卵巢组织冷冻保存及移植技术进展

背景:生育力保存技术可以为因肿瘤或肿瘤治疗相关原因失去卵巢功能的女性患者提供恢复内分泌功能和生殖功能的机会。目的:阐述了卵巢组织玻璃化冷冻以及冻融卵巢组织自体移植等技术在重建卵巢功能方面取得的进展和存在的问题。方法:应用计算机检索CNKI和Pubmed数据库中1999-01/2011-12关于卵巢早衰的文章,在标题和摘要中以"卵巢早衰,玻璃化冷冻,卵巢移植"或"premature ovarian failure,vitrification freeze,ovary transplantation"为检索词进行检索。最终选择关于卵巢玻璃化冷冻和自体移植的40篇文献进行综述。结果与结论:对于重建肿瘤相关性卵巢早衰患者卵巢功能,卵巢组织玻璃化冷冻保存和自体原位移植具有广泛临床应用前景。不仅能够恢复自然生育力、生殖功能及内分泌功能,而且不存在免疫排斥,也没有伦理学争议,安全方便。可以相信,随着医学技术的发展和进步,卵巢组织冷冻移植技术将越发成熟,为更多的女性肿瘤患者保存生育力和内分泌功能带来福音。     

卵巢组织玻璃化冷冻保存和移植的研究进展

背景:卵巢组织玻璃化冷冻技术作为一种快速、简便、经济的冷冻方式被逐渐应用于卵巢组织的保存。目的:综述国内外关于卵巢组织玻璃化冷冻保存及移植的研究进展。方法:由第一作者检索1995/2011PubMed数据库及清华同方数据库有关卵巢组织玻璃化冷冻保存以及卵巢组织移植技术等方面的文献。结果与结论:玻璃化冷冻是一个超高速的冷冻过程,形成高黏度的"玻璃样凝固状态",可以避免由于冰晶形成所造成的细胞损伤。但至今玻璃化冷冻仍缺乏统一的标准化程序。影响卵巢组织玻璃化冷冻保存效果的主要因素有卵巢组织块的大小、冷冻保护剂的种类、渗透平衡的时间和温度、冷冻载体等。随着低温生物学的发展和卵巢组织冷冻保存效果的提高,卵巢组织的移植已经具备了一定的临床应用可行性。到目前为止,全世界已有一系列关于冻存卵巢组织移植后成功妊娠及分娩的报道,移植成功的关键在于减少缺血再灌注损伤和促进新生血管的形成。     

卵巢移植在宫颈癌治疗中的临床应用价值

目的:探讨卵巢移植在宫颈癌患者中应用的可行性、临床价值、并发症及其预防。方法:应用计算机检索中国全文期刊数据库1985/2006卵巢移植相关的文献,检索词为“卵巢移植、宫颈癌”,限定语言种类为中文,同时检索Pubmed数据库1995/2006有关宫颈癌卵巢移植的文献,检索词为“cervical cancer,ovarian transplantation”,限定语言种类为“English”,共收集51篇文献,进行归纳总结。结果:①对于年轻的宫颈鳞癌患者,保留卵巢并行自体异位移植手术是安全的,也是必要的。②宫颈癌患者卵巢自体移植的方法有卵巢组织移植术、带蒂卵巢器官移植术(卵巢移位术)、游离卵巢器官移植术等术式。③移位术后卵巢的功能较原位卵巢下降,卵巢器官移植术后较移位术后下降显著,辅以放疗后进一步加重卵巢功能的损伤。④卵巢移植术后常见的并发症有移植部位结节和包块、症状性卵巢囊肿、移植部位疼痛和卵巢功能衰退,但是可以预防的。结论:卵巢移植术使年轻宫颈癌患者的卵巢得以保留,但由于移植后卵巢功能减退及术后辅助放疗对卵巢的影响、移植后宫颈癌卵巢转移等问题限制了临床应用,如能对上述问题加以预防和治疗,卵巢移植术在宫颈癌患者中会有广阔的应用前景。     

组织工程化肌腱移植的进展

背景:肌腱移植是重建损伤肌腱功能的主要手段,目用于肌腱移植的材料有自体肌腱、同异体肌腱、异种异体肌腱、人工肌腱、组织工程化肌腱等,但均有各自的缺点.目的:就近年肌腱缺损的自体和异体移植治疗进展进行总结,为组织工程修复肌腱损伤的研究提供理论基础.方法:由第一作者于 2010-03 应用计算机检索 PubMed 数据库、万方数据库和维普数据库相关文献.英文资料的检索时间为 2000/2010-03;中文资料的检索时间为 2002-01/2010-03.英文检索词为"tendon tissue engineering,tendon allograft,transplantation";中文检索词为"肌腱,损伤修复,移植,自体,异体,组织工程".纳入标准:①肌腱损伤修复的发展史.②自体或异体肌腱移植治疗肌腱损伤的研究.③动物实验及临床应用.阅读标题和摘要进行筛选,共纳入30篇用于文章分析.结果与结论:随着组织工程研究的发展,利用细胞生物学、分子生物学及生物材料学技术构建组织工程复合物已成为是肌腱移植材料的研究热点.但异体肌腱移植后的排斥反应、粘连及转归情况等,尚需动物实验及临床研究做进一步观察和验证.     

细胞移植在白癜风治疗中的应用

目的:介绍细胞移植治疗白癜风的各种方法及效果。资料来源:应用计算机检索Medline 1996-01/2006-12与细胞移植治疗白癜风相关的文章,检索词为“vitili,gotransplantatio,nMelanocyte-keratinocyte cell,epidermal cell”,限定文献语种为“English”;同时检索万方数据库2000-01/2006-12相关文章,检索词为“白癜风,移植,黑素细胞,表皮细胞”,限定文献语种为中文。资料选择:共检索到相关文献180余条,选择细胞移植治疗白癜风临床应用,以及相关的表皮细胞或黑素细胞培养文章,无论是否随机、有无对照组均纳入,排除综述类及重复文献。资料提炼:对筛选的文章进一步查找全文,纳入31篇作为参考文献进行综述。31篇中介绍表皮细胞培养移植的8篇,介绍自体培养的黑素细胞移植的13篇,5篇论述表皮细胞悬液移植情况,报道同种异体黑素细胞移植的5篇。资料综合:文章介绍了4种移植治疗白癜风的不同方法,包括自体表皮细胞培养移植、自体培养的和非培养的黑素细胞移植、以及同种异体黑素细胞移植。治疗方法的选择因人而异,主要根据白斑的部位和大小。自体培养和非培养的黑素细胞移植治疗白癜风比传统的表皮移植效果好,用少量供皮区可以治疗大面积皮损,很有前景,但还有诸如细胞繁殖方法、移植技术、费用以及安全性等问题需要解决。结论:细胞移植是治疗白癜风的一个重要手段,但目前关于细胞移植的临床经验并不多,有的还在研究和探索阶段,所以应该小心谨慎。     

角膜缘干细胞移植在眼科的临床应用及发展

目的:探讨角膜缘干细胞移植的应用现状及发展前景。资料来源:应用计算机检索PUBMED 2000/2007与角膜缘干细胞移植相关的文章,检索词“limbal stem cells,transplantation”,限定文献语种为“English”;同时检索万方数据库2000/2007相关文章,检索词“角膜缘干细胞,移植”,限定文献语种为中文。资料选择:共检索到相关文献180余条,选择与角膜缘干细胞的组织生物学特征、角膜缘干细胞的体外培养以及角膜缘干细胞的临床应用相关的文章。资料提炼:将初步筛选的文章进一步查找全文,排除综述和重复文献,内容相似的选择发表在权威杂志或近3年发表的文献,无论有无对照组,观察对象为人或动物均纳入。最后共纳入37篇进行综述,其中7篇研究角膜缘干细胞的组织生物学特性,8篇介绍角膜缘干细胞的体外培养,剩余22篇文章为角膜缘干细胞移植的基础和临床研究。资料综合:角膜缘干细胞移植,可以恢复正常的角膜缘屏障功能,重建眼表的完整性;而最终改善角膜的透明性和视功能。目前开展的角膜缘干细胞移植,包括自体或异体角膜缘组织移植和体外培养的角膜缘干细胞移植。自体角膜缘干细胞的移植已成为临床上较为可靠和日益成熟的治疗方法,但来源有限,且不适合双眼角膜缘病变的患者,异体角膜缘组织移植存在排斥反应,因此自体角膜缘干细胞体外培养移植术被认为是目前较理想的角膜缘干细胞移植方法,但其远期疗效需进一步临床观察。结论:目前角膜缘干细胞移植治疗严重角膜病变的研究尚处于初步阶段,自体角膜缘干细胞移植成功率是较高,自体角膜缘干细胞培养后移植治疗眼表疾病已初步获得成功,但还存在一些问题,如角膜缘干细胞生存的微环境、培养的干细胞生理、生化的免疫特性,以及黏附、增殖、分化能力等问题尚需进一步研究。     

肌腱移植材料与组织工程化肌腱移植技术

目的:就近年来国内外肌腱移植材料的研究进展,对组织工程化肌腱移植技术取得的成果进行总结。资料来源:应用计算机检索Medline1980-01/2005-01相关肌腱移植材料与组织工程化肌腱移植技术的文献,检索词“tendon transplant,tissue engineer,progress”,并限定文献语言种类为English。同时计算机检索CBM1990-01/2005-01相关肌腱移植材料与组织工程化肌腱移植技术方面的文献,检索词为“肌腱移植,组织工程,综述文献”,并限定语言种类为中文。资料选择:对资料进行初审,选取包括肌腱移植材料与组织工程化肌腱移植技术的文献,开始查找全文。纳入标准:①肌腱移植材料。②组织工程化肌腱移植技术。排除标准:综述文献,重复研究,Meta分析类文章。资料提炼:共收集到45篇关于肌腱移植材料与组织工程化肌腱移植技术的文献,纳入30篇符合标准的文献。资料综合:用于肌腱移植的材料主要有以下几类:自体肌腱、同种异体肌腱、人工肌腱和组织工程化肌腱。近年来在异体肌腱移植方面取得了较成熟的经验。20世纪80年代后期组织工程技术的建立和发展,为肌腱组织缺损的修复又提供了一条新的思路和途径。组织工程化肌腱的研究目的是将体外预制的肌腱回植入体内的肌腱缺损处以恢复关节的功能。目前,研究者正致力于研究同时集两类生物材料优点的细胞支架,与肌腱细胞联合体外培养,使之可以成为一种永久性的有生命活性的组织工程化肌腱。结论:肌腱移植的材料主要有自体肌腱、同种异体肌腱、人工肌腱和组织工程化肌腱等。种子细胞、细胞外基质材料应用的深入研究必将推动组织工程化肌腱移植技术的进一步发展。     

大鼠卵巢组织的冷冻移植

背景:玻璃化冷冻是应用高浓度的冷冻保护液结合极快的制冷速度,使细胞快速冷冻,避免细胞内外冰晶形成对细胞的破坏作用,是一种比较新的冷冻方法,具有操作简单、冷冻效率高等特点.目的:采用玻璃化冷冻技术冷冻大鼠卵巢组织,比较4种冷冻保护剂对大鼠卵巢组织学和功能的影响.方法:将大鼠随机数字表法分为6组,每组6只:二甲基亚砜+乙二醇组、二甲基亚砜+乙二醇+蔗糖组、二甲基亚砜+乙二醇+蔗糖+乙酰胺组、乙二醇+蔗糖+乙酰胺组、去势组、正常对照组.4冷冻组摘除卵巢后应用相应的冷冻保护液冻存,去势组仅摘除卵巢不冻存、不移植,正常对照组不作处理.冻存2周后解冻复苏行同体异位移植,将卵巢组织植入大鼠后肢大腿内侧.移植后30 d,观察阴道上皮类型及动情周期;移植后3个月,经腹主动脉采血检测血清雌二醇水平;回收卵巢组织做组织学检查.结果与结论:4冷冻组均可见卵巢组织结构受损表现,原始卵泡的形态正常率分别为67.9%,71.6%,80.5%,59.4%,初级卵泡形态正常率分别是41.6%,52.3%,55.9%,36.7%.二甲基亚砜+乙二醇+蔗糖+乙酰胺组卵泡正常率较二甲基亚砜+乙二醇组、乙二醇+蔗糖+乙酰胺组高(P<0.05);不同发育阶段卵泡构成比差异无显著性意义,均未见典型的次级卵泡.受损的卵细胞主要表现为体积变小、胞浆内出现空泡、核皱缩等.4冷冻组未出现典型动情周期的细胞类型.移植物自周围组织获得可见的血管供应,将卵巢组织块连接形成网络.移植物内毛细血管丰富,皮质中可见成群的原始卵泡,初级卵泡、次级卵泡所占比例低于原始卵泡,形态与正常者相似.4种冷冻方法冻存卵巢组织血清雌二醇水平较正常对照组明显降低(P<0.01),二甲基亚砜+乙二醇+蔗糖+乙酰胺组高于其他冷冻组(P<0.05).结果提示4种冷冻方法均对大鼠卵巢组织有一定程度破坏,初级卵泡的损伤大于原始卵泡.冻存复苏后,卵巢功能恢复,但并不完全,二甲基亚砜+乙二醇+蔗糖+乙酰胺组效果优于另外3组,但移植后动物没有出现规律的动情周期,提示冷冻方法尚需进一步完善.     

运动性肌腱损伤同种异体移植和外科修复的生物力学特征

背景:为了提高肌腱损伤后的缝合修复强度、尽早开始主被锻炼、防止肌腱粘连,研究者们在不断地寻找更牢固的缝合方法。大于3cm的肌腱缺损.不能直接缝合,目前主要依靠自体、异体肌腱移植修复。目的:总结同种异体肌腱移植和外科修复运动性肌腱损伤涉及的生物力学研究现状。方法:应用计算机检索PubMed数据库及中国期刊网全文数据库1994-01/2011-10有关肌腱损伤的外科修复和同种异体肌腱移植修复的生物力学方面的文章,英文检索词为"tendon,biomechanical study,repair,suture,allogenetic tendon",中文检索词为"肌腱,生物力学,同种异体移植,缝合"。排除重复性及非中英文语种研究,共保留34篇文献进行综述。结果与结论:对肌腱吻合方法进行生物力学测量,能了解哪种方法更能满足早期功能锻炼的需要,更能有效防止肌腱再断裂和吻合处间隙形成,以便在术后早期功能锻炼时有更大的安全性。深低温冷冻化和玻璃化保存同种异体肌腱移植在生物力学方面的表现与自体肌腱移植结果基本相同,可替代自体肌腱应用于移植修复肌腱缺损。     

冻存卵巢组织移植后抗损伤处理对移植结局的影响

背景:卵巢组织移植是无血管吻合移植,改善卵巢组织对移植后损伤的耐受力是提高冻存后移植卵巢组织卵泡存活和发挥功能的关键环节.目的:比较冻存后卵巢组织自体异位移植后,应用血管内皮生长因子、维生素E、黄芪抗损伤处理对卵巢组织形态和功能恢复的影响.方法:将成年雌性Wistar大鼠随机数字表法分为4组:正常对照组、去势组、自体新鲜卵巢组织移植组(卵巢组织未冻存,直接移植)、冷冻保存卵巢组织移植组.冷冻保存卵巢组织移植组移植后分3组干预:未经抗损伤处理组,血管内皮生长因子、维生素E、黄芪联合抗损伤组,血管内皮生长因子、维生素E联合抗损伤组.移植2个月后检测血清雌二醇水平,苏木精-伊红染色后观察卵泡的形态及正常卵泡数量.结果与结论:应用血管内皮生长因子、维生素E、黄芪联合抗损伤组较未用药物组血清雌二醇水平升高,初级卵泡数量增加,且差异显著(P＜0.05),即抗损伤药物对卵巢形态和功能的恢复有作用.血管内皮生长因子、维生素E、黄芪联合抗损伤组血清雌二醇水平、初级卵泡数量略高于血管内皮生长因子、维生素E联合抗损伤组,但差异无显著性意义.尚不能认为加用黄芪抗损伤处理效果更佳.提示自体异位移植后应用血管内皮生长因子、维生素E、黄芪抗损伤处理对卵巢形态和I功能的恢复均有作用.