中成药坤宁安调控围绝经期大鼠卵巢颗粒细胞凋亡因子Bcl-2 mRNA表达的特点

目的:观察中成药坤宁安对围绝经期大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响。方法:实验于2004年在黑龙江中医药大学完成。选用13～15个月龄雌性Wistaer大鼠50只,经阴道脱落细胞涂片检查,呈现出无动情周期确定为围绝经期鼠。随机分为5组,围绝经期模型组、坤宁安高剂量组,坤宁安低剂量组、替勃龙对照组、更年康对照组,每组10只。另选5月龄雌性Wistar大鼠10只作为青年对照组。围绝经期模型组给予生理盐水2mL,坤宁安高剂量组给予1.96g/kg坤宁安混悬液穴组成为柴胡、桂枝、龙骨、牡蛎、白芍、当归等雪;坤宁安低剂量组给予0.49g/kg坤宁安混悬液;替勃龙对照组给予0.136mg/kg替勃龙混悬液;更年康对照组给予0.15g/kg更年康混悬液;青年对照组给予生理盐水2mL,灌胃1次/d。灌胃4周后,断头处死,剖取大鼠卵巢,即供原位杂交法检测Bcl-2mRNA的表达。卵巢颗粒细胞凋亡因子Bcl-2mRNA阳性评定标准:根据切片卵巢组织中卵泡内颗粒细胞免疫组织化学染色的深浅分4级,未被染色的为阴性表达,深棕色为弱阳性表达,棕黄色为中度阳性表达,棕褐色为强阳性表达。为统计方便,予以半定量计分:1,2,3,4分别对应阴性表达,弱阳性表达,中度阳性表达,强阳性表达。每张切片至少观察3个视野。结果:实验过程中,围绝经期模型组、更年康对照组各有1只大鼠死亡。其余大鼠均存活直至实验结束。青年对照组大鼠卵巢颗粒细胞Bcl-2mRNA呈强阳性表达,围绝经期模型组大鼠卵巢颗粒细胞Bcl-2mRNA呈弱阳性表达,青年对照组与之相比差异有极显著性意义(P<0.01)。坤宁安高、低剂量组、替勃龙对照组大鼠卵巢颗粒细胞均有不同程度的Bcl-2mRNA阳性表达,与围绝经期模型组大鼠比较差异均有极显著性意义(P<0.01),更年康对照组大鼠卵巢颗粒细胞Bcl-2mRNA蛋白表达呈弱阳性,与围绝经期模型组比较差异有显著性意义(P<0.05)。结论:围绝经期大鼠卵巢颗粒细胞凋亡与Bcl-2mRNA的阳性表达呈负相关,坤宁安通过调控大鼠卵巢颗粒细胞Bcl-2mRNA的表达,达到延缓卵巢颗粒细胞凋亡的目的。     

氧化修饰高密度脂蛋白对大鼠颗粒细胞激素分泌的影响及相关机制

目的研究氧化修饰高密度脂蛋白(Ox-HDL)对大鼠颗粒细胞激素分泌的影响及相关机制。方法 30只6周龄SPF级SD雌性大鼠经适应性饲养5 d后,采用孕激素拮抗剂米非司酮进行多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠造模。随机选择25只雌鼠,每天对大鼠进行1次皮下注射,每次剂量0.2 mL米非司酮(20 mg/mL),连续14 d。其余5只雌鼠作为对照组。选择造模成功的15只雌鼠,分为模型组,低剂量组及高剂量组,每组5只。对照组及模型组大鼠尾静脉注射0.05 mL生理盐水,连续14 d。低剂量组和高剂量组每天尾静脉注射0.05 m L Ox-HDL溶液(浓度分别为200、400μmol/L),连续14 d。并收集大鼠卵巢颗粒细胞。采用ELISA试验检测大鼠血清雌激素及孕酮水平;采用HE染色检测Ox-HDL对PCOS卵巢病理形态的影响观察;采用Hoechest33258凋亡染色检测大鼠颗粒细胞凋亡水平的影响;采用RT-PCR法检测Ox-HDL对大鼠颗粒细胞Bcl-2、FSHR、StAR及Bax基因表达的作用;采用Western blot法检测Ox-HDL对大鼠颗粒细胞Bcl-2、FSHR、StAR及Bax蛋白表达的作用。结果 PCOS大鼠在Ox-HDL作用后,雌激素及孕酮水平均下降差异有统计学意义(P<0.05),高剂量组的雌激素及孕酮均显著低于其它各组差异有统计学意义(P<0.05)。HE染色发现PCOS大鼠给予高剂量Ox-HDL后,囊肿卵泡进一步增多,颗粒细胞排列较为疏松,大鼠卵巢病理症状有一定加剧。Hoechest33258凋亡染色检测发现高剂量组细胞凋亡水平显著高于其它各组(P<0.05)。RT-PCR实验发现发现Ox-HDL可抑制颗粒细胞Bcl-2、FSHR、StAR基因的mRNA表达水平差异有统计学意义;Ox-HDL可促进颗粒细胞Bax基因的mRNA表达水平差异有统计学意义(P<0.05)。Western blotting实验发现发现Ox-HDL可抑制颗粒细胞Bcl-2、FSHR、StAR蛋白表达水平;Ox-HDL可促进颗粒细胞Bax蛋白表达水平差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Ox-HDL可促使PCOS大鼠卵巢病理症状加剧,诱导颗粒细胞发生凋亡,并导致颗粒细胞激素分泌能力紊乱。     

雌激素对大脑皮质细胞的神经保护作用

目的：观察雌激素对体外培养的大鼠大脑皮质细胞在发生缺血缺氧损伤时的保护作用及对凋亡基因Bcl-2和Bax表达的影响。方法：原代培养大鼠大脑皮质细胞，将实验分为对照组和雌激素组。对照组给予等体积蒸馏水+100mmol／L谷氨酸，雌激素组给予雌激素0．1mmol／L+100mmol／L谷氨酸，作用24h透射电镜观察细胞超微结构。免疫组化和RT-PCR观察Bcl-2和Bax的表达。结果：透射电镜显示雌激素能改善大脑皮质细胞超微结构，抑制凋亡。免疫组化雌激素组Bcl-2的阳性细胞数明显增加，而Bax的蛋白表达则无明显改变。RT—PCR结果雌激素组Bcl-2mRNA的表达为0．72，较对照组0．56明显上调，差异有非常显著性意义(P&;lt;0．01)。BaxmRNA的表达虽无明显改变，但Bcl-2和Bax的比率二组差异有非常显著性意义，分别为1．14和0．86(P&;lt;0．01)。结论：雌激素能改善大鼠大脑皮质细胞超微结构，具有神经保护作用。而且能上调抗凋亡基因Bcl-2表达，抑制细胞凋亡。     

3cl-2基因在脓毒症大鼠心肌细胞凋亡中作用的研究

目的：探讨Bcl-2基因在脓毒症大鼠心肌细胞凋亡中的意义。方法：以盲肠结扎并穿刺法制作脓毒症大鼠模型。用电镜和TUNEL法检测其心肌细胞凋亡变化，用免疫组化方法检测Bcl-2蛋白，用RT-PCR法检测其心肌细胞的Bcl-2基因mRNA的表达。用SPSS10．0软件完成统计分析。结果：一定时间内脓毒症大鼠心肌细胞凋亡数均明显高于正常对照组和假手术对照组（P〈0．05），Bcl-2蛋白表达阳性细胞数和mRNA表达量均较正常对照和假手术组明显降低（P〈0．05），其变化均与TUNEL法检测凋亡的结果一致（P〈0．05）。结论：细胞凋亡可能是脓毒症中心肌损害的机制之一。Bcl-2基因的改变可作为脓毒症病情改变的标志。     

紫参颗粒治疗围绝经期综合征实验研究

目的:研究紫参颗粒的作用机理.方法:以去卵巢大鼠模型模拟围绝经期卵巢功能减退,观察紫参颗粒大、中、小剂量组与模型组、阴性组、更年康阳性组及正常组作对照,同时观察小鼠对紫参颗粒高、低剂量组与更年康阳性组及生理盐水阴性组作对照.结果:紫参颗粒中剂量组有使去势大鼠血清FSH水平降低、IL-2水平上升趋势,并使其子宫、胸腺、脾脏的重量系数增加;对小鼠有明显催眠、镇静作用,且明显优于阳性对照组(P＜0.05).提示:紫参颗粒能调整去势大鼠血中性激素水平,提高其免疫力;对小鼠有较强的催眠、镇静作用.     

人参和氯沙坦对缺血再灌注心肌细胞Bcl-2表达的影响

背景：心肌细胞凋亡与缺血再灌注损伤直接相关，Bcl-2表达与细胞凋亡密切相关。临床和实验证实人参和氯沙坦均能改善心肌缺血，对缺血再灌注损伤有明显保护作用，但两者对缺血再灌注心肌细胞损伤有何异同？目的：探讨人参和氯沙坦对大鼠缺血再灌注心肌细胞内Bcl-2mRNA和蛋白质表达的影响。设计：随机对照实验。单位：华中科技大学同济医学院附属同济医院心血管内科，华中科技大学同济医学院神经生物学系。材料：实验于2002-11／2003—04在华中科技大学同济医学院附属同济医院心血管内科实验室完成。采用健康成年Wistar大鼠40只，体质量200-250g，雌雄不限，随机分为假手术对照组，缺血再灌注组，人参治疗组和氯沙坦治疗组，每组10只。方法：缺血再灌注组，人参治疗组和氯沙坦治疗组均造模，假手术对照组不造模。氯沙坦治疗组术前2h，术后立即和术后24h分别给予氯沙坦20mg／kg（1mL），灌胃各1次；人参治疗组术前2h，术后立即和术后24h分别给予红参煎剂（1g／mL,1mL／次）灌胃各1次。假手术对照组和缺血再灌注组分别于相同时间给予相同容积的生理盐水灌胃。用原位杂交和免疫组化分别检测人参和氯沙坦治疗后的大鼠缺血再灌注心肌细胞内Bcl-2mRNA和蛋白质含量，并与对照组比较。主要观素指标：人参和氯沙坦治疗后的大鼠缺血再灌注心肌细胞内Bcl-2mRNA和蛋白质的表达水平，并与对照组比较。结果：实验大鼠40只均进人结果分析。①氯沙坦组与对照组心肌细胞内Bcl-2mRNA，蛋白含量无明显差别（P〉0．05）。②人参治疗组Bcl-2mRNA含量和Bcl-2蛋白表达高于缺血再灌注组（P〈0．05或0．01）。结论：人参治疗组Bcl-2mRNA及Bcl-2蛋白表达均较氯沙坦治疗组高，提示人参防治心肌缺血再灌注损伤抑制心肌细胞凋亡与氯沙坦不同。     

灯盏花素减轻顺铂对大鼠肾损害及肾细胞凋亡机制的研究

目的探讨应用灯盏花素减轻顺铂对大鼠肾损害及肾细胞凋亡的作用机制。方法48只SD大鼠分为对照组、模型组、25mg／kg灯盏花素组（灯盏花素1组）和50mg／kg灯盏花素组（灯盏花素2组）各12只。对照组给予羧甲基纤维素钠溶液灌胃,模型组、灯盏花素1组和2组均腹腔注射顺铂8mg／kg造模。灯盏花素1组和2组分别以25mg／kg和50mg／kg灯盏花素灌胃,给药7d后计算4组肾脏指数,采用原位缺15末端标记法检测肾细胞凋亡情况,左肾采用蛋白质印迹法检测肾皮质Bax、Bcl-2表达水平,右肾采用免疫组织化学法检测肾组织凋亡蛋白Bax和Bcl-2表达水平。结果模型组、灯盏花素1组和2组肾脏指数、凋亡指数及Bax、Bcl-2表达水平高于对照组（P〈0．05）;灯盏花素2组肾脏指数、凋亡指数、Bax表达水平及Bax／Bcl-2比值低于模型组、Bcl-2表达水平高于模型组（P〈0．05）;灯盏花素1组肾脏指数和凋亡指数高于2组（P〈0．05）。结论灯盏花素可增强凋亡蛋白Bcl-2表达、降低Bax表达,影响线粒体凋亡通路,从而减轻顺铂对肾损害大鼠肾细胞的凋亡。     

硒对自身免疫性甲状腺炎大鼠甲状腺细胞Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白表达影响

目的探讨亚硒酸钠对实验性自身免疫性甲状腺炎（EAT）大鼠甲状腺组织Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达及分布的影响。方法将Wistar大鼠分为正常对照组、EAT组和EAT加硒干预组。制备EAT大鼠模型,EAT加硒干预组给予亚硒酸钠灌胃进行干预。免疫组化SABC法检测大鼠甲状腺组织Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白的表达及分布,并应用美国Sample PCI图像分析系统进行平均吸光度测定,对免疫组化结果进行定量分析。结果与EAT组相比,EAT加硒干预组大鼠甲状腺组织滤泡破坏程度明显减轻,淋巴细胞浸润减少,Caspase-3的阳性表达减少（F=45．01,q=7．32,P〈0．05）,Bcl-2／Bax有上升趋势。Bax阳性表达多位于浸润淋巴细胞附近的滤泡上皮,远离浸润淋巴细胞的滤泡上皮表达较少,而Bcl-2的阳性表达部位相反。EAT组大鼠甲状腺组织Caspase-3的阳性表达与Bax的阳性表达呈正相关（r=0．89,P〈0．01）,Caspase-3的阳性表达与Bcl-2的阳性表达呈负相关（r=-0．85,P〈0．01）。结论亚硒酸钠可能通过影响Bcl-2／Bax比值,下调Caspase-3的表达,抑制甲状腺细胞的凋亡来减轻或抑制自身免疫性甲状腺炎的免疫损伤。     

雌激素对局灶性脑缺血大鼠脑梗死体积与Bcl—2蛋白表达的影响

目的：观察雌激素对局灶性脑缺血大鼠神经细胞凋亡及其Bcl-2蛋白表达的影响，探讨雌激素的脑保护作用。方法：实验于2004—09在河南大学医学院形态实验室完成。选取健康级雌性Wistar大鼠30只，随机分为假手术组，手术对照组和雌激素用药组，每组10只．将手术对照组和雌激素用药组大鼠于造模前7d切除双侧卵巢，手术对照组切除卵巢后给予生理盐水腹腔注射7d，雌激素用药组给予雌二醇1mg／（kg&;#183;d）腹腔注射7d，假手术组只行开腹手术，但不切除卵巢，并给予生理盐水腹腔注射7d。采用大脑中动脉阻断制成局灶性脑缺血模型。缺血2h再灌注24h，在麻醉状态下断头取脑，应用免疫组织化学方法及10mL/L几四氮唑染色，观察脑梗死体积及Bcl-2蛋白的表达。结果：30只Wistar大鼠全部进入结果分析。假手术组未发现缺血性梗死灶，手术对照组脑梗死病灶体积明显大于雌激素用药组[（96．93&;#177;11．63，59．32&;#177;8．95）mm^3]（t=8．104，P〈0．05）。假手术组未见Bcl-2蛋白染色阳性细胞，雌激素用药组和手术对照组梗死病灶边缘出现大量Bcl-2阳性细胞，两组细胞数分别为（167&;#177;22，139&;#177;19）个／mm^2．差异有显著性意义（t=3．046，P〈0．05）。结论：雌激素可缩小大鼠局灶性脑缺血梗死灶体积，增强Bcl-2蛋白的表达，具有脑保护作用。     

雌激素对血清饥饿诱导成骨细胞凋亡基因表达的影响

目的探讨雌激素对血清饥饿诱导的体外培养大鼠成骨细胞凋亡基因bcl-2、bax、fas表达的影响，为明确雌激素抑制由血清饥饿诱导的大鼠成骨细胞凋亡的机理提供依据。方法新生SD大鼠颅骨第2、3代成骨细胞随机分为对照组、血清饥饿组、血清饥饿＋雌激素组3组，每组细胞分别培养1d、2d、3d、5d、7d、14d后做免疫组化染色，计数各组Bcl-2、Bax、Fas阳性细胞率。结果对照组成骨细胞有少量Bcl-2、Bax、Fas表达；与对照组比较，血清饥饿组细胞Bax和Fas表达升高（P〈0．05），高峰期为14d，Bcl-2的表达无明显变化（P〉0．05）；与血清饥饿组比较，血清饥饿＋雌激素组细胞Bax和Fas表达降低（P〈0．05），高峰期仍为14d，Bcl-2的表达升高（P〈0．05）。结论血清饥饿使成骨细胞Bax和Fas表达增强，而对Bcl-2的表达无明显影响；雌激素能抑制血清饥饿增强成骨细胞Bax和Fas表达的作用，并使Bcl-2的表达增加，从而抑制血清饥饿诱导的大鼠成骨细胞凋亡。     

韶关市农村留守儿童孤独感状况调查

目的了解广东省韶关市农村地区留守儿童孤独感现状及其影响因素。方法对韶关市某地区两所农村小学3～6年级学生中的489名留守儿童采用儿童孤独量表和自编调查表进行问卷调查。结果17．6％留守儿童存在孤独感，不同性别孤独感发生率无差异性，不同年龄及不同年级间孤独感发生率差异均有极显著性（P〈0.01）；随年级增加，孤独感发生率呈下降趋势（X^2趋势=5．970，P〈0.05）。留守儿童孤独感与健康状况、学习成绩、学习困难程度、父母教育方式、父母间关系和老师教育方式等因素显著相关（P〈0.01～0．05）。结论农村地区留守儿童中存在一定程度的孤独感问题，老师和家长应以正确的态度和方法对待留守儿童，以减少其孤独感的发生。     

产科新生儿不同部位经皮测黄报警预值的可靠性观察

目的对比观察产科新生儿不同部位经皮胆红素（TCB）报警预值的可靠性。方法132例产科新生儿采取随机数字分组法分为正常产组和剖宫产组各66例,新生儿均于产后第4天同一时间点应用KJ8000经皮测黄仪分别测量额、胸、腹、额胸、额胸腹TCB值,TCB〉12．9mg／dl者,取得亲属同意抽取静脉血检测血清胆红素（SB）,对比分析不同部位TCB及其与sB值的差异。结果两组分别有17例或21例达到TCB报警预值。两组TCB或sB相同方法及相同部位比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;两组TCB不同部位对比,额部值最低、胸部值最高,且与其他部位同组对比差异均有统计学意义（P〈0．01）;两组sB值对比差异无统计学意义（t=1．53,P〉0．05）,与不同部位TCB对比均以胸部数值差异无统计学意义（P〉0．05）,而与其他部位TCB两组差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论正常产与剖宫产新生儿术后sB对比差异无意义;TCB动态监测以胸部结果更接近SB。     

Determination of loss of quality of life

Physiatrists are a valuable resource in legal settings, where assessment of functional capacity to perform work and of future medical needs must be determined. Physiatrists help determine what future medical care is needed to restore and maintain an individual at the maximum level of life function. This article focuses on the use of a quality of life (QOL) rehabilitation model, rather than a medical model, for enhancing functional performance, modifying environments, and facilitating patient coping. We discuss use of the QOL model to describe and influence a patient's physical, psychological, cognitive, vocational/economic, and social/leisure domains.     

护士选择性应用静脉留置针现状分析

[目的]了解护士选择性应用留置针的现状以及主要影响因素,为指导临床留置针合理应用提供理论依据。[方法]采用自设问卷对138名护士留置针选择性使用情况及其影响因素进行调查。[结果]约1／4的护士并不知道应选择性使用留置针,近60％的护士在实际工作中选择留置针的意识较差;护士选择性应用留置针的决策受多因素影响;不同科室、职称及是否具有带教资格选择性应用留置针的影响因素不尽相同;绝大部分护士希望参加选择性应用留置针相关内容的培训。[结论]临床护士操作前考虑留置针选择的意识有待加强。建议实施有针对性的培训以提高护士选择性应用留置针的能力。     

血液透析患者家庭护理提供者的生活质量调查

目的:了解江汉油田血液透析(血液透析)患者家庭护理提供者(护理者)的生活质量。方法:对60例血液透析患者的家庭护理提供者进行一般情况和生活质量综合评定问卷(QOLI-74)调查,并进行相关性和多因素回归分析。结果:家庭护理提供者各维度的主观生活满意度与其客观指标相关,但也与其需求、年龄、文化程度、与患者的关系有关。结论:客观状态是影响主观生活满意度的重要因素,同时应考虑护理者的需求、年龄、文化程度、与患者的关系对护理者主观生活满意度的影响。