金双歧对新生儿黄疸的治疗作用及单个核细胞凋亡的影响

目的:探讨金双歧制剂对新生儿高胆红素血症的治疗作用及外周血单个核细胞凋亡的影响。方法:将2003年6月至2004年10月住院的黄疸新生儿50例,随机分为观察组和对照组各25例,对照组采用常规的治疗,观察组则在对照组的基础上加口服金双歧制剂,观察两组患儿黄疸消退时间,并于治疗的第1天和第7天分别检测患儿外周血的单个核细胞凋亡情况,同时检测20例正常儿的外周血单个核细胞凋亡比例,比较两种治疗情况下细胞凋亡率的变化。结果:口服金双歧制剂能有效地促进新生儿黄疸的消退,且能降低黄疸新生儿的外周血单个核细胞凋亡率。结论:口服金双歧制剂对新生儿黄疸有一定的辅助治疗作用,可促进黄疸消退和通过降低单个核细胞的凋亡比例来预防感染。     

内源性保护蛋白Survivin对辐射诱导细胞凋亡的抑制作用

目的:抗凋亡蛋白Survivin对辐射诱导的细胞凋亡表现出很强的抑制作用。采用低氧预处理方法,诱导IEC-6细胞表达Survivin,观察其对辐射诱导的细胞凋亡的影响,并研究其可能机制,可为放射病的防护提供新的方法和实验依据。方法:分为空白组,单纯放射组,低氧+放射组和拮抗组4组。①将IEC-6细胞置于20mL/LO2环境中低氧6,8,12h,复氧24,48h,用Western-blot检测Survivin。②给予各实验组35Gy60Co照射,采用琼脂糖凝胶电泳分析DNA片段化,及采用细胞流式PI法检测细胞凋亡率。结果:低氧预处理后出现Survivin蛋白沉积带,以低氧预处理8h复氧48h组最明显。拮抗组、单纯放射组出现典型的DNA片段梯现象,低氧+放射组明显轻于上述两组。单纯放射3h凋亡率由1.44±0.08升高到8.57±0.27,6h达到凋亡高峰24.44±0.32。低氧+放射组凋亡率在3h仅为6.33±0.19,6,12,24h凋亡率明显低于单纯放射组。拮抗组凋亡率明显高于低氧+放射组。结论:低氧预处理可诱导内源性保护蛋白Survivin表达,Survivin可减轻辐射诱导的细胞DNA损伤,同时明显降低辐射诱导的细胞凋亡率。     

右美托米啶对β-淀粉样肽引起的SH-SY5Y细胞凋亡的影响

目的:探讨右美托米啶(dexmedetomidine,Dex)对β-淀粉样肽(amyloid-βpeptide,Aβ)引起的SH-SY5Y细胞(神经母细胞瘤细胞)凋亡的影响作用。方法:体外培养SH-SY5Y细胞,随机分为4组:阴性对照组,不同浓度Aβ25-35组(2.5、5.0、10.0μmol/L组),观察不同浓度的Aβ25-35对SH-SY5Y细胞的作用。同时进一步观察Dex与Aβ联合应用对SH-SY5Y细胞的作用,实验随机分为5组:阴性对照组,Aβ组(10.0μmol/L Aβ25-35),Aβ+Dex 0.1组(10.0μmol/L Aβ25-35+0.1μmol/L Dex),Aβ+Dex 1.0组(10.0μmol/L Aβ25-35+1.0μmol/LDex)和Aβ+Dex 10.0组(10.0μmol/L Aβ25-35+10.0μmol/L Dex),分别处理24 h后,采用DAPI荧光染色法计数凋亡细胞数,计算凋亡率。结果:Aβ25-35可以促进SH-SY5Y细胞的凋亡,且呈时间和浓度依赖性;而在Aβ25-35中同时加入Dex作用后,细胞凋亡明显受到抑制,细胞凋亡率明显下降(P<0.05),但仍明显高于阴性对照组。结论:Dex可以有效的抑制Aβ25-35引起的SH-SY5Y细胞的凋亡。     

PI3K抑制剂LY294002对胶质瘤U87细胞的放射增敏作用

目的:探讨磷脂酰肌醇3-激酶/ 丝氨酸苏氨酸激酶(PI3K/Akt)信号转导通路抑制剂LY294002对人恶性胶质瘤细胞的放射增敏作用.方法:以人胶质瘤细胞株U87 细胞为研究对象,MTT 法观察LY294002 对U87 细胞的增殖抑制;克隆形成法分析细胞放射敏感性,计算放射增敏比(SER);流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期分布变化.结果:LY294002 对U87 细胞的生长有抑制作用,且呈剂量依赖性;在较低浓度时(25 滋mol/L)可降低U87 细胞照射后的克隆形成率,其SER 为1.01;流式细胞仪分析显示:LY294002 联合放射组的周期分布及凋亡率与LY294002 组,单纯放射组比较均有差异(P ＜ 0.05),表现为G0/G1期细胞增加,S 期细胞减少,凋亡率增加.结论:LY294002 可增强U87 细胞的放射敏感性,抑制PI3K/Akt 信号转导通路可提高胶质瘤的放射治疗效果.     

Apo-2L对放射线诱导鼻咽癌CNE细胞凋亡作用

目的了解凋亡素2配体（Apo-2L）与放射治疗协同对体外培养鼻咽癌CNE细胞增殖周期及凋亡率的影响。方法 MTT法检测不同浓度Apo-2L对鼻咽癌CNE细胞的影响,确定Apo-2L与细胞作用时间及浓度。将细胞随机分为对照组、Apo-2L组、Apo-2L＋放射组及单纯放射组,分别给予相应的处理后制成细胞悬液,流式细胞仪分析细胞凋亡率和细胞周期变化。结果鼻咽癌CNE细胞的抑制率与Apo-2L的浓度呈正相关（r=0.91,P〈0.05）,当用浓度为100μg/L的Apo-2L处理CNE细胞24h,Apo-2L＋放射组凋亡率较其他各组明显升高,差异有显著性（F=8.64,P〈0.05）。Apo-2L＋放射组G2-M期比率较其他各组显著降低（F=7.74,P〈0.05）。结论Apo-2L对体外培养鼻咽癌CNE细胞有抑制增殖和促进凋亡作用;Apo-2L联合放射线治疗可以使细胞周期同步化,并明显提高CNE细胞的凋亡率。     

面神经损伤后rhEPO对面运动神经元的保护作用

目的：观察重组人促红细胞生成素（recombinant human erythropoietin, rhEPO）对大鼠受损面神经的保护作用及对Caspase-3表达的影响。方法：75只雌性大鼠随机分为rhEPO治疗组(n=25) 、对照组(n=25)、假手术组(n=25)，50只大鼠建立左侧面神经干损伤动物模型,rhEPO组大鼠致伤后即刻及每天腹腔内注射rhEPO(5000U/kg)，连续两周，对照组给予等量生理盐水。分别于第3、7、14、21、28天采用Toluidine blue染色计算面神经元存活率，TUNEL检测细胞凋亡，免疫组化检测Caspase-3的表达。结果：从伤后第7天开始治疗组和对照组左侧面神经元存活率逐渐下降，每个时间点治疗组面神经元存活率明显高于对照组（P＜0.05）；治疗组与对照组在伤后第3天未见Tunel染色阳性细胞，对照组第7天见表达，第14天数量达高峰，治疗组在伤后第7、14、21天面神经元凋亡细胞数显著减少 (P<0．05)；伤后第3天对照组见 Caspase-3表达增加，第14天达高峰，第28天仍见少许表达，治疗组在各时间点Caspase-3表达均明显低于对照组(P<0．05)。结论：rhEPO对受损大鼠面神经元有保护作用；降低Caspase-3的表达、抑制细胞凋亡可能是rhEPO治疗创伤性面瘫的重要机制。     

甘氨双唑钠通过影响喉癌细胞的细胞周期实现放射增敏作用

目的探讨甘氨双唑钠对放射线照射后喉癌细胞各细胞周期细胞比例的影响。方法选择喉癌Hep-2细胞,共分为5组。对照组:癌细胞不做任何处理;放射组:癌细胞仅接受6 MV-X线照射,剂量率300 cGy/min,剂量5 Gy;甘氨双唑钠组:予0.8 mmol/L甘氨双唑钠100μl作用4 h;甘氨双唑钠+放射组:同甘氨双唑钠组及放射组;AT突变基因(AT mutated,ATM)阻断+甘氨双唑钠+放射组:KU55933+0.8 mmol/L甘氨双唑钠的培养液培养4 h后行5 Gy照射。分别采用流式细胞术和蛋白免疫印迹杂交技术检测细胞周期的变化及Bax蛋白表达量。结果经甘氨双唑钠作用和5 Gy X线照射后,喉癌细胞G0/G1期细胞明显降低,Bax蛋白表达水平明显升高,与不做任何处理、单独X线照射、单独甘氨双唑钠作用及ATM阻断+甘氨双唑钠+放射治疗的喉癌细胞比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论甘氨双唑钠可通过影响喉癌细胞的细胞周期实现放射增敏作用。     

急性动脉粥样硬化性脑梗死患者外周血CD4~＋CD25~＋调节性T细胞（Treg）的动态变化研究

目的动态观察急性动脉粥样硬化性脑梗死患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞（Treg）的变化,探讨其临床意义。方法收集2012年2月-2012年12月在吉林大学中日联谊医院神经内科住院的发病7天内的急性动脉粥样硬化性脑梗死患者（即梗死组）48例,同期住院健康体检者（即对照组）30例。其中,梗死组按照时间（第1、2、3、5、7天）进行分组,采用流式细胞仪法测定全部人群外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞（Treg）水平,分别比较各组外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞（Treg）水平,并分析其在梗死不同时间水平的变化,进行统计分析。常规检测血常规。结果梗死组患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞（Treg）百分比在第1天、第2天低于对照组,第5天、第7天高于对照组,差异均有统计学意义（P〈0.05）,第3天略低于对照组,差异无统计学意义（P〉0.05）。梗死组第1-2天血常规中白细胞及中性粒细胞较正常值显著异常升高,且中性粒细胞与Treg细胞百分比呈负性相关（相关系数r为-0.664,P〈0.01）。结论外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞水平变化可以成为评估急性动脉粥样硬化性脑梗死患者早期脑缺血的非侵入性指标;Treg细胞可作为急性动脉粥样硬化性脑梗死患者免疫稳态失衡和炎症反应的标志物之一。     

脉冲强磁场联合姜黄素对诱导膀胱肿瘤细胞BIU-87凋亡的影响

目的:观察脉冲强磁场联合姜黄素引起膀胱肿瘤细胞BIU-87凋亡的作用。方法:将体外培养的膀胱肿瘤细胞癌株BIU-87随机分为A、B和C 3组。A组为空白对照组,B、C组均经姜黄素处理,C组处理后置于脉冲强磁场中干预(8T,15HZ),每天2 h。分别于干预后的第1、2、3天时采用显微镜观察肿瘤细胞形态、MTT法检测肿瘤细胞生长抑制率。结果:与A组比较,肿瘤细胞显微镜下处理后的B、C组,均出现典型的凋亡细胞形态,以C组表现更加明显;MTT检测,B、C组肿瘤细胞生长抑制率明显上升(均P0.01),且呈时间依赖关系,第1~3天肿瘤细胞增殖抑制率B组明显低于C组(18.6%、40.6%、51.4%与26.9%、50%、61.4%,P0.01);结论:脉冲强磁场联合姜黄素可促进膀胱肿瘤细胞的凋亡和抑制其生长。     

高三尖杉酯碱诱导K562细胞凋亡的时间节律性及其机制研究

本研究旨在观察高三尖杉酯碱（HHT）作用于K562细胞后不同时间点凋亡率的变化及其机制。HHT10ng／ml作用K562细胞后,用MTT法检测不同时间点的细胞增殖活力,Westernblot法检测caspase-3凋亡蛋白表达;流式细胞术检测BCL-2蛋白表达;应用透射电子显微镜观测细胞自噬。结果表明,HHT10ng／ml处理后的前5d,K562细胞增殖活性逐渐下降,但在第6天以后增殖活性又逐渐上升;同时激活型caspase-3蛋白从第1天至第7天逐渐增高,而在第8天明显降低（P〈0．05）;BCL-2蛋白表达水平则呈现先降低后升高（P〈0．05）的特点。细胞自噬体在HHT作用第8天明显增多。结论：HHT作用后,K562细胞凋亡水平变化呈现先升高后下降的特点,其机制与HHT作用后期K562细胞自噬水平升高有关。     

双链RNA依赖的蛋白激酶在放射性肺损伤中的作用及机制研究

目的:探讨双链RNA依赖的蛋白激酶(PKR)在放射性肺损伤中的作用和分子机制。方法:将20只雄性SD大鼠随机分成对照组和放射组,对照组不做任何处理,放射组大鼠左肺一次性给予20Gy照射,观察1个月。人肺泡上皮细胞(HPAEpiC)分别转染高、低表达的PKR后,给予15Gy照射。采用支气管肺泡灌洗液的分析、Masson染色、免疫组织化学、MTT法、Real-time PCR和Western blot等方法研究PKR在放射性肺损伤中的作用及机制。结果:与对照组比较,放射组大鼠体重明显较低,肺/体重比值明显较高(P0.05);通过ELISA检测发现,放射组大鼠肺组织中促炎因子IL-1β和TNF-α相对表达水平显著高于对照组,而抑炎因子IL-10相对表达水平则明显低于对照组(P0.05);Masson染色结果表明,放射组大鼠肺间隔纤维组织沉积显著高于对照组(P0.05);放射组肺组织TUNEL阳性细胞及促凋亡因子Bax、Caspase-3的mRNA和蛋白水平明显高于对照组,且抗凋亡因子Bcl-2mRNA和蛋白水平显著低于对照组(P0.05);放射组大鼠肺组织PKR蛋白表达水平明显低于对照组,而p-PKR蛋白表达水平明显高于对照组(P0.05);实验结果表明,PKR敲低细胞照射组细胞生存率、PKR蛋白和抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白表达显著低于正常细胞照射组,而促凋亡蛋白Bax和Caspase-3表达显著高于正常细胞照射组(P0.05);PKR过表达细胞照射组细胞生存率、PKR蛋白和抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白表达显著高于正常细胞照射组,而促凋亡蛋白Bax和Caspase-3表达显著低于正常细胞照射组(P0.05)。结论:放射可以导致严重的肺损伤,肺损伤发生机制可能与PKR通路有关。     

脂肪源性干细胞移植对颅脑损伤大鼠神经功能评分和神经细胞凋亡的影响

摘要 目的：观察从大鼠脂肪组织中分离出的脂肪干细胞（ADSCs）,研究ADSCs移植对颅脑损伤大鼠神经功能及细胞凋亡的影响。 方法：采用Feeney法制成大鼠颅脑损伤模型,健康雌性Wistar大鼠60只用随机数字法分成移植实验组、培养基对照组、假手术组,每组20只。5－溴脱氧尿核苷(5-Brdu)标记ADSCs。对实验组大鼠进行损伤区域细胞移植,培养基对照组移植等量氨基酸葡萄糖培养基(DMEM/F12),假手术组仅开骨窗处理。在移植后第1、3、10、21天采用神经功能评分(NSS)方法分别对各组实验大鼠进行评分。取损伤部位脑组织用直接免疫荧光法检测标记细胞体内存活增殖情况,原位末端凋亡法(Tunel)观察细胞凋亡。 结果：移植后ADSCs在大鼠体内存活良好分布于损伤区域。移植组在移植后第3、10、21天神经功能评分均低于对照组(P<0.05),在各时间点移植组细胞凋亡明显少于对照组(P<0.05)。 结论：ADSCs移植后可以减少颅脑损伤大鼠神经细胞凋亡,有助于神经功能恢复。     

MiR-551b-3p靶向USP9X对人肺癌A549细胞凋亡和放射敏感性的影响

目的:探讨miR-551b-3p对肺癌A549细胞凋亡和放射敏感性的影响及分子机制。方法:将miRNC,miR-551b-3p,anti-miR-NC,anti-miR-551b-3p,si-NC,si-USP9X分别转染至A549中,记为miR-NC组、miR-551b-3p组、anti-miR-NC组、anti-miR-551b-3p组、si-NC组、si-USP9X组;将miR-551b-3p分别与pc DNA和pc DNA-USP9X共转染至A549中,记为miR-551b-3p+pc DNA组、miR-551b-3p+pc DNA-USP9X组。采用实时荧光定量PCR(RT-q PCR)检测miR-551b-3p和USP9X的表达水平;蛋白质印迹法检测X染色体连锁的泛素特定蛋白水解酶9(ubiquitin-specific peptidase 9 X-linked,USP9X)、 B细胞淋巴瘤/白血病-2 (B-cell lymphoma/leukemia-2, Bcl-2)、 Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 related X protein,Bax)的表达;荧光素酶报告实验检测miR-551b-3p和USP9X的靶向关系;流式细胞术检测细胞凋亡;细胞克隆集落形成实验检测放射敏感性。结果:肺癌组织和肺癌细胞A549中miR-551b-3p表达水平显著降低,USP9X mRNA和蛋白质表达水平显著升高(均P<0.001)。miR-551b-3p靶向调控USP9X,过表达miR-551b-3p和抑制USP9X表达,细胞凋亡率显著升高,Bcl-2表达水平显著降低,Bax表达水平显著升高,细胞的存活曲线明显下移(均P<0.001)。USP9X过表达逆转了miR-551b-3p过表达对肺癌A549细胞凋亡和放射敏感性的作用。结论:过表达miR-551b-3p促进肺癌A549细胞凋亡,增强肺癌细胞放射敏感性,其机制可能与USP9X有关。     

内源性保护蛋白Survivin对辐射诱导细胞凋亡的抑制作用

目的：抗凋亡蛋白Survivin对辐射诱导的细胞凋亡表现出很强的抑制作用。采用低氧预处理方法，诱导IEC-6细胞表达Survivin，观察其对辐射诱导的细胞凋亡的影响，并研究其可能机制，可为放射病的防护提供新的方法和实验依据。方法：分为空白组，单纯放射组，低氧+放射组和拮抗组4组。①将IEC-6细胞置于20mL／LO2环境中低氧6，8，12h，复氧24，48h，用Western-blot检测Survivin。②给予各实验组35 Gy^60Co照射，采用琼脂糖凝胶电泳分析DNA片段化，及采用细胞流式PI法检测细胞凋亡率。结果：低氧预处理后出现Survivin蛋白沉积带，以低氧预处理8h复氧48h组最明显。拮抗组、单纯放射组出现典型的DNA片段梯现象，低氧+放射组明显轻于上述两组。单纯放射3h凋亡率由1．44&;#177;O．08升高到8．57&;#177;O．27，6h达到凋亡高峰24，44&;#177;O．32。低氧+放射组凋亡率在3h仅为6．33&;#177;O，19，6，12，24h凋亡率明显低于单纯放射组。拮抗组凋亡率明显高于低氧+放射组。结论：低氧预处理可诱导内源性保护蛋白Survivin表达，Survivin可减轻辐射诱导的细胞DNA损伤，同时明显降低辐射诱导的细胞凋亡率。     

鱼藤酮对大鼠嗜铬细胞瘤细胞PC12的毒性作用

目的:探讨鱼藤酮对多巴胺能细胞的毒性作用及其机制。方法:PC12细胞分为对照组和鱼藤酮组(Ro10 nM、Ro100 nM、Ro1μM组),分别用DMSO和10 nmol/L、100 nmol/L、1μmol/L鱼藤酮处理24 h,用噻唑蓝比色法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡率、细胞线粒体膜电位,荧光底物酶活性法检测Caspase 3活性。结果:与对照组相比,Ro10 nM、Ro100 nM、Ro1μM组的细胞活力和细胞凋亡率呈剂量依赖性下降(P<0.05),其中Ro1μM组MTT吸光度为对照组的42.1%,凋亡率为41.9%。与对照组相比,各鱼藤酮组线粒体膜电位均下降及Caspase 3活性增高(P<0.05),其变化程度亦呈药物剂量依赖性。结论:鱼藤酮处理可诱导多巴胺能细胞凋亡,而且其凋亡程度具有剂量依赖性。     

二氢杨梅素通过STAT3/Bcl-2信号通路促进HNSCC细胞自噬和凋亡

目的:探讨二氢杨梅素(DHM)对人头颈鳞癌(HNSCC)细胞增殖及凋亡的影响。方法:分别用不同浓度(12.5、25、50 μmol/L)DHM处理人HNSCC SCC-25细胞6、12、24 h,用流式细胞仪检测SCC-25细胞凋亡情况;用细胞免疫荧光法观察SCC-25细胞中自噬小体产生情况;Western印迹法检测SCC-25凋亡和自噬标志物的表达。结果:12.5、25、50 μmol/L的DHM处理24 h后,SCC-25细胞凋亡逐渐增加;细胞中凋亡标志物CL-PARP、Bax、CL-casp3逐渐增加,Bcl-2逐渐减少(P0.05)。12.5、25、50μmol/L的DHM处理24 h后,SCC-25细胞自噬逐渐增强;自噬标志指标p-STAT3表达上调,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值逐渐加大,Beclin 1增加,p62逐渐减少(P0.05)。抑制自噬能促进DHM诱导的SCC-25细胞凋亡,细胞凋亡标志物CL-PARP、Bax增加,Bcl-2减少(P0.05)。结论:DHM能诱导HNSCC细胞凋亡及自噬,其机制与STAT3相关信号通路有关;抑制自噬能促进DHM诱导的HNSCC细胞凋亡。     

川芎嗪对放射损伤小鼠骨髓基质细胞血管内皮细胞生长因子表达的影响

为了探讨川芎嗪对放射损伤小鼠骨髓基质细胞血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的影响及其促进放射损伤小鼠骨髓微环境修复的机制和信号通路，采用Western blot法和流式细胞术对放射损伤小鼠骨髓基质细胞中VEGF表达水平，粘着斑激酶(FAK)和促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)活性变化及骨髓基质细胞凋亡率和细胞周期改变进行分析，同时观察川芎嗪对其影响。实验结果表明，放射损伤后小鼠骨髓基质细胞VEGF表达明显低于正常水平，随时间推移而逐渐升高，但照射后第14天仍未恢复正常，而服川芎嗪组VEGF表达在第14天时已接近正常水平；骨髓基质细胞中磷酸化FAK和磷酸化MAPK表达亦有相同变化趋势。放射损伤后，骨髓基质细胞停滞于G0—G1期，S期减少，凋亡率明显增加。随时间推移，G0-G1期细胞比例呈由高到低的变化，凋亡率也逐渐降低，至14天仍未恢复正常。用川芎嗪治疗后，骨髓基质细胞S期合成活跃，凋亡率明显下降，第14天时恢复更明显，接近正常水平。结论：川芎嗪可通过促进骨髓基质细胞VEGF的表达加速照射后骨髓造血微环境恢复．其机制可能是通过VEGF诱导FAK和MAPK磷酸化途径实现的。     

上调AMPK可促进左旋布比卡因诱导SH-SY5Y细胞凋亡

目的:探讨过表达单磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMPK)在左旋布比卡因作用于SH-SY5Y细胞过程中是否激活了ROS爆发,进而导致细胞凋亡。方法:将空载质粒pEGFP-N1和质粒pEGFP-N1-AMPKα2分别转染SH-SY5Y细胞株,Western blot法对AMPKα2表达水平进行鉴定。重组质粒的SH-SY5Y细胞和未转染细胞分别经1mmol/L左旋布比卡因处理后,MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞内ROS含量。结果:与空载质粒pEGFP-N1细胞和未转染质粒细胞相比,重组质粒pEGFP-N1-AMPKα2的SH-SY5Y细胞组的AMPKα2表达上调,1mmol/L左旋布比卡因处理后,与空载质粒pEGFP-N1细胞组及未转染质粒的细胞组相比,重组质粒pEGFP-N1-AMPKα2的SH-SY5Y细胞活力降低,ROS含量提高,细胞凋亡率增多(P<0.01)。空载质粒pEGFP-N1细胞组和未转染质粒细胞组细胞活力,细胞内ROS含量和细胞凋亡率均无明显差异(P>0.05)。结论:上调AMPKα2的表达可促进左旋布比卡因诱导ROS大量增多和细胞凋亡。     

靶向survivin的siRNA并氟尿嘧啶转染对HepG2增殖影响

目的研究靶向survivin的小分子干扰RNA（siRNA）和氟尿嘧啶（5-FU）联用对肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用及对凋亡的影响。方法将HepG2细胞分为空白对照组、阴性对照组、5-FU处理组、siRNA转染组及5-FU＋siRNA转染组。转染采用脂质体法。采用RT-PCR法分别检测HepG2细胞survivin mRNA转录水平;MTT法分别检测靶向survivin的siRNA和5-FU对HepG2细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测HepG2细胞凋亡情况。结果 siRNA转染组、5-FU＋siRNA转染组survivin mRNA表达较空白对照组、阴性对照组、5-FU处理组明显下降（F=326.78,q=5.78～7.12,P〈0.05）。5-FU＋siRNA转染组细胞增殖抑制率为51.58%±1.35%,与其他各组相比明显增高（F=1 293.24,q=15.31～82.26,P〈0.01）。5-FU＋siRNA转染组与其他各组相比细胞凋亡率明显增高（F=13 568.68,q=110.47～327.16,P〈0.01）。结论将靶向survivin的siRNA和5-FU联合应用可以显著抑制肝癌细胞survivin基因表达,并协同抑制HepG2细胞增殖,共同发挥诱导细胞凋亡作用。     

高压氧对大鼠继发性脊髓损伤保护作用的实验研究

目的探讨高压氧（HBO）治疗对继发性脊髓损伤（SCI）的保护作用及其机制。 方法96只SD大鼠采用Allen打击法造成SCI后分为HBO组、常氧高压氮组、常压吸氧组和常压空气组,分别于损伤后第1,3,7,14天取材,采用原位末端标记法（TUNEL）检测凋亡细胞,PV-9000二步法免疫组化检测caspase-3表达,光镜下观察,并对结果进行统计学分析;神经功能评价采用BBB评分。 结果HBO组在各时间点caspase-3表达均低于其他各组;TUNEL结果亦显示,HBO组凋亡细胞数低于其他各组;HBO组大鼠神经功能明显改善。 结论HBO能通过下调caspase-3的表达抑制SCI后细胞凋亡,其作用与氧有关。