HYAL2基因DNA甲基化水平可用于甲状腺良恶性肿瘤的鉴别诊断

目的通过比较甲状腺良恶性肿瘤组织样本中HYAL2基因CpG位点甲基化水平的差异，评估其作为甲状腺癌鉴别诊断分子标志物的潜在价值。方法采用飞行时间质谱检测190对甲状腺乳头状癌(PTC)病例和年龄、性别配对的甲状腺腺瘤中HYAL2基因启动子区域CpG位点的甲基化水平。采用免疫组化检测另外55对匹配的甲状腺良恶性肿瘤患者的HYAL2蛋白表达水平。Logistic回归分析用于评估甲基化水平每降低10% 与早期PTC之间的关联并计算比值比(OR)。受试者工作特征曲线及曲线下面积(AUC)用于评估HYAL2基因特定CpG位点甲基化水平改变作为分子标志物的效能。结果HYAL2_CpG_3位点低甲基化与早期PTC显著相关(OR=1.51，P=0.001)，且该关联在Ⅰ期PTC中依旧显著(OR=1.42，P=0.007)。年龄分层分析显示HYAL2_CpG_3甲基化水平降低与早期PTC关联在年龄小于50岁的人群中显著高于高年龄组(OR：1.89 vs 1.37；P < 0.05)，且低年龄组人群中AUC最高，为0.787。免疫组化结果显示早期PTC中HYAL2蛋白表达水平显著高于甲状腺良性肿瘤。结论HYAL2基因启动子区域甲基化水平改变与早期PTC的关联，并为DNA甲基化改变作为甲状腺良恶性肿瘤鉴别诊断的标志物提供了新思路。     

二甲双胍和LPS通过转录因子RUNX2调控NFATc2基因的转录

目的构建人T细胞活化核因子C2（NFATc2）基因启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-NFATc2-promoter，检测其转录活性，探究二甲双胍和脂多糖对其转录活性的影响。方法利用UCSC网站查找人NFATc2基因的启动子序列并设计上下游引物PCR扩增人NFATc2基因启动子片段；用限制性内切酶Kpn Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切质粒pGL3-basic，将人NFATc2基因启动子片段插入到pGL3-basic质粒，重组质粒命名为pGL3-NFATc2-promoter。将pGL3-NFATc2-promoter与内参质粒pRL-TK共转染293F细胞，检测其荧光素酶活性。同时构建人NFATc2基因启动子不同片段长度的报告基因载体并进行荧光素酶活性检测，分别给予不同浓度的二甲双胍和脂多糖处理24 h后检测二甲双胍和脂多糖对NFATc2转录活性的影响。进一步突变NFATC2基因启动子上转录因子RUNX2的结合位点探究二甲双胍和脂多糖对NFATc2的转录调控作用。结果研究成功构建了不同片段长度（2170、2077、1802、1651、1083、323 bp）的人NFATC2基因启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-NFATc2-promoter，经酶切及测序鉴定完全正确。将不同片段长度的pGL3-NFATc2-promoter转染到293F细胞，发现pGL3-1651 bp具有最高转录活性，荧光素酶活性约为pGL3-2170 bp的3.3倍（1.8433±0.1457 vs 0.5467±0.0850）。中浓度（5 mmol/L）和高浓度（10 mmol/L）的二甲双胍分别上调pGL3-1651 bp的转录活性多达2.5、3倍（1.3467±0.1601 vs 0.8867±0.0321，1.8124±0.2771 vs 0.8867±0.0321）。不同剂量的脂多糖均能上调pGL3-1651 bp的转录活性不低于1.6倍（1.4813±0.0616 vs 0.8867±0.0321）。突变pGL3-1651 bp上的RUNX2结合位点后，二甲双胍和脂多糖上调的pGL3-1651 bp转录活性均受到抑制，转录活性下降（2.1667±0.1527 vs 1.233± 0.1155；2.3667±0.2887 vs 1.1333±0.3786）。结论pGL3-NFATc2-promoter在293F细胞中能被转录激活，并证实脂多糖和二甲双胍转录激活pGL3-NFATc2-promoter依赖于转录因RUNX2。     

JNET Type 2B在结直肠肿瘤内镜诊断中的应用价值

目的探讨影响JNET 2B分型预测病变组织病理学类型准确性的因素。方法收集2018年7月~2021年4月南方医科大学南方医院行窄带光成像放大内镜检查诊断为JNET 2B型的261例结直肠病变资料，分析影响JNET 2B型诊断病变病理性质的因素，包括病灶形态、大小、位置及PP分型。结果纳入的261个病变包括低级别上皮内瘤变91例（34.9%），高级别上皮内瘤变132例（50.6%），黏膜下浅层浸润癌13例（5.0%），黏膜下深层浸润癌25例（9.6%）。JNET 2B病理预测符合率为55.6%（145/261）。病灶的形态学分类及大小与JNET 2B分型预测病变组织病理学类型准确性的差异有统计学意义（P < 0.001），PP分型对JNET 2B预测病变组织病理学类型准确性的差异具有统计学意义（P < 0.001）。结论结直肠病灶的形态学分类和病灶大小会对JNET 2B分型预测病变组织病理学类型准确性产生影响，联合JNET分型和PP分型能提高病变病理组织学预测的准确性。     

CD40LG是与浸润性乳腺癌肿瘤微环境中免疫和基质相关的预后标志物

目的旨在寻找与浸润性乳腺癌（BRCA）发生相关的肿瘤微环境（TME）相关基因，以预测其预后并为临床提供治疗靶点。方法从癌症基因组图谱（TCGA）数据库中检索到RNA转录组数据和临床相关数据。利用ESTIMATE算法计算基质评分和免疫评分。然后通过取交集筛选出差异表达基因（DEGs）。利用蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络和单变量COX回归分析来确定DEGs中的核心基因。选取一个核心基因进行GSEA集富集分析和CIBERSORT分析，以分别区分核心基因表达的功能和肿瘤浸润免疫细胞（TICs）的比例。最终用Western blot和qRT-PCR对CD40LG的表达水平进行临床验证。结果从TCGA中提取了1222个样本（124个正常样本和1098个肿瘤样本）进行分析，共获得了487个DEG。这些基因主要富集在与免疫相关的途径中。进一步的交叉分析揭示了11个关键基因，包括CD40LG、ITK、CD5、CD3E、SPN、IL7R、CD48、CCL19、CD2、CD52和CD2711，这些基因被证明与乳腺癌TME状态相关。挑选了CD40LG进行进一步研究，结果表明，CD40LG高表达BRCA患者的总生存期（OS）比低表达BRCA患者更长（P=0.002），并且CD40LG表达在TNM分期、肿瘤大小方面的差异也具有统计学意义（P＜0.05）。GSEA和CIBERSORT分析表明CD40LG的表达与TME中的免疫活性有关。Western blot和qRT-PCR结果显示CD40LG在乳腺癌细胞及癌组织中的蛋白及mRNA表达量均低于乳腺正常细胞及癌旁组织（P＜0.05）。结论CD40LG在TME中高表达与BRCA患者的生存呈正相关，所以CD40LG可能是一种新的用于预后预测的生物标志物。其生物学行为可能促进我们对肿瘤进展的分子机制和靶向治疗的理解。     

烟酰胺-N-甲基转移酶在胃癌中高表达并与预后负相关：基于生物信息学方法

目的探讨烟酰胺-N-甲基转移酶（NNMT）在胃癌中的表达、生物学功能和临床病理学意义。方法运用公共数据库GEO、Oncomine及TCGA分析筛选与胃癌分型和临床预后相关的基因；利用STRING、GSEA、DAVID、Cytoscape等软件分析预测与候选基因相关的分子通路，构建蛋白质相互作用关系网络；通过qRT-PCR分析候选基因在28例胃癌和配对癌旁组织中mRNA的差异表达；CCK8增殖实验、平板克隆形成实验、划痕愈合实验、Transwell小室细胞运动实验等分析NNMT表达对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。结果NNMT在多个数据库分析中呈高表达且与胃癌预后负相关；通路分析显示，NNMT高表达与细胞外基质受体和细胞黏附分子等细胞粘附相关通路以及细胞因子受体等分子通路相关；而NNMT低表达可能与碱基错配修复和核黄素代谢等生物过程相关。蛋白相互作用分析显示，NNMT可能与AURKA等16个差异表达的蛋白存在相互作用关系，且与TAGLN、PTRF、AKAP12、IGF2BP2蛋白存在较高的共表达趋势。在临床组织标本中，qRT-PCR结果显示，胃癌组织中NNMTmRNA的表达明显高于癌旁组织（P < 0.05）。在胃癌细胞系中，NNMT的过表达可显著促进细胞增殖、侵袭和迁移，而NNMT敲除可对细胞增殖、侵袭和迁移产生明显的抑制作用。结论NNMT在胃癌中异常高表达并促进胃癌细胞的增殖、侵袭和转移；NNMT高水平表达与胃癌患者预后呈负相关，提示NNMT可能为胃癌预后相关分子。     

基于癌症基因组图谱数据库结直肠癌免疫细胞浸润预测模型的建立

目的研究结直肠癌组织的免疫细胞浸润与临床预后之间的相关性。方法从癌症基因组图谱(the can-cer genome atlas，TCGA)中提取结直肠癌数据，基于反卷积算法(CIBERSORT)分析评估结直肠癌组织中22种肿瘤浸润性免疫细胞(tumor-infiltrating immune cells，TIICs)的浸润模式，以确定不同TIICs表达程度与5年生存率之间的关联。使用条形图展示结直肠癌样本中TIICs比例，绘制矩阵图分析不同TIICs之间的相关性。结果共从TCGA数据库中提取了473例结直肠癌组织和41个正常对照组织，对比分析表明，结直肠癌组织中各种TIICs比例存在差异。在研究的细胞亚群中，结直肠癌组织中M0、M1和M2巨噬细胞和单核细胞的比例相对较高，而B细胞和中性粒细胞的比例相对较低。TIICs的比例与患者的TNM分期及临床分级显著相关：静息NK细胞、CD8⁺T细胞、浆细胞与T期相关，活化树突状细胞与N期相关，嗜酸性粒细胞、M1巨噬细胞及活化肥大细胞与M期相关，M1巨噬细胞和单核细胞与临床分级相关。生存分析结果显示，活化的树突状细胞与结直肠癌患者的5年生存率呈正相关，幼稚CD4⁺T细胞与5年生存率呈负相关。结论分析结直肠癌患者肿瘤组织TIICs亚群比例具有潜在的临床预后价值，可通过其识别可能从化疗中受益的患者，并预测新药的可能靶点。     

缺血性脑卒中全基因组关联研究提示阳性基因位点与睡眠行为的交互作用

目的探讨睡眠行为(睡眠时长、睡眠效率、入睡时间)和全基因组关联研究(genome-wide association studies, GWAS)提示阳性缺血性脑卒中(ischemic stroke, IS)基因位点与IS风险的关联，以及睡眠-基因交互作用与IS风险的关联。方法基于北京市房山家系队列，在基线对所有研究对象进行问卷调查、体格检查、血生化检测和基因型检测。采用多因素广义线性模型分析睡眠、基因与IS的关联。结果共纳入研究对象4 648人，平均年龄(58.5±8.7)岁，其中IS患者有1 316人。相比于非患者，IS患者睡眠时长≥9 h、睡眠效率 < 80%及入睡时间早于22:00占比更高(P均 < 0.05)。多因素广义线性模型下，未见睡眠时长与IS风险的线性关联(OR=1.04，95%CI：0.99~1.10，P=0.085)。睡眠效率与IS风险呈线性负相关(OR=0.18，95%CI：0.06~0.53，P=0.002)；相比于睡眠效率≥80%，睡眠效率 < 80%的IS风险为其1.47倍(95%CI：1.03~2.10，P=0.033)。相较于在22:00—22:59入睡，入睡时间早于22:00的IS风险是其1.26倍(95%CI：1.04~1.52，P=0.017)。多因素模型发现ABO基因上rs579459位点与入睡时间存在交互作用(P_交互=0.040)，rs579459致病等位基因T个数为2时，相比于入睡时间22:00—22:59，早于22:00入睡者IS风险显著升高，为其1.56倍(95%CI：1.20~2.04，P=0.001)，而致病等位基因个数为0或1时无显著关联。仅调整性别、年龄、家系的模型中，睡眠时长与PITX2基因上rs2634074致病等位基因T的个数对IS存在交互作用(P_交互=0.033)。结论睡眠效率降低与IS风险增高有关，入睡时间早于22:00与较高的IS风险相关。入睡时间与ABO基因上rs579459和IS风险存在交互作用；睡眠时长与PITX2基因上rs2634074和IS风险可能存在潜在的交互作用。     

久坐行为与体育锻炼行为对职业人群焦虑倾向的联合作用

目的探讨国内职业人群焦虑倾向现况，分析久坐行为和体育锻炼行为二者联合作用对焦虑倾向的影响。方法基于2021年亚洲最佳职场(中国大陆地区)的调查数据，使用广泛性焦虑障碍量表评估员工的焦虑倾向，采用Logistic回归方程分析久坐和体育锻炼对焦虑倾向的联合影响并计算不同组别之间的优势比(odds ratio, OR)。结果共纳入11 903名企业员工，平均年龄32.9岁；其中3 562名员工存在焦虑倾向，检出率为29.9%；40岁以下人群焦虑倾向率(30.6%)高于40岁以上人群(26.7%)，两者差异有统计学意义。过去一周平均每日静坐时间为9.4 h，静坐时间超过8 h界定为久坐，久坐的比例达到76.3%。多因素Logistic回归分析结果显示，吸烟(OR=1.24，95%CI：1.23~1.39)、更长的静坐时间和更低的体育锻炼水平是员工出现焦虑倾向的危险因素，平均每日更久的睡眠时间(OR=0.56，95%CI：0.51~0.61)是其保护因素。将体育锻炼行为和静坐行为分别进行联合相关性分析和分层分析，结果显示静坐时间增加与体育锻炼水平减少相结合会导致焦虑倾向风险的显著增加，随着体育锻炼水平的增加，静坐时间作为焦虑倾向危险因素的阈值逐渐下降。结论本次调查职业人群焦虑倾向的检出率较高且久坐行为严重，缺乏体育锻炼与久坐行为均是焦虑倾向的独立危险因素，加强体育锻炼可以在一定程度上弥补久坐行为对焦虑倾向带来的危害。     

中国女性外周血EMR3基因甲基化水平与乳腺癌的相关性

目的探究中国人群外周血中C19orf57、MAP9、EMR3、NEK6和PCOLCE2基因的甲基化水平与乳腺癌的相关性。方法通过病例对照研究收集了258例早期乳腺癌患者和272名健康女性的外周血，并采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术（MALDI-TOF-MS）定量检测基因上CpG位点的甲基化水平。使用logistics回归模型校正协变量分析DNA甲基化水平与乳腺癌的相关性。Spearman秩相关用于分析基因甲基化水平与年龄的关系。使用非参数检验分析不同临床特征组别的甲基化水平差异。结果与欧美人群的乳腺癌EMR3高甲基化相反，EMR3基因的低甲基化与中国女性的乳腺癌相关，但该相关性仅存在于≥ 50岁的女性中（每减少10%的甲基化，EMR3_CpG_1：OR=1.40；EMR3_CpG_2：OR=2.31；EMR3_CpG_3：OR=2.76，P＜0.05）。EMR3的甲基化水平与肿瘤分期、大小、淋巴转移、ER、PR、HER2、Ki67等没有或仅有弱相关。C19orf57甲基化与乳腺癌无相关性。结论外周血EMR3基因的低甲基化与中国女性乳腺癌之间存在相关性，尤其是年龄较大或绝经后女性。     

VIPR1启动子甲基化促进转录因子AP-2α下调VIPR1的表达并促进肝细胞癌的生长

目的探讨血管活性肠肽受体1（VIPR1）在肝细胞癌（HCC）组织中低表达的转录调控机制和生物学功能。方法肝癌细胞系Hep3B和Huh7常规培养，实验分为VIPR1启动子野生型组、启动子突变载体1组、启动子突变载体2组和启动子突变载体1+ 2组。双荧光素酶报告基因实验检测AP-2α表达对VIPR1启动子活性的影响；DNA甲基化转移酶抑制剂（DAC）处理肝癌细胞，焦磷酸测序法检测VIPR1启动子甲基化水平的变化；染色质免疫共沉淀检测AP-2α与VIPR1启动子的结合能力；Western blot检测AP-2α的敲减作用以及VIPR1的表达；Western blot检测两种细胞株中VIPR1的差异表达；qPCR和Western blot检测VIPR1过表达和敲减效果；流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡；CCK8实验检测细胞增殖。建立裸鼠移植瘤模型，检测LV-NC组和LV-VIPR1组中肿瘤的体积和质量。结果与VIPR1启动子野生型组相比，启动子突变载体1+2与AP-2α表达质粒共转染后，荧光素酶活性明显恢复（P < 0.05）；DAC处理后，VIPR1启动子甲基化水平降低，并且随着甲基化程度减弱，与VIPR1启动子结合的AP-2α显著减少（P < 0.01）；敲减AP-2α后，VIPR1表达上升；Huh7细胞株中VIPR1表达低于Hep3B细胞株，在两种细胞株中成功构建了VIPR1过表达和敲减模型，VIPR1过表达增加了G2/M期的细胞数量（P < 0.01），凋亡细胞显著增加（P < 0.001），细胞增殖受到抑制（P < 0.001），而VIPR1敲低则相反。体内实验表明VIPR1过表达组的肿瘤体积减小（P < 0.001），肿瘤量降低（P < 0.05）。结论HCC中VIPR1的启动子甲基化促进了转录因子AP-2α的结合，并且抑制了VIPR1表达，而VIPR1过表达可使细胞周期阻滞在G2/M期，促进细胞凋亡，抑制细胞增殖和肿瘤生长。     

腮腺微小肿瘤的临床病理研究

目的探讨直径≤20 mm的体积微小的腮腺肿瘤临床病理特点，为临床诊疗提供参考依据。方法选择2012年12月至2020年4月于北京大学口腔医院口腔颌面外科手术治疗的腮腺肿瘤患者，收集术前CT检查肿瘤直径≤20 mm的患者相关临床资料，根据肿瘤直径大小分为直径11~20 mm组与直径≤10 mm组，对两组进行临床随访，比较一般情况、临床病理特点及预后。结果共收集原发性上皮性腮腺肿瘤患者2 067例，其中肿瘤直径≤20 mm者有685例(33.1%)，男女性别比例为1 ∶1.93，平均年龄(45.3±13.8)岁(12~83岁)，中位病程12个月(1周至30年)。685例中良性肿瘤635例(92.7%)，恶性肿瘤50例(7.3%)，良恶性比例为12.7 ∶1；最常见的良性肿瘤为多形性腺瘤，最常见的恶性肿瘤为黏液表皮样癌。肿瘤直径≤10 mm的患者有74例，占肿瘤直径≤20 mm患者的10.8%(74/685)。肿瘤直径11~20 mm组(n=611)和≤10 mm组(n=74)患者的一般情况及病理学分型比较提示，两组在性别、年龄、病程上差异均无统计学意义(P>0.05)。直径11~20 mm组患者良性肿瘤占92.8%(567/611)，恶性肿瘤占7.2%(44/611)，良恶性比例为12.9 ∶1；直径≤10 mm组良性肿瘤占91.9%(68/74)，恶性肿瘤占8.1%(6/74)，良恶性比例为11.3 ∶1，两者间差异无统计学意义(P>0.05)。对50例恶性肿瘤患者进行临床随访，中位随访时间为39.5个月(1~91个月)，有2例患者局部复发，其中1例死亡，总体2年生存率为93.7%，5年生存率为89.3%。结论直径≤20 mm的体积微小的腮腺肿瘤以良性多见，手术是主要治疗手段，其中的腮腺恶性肿瘤预后良好，应积极进行早期手术治疗。     

FNDC1在肺腺癌中高表达并与不良预后相关

目的研究Ⅲ型纤连蛋白结构域1(FNDC1)蛋白在肺腺癌组织中的表达及临床意义。方法采用GEO数据库及GEPIA预测FNDC1在肺腺癌的表达水平, 进一步对92例肺腺癌组织及配对的相邻正常组织进行免疫组化染色, 验证FNDC1的表达。分析FNDC1表达与肺腺癌患者临床特征之间的关系, 使用Cox生存分析进一步研究其预后价值。结果GEO数据库及GEPIA结果显示, 肺腺癌组织中FNDC1的表达水平高于其配对的正常组织(P < 0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示, FNDC1蛋白表达量较高的患者的总生存期较短(P=0.035, 0.036, 0.00029)。免疫组化结果显示, 与正常肺组织相比, 肺腺癌组织FNDC1蛋白表达水平升高(P < 0.001)。FNDC1蛋白的高表达与临床分期(P=0.044)、T分期(P=0.047)、N分期(P=0.003)存在相关性。Cox单变量及多变量回归生存分析结果显示, FNDC1表达水平增加是肺腺癌患者预后不良的独立危险因素(P < 0.05)。结论FNDC1蛋白在肺腺癌患者中高表达且与肺腺癌的发生发展及预后密不可分, 有可能成为判断肺腺癌患者生存预后的标志物。     

萘烯丙基三氟甲基苯并环戊酮抑制肺癌A549细胞增殖并诱导其凋亡

目的探讨新型萘烯丙基三氟甲基苯并环戊酮（XX0335）抑制肺癌细胞系A549增殖并诱导凋亡的分子机制。方法实验分为4组：对照组（含0.1% DMSO的培养液）、另外3组为不同浓度（6.25、12.5、25 μg/mL）的XX0335（该化合物需DMSO溶解，但工作浓度中DMSO的终浓度均低于0.1%）。通过CCK-8和EdU实验分别测定各组对A549细胞活力及增殖的影响，通过流式细胞术测定上述浓度的XX0335对A549细胞凋亡及周期的影响；通过免疫印迹实验测定不同浓度的XX0335对增殖相关蛋白Akt、mTOR、Akt/mTOR磷酸化水平、凋亡相关蛋白cleaved PARP及细胞周期相关蛋白CyclinD1表达水平的影响；通过裸鼠荷瘤实验探究XX0335对A549增殖的影响，动物实验使用4周龄小鼠共10只，随机均分为2组。将2×10⁶A549细胞植入小鼠左侧腋下，待26 d后瘤体长径长至1 cm时，对照组小鼠注射无菌生理盐水（200 μL），对实验组注射化合物XX0335（12.5 μg/mL，200 μL），隔天注射1次，共5次之后取肿瘤观察每组瘤体大小。结果CCK-8实验表明，A549细胞活力在XX0335的作用下比对照组呈剂量依赖性下降（P < 0.01）。EdU实验发现XX0335能显著抑制A549细胞增殖（P < 0.001）。流式细胞术检测结果表明，细胞凋亡较对照组呈剂量依赖性上升（P < 0.01），且细胞停滞于G1期。与对照组相比，AKT、mTOR的磷酸化受到了明显抑制，cleaved PARP表达量升高，且CyclinD1的蛋白表达量下降。裸鼠荷瘤实验结果显示注射XX0335后肿瘤体积明显减小（P < 0.01）。结论XX0335抑制了肺癌A549细胞增殖并诱导细胞发生了凋亡，且细胞周期阻滞于G1期，其作用机制可能与抑制Akt/mTOR信号通路有关。     

临床T1期肾细胞癌肾窦侵犯的危险因素

目的总结临床T1(cT1)期肾细胞癌的临床影像学特点，探究影响cT1期肾细胞癌患者发生肾窦侵犯的危险因素。方法回顾性分析2016年1月至2019年8月于北京大学第三医院泌尿外科住院行肾部分切除术或根治性肾切除术，术前诊断为cT1期肾细胞癌的患者，收集患者的临床、影像学和病理学资料。采用卡方检验、Mann-Whitney U检验、多因素Logistic回归，对cT1期肾细胞癌发生肾窦侵犯的相关危险因素进行分析。结果共纳入507例患者，其中男性354例(69.8%)，女性153例(30.2%)，中位年龄59岁，中位体重指数25.5 kg/m²。术前有肉眼血尿者18例(3.6%)，中位肿瘤直径3.5 cm。cT1a期322例(63.5%)，cT1b期185例(36.5%)，中位R.E.N.A.L.评分为8分。肿瘤边界规则者359例(70.8%)，肿瘤边界不规则者148例(29.2%)。所有患者均行手术治疗，包括186例(36.7%)肾部分切除术和321例(63.3%)根治性肾切除术。术后病理提示肾窦侵犯75例(14.8%)，其中cT1a期侵犯肾窦18例，占cT1a期总数的5.6%;cT1b期侵犯肾窦57例，占cT1b期总数的30.8%。单因素分析发现，年龄(P=0.02)、R.E.N.A.L.评分(P < 0.001)、肿瘤边界状态(P < 0.001)是cT1期肾细胞癌发生肾窦侵犯的相关危险因素。多因素Logistic回归显示，R.E.N.A.L.评分(P≤0.020)和肿瘤边界状态(P=0.001)是cT1期肾细胞癌发生肾窦侵犯的独立危险因素。结论对cT1期肾细胞癌，术后接近15%的患者存在肾窦侵犯现象; R.E.N.A.L.高评分和肿瘤边界不规则，均可以提示cT1期肾细胞癌有发生肾窦侵犯的风险。     

肾上腺海绵状血管瘤1例及文献回顾

A 57-year-old male patient was referred to our department with complaints of his right adrenal gland occupancy and hypertension about 6 months. When admitted to the hospital, the blood pressure was about 160/100 mmHg, and the heart rate was 110 beats/min. He was no obvious obesity, acne, abnormal mood, without weakness of limbs, acral numbness, palpitation and headache. He presented with type 2 diabetes for more than 3 years, with oral administration of metformin enteric coated tablets and subcutaneous injection of insulin glargine to control blood glucose, and satisfied with blood glucose control. Enhanced CT showed that: the right adrenal gland showed a kind of oval isodense, slightly hypodense shadow, the edge was clear, lobular change, the size was about 5.8 cm×5.4 cm, uneven density, there were nodular and strip calcification, round lipid containing area and strip low density area, and the CT value of solid part was about 34 HU. Enhanced scan showed heterogeneous nodular enhancement in the solid part of the right adrenal gland, nodular enhancement could be seen inside. The CT values of solid part in arterial phase, venous phase and delayed phase were 45 HU, 50 HU and 81 HU, respectively. Considering from the right adrenal gland, cortical cancer was more likely. No obvious abnormality was found in his endocrine examination. After adequate preoperative preparation, retroperitoneal laparoscopic adrenalectomy was performed under general anesthesia. During the operation, the 6 cm adrenal tumor was closely related to the inferior vena cava and liver, and after careful separation, the tumor was completely removed and normal adrenal tissue was preserved. The operation lasted 180 min and the blood loss was 100 mL, and the blood pressure was stable during and after the operation. There was no obvious complication. The results of pathological examinations were as follows: the size of the tumor was 7.5 cm×6.0 cm×3.5 cm, soft, with intact capsule and grayish-red cystic in section. Pathological diagnosis: (right adrenal gland) cavernous hemangioma, secondary intravascular thrombosis, old hemorrhagic infarction with calcification and ossification. After 6 months of observation, no obvious complications and tumor recurrence were found. In summary, cavernous hemangioma of adrenal gland is a rare histopathological change. Its essence is a malformed vascular mass. Blood retention is the cause of thrombosis and calcification in malformed vessels. The imaging findings were inhomogeneous enhancement of soft tissue masses, and the adrenal function examination showed no obvious abnormalities. Retroperitoneal laparoscopic surgery is feasible after adequate preoperative preparation. It is difficult to diagnose the disease preoperatively and needs to be confirmed by postoperative pathology.     

肝细胞癌进展过程中的关键基因ATP1B3和ENAH的筛选与鉴定：基于数据挖掘和临床验证

目的筛选与肝细胞癌（HCC）预后、进展和临床诊断相关标记物。方法分析来自癌症基因组图谱数据库（TCGA）和基因表达综合（GEO）的TCGA-LIHC、{"type":"entrez-geo","attrs":{"text":"GSE84432","term_id":"84432"}}GSE84432、{"type":"entrez-geo","attrs":{"text":"GSE14323","term_id":"14323"}}GSE14323和{"type":"entrez-geo","attrs":{"text":"GSE63898","term_id":"63898"}}GSE63898数据集。利用GEO2R和edge R包获得各疾病类型之间共同差异基因（DEG），并对DEG进行基因本体论（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析。将DEG在TCGA-LIHC中正常和癌组织进行差异表达验证分析，挑选在HCC中上调基因。利用R语言进行生存分析、受试者工作特征（ROC）曲线分析、基因与患者临床特征关系分析。再通过RT-qPCR验证15对临床HCC和癌旁组织中基因的差异表达。结果数据库挖掘共获得118个共同DEG，挑选出2个基因：ATP酶Na+/K+转运亚基Beta 3（ATP1B3）和肌动蛋白调节器（ENAH），其表达随疾病进展升高。结合TCGA-LIHC数据集生存分析发现两者高表达与HCC患者不良预后显著相关（P＜0.05）。ROC曲线分析ATP1B3和ENAH的AUC值分别是0.821和0.933。ATP1B3高表达与晚期病理T分期、Stage和Grade相关（P＜0.05），而ENAH高表达仅与晚期病理Grade有关（P＜0.05）。RT-qPCR结果发现，ATP1B3和ENAH在临床HCC组织中表达上调（P＜0.05）。结论ATPIB3和ENAH有望成为肝脏疾病恶化和肝细胞癌的不良预后标志物。     

卡托普利试验在醛固酮腺瘤无创诊断中的临床价值

目的分析原发性醛固酮增多症(primary aldosteronism，PA)中醛固酮腺瘤(aldosterone-producing adenoma，APA)亚型的临床特点及卡托普利试验(captopril challenge test，CCT)在APA诊断中的应用价值，尝试寻找从PA中识别APA的临床特异性无创指标。方法回顾性收集因高血压住院患者的临床资料，确诊PA者90例，其中手术证实为APA者34例。对两组患者临床指标，包括CCT前后的血浆醛固酮浓度(plasma aldosterone concentration，PAC)、醛固酮/肾素比值(aldosterone to renin ratio，ARR)以及CCT后的醛固酮抑制率(%)进行比较，并绘制CCT前后相关指标的受试者工作特征曲线，比较曲线下面积(area under the curve，AUC)。结果与PA组相比，APA患者确诊时高血压病程较短，低血钾发生率更高，血钾平均水平更低，两者的血压水平、性别分布、血钠水平、体重指数差异无统计学意义。APA组CCT前ARR及CCT后PAC、ARR、醛固酮抑制率均较PA组高，其中CCT前后ARR均对APA有诊断价值CCT前ARR临界点为7.12时，灵敏度为35.85%，特异度为77.78%；CCT后ARR临界点为4.23时，灵敏度为71.43%，特异度为62.22%；两者对PA分型的诊断价值相当。CCT前ARR>7.12联合低血钾的诊断特异度高达80%。结论CCT前后ARR对APA的诊断均具有临床价值，当联合低血钾时诊断特异度增高。     

甲磺酸去铁胺促进大鼠颅骨临界骨缺损血管化骨再生的早期连续观察

目的连续观察骨缺损愈合早期血管样组织和骨样组织的变化过程，初步了解局部施用甲磺酸去铁胺(deferoxamine mesylate，DFO)对血管化及骨再生的作用，验证DFO维持缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α, HIF-1α)活性的能力。方法构建30只6~8周龄雄性SD大鼠颅骨缺损模型，随机分为DFO实验组和生理盐水对照组，于颅骨缺损后第4天分别局部注射200 μmol/L DFO溶液300 μL或生理盐水300 μL，并于缺损后第5、7、10、14和28天，每组每次处死3只大鼠。采用CD31免疫组织化学染色检测血管数量，采用HE染色、Masson染色观察成骨及矿化情况，以HIF-1α免疫组化染色检测HIF-1α蛋白相对表达量。结果术后第5、7、10、14和28天，实验组血管数量(个)分别为：30.40±12.15、62.00±17.87、73.43±15.63、40.00±7.84和48.71±11.64，对照组血管数量(个)分别为：18.75±6.63、19.13±2.80、51.35±16.21、27.18±7.32和30.88±13.43，各时间点实验组血管数量均显著多于对照组(P < 0.05)；术后第14和28天，实验组新生骨组织较多，新生骨组织矿化百分比分别为(27.73±5.93)%和(46.53±3.66)%，对照组分别为(11.99±2.02)%和(31.98±4.22)%，这两个时间点实验组矿化百分比显著高于对照组(P < 0.001)；术后第5、7、10、14和28天，实验组相较对照组的HIF-1α蛋白相对表达量为2.86±0.48、1.32±0.26、1.32±0.32、1.28±0.38、1.05±0.34，仅术后第5天两组间差异有统计学意义(P < 0.01)。结论在骨缺损局部使用DFO可促进血管化及骨再生，可短暂维持HIF-1α蛋白活性。     

结肠直肠癌患者肠道黏膜区域的菌群分布

目的比较健康人群与结肠直肠癌（CRC）患者粪便菌群及肿瘤/瘤旁黏膜菌群的差异性，尝试寻找CRC新的防治途径。方法收集了13例CRC患者粪便、6例患者肿瘤/瘤旁黏膜和20名健康对照人群粪便，利用16SrDNA测序技术与生物信息学方法分别对粪便和黏膜的菌群组成差异进行了分析。在流式细胞仪检测粪便中的细菌总数后，采用几种较为常见的细菌培养基对粪便及黏膜中微生物进行分离鉴定，并利用乳酸脱氢酶检测试剂盒测试了其中7株细菌对3株肠癌细胞凋亡的影响。结果健康人粪便和CRC患者瘤旁黏膜中的菌群α-多样性显著高于CRC患者粪便和肿瘤黏膜中菌群α-多样性（P < 0.05）。从特异性微生物来看，与健康人群相比，CRC患者粪便中的特有菌为Lactobacillaceae，而其肿瘤黏膜上特有菌是Escherichia、Enterococcus、 Fusobacterium等。通过体外实验发现，分离自CRC患者肿瘤黏膜处的Bacteroides fragilis与Fusobacterium nucleatum分别对肠道癌细胞的增殖具有显著抑制活性（P < 0.0001）与促进作用（P < 0.001）。结论CRC患者粪便、肿瘤黏膜及瘤旁黏膜菌群与健康人群粪便菌群差异较大，且CRC患者粪便菌群不能代表肿瘤黏膜特异性菌群。体外实验结果表明，抑制肿瘤黏膜中F. nucleatum定植与促进具有癌细胞毒性的B. fragilis定植可能是治疗CRC潜在的有效方法。     

中国老年人群促甲状腺激素水平的多中心调查

目的调查中国表观健康老年人群血清促甲状腺激素（TSH）水平及其变化特征，对比罗氏电化学发光免疫分析仪和新产业全自动化学发光免疫分析仪检测TSH水平的差异。方法收集中国具有地域代表性的10个中心共5451例表观健康老年人（> 60岁）一般临床资料及冻存空腹血清样本，通过罗氏电化学发光免疫分析仪和新产业全自动化学发光免疫分析仪检测TSH等甲状腺功能指标。使用中位数（P_2.5，P_97.5）表示老年人群TSH水平。分析不同地域、性别、年龄组（组距为5）TSH水平差异，探索各因素对TSH水平的影响。结果罗氏电化学发光法和新产业全自动化学发光法调查TSH参考区间分别为0.42~9.47 mU/L；0.36~7.98 mU/L，两种方法检测TSH结果有差异（P < 0.001）。2个西部地区中心TSH水平显著高于其他中心（P < 0.05）；老年女性TSH水平不随年龄增长，而老年男性TSH水平随年龄增长有增长趋势；60~75岁女性TSH水平普遍高于男性， > 75岁男性女性TSH水平无显著差异。结论TSH水平受地区、性别、年龄因素影响，但老年人群无需再根据地区、性别、年龄再分组建立参考区间。TSH结果解读应注意不同检测方法之间的差异。