rhIL-11联合rhG-CSF动员小鼠外周血造血干/祖细胞的研究

目的　研究rhIL 11对小鼠巨核系造血干 /祖细胞的动员作用。方法　rhIL 112 5 0μg·kg-1·d-1或联合rhG CSF 2 5 0 μg·kg-1·d-1给C5 7BL/ 6小鼠皮下注射 1～ 7d ,观察用药前和用药第 3,5 ,7,9天小鼠外周血白细胞、血小板计数 ,CD34 +细胞比例 ,CFU GM、CFU MK、CFU E的数量变化。结果　单用rhIL 11或与rhG CSF联合使用时 ,外周血白细胞、血小板、CD34 +细胞比例及各种造血细胞集落数明显高于对照组 (P <0 .0 1)。在含有IL 11的实验组中 ,CFU MK明显高于rhG CSF组 (P <0 .0 1)。结论　rhIL 11可升高外周血白细胞、血小板 ,同时增加外周血CD34 +细胞的比例 ,提高粒、红、巨核系造血细胞集落形成单位的数量 ,特别是对CFU MK作用较强 ;与rhG CSF联合使用对动员骨髓造血干 /祖细胞进入外周血有明显的协同作用。     

化疗加G-CSF和GM-CSF联合动员自体外周血干细胞

目的　探讨化疗加粒细胞集落刺激因子 (G CSF)和粒 巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF)联合动员自体外周血干细胞 (APBSC)的效果。方法　卡铂 (CBP) 35 0mg m2 ,第 1天静滴 ;足叶乙甙(Vp16 ) 35 0mg m2 ,第 1～第 3天静滴 ;白细胞降至最低点又回升到 (2 .4～ 6 .4)× 10 9 L时 ,皮下注射G CSF 5 μg·kg- 1 ·d- 1 (早 6∶0 0 ) GM CSF 5 μg·kg- 1 ·d- 1 (晚 6∶0 0 ) 地塞米松 5mg d(采集日 10mg d)直到采集结束前 1天 ;白细胞上升到 (2 9.80± 5 .98)× 10 9 L ,开始用CS30 0 0plus血细胞分离机连续 2d采集APBSC。结果　 2 0例患者连续采集APBSC 2次 ,共采集到MNC(5 .93± 1.6 2 )× 10 8 kg ,CD34 细胞 (2 3.10± 11.5 3)× 10 6 kg ,CFU GM(3.44± 2 .85 )× 10 5 kg。无严重不良反应。 9例 10次自体外周血干细胞移植(APBSCT)造血功能均获满意重建。结论　以化疗联合G CSF和GM CSF能高效、安全地动员APBSC ,1次动员采集 2次可满足 1～ 2次的APBSCT。     

以氟达拉滨为主的预处理行非清髓异基因造血干细胞移植17例临床观察

目的　对 1 7例血液病患者行非清髓异基因造血干细胞移植 (NAST)治疗 ,并探讨其疗效及不良反应。方法　急性髓系白血病 3例 ,慢性粒细胞白血病 (CML) 6例 ,重型再生障碍性贫血 4例 ,骨髓增生异常综合征 1例 ,非霍奇金淋巴瘤 2例 ,多发性骨髓瘤 1例。供者为其HLA配型完全相合的同胞。供者动员方案 :G CSF 30 0 μg 1 2h× 5d后分离采集外周血干细胞。输注CD3 4 +细胞数 (2 .1 5～1 0 .0 1 )× 1 0 6 kg;T细胞总数 (2 .52～ 1 0 .2 6)× 1 0 8 kg;单个核细胞数 (4.87～ 1 7.1 3)× 1 0 8 kg。预处理方案为 :氟达拉滨 30mg·m-2 ·d-1 × 6d ;白消安 4mg·kg-1 ·d-1 × 2d ;抗淋巴细胞免疫球蛋白 1 2～ 1 5mg·kg-1·d-1 × 4d ;阿糖胞苷 50 0mg d× 3d或环磷酰胺 50mg·kg-1 ·d-1 × 2d。单用环孢菌素A(CsA) 3mg·kg-1 ·d-1 预防移植物抗宿主病 (GVHD)。结果　所有患者均顺利完成预处理及移植治疗。 1 1例出现轻微黏膜炎 ,1例有血清病样表现 ,1 0例发生轻度肝功能损害 ,2例在应用CsA过程中有轻度肾功能损害。移植后出现急性GVHD和慢性GVHD各 5例 ,并发间质性肺炎 5例 ,无肝静脉闭塞症、出血性膀胱炎、白质脑病、严重的感染及出血发生。移植后第 8天 (+8天 )～ +1 9天造血重建。 1 6例患者已达完全嵌合     

rhG-CSF体内诱导造血干细胞移植供者外周血T细胞免疫耐受的初步研究

本研究探讨rhG CSF体内应用诱导健康供者外周血T淋巴细胞免疫耐受的机制。对 15例病人进行了外周血干细胞移植 ,借助三色和四色荧光标记技术 ,对供者rhG CSF动员前后外周血T细胞上共刺激分子CD2 8的表达、树突状细胞 (DC)亚群以及CD8 CD2 8- 抑制性T细胞的变化进行了流式细胞术测定。结果显示 ,rhG CSF动员后外周血采集物中CD3 CD2 8 细胞的相对数显著升高 (P <0 .0 1) ,CD2 8表达的平均荧光强度明显降低 (P<0 .0 5 ) ;CD8 CD2 8 细胞的相对数也显著升高 (P <0 .0 1)。但在T细胞上CD2 8总体表达的相对荧光强度无变化 (P >0 .0 5 )。动员前外周血中DC2的含量明显低于正常骨髓 (P <0 .0 1) ,动员后采集物中DC2的数量较动员前和正常骨髓均有显著增加 (P <0 .0 1) ,DC的数量也显著增加 (P <0 .0 1) ,DC1 DC2比值倒置 (P <0 0 1) ,而DC1在动员前后无变化 (P >0 .0 5 )。CD8 CD2 8- 细胞占有核细胞的百分比较动员前明显增加 (P <0 0 5 )。结论 :rhG CSF体内应用后 ,采集物中DC2和CD8 CD2 8- 抑制性T细胞数量的增加可能是外周血T细胞免疫耐受产生的重要机制。     

异基因外周血干细胞移植G-CSF动员对健康供者血液系统的近期影响及毒副作用

目的　观察异基因外周血干细胞移植 (Allo PBSCT)粒细胞集落刺激因子 (G CSF)动员对健康供者血液系统的近期影响及毒副作用。方法　对 75 3例次健康供者G CSF动员后的毒副作用进行临床观察和对 5 0例Allo PBSCT健康供者G CSF动员前、采集前、采集后分别进行相关血液分析。结果　少数供者有不同程度的头痛、低热等综合症 ,停用G CSF后症状消失。G CSF动员后第 5天供者白细胞、单个核细胞 (MNC)和CD3 4 + 细胞明显升高 ,CD3 4 + 和MNC细胞第 7～ 8天几乎回到基础水平 ;WBC第 1 5天恢复到基础水平 ;G CSF动员和外周血干细胞采集过程中血小板有不同程度的下降 ,外周血干细胞采集是血小板下降的主要原因 ,G CSF对血小板的生成也有一定影响 ,大多数供者停药后 1 0d恢复到基础水平。结论　G CSF用于PBSCT的健康供者是安全的 ,但少数供者对白细胞和血小板的影响时间较长 ,个别供者WBC 4个月后未恢复到基础水平     

重组人G-CSF对健康供者外周造血干／祖细胞动员和采集效果的影响因素分析

应用重组人粒系集落刺激因子（rhG—CSF）对健康供者进行动员并采集造血干细胞用于异基因外周血造血干细胞移植已在临床广泛应用，本研究通过对影响外周干细胞动员和采集效果的多因素分析，进一步探讨最佳动员方案及采集时机。采取回顾性方法分析了431例健康供者外周血干细胞动员采集效果，并进一步分析了供者一般特征、rhG—CSF动员天数、每日皮下注射次数、剂量与采集效果的关系。结果表明：rhG—CSF在动员中平均应用剂量为5．7μg／（kg·d），平均采集1．7次，收获单个核细胞数平均为9．57×10^8／kg，CD34^＋细胞平均为4．91×10^6／kg。绝大多数供者不良反应轻微。多因素分析结果显示，采集效率主要与供者体重指数，采集天数相关。rhG—CSF动员第5天采集的供者，其MNC数、CD34^＋细胞数及第一次单采成功率均优于其他时间采集的供者。同时，本组供者应用rhG—CSF剂量较小且剂量范围较窄，rhG—CSF剂量不如采集时间对采集物质量的影响明显。结论：小剂量应用rhG—CSF动员并于第5天开始采集是健康供者造血干细胞动员的较理想方案。     

中剂量环磷酰胺或增大环磷酰胺剂量的常规化疗联合G-CSF动员恶性肿瘤患者外周血造血祖细胞

目的　多中心临床研究糖基化的G CSF联合中剂量环磷酰胺 (Cy)或增大针对性联合化疗中Cy剂量动员自体外周血造血祖细胞的效果。方法　北京地区 4所医院 30例患者纳入方案。其中非霍奇金淋巴瘤 (NHL) 2 1例 ,霍奇金病 (HD) 1例 ,乳腺癌 7例及卵巢癌 1例。采用中剂量Cy或以增大Cy剂量为基础的针对性化疗联合G CSF动员自体外周血造血祖细胞 (APBPC)。在化疗后白细胞计数达最低值时开始应用G CSF。当白细胞升至 5 .0× 10 9 L以上时 ,用血细胞分离机采集。结果　Cy平均实际使用剂量为 3.95g(2 .3g m2 ) ;G CSF的剂量分别为 2 5 0 μg d(2 9例 ) ,5 0 0 μg d(1例 ) ,实际剂量3 1～ 6 .4 μg·kg- 1 ·d- 1 。 30例患者平均采集 2 .7次 ,其中 13例采集 2次 ,14例采集 3次 ,3例采集 4次。达到目标采集量单个核细胞≥ 6× 10 8 kg为 2 1例 (70 .0 % ) ,CD34 + 细胞≥ 2× 10 6 kg为 30例 (10 0 % ) ,CFU GM≥ 2× 10 5 kg为 2 4例中 15例 (6 2 .5 % )。 1次采集后 2 7例 (90 .0 % )、2次采集后 2 9例 (96 .7% )患者达到了CD34+ 细胞数目标采集量。结论　G CSF 2 5 0 μg d联合中剂量Cy或以增大Cy剂量为基础的针对性化疗可采集到足够数量的APBPC。     

醋酸精氨酸对严重烧伤家兔免疫功能的影响及其量效关系

目的 :研究醋酸精氨酸对严重烧伤家兔免疫功能的影响及其量效关系。方法 :采用家兔 (6 4只 ) 30 %体表面积 度烧伤后灌喂醋酸精氨酸模型 ,5 2只存活兔随机分成 6组 :正常对照组 (8只 ) ,烧伤对照组 (9只 )及醋酸精氨酸喂养 2 .4 g· kg- 1 · d- 1 组 (9只 )、1.2 g· kg- 1 · d- 1 组 (9只 )、0 .6 g· kg- 1 · d- 1 组 (9只 )、0 .3g· kg- 1· d- 1组 (8只 )。烧伤对照组予 1.2 g· kg- 1· d- 1酪氨酸 ,观察给药 7日后不同剂量精氨酸对烧伤家兔免疫功能的影响。结果 :烧伤 7日后各组动物免疫功能均明显下降 ,淋巴细胞转化率、白细胞吞噬率及趋化指数、血浆免疫球蛋白、CD4 / CD8比值均不同程度下降。精氨酸 1.2 g· kg- 1 · d- 1 组和 2 .4 g· kg- 1 · d- 1 组各项免疫指标均明显优于烧伤对照组 ,0 .3g· kg- 1· d- 1组和 0 .6 g· kg- 1· d- 1组与烧伤对照组相比变化不明显 ,但 2 .4 g· kg- 1 · d- 1 组动物死亡率有所上升。结论 :严重烧伤家兔机体免疫功能下降 ,经肠道补充精氨酸1.2 g· kg- 1· d- 1和 2 .4 g· kg- 1· d- 1能有效提高伤后免疫功能 ,以 1.2 g· kg- 1· d- 1效果最好 ,动物死亡率最低     

自体纯化CD_(34)~+细胞移植治疗严重自身免疫性疾病的初步研究

目的　探讨自体外周血CD34+ 细胞移植治疗严重自身免疫性疾病的干细胞动员、细胞采集和分选、预处理和并发症处理等问题。方法　 10例重度自身免疫性疾病患者接受自体外周血CD34+细胞移植治疗。采用环磷酰胺 (CTX) +rhG CSF方案动员外周血干细胞 ,并以CliniMACS细胞分选仪分选CD34+ 细胞 ,适时用CTX +抗胸腺细胞球蛋白 (7例 )或CTX +全身照射 (3例 )两种预处理方案后 ,进行CD34+ 细胞回输的方法治疗。结果　经CTX +rhG CSF方案动员并以CliniMACS细胞分选仪分选后 ,可获得 (1.98± 0 .95 )× 10 8的CD34+ 细胞 ,其纯度为 (91.4± 10 .6 ) % ,回收率为 (6 0 .5± 19.8) %。在回输(2 .14± 1.0 5 )× 10 6 kg的CD34+ 细胞后 ,ANC≥ 0 .5× 10 9 L的时间为 (8.6± 2 .5 )d ,血小板升至 2 0× 10 9 L的时间为 (9.0± 5 .2 )d。在造血恢复后 ,所有CD3+ 细胞、CD1 9+ 细胞和CD1 6+ CD56+ 细胞均未恢复至移植前状态。在造血和免疫抑制时 ,巨细胞病毒感染的发生率较高。 2例患者死于移植相关并发症。所有患者近期疗效满意 ,6例系统性红斑狼疮患者DAI评分由移植前的平均 17分降为移植后的 4分 ;类风湿关节炎患者DAS2 8评分由 6 .4分降至 1.8分 ;干燥综合征患者的症状和体征均明显缓解。结论　对常规治疗无效的严     

造血干细胞动员和采集对正常供者的影响

背景:粒细胞集落刺激因子动员是当前健康志愿供者采用的主要方法.据国内外文献报告:在粒细胞集落刺激因子动员中已发生少数严重不良反应,这引起了国人对中国非血缘健康供者安全的忧虑.粒细胞集落刺激因子作为动员剂对健康志愿供者有何影响?是否安全?目的:观察粒细胞集落刺激因子对正常供者的影响.方法:选择2003-01/2008-12在海口市人民医院接受粒细胞集落刺激因子5～10 μg/(kg·d)动员剂进行外周血造血干细胞捐赠者16例,观察动员及采集过程的不良反应,检测动员前后血常规CD3、CD19、CD3+4、CD3+8细胞比值在动员前后变化,并随访所有供者.结果与结论:10例供者在重组人粒细胞集落刺激因子动员过程中无任何不适,有3例出现低热,头痛、肌肉及骨骼疼痛、腰痛等,3例供者出现发热,其严重程度均在Ⅰ级,但无需终止动员.白细胞经重组人粒细胞集落刺激因子动员后数量较动员前升高,停止动员后3 d全部供者的白细胞恢复至动员前水平.血红蛋白、血小板、CD3、CD19、CD3+4、CD3+8细胞比值在动员前、动员后72,96 h无明显变化.提示健康供者可耐受粒细胞集落刺激因子5～10 μg/(kg·d),动员和采集过程;且对T细胞亚群无影响.