(KA)诱导的大鼠抽搐发作向颞叶癫痫(TLE)发展的长期影响.方法 将大鼠分为健康对照组、盐水治疗癫痫组、Sim治疗癫痫组.KA诱导癫痫半小时后,Sim灌胃.(1)大鼠抽搐后3d评估了细胞因子(TNF-α、IL-1β、IL-6)的水平变化.(2)在4-6个月观察海马胶质细胞增生、神经元死亡、苔状纤维发芽(MFS)和大鼠癫痫发作情况.结果 Sim降低了TNF-α、IL-1β水平,减轻了胶质细胞增生和神经元死亡,并抑制了海马MFS和癫痫发作.结论 Sim具有抑制KA诱导的大鼠急性抽搐发作向TLE发展的效能.