人牙胚发育过程中Smad3的表达变化及其意义

目的：观察转化生长因子β（TGF-β）特异的细胞内信号转导分子Smad3在人牙胚发育过程中的时空表达,探讨Smad3对牙胚发育的作用。方法：运用免疫组化方法观察Smad3在人牙胚发育各期的表达分布和表达变化情况。结果：Smad3在牙胚发育各期均有表达,但表达模式不尽相同,总的趋势是随着成釉细胞和成牙本质细胞的分化成熟而逐渐增强。结论：观察到Smad3在人牙胚发育不同时期的表达及其表达变化,提示Smad3可能在TGF-β调节成釉细胞和成牙本质细胞分化的信号转导过程中发挥一定的作用。     

Runx2/cbfa1在人牙胚发育过程中的表达

观察核心因子Runx2/cbfa1在人牙胚发育过程中的表达,探讨cbfa1在牙齿发育过程中的作用。方法:制备人牙胚发育各期标本,免疫荧光法观察cbfa1在人牙胚发育过程中的表达情况。结果:在牙胚发育的不同时期均可见不同的时空表达模式。蕾状期表达比较广泛;帽状期内外釉上皮细胞和牙囊中呈强阳性表达,中间层也为强阳性,牙乳头为弱阳性;钟状早期,前成牙本质细胞处有强阳性表达;钟状中后期,成釉细胞为强阳性,成牙本质细胞为阴性,而牙囊部位仍为强阳性。结论:Runx2/cbfa1转录因子在人牙胚整个发育过程中的表达状况,提示该因子可能在牙胚各期的发育起一定作用,参与了各种成牙相关细胞的分化和硬组织的形成。     

Runx2/cbfal在人牙胚发育过程中的表达

观察核心因子Runx2/cbfal在人牙胚发育过程中的表达,探讨cbfal在牙齿发育过程中的作用.方法：制备人牙胚发育各期标本,免疫荧光法观察cbfal在人牙胚发育过程中的表达情况.结果：在牙胚发育的不同时期均可见不同的时空表达模式.蕾状期表达比较广泛;帽状期内外釉上皮细胞和牙囊中呈强阳性表达,中间层也为强阳性,牙乳头为弱阳性;钟状早期,前成牙本质细胞处有强阳性表达;钟状中后期,成釉细胞为强阳性,成牙本质细胞为阴性,而牙囊部位仍为强阳性.结论：Runx2/cbfal转录因子在人牙胚整个发育过程中的表达状况,提示该因子可能在牙胚各期的发育起一定作用,参与了各种成牙相关细胞的分化和硬组织的形成.     

Smad2蛋白在人牙乳头细胞内的表达及信号转位过程

观察体外原代培养的人牙乳头细胞内Ｓｍａｄ２蛋白的表达,以及Ｓｍａｄ２蛋白在转化生长因子－β１（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ－β１,ＴＧＦ－β１）信号转导中的作用。方法原代培养工牙乳头细胞,用ＴＧＦ－β１和骨形成蛋白－２（ｂｏｎｅｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎ,ＢＭＰ２）刺激培养的细胞,免疫化观察。结果：ＴＧＦ－β１和ＢＭＰ２刺激组均可见Ｓｍａｄ２蛋白表达,但与对照组相     

牙本质基质蛋白1在人牙胚发育过程中的表达和意义

目的：观察牙本质基质蛋白1(dental matrix protein，DMP1)在人牙胚发育过程中的表达和分布变化，探讨DMP1在人牙齿发育过程中的作用。方法：制备人牙胚发育各期组织标本，采用免疫组织化学方法观察DMP1在人牙胚不同阶段的表达情况。结果：DMP1主要表达于钟状晚期分泌型成牙本质细胞，在前成牙本质细胞、前成釉细胞和牙乳头细胞中表达弱阳性，在成釉细胞中有一过性表达，即在釉基质开始形成但没有形成硬组织时的分泌型成釉细胞中有表达，但在随后的分泌型成釉细胞中表达渐弱至阴性。结论：观察到DMP1在人牙胚发育不同时期的表达和表达变化，提示其可能参与成牙本质细胞和成釉细胞的分化及牙本质形成过程。     

Cav1.2在大鼠磨牙牙胚发育中的时空表达

目的观察L型钙离子通道Cav1.2亚型在大鼠磨牙牙胚发育过程中的时空表达特征,探讨其在牙齿发育中的作用。方法制作大鼠不同时期牙胚发育标本,采用免疫组织化学方法,观察Cav1.2在大鼠牙胚发育的不同时期的表达。结果 Cav1.2在大鼠磨牙发育的蕾状期、帽状期,牙蕾上皮和内釉上皮层呈弱阳性表达;钟状期时,Cav1.2在内釉上皮层和成牙本质细胞层呈阳性表达,并随着牙本质的矿化阳性表达增强。结论 Cav1.2在大鼠牙胚发育过程中具有时空表达特异性,推测其在牙胚的发育和细胞分化中发挥重要作用。     

Smad4在人牙胚发育各期的表达与分布

目的：观察转化生长因子β超家族（transforming growthfactor-βsuperfamily,TGF-β superfamily)细胞因子细胞内共同的信号转导分子Smad4在人牙胚发育过程中的表达与分布变化,探讨Smad4在牙齿发育过程中的作用。方法：制备人牙胚发育各期标本,免疫组化方法观察。结果：Smad4在牙胚发育的各个时期在特异的时空分布模式。结论：首次观察到Smad4信号分子在人牙胚发育过程中的表达,Smad4作为TGF－β超家族细胞内信号分子,可能参与上皮间充质的相互作用,同时也参与成釉细胞和成牙本质细胞的分化以及牙釉质和牙本质的形成。     

细胞内信号转导分子——Smad7在人牙胚发育中的表达和意义

目的　探讨Smad7在TGF-β调节牙胚发育过程中的作用。方法　采用免疫组化ABC法观察Smad7在人牙胚发育各个时期的表达分布及其变化情况。结果　人牙胚发育各个时期均表达Smad7,但各期分布模式有所不同。Smad7在不同发育时期牙胚中的分布与TGF-β及其特异的信号转导分子Smad2、3有相似之处。结论　Smad7 可能在TGF-β调节成釉细胞和成牙本质细胞分化的信号转导通路中起一定的作用。     

人牙乳头细胞内Smad4表达的免疫组化研究

观察转化生长因子－β超家族的细胞内信号转导分子Ｓｍａｄ４在人牙乳头细胞内的表达及信号转位过程,从细胞内信号转导水平探讨牙齿发育过程中成牙本质细胞的分化机制。方法：原代培养人牙乳头细胞,用转化生长因子－β１（ｔｒａｎｓｆｏｒｎｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ－β１,ＴＧＦ－β１）和骨形成蛋白－２（ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｈｕｍａｎｂｏｎｅｍｏｒｐｈｏｇｅｎｎｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎ,ｒｈＢＭＰ－２）刺激培养     

氯离子通道ClC-5在大鼠牙胚发育过程中的表达

目的研究氯离子通道ClC- 5在大鼠牙胚发育过程中的表达情况,探讨其在牙齿发育过程中的作用。方法从不同发育阶段的大鼠牙胚中提取总RNA和蛋白,应用RT- PCR和Western blot检测ClC- 5在大鼠牙胚发育过程中mRNA和蛋白的表达情况。结果ClC- 5在牙胚发育的过程中存在时空特异性表达,其mRNA和蛋白都主要在牙胚发育的钟状晚期表达。结论ClC- 5在大鼠牙胚发育过程中的这种时空特异性表达,提示其可能在牙齿发育的过程中发挥一定的作用。     

人牙胚发育过程中Smad2分子的表达与分布变化

目的 观察转化生长因子β（transforming growth factor－β，TGF－β）特异的细胞内信号转导分子Smad2在人牙胚发育过程中的表达与分布变化，探讨Smad2在牙发育过程中的作用。方法 制备人牙胚发育各期标本，免疫组化方法检测Smad2分子的表达。结果 Smad2在牙胚发育的各个时期存在特异的时空分布模式，其分布与TGF－β有相似之处。结论 首次观察到Smad2信号分子在人牙胚发育过程中的表达，Smad2作为TGF－β细胞内信号分子，可能参与上皮－间充质的信号诱导，同时也参与成釉细胞和成牙本质细胞的分化本质细胞原分化以及牙釉质和牙本质的形成。     

新基因mcpr1在小鼠牙胚发育中的时空表达和意义

目的:探讨mcpr1在牙胚发生过程中的可能作用。方法:采用免疫组化LsAB法观察MCPR1在小鼠牙胚发育各个时期的表达分布及其变化情况。结果:MCPR1在小鼠牙胚各个时期均有表达,但各期分布模式有所不同,帽状期开始在成釉器上皮细胞表达,在釉结节内亦呈现强阳性表达,在分化成熟的成牙本质细胞及成釉细胞内呈现出强阳性表达。结论:mcpr1可能通过上皮-间充质之间的信号传递及相关基因的相互调控,参与成釉器的成熟及牙胚的发育。     

大鼠正畸牙齿移动过程中Smad1的表达和意义

目的：探讨BMP超家族的细胞内信号转导分子Smad1蛋白在大鼠正畸牙齿移动过程中牙周组织的分布和表达。方法：用ABC免疫组织化学法，检测实验性大鼠正畸牙齿移动过程中牙周组织Smad1的表达。结果：Smad1在正畸牙齿加力各个时期存在的特异的分布模式，与BMP有相似之处。结论：Smad1参与了大鼠正畸牙齿移动过程，可能介导了BMP在正畸牙齿加力区的信号。     

上游刺激因子1在小鼠牙齿发育过程中表达的原位杂交研究

目的：检测小鼠牙齿发育中上游刺激因子1mRNA的表达及时空分布模式。方法：制备E13,16,19,P1,5,8,11,21d小鼠第一磨牙石蜡切片,用我们前期实验制备的USF1cDNA探针,原位杂交方法检测USF1mRNA的表达和分布。结果：原位杂交染色从钟状晚期小鼠牙胚中开始检测到阳性信号,持续至P11d,阳性信号主要定位于成牙本质细胞与成釉细胞;而蕾状期,帽状期,钟状期牙胚中未检测到阳性信号,并且在牙齿萌出后（P21d）,牙齿中USF1mRNA阳性信号再次消失。结论：牙胚中有USF1mRNA表达,主要位于分泌期的成牙本质细胞和成釉细胞,表达模式具有显著的时空特异性。     

BSP、OPN在小鼠牙胚发育中的表达

目的:探讨骨涎蛋白(Bone sialoprotein,BSP)、骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)在Balb/c小鼠牙胚发育各期的时空分布特点及两者在牙齿矿化过程中的作用。方法:采用免疫组化法观察Balb/c小鼠出生前后牙胚及颌骨中BSP、OPN的表达与分布。结果:BSP、OPN在牙胚发育中的时空分布模式存在差异。OPN在蕾状期的表达弱于BSP,两者在成釉器早期的发育中作用微弱;在帽状期、钟状期及牙体硬组织(牙冠、牙根)分泌形成期,OPN的表达范围及强度高于BSP,尤其在牙体硬组织形成期,OPN在牙胚各类细胞及骨组织中均呈强阳性表达。结论:BSP、OPN参与牙胚的发育及牙体硬组织的矿化成熟,在牙齿发育中发挥关键作用。     

bFGF在大鼠牙齿发育过程中表达的研究

目的:观察碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)在大鼠牙齿发育过程中的表达和分布变化,探讨bFGF在大鼠牙齿发育过程中的作用。方法:选用5、10、15、20、25d的大鼠,制备大鼠牙齿发育组织标本,采用免疫组织化学方法观察bFGF在大鼠牙齿不同阶段的表达情况。结果:在大鼠牙齿发育早期bFGF主要在成釉细胞表达,而在中间层和牙乳头表达较少。随着牙齿的发育,在成釉细胞、成牙本质细胞、前期牙本质和牙乳头表达逐渐加强。结论:bFGF可能与大鼠前期牙本质的沉积,牙釉质和牙本质的发育形成有关。     

人牙胚cDNA文库的筛选和Hevin cDNA的克隆

目的：筛选人牙胚cDNA文库,考察Hevin在牙齿发育过程中是否表达,方法：以Ｈevin的一段编码序列作为探讨筛选人牙胚cDNA文库,挑取阳性噬菌斑,将其转化为质粒ＤＮＡ,再通过限制性酶切和部分核苷酸序列分析的方法鉴定阳性克隆。结果：从人牙胚cDNA文库中筛选到一个阳性克隆,序列分析结果证实为Hevin的cDNA。结论：克隆到Hevin基因的部分cDNA序列,说明Hevin在牙胚发育过程中确有表达。