白细胞介素18与肿瘤

白细胞介素18(IL-18)是一种细胞因子，早期称IGIF(IFN-γ inducing factor)。来源于单核细胞及巨噬细胞，具有刺激T细胞增殖，增强Th及NK细胞活性，并具有抗肿瘤、抗感染等多种生物学作用，本文就其生物学活性以及抗肿瘤作用作一综述。     

白细胞介素18与肿瘤

白细胞介素 18(IL 18)是一种细胞因子 ,早期称IGIF(IFN γinducingfactor)。来源于单核细胞及巨噬细胞 ,具有刺激T细胞增殖 ,增强Th及NK细胞活性 ,并具有抗肿瘤、抗感染等多种生物学作用 ,本文就其生物学活性以及抗肿瘤作用作一综述。     

模拟mIL-18天然生成真核表达体系的构建及生物活性初探

目的：构建模拟小鼠IL-18(mIL-18)天然生成真核表达体系，并探讨其与人IL-2(hIL-2)真核表达载体pVR1012-hIL-2(phIL-2)体内外共转染对细胞免疫功能的影响。方法：分别构建小鼠IL-18前体(mproIL-18)和小鼠IL-1β转换酶(mICE)的真核表达载体pVR1012-mpmIL-18(pmproIL-18)和pEGFP-N1-mICE(pmICE)。两者单独或共转染COS-7细胞，分别在mRNA和蛋白水平检测IL-18的表达；将pmproIL-18、pmICE和phIL-23种真核表达载体分别通过体内、外共转染，初步检测其生物学活性。结果：pmproIL-18及pmICE构建正确，分别转染COS-7细胞后能检测到相应mRNA表达。在pmproIL-18单独或pmproIL-18／pmICE共转染的COS-7细胞中能检测到前体和成熟2种不同形式的mIL-18蛋白表达，并且mIL-18能分泌到上清；所分泌的mIL-18与hIL-2体外联合作用可增强小鼠脾细胞增殖能力。pmproIL-18、pmICE和phIL-23种真核表达载体联合肌肉注射的小鼠脾细胞体外杀伤同基因型肿瘤细胞的能力显著提高。结论：构建的模拟mIL-18天然生成的真核表达体系(pmproIL-18／pmICE)与phiL-2共转染有可能用于肿瘤的基因治疗。     

IL-18基因转染对小鼠卵巢癌OVHM细胞免疫生物学特性的影响

目的 分析转染IL-18基因后,小鼠卵巢癌OVHM细胞的IL-18 mRNA及蛋白表达、培养上清中IL-18含量、IFN-γ诱生能力等免疫生物学特性的变化,初步探讨IL-18基因转染治疗卵巢癌的应用价值.方法 将逆转录病毒携带的小鼠活性IL-18基因转染至OVHM(OVHM/IL-18),以空载体转染的OVHM(OVHM/LXSN)和野生型OVHM作为对照.分别采用RT-PCR及免疫细胞染色法检测3组细胞的IL-18 mRNA及蛋白表达;ELISA方法测定细胞培养上清中IL-18的含量、及其诱生小鼠脾细胞产生IFN-γ的能力.结果 OVHM/IL-18细胞中可检测到IL-18 mRNA及蛋白的表达,而OVHM/LXSN和野生型OVHM细胞中未见表达.OVHM/IL-18细胞可分泌IL-18,于培养24 h时达高峰(138.25 pg/mL±12.36 pg/mL),之后逐渐减弱;OVHM/LXSN和野生型OVHM细胞上清中未检测出IL-18.0VHM/IL-18细胞培养上清诱生IFN-γ的水平明显高于VHM/KXSN和野生型OVHM细胞(分别为33.84 pg/mL±2.36 pg/mL、18.80 pg/mL±1.06 pg/mL、18.43 pg/mL±2.64 pg/mL,P<0.01),VHM/LXSN与野生型OVHM细胞之间未见显著差异(P0.05).结论 IL-18基因转染可有效提高小鼠卵巢癌细胞IL-18mRNA的表达及其蛋白的合成释放、诱导小鼠脾细胞产生IFN-γ.IL-18基因转染可纠正肿瘤细胞的IL-18低表达状态,诱导IL-18的抗瘤效应,可能对抑制肿瘤生长、促进肿瘤消退有一定的应用价值.     

白细胞介素18基因修饰的巨噬细胞免疫效应分析

白细胞介素 18(ＩＬ 18)是新近发现的一种细胞因子 ,主要由活化的巨噬细胞和肝脏枯否氏细胞产生 ,其前体须经白介素 1β转化酶 (ＩＣＥ也称ｃａｓｐａｓｅ 1)的酶解 ,才能分泌出胞外 ,发挥生物活性[1 3] 。研究表明ＩＬ 18有多种生物学功能 ,但目前就ＩＬ 18对巨噬细胞作用的报道甚少 ,我们尝试将自发分泌ｍＩＬ 18基因重组腺病毒转染小鼠腹腔巨噬细胞 ,观察对巨噬细胞某些免疫效应功能的影响。1　材料与方法1 1　动物及细胞株　ＢＡＬＢ/ｃ小鼠 ,6～ 8周龄 ,雄性 ,购自上海必凯实验动物有限公司。 2 93病毒包装细胞由德国柏林ＭＤＣ分子医…     

甲状腺癌患者外周血及肿瘤组织中IL鄄8 的表达及其作用的初步研究

通过分析甲状腺癌患者IL-18 的表达探讨IL-18 对甲状腺癌的作用。方法:本研究共纳入2015 年6 月~2017 年1 月我院收治的123 例甲状腺癌患者作为研究对象。另选取20 例同期在我院进行体检的健康者作为对照。采用 ELISA 法(酶联免疫吸附法)检测甲状腺癌患者和健康者的血清IL-18 水平。采用Western blot 和免疫组化分析甲状腺癌患者 癌组织及癌旁组织中IL-18、IFN-γ及p-STAT1 的表达。建立小鼠模型,采用TRK鄄T1 转基因小鼠诱导甲状腺癌,构建TRK鄄T1 单转基因与TRK鄄T1/ IL-18 双转基因小鼠模型,将单转基因与双转基因后代小鼠进行比较。记录两组小鼠的甲状腺癌发生率, 绘制小鼠的生存曲线。采用Western blot 和免疫组化分析各组小鼠甲状腺癌组织中IL鄄18、IFN-γ及p-STAT1 的表达水平。流 式细胞术检测各组小鼠甲状腺癌组织中CD4+ T 细胞、CD8+ T 细胞与CD56+ CD16+ NK 细胞数量。分离正常C57BL/6J 小鼠的外 周血单核细胞(PBMC),分别转染IFN鄄酌及对照siRNA,使用IL-18 处理后检测NK 细胞的活性水平。结果:ELISA 结果显示, 甲状腺癌患者的血清IL-18 水平显著高于健康者(P<0.05)。Western blot 和免疫组化分析显示甲状腺癌患者癌组织中IL-18、 IFN-γ及p-STAT1 的表达水平均显著高于癌旁组织(P<0.05)。TRK鄄T1 单转基因与TRK鄄T1/ IL-18 双转基因小鼠的甲状腺癌 发病率分别为27.3%和7.5%,两者相比差异具有统计学意义(P<0.05)。TRK-T1/ IL-18 双转基因小鼠的生存率显著优于 TRK-T1 单转基因小鼠(P<0.05)。Western blot 和免疫组化分析显示TRK-T1/ IL-18 双转基因小鼠甲状腺癌组织中IL-18、IFN-γ及p-STAT1 的表达水平均显著高于TRK-T1 单转基因小鼠(P<0.05)。流式分析显示TRK-T1/ IL-18 双转基因小鼠甲状腺癌 组织中CD4+ T 细胞、CD8+ T 细胞与CD56+ CD16+ NK 细胞数量均显著高于TRK-T1 单转基因小鼠(P<0.05)。IL-18 处理能显著 增加正常PBMC 中NK 细胞的活性(P<0.05),而不影响转染IFN-γsiRNA 的PBMC 中NK 细胞的活性(P>0.05)。结论:甲状 腺癌患者癌组织中IL-18、IFN-γ及p-STAT1 的表达水平均显著增高,IL-18 可能通过调控IFN-γ/ JAK-STAT1 信号通路激活肿 瘤免疫从而发挥抑制甲状腺癌的作用。     

大蒜油激活枯否氏细胞分泌一氧化氮的实验研究

一氧化氮(NO)在免疫细胞对肿瘤细胞产生毒性方面具有重要意义，可影响肿瘤的增殖生长及死亡。肝脏枯否氏细胞(Kuppfer cell,KC)是机体巨噬细胞中最大的群体，有学者发现生物反应调节剂能激活枯否氏细胞的抗癌活性。本实验在体外培养中，观察大蒜油刺激小鼠枯否氏细胞前、后NO的分泌功能变化。     

具有天然N端的小鼠高活性IL-18的高效表达与纯化

IL-18是IL-1家族成员,与IL-1β相似,IL-18也是以前体形式合成,其成熟和分泌需要Caspase-1的作用。我们正确克隆了小鼠IL-18全长cDNA,并成功构建了真核表达载体pcDNA3-proIL-18,能在真核细胞COS7中得到正确表达;为了得到具有天然N端的成熟IL-18(mIL-18),IL-18cDNA上Caspase-1的识别位点被转换成FactorXa的作用位点,并克隆到原核表达载体pGEX-4T-1中,IPTG能大量诱导GST-IL-18融合蛋白的可溶性表达,经一步亲和纯化后,能得到30～50mg融合蛋白/升菌;经过FactorXa作用融合蛋白,能得到大量(5～8mg/升菌)、高纯度(>95%)的mIL-18。与商品化的IL-18相比,所得mIL-18能诱导小鼠脾细胞表达更高水平的IFN-γ,表现出更强的生物学活性,这为进一步在小鼠系统中研究IL-18的功能、人成熟IL-18蛋白的高效表达、纯化以及其后可能的临床应用奠定了基础。     

TNF-α对小鼠腹腔渗出细胞抗真菌活性的影响

目的：研究TNF—α对小鼠腹腔渗出细胞的激活和杀菌活性的效应。方法：以IL-12、IL-18、IFN—γ、TNF-α及抗体诱导小鼠腹腔渗出细胞和巨噬细胞，应用ELISA法测定细胞因子变化，Griess反应法测定培养上清液中NO的含量，检测巨噬细胞内新型隐球菌菌落数。结果：IL-12和IL-18联合应用协同诱导腹腔渗出细胞产生TNF—α，且能被IFN—γ抗体所抑制。IFN—γ、TNF-α协同诱导巨噬细胞产生NO和增强其杀伤新型隐球菌活性。结论：TNF—α在细胞因子相互调节诱导增强巨噬细胞杀真菌活性中起重要作用。     

IL-18、IL-18BP在肝脏疾病及肿瘤中的作用研究进展

在炎症、肿瘤的发生、发展过程中,细胞因子的作用越来越受到关注,多种细胞因子(如IL-2、IL-12、IFN-γ、IL-18等)在炎症反应、肿瘤免疫中发挥着重要的作用.IL-18和IL-18BP是新近发现的一对新的拮抗因子,IL-18BP可以在体内外有效抑制IL-18的生物学活性,两者的局部以及循环浓度可能决定炎症、感染和肿瘤状态下的IL-18的生物学作用,且与新生血管生成密切相关.现就IL-18、IL-18BP在肝脏疾病及肿瘤中的研究进展作一综述.     

IFN-γ诱导因子——白细胞介素18及其生物学活性

IL-18是新近发现的一种细胞因子,主要来源于单核巨噬细胞样细胞。它具有多种生物学功能,能促进外周血单个核细胞产生IFN-γ、IL-2、GM-CSF等细胞因子.增强NK细胞的细胞毒作用.促进T细胞的增殖.在诱导Thl细胞的分化成熟过程和Thl细胞为主的细胞免疫反应中具有促进和调节作用。并与自身免疫病和免疫炎症反应引起的疾病密切相关。     

小鼠IL-18基因修饰瘤苗的抗白血病作用研究

我们在前期工作中成功制备了IL-18基因修饰的白血病疫苗,为了探讨IL-18基因修饰瘤苗的体内抗白血病作用,实验采用L1210小鼠淋巴细胞白血病模型,在小鼠体内接种IL-18基因修饰瘤苗,观察瘤苗对L1210细胞致瘤性的影响及免疫保护作用,并进一步对其抗白血病作用机制进行了探索。结果显示,IL-18基因修饰瘤苗能够明显延长荷瘤小鼠存活时间,大部分小鼠达到长期生存,且长生存小鼠用野生型L1210细胞二次攻击后大多数仍能长期生存,表明IL-18基因修饰瘤苗有显著的抗白血病作用,并可诱导小鼠产生免疫记忆和免疫保护。机制探讨发现,接种IL-18基因修饰瘤苗后,小鼠脾脏淋巴细胞对L1210肿瘤细胞的CTL及NK细胞杀伤活性明显高于对照组(P<0.05),提示IL-18基因修饰瘤苗能够显著增强抗肿瘤CTL和NK细胞反应。接种瘤苗可使小鼠IFN-γ水平升高,但与对照相比无统计学意义,提示IFN-γ可能在IL-18基因修饰瘤苗诱导的抗肿瘤免疫应答中作用不大。     

白细胞介素18与肿瘤

白介素18(IL-18)具有强烈的诱导IFN-γ的能力,能促进NK细胞的活化和杀伤能力以及CTL的细胞毒活性。现已研究IL-18水平与肿瘤临床的关系,并将IL-18应用于肿瘤的免疫治疗。在许多小鼠的肿瘤模型中,IL-18表现出显著的抑制肿瘤和治疗效应,并由此探索出多种IL-18应用方式。文章着重介绍了IL-18的三种主要应用方式、效果和IL-18可能的抗肿瘤机制。     

IL—18的生物学活性及其与肝病的关系

IL-18是一种分布广泛的细胞因子，具有诱导IFN-γ等细胞因子的产生、增强NK细胞活性及促进，Thl细胞的分化，增强，Thl类反应等多种生物学活性，在介导炎症、调节机体的免疫功能方面具有重要作用。现将其生物学活性及在肝病中的作用综述如下。     

小鼠白介素18与白介素1β转化酶共表达载体的构建及真核表达

为了制备白介素18前体(proIL-18)和白介素1β转化酶(ICE)共表达肿瘤疫苗,从小鼠脾细胞克隆proIL-18和ICE基因,构建小鼠proIL-18和ICE共表达质粒(pIRES-proIL-18-ICE),经测序证实序列正确后,脂质体法转染小鼠淋巴细胞白血病细胞系L1210,筛选稳定表达细胞株。转染细胞RT-PCR及转染细胞培养上清IL-18ELISA检测结果表明,肿瘤细胞可以表达并分泌成熟的IL-18。培养上清的IL-18可显著诱导ConA刺激的小鼠脾细胞产生IFN-γ,表明其具有功能活性。生长曲线和细胞周期实验证实与未转染的肿瘤细胞相比,转染空载体pIRES、pIRES-proIL-18、pIRES-ICE、pIRES-proIL-18-ICE基因对肿瘤细胞生长增殖无明显影响。IL-18白血病瘤苗的成功制备表明,利用pIRES载体在同一肿瘤细胞中共表达的proIL-18和ICE能够完全模拟生理过程,在真核细胞内有效酶切,分泌出成熟并有功能活性的IL-18;构建的IL-18瘤苗为进一步评价其在小鼠体内的抗白血病效果奠定基础。     

IL-18信号转导途径研究进展

白细胞介素18(IL-18)是新近发现的细胞因子,其独特的少TATA型启动子、特殊的mRNA结构及其前体蛋白需IL-1β转化酶(ICE)加工成熟的特点,使得IL-18基因可广泛表达于多种类型的细胞。IL-18与IL-18受体结合组成受体复合物,受体复合物信号通过IRAK-TRAF6途径激活NF-кB,及通过酪氨酸蛋白激酶(PTK)的LCK-MAPK信号途径诱导TH1细胞产生IFN-γ、IL-2等细胞因子。IL-18通过AP-1位点调节IFN-γ启动子活性,而IL-12则需要通过STAT4和AP-1两个位点共同调节IFN-γ启动子的活性。     

不同杂交瘤饲养细胞上清和条件培养液中IL-2和IL-6水平的比较

本文应用细胞因子依赖细胞株CTLL和7TD1及。~3H-TDR掺入方法,分别对6种常用培养杂交瘤的饲养细胞培养上清和条件培养液中IL-2和IL-6的生物学活性水平进行了定量检测和比较。结果发现,除大鼠混合胸腺细胞培养上清中含有约1u/ml IL-2外,其它均未测出IL-2的生物学活性。但6种上清中都含有IL-6,其中人成纤维细胞CRL_(1506)和人内皮细胞中含有很高水平的IL-6,分别为10000u/ml和2512u/ml;大鼠混合胸腺细胞和小鼠腹腔巨噬细胞培养上清分别为158u/ml和126u/ml;小鼠脾脏细胞和胸腺细胞培养上清中IL-6相对较低,分别为79u/ml和16u/ml。此外,本文还对常用饲养细胞及条件培养液在杂交瘤细胞生长中可能起的主要作用进行了讨论。     

IL-18在抗流感病毒感染早期免疫应答中的作用

IL-18是话化巨噬细胞产生的IFN-γ诱导因子。IL-18可增加脑实质中IFN-γ产生细胞数，增强活化小神经胶质细胞的功能。体外实验证明肺巨噬细胞能选择性识别和杀伤被流感病毒感染的组织细胞，抑制流感病毒的增殖。本研究利用IL-18基因缺陷鼠流感病毒感染模型，探讨IL-18在调节肺巨噬细胞抗流感病毒感染早期免疫应答中的作用。     

miR-146a对小鼠巨噬细胞IL-18表达的影响

目的:探讨miR-146a对小鼠单核-巨噬细胞株RAW264.7以及小鼠原代腹腔巨噬细胞Thl/Th2类细胞因子表达的影响。方法:体外培养的小鼠单核-巨噬细胞系RAW264.7细胞和腹腔新鲜分离的巨噬细胞分别瞬时转染miR-146a mimics、阴性对照mimics(NC mimics)、抑制性miR-146a(miR-146a inhibitor)和抑制性miR-146a阴性对照(NC in-hibitor)。转染后,利用real time PCR定量检测IL-18、IL-5和IL-10的表达情况。结果:RAW264.7细胞和原代腹腔巨噬细胞在转染miR-146a mimics后IL-18的表达水平明显降低(P<0.05),转染miR-146a inhibitor后IL-18的表达水平明显升高(P<0.05),但对IL-5和IL-10的表达,两种转染形式均没有影响。结论:巨噬细胞RAW264.7及原代巨噬细胞表达的miR-146a能够负向调控Thl类细胞因子IL-18的表达,但是不能调控Th2类细胞因子IL-5及IL-10的表达。     

玉屏风散对S180荷瘤小鼠肿瘤生长及免疫功能的影响

目的:探讨玉屏风散对荷瘤小鼠肿瘤生长及免疫功能的影响.方法:采用体外培养S180肉瘤细胞,接种健康小鼠,建立荷瘤小鼠模型,并给予玉屏风散治疗,观察计算抑瘤率,检测巨噬细胞吞噬活性,巨噬细胞NO分泌量,自然杀伤细胞(NK)活性,T淋巴细胞增殖能力及白介素-2(IL-2)的产生及活性.结果:玉屏风散可提高荷瘤小鼠吞噬细胞的功能,增加巨噬细胞NO分泌量,促进荷瘤小鼠白介素-2(IL-2)的产生,淋巴细胞的转化、及NK细胞活性.结论:玉屏风散可增强荷瘤小鼠的免疫功能,抑制模型鼠肿瘤的生长.