表皮生长因子联合血糖控制对糖尿病创面愈合的影响:成纤维细胞生长因子蛋白及其mRNA表达的变化

背景:有研究表明急性创伤可导致内源性的重组人表皮生长因子(recombinant human epidermal growth factor,rhEGF)表达下调,导致不愈合的发生.目的:观察局部应用rhEGF联合血糖控制下对糖尿病大鼠烫伤创面成纤维细胞生长因子表达的影响.方法:将Wistar糖尿病大鼠制备背部深Ⅱ度烫伤模型.联合治疗组于烫伤前1周控制血糖至对照组水平,并在烫伤24 h内创面喷洒rhEGF;rhEGF组仅创面喷洒rhEGF;血糖控制组仅控制血糖:对照组不制备糖尿病模型,烫伤后处理同联合治疗组.烫伤后1,3,5,7,1 1,15,21 d取创面皮肤组织采用免疫组织化学染色及原位杂交法检测成纤维细胞生长因子蛋白及mRNA的表达,并观察各组大鼠创面愈合情况.结果与结论:烫伤后各组大鼠刨面成纤维细胞生长因子蛋白及mRNA表达均明显增多,分别在5～7d及7～11 d达高峰,且联合治疗、对照组峰值较rhEGF、血糖控制组高(P<0.05).烫伤后7～21 d,联合治疗、对照组创面愈合率高于rhEGF、血糖控制组(P<0.05).说明局部应用rhEGF在联合血糖控制下可促进糖尿病大鼠烫伤创面的愈合,可能与促进创面成纤维细胞生长因子表达有关.     

重组人血小板源性生长因子与胰岛素联合局部应用对老龄糖尿病大鼠烧伤创面的作用

目的:文献报导单一局部应用重组人血小板源性生长因子或胰岛素对糖尿病创面的愈合具有促进作用.拟验证局部联合应用重组人血小板源性生长因子和胰岛素对老龄糖尿病大鼠烧伤创面愈合的作用.方法:实验于2006-10/2007-05在甘肃省中医学院SPF级动物实验室完成.①实验材料及分组:SPF级健康Wistar老龄大鼠88只,年龄1年以上,雌雄不限,体质量300～350 g.随机分为烫伤对照组20只,糖尿病烫伤对照组20只,糖尿病重组人血小板源性生长因子对照组16只,糖尿病胰岛素对照组16只,糖尿病重组人血小板源性生长因子、胰岛素治疗组16只.实验用鱼精蛋向锌胰岛素为上海第一生化药业有限公司产品;重组人血小板源性生长因子凝胶剂为北京金赛狮生物制药技术开发有限公司产品.②实验过程:除烫伤对照组外,其他组大鼠通过高脂、高蛋白、高糖饲养后腹腔注射链尿佐菌素,建立老龄Ⅱ型糖尿病动物模型,并以高脂、高蛋白、高糖饲养.8周后各组给予深Ⅱ度烫伤.③实验评估:于伤后第1,3,7,14,21天时相点测量创面面积,计算创面愈合率:观察组织形态学、检测创面羟脯氨酸含量:采用免疫组织化学检测血管内皮细胞生长因子、CD34的表达:计算微血管密度.实验过程对动物的处理符合动物伦理学标准.结果:与糖尿病烫伤对照组、糖尿病重组人血小板源性生长因子对照组、糖尿病胰岛素对照组相比,糖尿病重组人血小板源性生长因子、胰岛素治疗组老龄大鼠创面愈合率加快(P＜0.05),创面上皮化加速,羟脯氨酸含量增加(P＜0.05),血管内皮细胞生长因子、CD34阳性表达,微血管密度值增加(P＜0.05).结论: 局部联合应用重组人血小板源性生长因子和胰岛素可通过协同作用促创面胶原的合成,增加创面的血管形成,加速老龄性糖尿病大鼠创面愈合.     

深Ⅱ度烫伤创面早期应用重组人表皮生长因子后表皮生长因子受体的表达

背景：有研究表明重组人表皮生长因子能促进烧伤创面愈合,内源性表皮生长因子通过与表皮生长因子受体结合发挥生物学效应。目的：观察局部应用重组人表皮生长因子对大鼠烫伤创面表皮生长因子受体的影响,分析其促进创面愈合的可能机制。方法：制备Wistar大鼠背部深Ⅱ度烫伤模型,分为2组,对照组于创面喷洒生理盐水,实验组喷洒重组人表皮生长因子。烫伤后0,1,3,5,7,10,14,21d取创面组织,采用Western blot检测表皮生长因子受体蛋白表达,并测定两组大鼠创面愈合率。结果与结论：烫伤后7-21d实验组创面愈合率高于对照组（P〈0.05）。两组表皮生长因子受体蛋白表达在1d明显降低（P〈0.05）,随后又升高,7d达峰值且对照组比实验组高（P〈0.05）;峰值过后,对照组逐渐下降,21d接近烫伤前水平,实验组迅速下降,14d达谷值,随后上升,21d接近烫伤前水平,两组差异有显著性意义（P〈0.05）。说明早期局部应用重组人表皮生长因子可影响表皮生长因子受体的表达规律,并显著促进大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合。     

蜕皮甾酮联合骨髓间充质干细胞促进烫伤皮肤愈合的实验研究

目的:探讨蜕皮甾酮(EDS)联合骨髓间充质干细胞(MSCs)促进家兔烫伤皮肤愈合的作用及可能的机制。方法:家兔18只,每只4个创面,随机标记设为空白对照组(A组)、EDS组(B组)、MSCs(C组)、EDS+MSCs(D组)。烫伤后5、10、15d各处死6只家兔,计算创面愈合率,观察组织病理学指标。结果:烫伤后5d,B组创面愈合率显著高于A组,B、D组炎性细胞浸润度显著低于A组。烫伤后10d,各组创面愈合率、组织病理学评分、炎性细胞浸润度之间差异均无显著性。烫伤后15d,B、C、D组创面愈合率、组织病理学评分均高于A组。结论:EDS联合MSCs对家兔烫伤皮肤有促愈合作用。     

外源性胰岛素样生长因子Ⅰ促创面愈合的特征

目的:观察局部应用胰岛素样生长因子Ⅰ对大鼠皮肤创面愈合的作用,为临床应用胰岛素样生长因子Ⅰ加速创面愈合建立理论和实验依据。方法:实验于2002-05/06在北京世纪坛医院动物实验室完成。①清洁级SD大鼠32只,雌雄不拘,体质量180～200g。随机分为胰岛素样生长因子Ⅰ组、胰岛素样生长因子Ⅰ 重组人生长激素组、重组人生长激素组、生理盐水组,每组8只。②在大鼠背部脊柱切除直径1.6～1.8cm的圆形皮肤全层缺损,创面压迫止血后各组分别给药。③胰岛素样生长因子Ⅰ组:每次每个创面给液量0.1mL,胰岛素样生长因子Ⅰ浓度1mg/L;胰岛素样生长因子Ⅰ 重组人生长激素组:每次每个创面给液量0.1mL,胰岛素样生长因子Ⅰ浓度1mg/L,重组人生长激素浓度0.2U/mL;重组人生长激素组:每次每个创面给液量0.1mL,重组人生长激素浓度0.2U/mL;生理盐水组:每次每个创面给生理盐水,给液量0.1mL。④分别于伤后1、4、7、11、14、17d创面取材,作组织切片观察。在取材同时剩余创面给药,药量同前,在伤后11～13d创面愈合后,14、17d取材为愈合部位组织。取材后即时以10%多聚甲醛固定10h,逐级脱水,作组织切片。⑤利用免疫组织化学和图像分析,研究局部应用胰岛素样生长因子Ⅰ、重组人生长激素后,创伤模型大鼠皮肤创面愈合过程中与创面愈合相关因素增殖细胞核抗原、Ⅰ型胶原之间的关系。结果:实验大鼠32只全部进入结果分析。①在局部应用外源性胰岛素样生长因子Ⅰ、重组人生长激素后,创面愈合过程中组织内Ⅰ型胶原的变化:伤后1d,胰岛素样生长因子Ⅰ组和胰岛素样生长因子Ⅰ 重组人生长激素组在胞浆里出现了Ⅰ型胶原表达,到伤后11d创面接近愈合及14d和17d创面愈合后在细胞间质中仍有增加的趋势。②增殖细胞核抗原的变化:在核内,胰岛素样生长因子Ⅰ组和胰岛素样生长因子Ⅰ 重组人生长激素组的增殖细胞核抗原表达量于4d达到高峰值,重组人生长激素组和生理盐水组伤后增殖细胞核抗原的表达量随时间的推移逐渐增加,在7d时达到最高后就开始降低,14、17d创面愈合后,其表达量也就下降到正常范围。③胰岛素样生长因子Ⅰ的变化:胰岛素样生长因子Ⅰ组和胰岛素样生长因子Ⅰ 重组人生长激素组伤后在胞浆和细胞间质胰岛素样生长因子Ⅰ的表达量就一直在高值,在重组人生长激素组和生理盐水组,伤后1d出现胰岛素样生长因子Ⅰ的表达,在7d时达到峰值,在伤后11d,表达量下降,14、17d创面愈合后,其表达量也就下降到正常范围。④组间采用t检验。结论:在创面应用胰岛素样生长因子Ⅰ能够促进成纤维细胞分裂增殖,合成分泌增加,是成纤维细胞增生的直接促进因子,能促进创面的愈合。创面应用的重组人生长激素促增殖作用不强。     

重组人表皮生长因子联合前列地尔作用于糖尿病溃疡创面

背景:人内源性表皮生长因子的缺乏以及血流动力学的改变会导致创面不愈合的发生。目的:观察重组人表皮生长因子联合前列地尔作用于糖尿病溃疡动物模型创面的疗效。方法:Wistar大鼠40只建立糖尿病溃疡动物模型,随机等分为模型组、重组人表皮生长因子组、前列地尔组和重组人表皮生长因子+前列地尔组,分别予以1%碘伏清创、重组人表皮生长因子凝胶外敷、前列地尔静脉滴注、重组人表皮生长因子凝胶外敷和前列地尔静脉滴注联合治疗。结果与结论:干预后3,7,10,14d观察发现,相比于模型组,重组人表皮生长因子和/或前列地尔治疗后,糖尿病皮肤溃疡大鼠溃疡面积减小、愈合时间缩短、创面动态愈合率上升(P<0.01),且两者联合治疗的效果优于重组人表皮生长因子和前列地尔单独治疗(P<0.01),而重组人表皮生长因子或前列地尔单独治疗的效果接近,提示重组人表皮生长因子与前列地尔联合使用比单纯使用前列地尔或单纯使用重组人表皮生长因子更能显著促进糖尿病溃疡创面的愈合。     

外源性胰岛素样生长因子Ⅰ促创面愈合的特征

目的：观察局部应用胰岛素样生长因子Ⅰ对大鼠皮肤创面愈合的作用，为临床应用胰岛素样生长因子Ⅰ加速创面愈合建立理论和实验依据。方法：实验于2002—05／06在北京世纪坛医院动物实验室完成。①清洁级SD大鼠32只，雌雄不拘，体质量180～200g。随机分为胰岛素样生长因子Ⅰ组、胰岛素样生长因子Ⅰ＋重组人生长激素组、重组人生长激素组、生理盐水组，每组8只。②在大鼠背部脊柱切除直径1．6～1．8em的圆形皮肤全层缺损，创面压迫止血后各组分别给药。③胰岛素样生长因子Ⅰ组：每次每个创面给液量0．1mL，胰岛素样生长因子Ⅰ浓度1mg/L；胰岛素样生长因子Ⅰ＋重组人生长激素组：每次每个创面给液量0．1mL，胰岛索样生长因子Ⅰ浓度1mg／L，重组人生长激素浓度0．2U／mL：重组人生长激素组：每次每个创面给液量0．1mL，重组人生长激素浓度0．2U／mL；生理盐水组：每次每个创面给生理盐水，给液量0．1mL。④分别于伤后1、4、7、11、14、17d创面取材，作组织切片观察。在取材同时剩余创面给药，药量同前，在伤后11—13d创面愈合后，14、17d取材为愈合部位组织。取材后即时以10％多聚甲醛固定10h，逐级脱水，作组织切片。⑤利用免疫组织化学和图像分析，研究局部应用胰岛素样生长因子Ⅰ、重组人生长激素后，创伤模型大鼠皮肤创面愈合过程中与创面愈合相关因素增殖细胞核抗原、Ⅰ型胶原之间的关系。结果：实验大鼠32只全部进入结果分析。①在局部应用外源性胰岛素样生长因子Ⅰ、重组人生长激素后，创面愈合过程中组织内I型胶原的变化：伤后1d，胰岛素样生长因子Ⅰ组和胰岛素样生长因子Ⅰ＋重组人生长激素组在胞浆里出现了Ⅰ型胶原表达，到伤后11d创面接近愈合及14d和17d创面愈合后在细胞间质中仍有增加的趋势。②增殖细胞核抗原的变化：在核内，胰岛素样生长因子Ⅰ组和胰岛素样生长因子Ⅰ＋重组人生长激素组的增殖细胞核抗原表达量于4d达到高峰值，重组人生长激素组和生理盐水组伤后增殖细胞核抗原的表达量随时间的推移逐渐增加，在7d时达到最高后就开始降低，14、17d创面愈合后，其表达量也就下降到正常范围。③胰岛素样生长因子Ⅰ的变化：胰岛素样生长因子Ⅰ组和胰岛素样生长因子Ⅰ＋重组人生长激素组伤后在胞浆和细胞间质胰岛素样生长因子Ⅰ的表达量就一直在高值，在重组人生长激素组和生理盐水组，伤后1d出现胰岛素样生长因子Ⅰ的表达，在7d时达到峰值，在伤后11d，表达量下降，14、17d创面愈合后，其表达量也就下降到正常范围。④组间采用t检验。结论：在创面应用胰岛素样生长因子Ⅰ能够促进成纤维细胞分裂增殖，合成分泌增加，是成纤维细胞增生的直接促进因子，能促进创面的愈合。创面应用的重组人生长激素促增殖作用不强。     

扶济复促进急性创面愈合的实验研究

目的:观察不同剂量扶济复(外用重组人bFGF)对SD大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合的促进作用。方法:32只SD大鼠随机分为4组:空白对照组(A)、基质治疗组(B)、扶济复低剂量治疗组(C)、扶济复高剂量治疗组(D)。大鼠背部各制备2个深Ⅱ度烫伤创面,于伤后每日创面分别涂抹基质和扶济复。伤后3、6、9、15 d分别测量痂皮形成及脱落创面数、新生上皮率、创面愈合率,伤后15 d行组织学检查。结果:与对照组相比,扶济复在烫伤后6~9 d前后融痂脱痂效果非常明显(P0.05);治疗后9 d,新生上皮较对照组显著增多(P0.05);治疗后15 d,毛囊再生较对照组显著增高(P0.05)。结论:扶济复可以促进痂皮形成和脱落、加快上皮生长、促进毛囊再生,增加烧伤创面修复速度并改善修复质量。     

人重组表皮生长因子与碱性成纤维细胞生长因子联合应用对糖尿病创面愈合过程的修复效应

目的:联合应用重组人表皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子,探讨其对糖尿病创面愈合过程的影响。方法:选择2001-05/2005-03广西医科大学烧伤整形康复中心收治的29例糖尿病足部溃疡患者,均自愿签署知情同意书。采用随机表法将29例患者随机分为4组:联合用药组7例、重组人表皮生长因子组8例、碱性成纤维细胞生长因子组6例、生理盐水对照组8例。各组患者均在处理创面前将空腹血糖控制在11.1mmol/L以下,伴感染者经有效抗生素静脉滴注至感染完全控制,创面刮除病理性肉芽。联合用药组给予外用重组人表皮生长因子1500IU/次,外喷碱性成纤维细胞生长因子720AU/次;重组人表皮生长因子组单纯给予外用重组人表皮生长因子1500IU/次;碱性成纤维细胞生长因子组给予外喷碱性成纤维细胞生长因子720AU/次;生理盐水对照组仅用生理盐水擦拭创面。各组敷料包扎,隔天换药,于处理创面后第3,7,14天观察创面上皮葡行情况和肉芽组织成熟程度。结果:实验选用糖尿病足患者29例,全部进入结果分析。①创面处理后不同时间各组创面愈合率的比较:创面处理后第3天各组基本相似(P>0.05);创面处理后第7天,与生理盐水对照组比较,联合用药组和重组人表皮生长因子组均明显提高(P<0.05);创面处理后14天,与生理盐水对照组比较,联合用药组、重组人表皮生长因子组、碱性成纤维细胞生长因子组均显著提高(21.67±1.53)%,(33.50±1.56)%,(28.77±1.50)%,(23.73±1.20)%(P<0.01或0.05),以联合用药组升高最为明显。②创面处理后不同时间各组肉芽组织生长大体观察情况:各组于创面处理后第3,7天创面肉芽组织生长情况均基本相似(P>0.05)。创面处理后第14天,联合用药组创面肉芽组织生长情况明显优于重组人表皮生长因子组、碱性成纤维细胞生长因子组、生理盐水对照组(P<0.05)。结论:重组生长因子和碱性成纤维细胞生长因子联合应用对于糖尿病创面的治疗具有协同效应。     

Ⅰ型胰岛素样生长因子重组真核表达载体的构建及在烫伤大鼠皮肤中的表达

目的:构建Ⅰ型胰岛素样生长因子重组真核表达载体pcDNA3.1/Ⅰ型胰岛素样生长因子,并观察其在烫伤大鼠皮肤中的表达情况。方法:实验于2003-07/12在解放军第一军医大学热带卫生学系实验室完成。利用原核表达质粒pUChIGF-I,通过分子克隆技术扩增Ⅰ型胰岛素样生长因子基因,将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1中,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1/Ⅰ型胰岛素样生长因子。取20只Wistar大鼠,全麻后背部浸入95℃水浴锅中,烫伤12s,造成30%Ⅲ度烫伤,烫伤后随机分为两组(n=10),即cDNA3.1/Ⅰ型胰岛素样生长因子组及pcDNA3.1组。①pcDNA3.1/Ⅰ型胰岛素样生长因子组:烫伤后当天及第1,2,3,4周后于大鼠左后背部创面边缘(距创面边缘0.5cm)皮下注射脂质体和重组质粒的混合物192μL眼3.6μgpcDNA3.1/Ⅰ型胰岛素样生长因子穴2μL雪 10μL脂质体 180μL生理盐水演。②pcDNA3.1组:注射时间和方法同前,脂质体和质粒混合物为3.0μgpcDNA3.1穴2μL雪 10μL脂质体 180μL生理盐水。伤后5周断头处死大鼠,取注射点附近皮肤,应用免疫组化方法检测Ⅰ型胰岛素样生长因子基因的表达情况。结果:20只大鼠全部进入结果分析,无脱失。①大鼠重组质粒经酶切鉴定与预期结果一致,DNA测序结果表明Ⅰ型胰岛素样生长因子基因已分别正确插入到pcDNA3.1质粒,提示成功构建了重组真核表达载体。②pcDNA3.1/Ⅰ型胰岛素样生长因子组大鼠皮肤组织中Ⅰ型胰岛素样生长因子呈现强阳性表达,pcDNA3.1组大鼠呈表达缺失或弱阳性表达。结论:应用分子克隆技术可以成功构建重组真核表达载体pcDNA3.1/Ⅰ型胰岛素样生长因子,Ⅰ型胰岛素样生长因子在烫伤大鼠皮肤中呈阳性表达。     

原位定型微囊化载体制剂在糖尿病大鼠皮肤溃疡中的作用

背景:原位定型微囊化载体制剂成分之一胰岛素可以促进溃疡愈合。目的:观察原位定型微囊化载体制剂在糖尿病大鼠皮肤溃疡中的疗效。方法:腹腔内注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,应用外科方法建立全层皮肤缺损模型。根据皮肤溃疡处干预方式将实验动物分为4组。①空白对照组用生理盐水处理创面。②一般制剂组应用甲硝唑+山莨菪硷1+普通短效胰岛素处理创面。③单纯微囊组创面外敷不含有效药物成分的微囊化载体膜。④微囊化有效制剂组溃疡处外涂微囊化载体制剂膜,内含药物成分与一般制剂组相同。定时测量溃疡面积,记录溃疡愈合时间,取创面全层组织进行组织学观察,测定表皮生长因子受体、纤维连接蛋白阳性细胞数量。结果与结论:微囊化有效制剂组大鼠溃疡愈合时间短于其他3组(P<0.05或P<0.01),微囊化有效制剂组表皮生长因子受体和纤维连接蛋白阳性细胞数目高于其他各组(P<0.05或P<0.01)。结果表明,原位定型微囊化载体制剂能够缩短愈合时间和促进糖尿病大鼠皮肤溃疡愈合。     

胰岛素和葡萄糖联合应用对严重烫伤MODS大鼠炎性因子水平的影响

目的研究胰岛素通过和不通过控制高血糖对严重烫伤多器官功能不全(MODS)大鼠炎性因子水平的影响,探讨胰岛素体内抗炎作用机制,为创伤外科使用胰岛素抗炎提供依据。方法 60只严重烫伤MODS大鼠,随机分为严重烫伤MODS大鼠胰岛素治疗高血糖控制组(INS组,20例)、胰岛素和葡萄糖联合治疗高血糖非控制组(INS+GLU组,20例)以及严重烫伤MODS大鼠治疗对照组(C组,20例),测定不同组大鼠伤前和伤后1、3、5、7d空腹血糖、血浆可溶性髓样细胞触发蛋白受体1(sTREM-1)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)水平,并进行统计分析。结果 INS组伤后各时点空腹血糖水平明显低于C组,差异有统计学意义(P0.01),而INS+GLU组伤后各时点与C组相比,差异无统计学意义(P0.05);INS组和INS+GLU组伤后各时点血浆sTREM-1、TNF-α和HMGB1水平均明显低于C组,差异有统计学意义(P0.01);INS组伤后各时点血浆sTREM-1、TNF-α和HMGB1水平与INS+GLU组相比,差异无统计学意义(P0.05)。结论胰岛素可降低严重烫伤MODS大鼠炎性反应,胰岛素体内抗炎作用并不通过控制高血糖发挥作用。     

升高空气压力减轻烫伤大鼠组织水肿及加速愈合

目的:应用升高空气压力来减轻大鼠深Ⅱ度烫伤后创面组织水肿,观察其效果及对愈合的影响。方法:实验于2004-12/2006-06在扬州大学医学院外科实验室完成。①实验分组:Wistar雄性大鼠36只,随机分为两组:实验组18只,对照组18只。②实验方法:大鼠以硫化钠脱毛剂脱去背部体毛,24h后采用苯巴比妥腹腔注射麻醉,水浴法(80℃,时间6s)造成背部4cm×4cm深Ⅱ度烫伤(病理切片证实),腹腔立即注射林格氏液5mL复苏。实验组动物伤后在高于大气压2.45kPa的压力箱内饲养,对照组箱内压力与大气压同。③实验评估:喂养48h后麻醉下处死大鼠,取伤部组织皮肤测定组织含水量;在伤后1,3,6,12h检测创面组织液渗出量;观察创面愈合率及愈合时间。结果:36只大鼠均进入结果分析。伤后48h实验组组织含水量低于对照组(P<0.05)。实验组在伤后1,3,6,12h创面组织液渗出量低于对照组(P<0.05)。实验组创面愈合时间短于对照组(P<0.05)。结论:升高空气压力可以降低创面的液体渗出,减轻组织水肿,缩短创面愈合时间。     

高浓度氧疗联合重组人表皮生长因子凝胶治疗新生儿红臀效果观察及护理

目的探讨高浓度氧疗联合重组人表皮生长因子凝胶治疗新生儿红臀的临床疗效,总结护理方法。方法 60例新生儿红臀患儿随机分为观察组与对照组,各30例。在常规护理的基础上,对照组采用高浓度氧疗联合鞣酸软膏治疗,观察组采用高浓度氧疗联合重组人表皮生长因子凝胶治疗。比较2组治疗总有效率、创面愈合时间以及治疗前后新生儿疼痛评估量表(NIPS)评分。结果观察组治疗总有效率96.67%(29/30),高于对照组的76.67%(23/30),差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,2组NIPS评分均较治疗前降低,且观察组较对照组降低显著(P<0.05);观察组创面愈合时间(4.59±2.37)d,短于对照组的(7.98±3.05)d(P<0.05)。结论新生儿红臀采用高浓度氧疗联合重组人表皮生长因子凝胶治疗效果显著,能进一步促进创面愈合时间,减轻疼痛症状。     

封闭负压引流对创伤愈合中周围神经末梢分泌的P物质及表皮生长因子表达的影响

目的:通过研究封闭负压引流技术(vacuum-assistedclosure,VAC)在创面愈合中对周围神经末梢分泌的P物质(简称,SP)、降钙素相关基因肽(calcitoningene-relatedpeptide,CGRP)与表皮细胞生长因子(epidermalgrowthfactor,EGF)表达的影响,探求促进创面愈合的方法。方法:100只SD大鼠随机分成4组,每组25只,即人工去感觉神经创面+封闭式负压引流组(A组)、人工去感觉神经创面组(B组)、有神经支配正常创面+封闭式负压引流组(C组)、有神经支配正常创面组(D组)。A,C组采用间断性VAC(3/d,负压10.67kPa)。在VAC后1,3,6,9,12d,A,B,C,D4组同时取材,采用免疫组化和原位杂交技术检测各组各时间点SP,CGRP,EGF/EGFmRNA的表达。结果:C,D组在伤后第1天SP,CGRP及EGF,EGFmRNA表达在伤缘皮肤毛囊及皮脂腺细胞。伤后第3天肉芽组织中有SP,CGRP有明显表达,以后SP,CGRP逐渐降低,但C组较D组维持相对高的状态,第9天其SP,CGRP表达强度分别为12.69/11.49和14.80/13.51(P<0.05),肉芽组织中EGF,EGFmRNA于伤后第3天从较低水平逐渐升高,至第9天达最高,其EGF,EGFmRNA表达强度分别为9.51/7.19和18.32/13.89(P<0.05)然后明显降低,在此过程中C组较D组EGF/EGFmRNA表达强烈。A,B组创缘和肉芽组织中SP,CGRP,EGF/EGFmRNA含量相对C,D组处于较低水平,但A     

脂质水胶体敷料联合表皮生长因子治疗浅Ⅱ度烫伤的疗效观察

目的观察脂质水胶体敷料联合表皮生长因子治疗浅Ⅱ度烫伤的疗效,探求一种操作简单、安全有效容易被患者接受的烫伤换药新方法。方法将864例轻、中度烫伤的患者按单双号分为观察组和对照组。观察组采用脂质水胶体敷料联合表皮生长因子,对照组采用磺胺嘧啶银传统无菌包扎法。比较两组创面患者更换敷料时有无创面粘连发生、有无疼痛、出血及伤口换药次数、愈合时间。结果观察组患者更换敷料时无创面粘连发生,平均治愈时间明显少于对照组且患者疼痛较轻(P0.05)。结论脂质水胶体敷料联合表皮生长因子治疗患者浅Ⅱ度烫伤,具有不粘连创面、换药无疼痛及出血、加速创面愈合等优点,值得在浅Ⅱ度烫伤患者中推广。     

复方茶多酚软膏对放射性皮炎大鼠伤口愈合和表皮生长因子表达的影响

背景:研究表明复方茶多酚软膏对急性放射性皮炎的伤口有愈合作用,但具体机制尚未阐明.目的:探讨复方茶多酚软青对大鼠放射性皮炎创面愈合及表皮生长因子表达的影响.方法:清洁级雄性成年Wistar大鼠随机分成3组:实验组和对照组大鼠通过60 Co γ射线照射建立大鼠放射性皮炎模型,实验组大鼠采用常规护理后用复方茶多酚软膏外涂辐射伤口区,对照组涂抹凡士林软膏:简单皮肤伤口组大鼠采用1.5 cm2皮肤全切除,仅接受常规护理.通过放射免疫法测定伤后5,10,20和40 d时创面组织的表皮生长因子表达、观测创面愈合率和愈合时间,并与简单伤口组比较.结果与结论:实验组和对照组在V射线照射后5 d创面组织表皮生长因子表达弱于简单皮肤伤口组,提示放射性皮炎与简单皮肤切口损失不同,创面恢复期创面组织表皮生长因子呈弱表达,愈合缓慢:实验组创伤后10和20 d时创面组织表皮生长因子表达显著高于对照组(P＜0.05):实验组在10和20 d时的创面愈合率明显高于对照组(P＜0.05);实验组愈合时间明显短于对照组的愈合时间(P＜0.05),实验组和对照组的愈合时间均明显长于简单皮肤伤口组(P＜0.05).结果表明复方茶多酚软膏外涂对大鼠放射性皮炎的愈合有促进作用,其机制可能与促进创面组织表皮生长因子的表达有关.     

Ⅰ型胰岛素样生长因子重组真核表达载体的构建及在烫伤大鼠皮肤中的表达

目的：构建Ⅰ型胰岛素样生长因子重组真核表达载体pcDNA3．1／Ⅰ型胰岛素样生长因子，并观察其在烫伤大鼠皮肤中的表达情况。 方法：实验于2003-07／12在解放军第一军医大学热带卫生学系实验室完成。利用原核表达质粒pUChIGF-I，通过分子克隆技术扩增Ⅰ型胰岛素样生长因子基因，将其克隆至真核表达载体pcDNA3．1中，构建重组真核表达质粒pcDNA3．1／Ⅰ型胰岛素样生长因子。取20只Wistar大鼠，全麻后背部浸入95℃水浴锅中，烫伤12s，造成30％Ⅲ度烫伤，烫伤后随机分为两组（n=10），即cDNA3．1／Ⅰ型胰岛素样生长因子组及pcDNA3．1组。①pcDNA3．1／Ⅰ型胰岛素样生长因子组：烫伤后当天及第1，2，3，4周后于大鼠左后背部创面边缘（距创面边缘0．5cm）皮下注射脂质体和重组质粒的混合物192μL（3．6μg pcDNA3．1／Ⅰ型胰岛素样生长因子（2μL）＋10μL脂质体＋180μL生理盐水]。②cDNA3．1组：注射时间和方法同前，脂质体和质粒混合物为3．0μg pcDNA3．1（2μL）＋10μL脂质体＋180μL生理盐水。伤后5周断头处死大鼠，取注射点附近皮肤，应用免疫组化方法检测Ⅰ型胰岛素样生长因子基因的表达情况。 结果：20只大鼠全部进入结果分析，无脱失。①大鼠重组质粒经酶切鉴定与预期结果一致。DNA测序结果表明Ⅰ型胰岛素样生长因子基因已分别正确插入到pcDNA3．1质粒，提示成功构建了重组真核表达载体。②pcDNA3．1／Ⅰ型胰岛素样生长因子组大鼠皮肤组织中Ⅰ型胰岛素样生长因子呈现强阳性表达，pcDNA3．1组大鼠呈表达缺失或弱阳性表达。 结论：应用分子克隆技术可以成功构建重组真核表达载体pcDNA3．1／Ⅰ型胰岛素样生长因子，Ⅰ型胰岛素样生长因子在烫伤大鼠皮肤中呈阳性表达。     

肝细胞生长因子基因重组腺病毒修饰间充质干细胞修复急性放射性损伤大鼠的创面☆◆

背景:基因药物与干细胞联合应用促进难治性大面积创面修复。目的:观察携带肝细胞生长因子基因的重组腺病毒(adenovirus hepatocyte growth factor,Ad-HGF)修饰的间充质干细胞对大鼠皮肤放射性损伤创面促愈合的作用。方法:体外分离、培养雄性Wistar大鼠骨髓间充质干细胞,转染Ad-HGF后备用。40只雌性Wistar大鼠用X射线局部照射制备急性放射性皮肤损伤模型。并将模型大鼠随机分为单纯间充质干细胞治疗组、单纯Ad-HGF治疗组、Ad-HGF修饰的间充质干细胞治疗组、溶剂对照组4组,制备模型即刻各组将相应细胞悬液、病毒悬液及溶剂行创面边缘多点注射。结果与结论:苏木精-伊红染色结果显示,伤后21d Ad-HGF修饰的间充质干细胞治疗组再生表皮明显薄于溶剂对照组,并可见丰富的新生小血管,且表皮较单纯间充质干细胞治疗组和单纯Ad-HGF治疗组更平整,新生小血管更丰富;免疫组织化学结果表明,Ad-HGF修饰的间充质干细胞治疗组创面中肝细胞生长因子表达均强于其他组;羟脯氨酸含量Ad-HGF修饰的间充质干细胞治疗组在7d后显著低于其他组(P<0.05);原位杂交结果显示,Ad-HGF修饰的间充质干细胞治疗组修复的皮肤组织中性别决定基因sry表达强于单纯间充质干细胞治疗组。结果提示,Ad-HGF修饰的间充质干细胞对皮肤放射性损伤创面有显著的促愈合修复作用,且优于二者单独应用。     

康肤霜对大鼠放射性皮肤损伤创面愈合的影响

背景:放疗中引起的放射性皮肤损伤,常使用重组人表皮生长因子和聚维酮碘治疗,但两者均有一定缺陷.而康肤霜能促进细胞分裂增殖,具有一定的抗菌消炎作用,可能对放射性皮肤损伤有很好的疗效.目的:观察康肤霜对大鼠放射性皮肤损伤创面愈合的影响.方法:高能X射线照射Wistar大鼠臀部皮肤建立深II度皮肤烧伤创面模型.照射后12d创面出现后,将损伤动物随机分为康肤霜组,重组人表皮生长因子组和聚维酮碘组.各组每日将药物均匀涂抹在创面,直至创面取材或创面愈合.观察创面愈合率及愈合时间.各组动物分别于创面治疗后7,14,21d取创面组织,观察病理组织学变化、创面组织增殖细胞核抗原的表达,以标记指数法测定增殖细胞核抗原阳性细胞数,评估组织创面的修复情况.结果与结论:康肤霜组与重组人表皮生长因子组创面愈合时间、愈合率均优于聚维酮碘组(P<0.01),但两组间无显著差异(P>0.05)且两组创面组织标本中增殖细胞核抗原表达量也明显高于聚维酮碘组(P<0.01),但其两组间比较差异无显著性意义(P>0.05).说明康肤霜能减轻创面早期的炎症反应,促进创面的再上皮化和表皮各层的分化,加速大鼠放射性皮肤损伤创面的愈合.