多药耐药基因在泌尿系统肿瘤细胞系中的表达

目的检测泌尿系统肿瘤多药耐药基因及其产物的表达。方法对肾颗粒细胞癌细胞系ＧＲＣ１，肾透明细胞癌细胞系ＲＣＣ９４９，膀胱移行细胞癌细胞系ＢＩＵ８７、Ｔ２４、ＥＪ，前列腺癌细胞系ＰＣ３ｍ和对照的白血病细胞系ＨＬ６０进行免疫细胞化学和逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）检测。结果只有ＧＲＣ１同时表达Ｐ糖蛋白（ＰＧＰ）和ＭＤＲ１基因ｍＲＮＡ，其他肿瘤细胞系均无表达。结论泌尿系肿瘤细胞系多数无ＰＧＰ也没有ＭＤＲ１基因ｍＲＮＡ水平的表达，只有ＧＲＣ１例外     

生长因子对间皮细胞增殖及合成细胞外基质的影响

目的　探讨血小板源生长因子ｂｂ（ＰＤＧＦｂｂ） 、转化生长因子β（ＴＧＦβ） 对人腹膜间皮细胞（ＨＰＭＣ）增殖及合成细胞外基质（ＥＣＭ） 的影响。方法　建立ＨＰＭＣ体外培养体系。３ＨＴｄＲ 掺入法测定细胞增殖；放射免疫法检测细胞上清中Ⅲ型前胶原（ ⅢＰＣ） 。结果　ＰＤＧＦｂｂ 促进、但ＴＧＦβ抑制ＨＰＭＣ增殖，均呈剂量依赖性（ Ｐ＜ ０－０１） 。２ 者均能刺激ＨＰＭＣ 产生ⅢＰＣ（ Ｐ＜ ０－０１）。结论　ＣＡＰＤ相关性腹膜炎时腹腔中高浓度的ＰＤＧＦｂｂ 、ＴＧＦβ能调节间皮层的修复和重塑，刺激其合成分泌ＥＣＭ，后者可能是腹膜炎（ＰＩ）反复发生最终导致腹膜硬化的重要机制之一。     

Fas/APO-1 在泌尿系肿瘤细胞中的表达

为了探讨Ｆａｓ／ＡＰＯ１在泌尿系恶性肿瘤发生发展中的作用，采用免疫细胞化学方法对６种泌尿系肿瘤细胞，膀胱癌（Ｔ２４，ＥＪ，ＢＩＵ８７），肾癌（ＧＲＣ１，ＲＣＣ９４９），前列腺癌（ＰＣ３Ｍ）和一种原代培养正常肾间质成纤维细胞Ｆａｓ／ＡＰＯ１分子的表达进行了检测。结果显示原代培养正常肾间质成纤维细胞和Ｔ２４细胞系Ｆａｓ／ＡＰＯ１分子表达较强，ＰＣ３Ｍ属中等强度表达，ＲＣＣ９４９与ＢＩＵ８７属微弱表达，而ＥＪ及ＧＲＣ１则不表达。Ｆａｓ／ＡＰＯ１在泌尿系恶性肿瘤培养细胞中的表达强度偏低或完全不表达，可能参与了泌尿系恶性肿瘤的发生和发展。     

逆转录病毒载体介导HSV—TK基因在膀胱癌细胞的表达和作用

应用基因工程技术构建了带ＨＳＶＴＫ基因的逆转录病毒重组体ｐＬＮＳＸＴＫ，磷酸钙沉淀法转染ＰＡ３１７细胞，建立了重组病毒的载体产生细胞系ＰＡ３１７／ＴＫ细胞。用病毒上清感染人的膀胱癌细胞株ＢＩＵ８７，Ｇ４１８筛选抗性克隆ＢＩＵ８７／ＴＫ细胞。提取ＰＡ３１７／ＴＫ和ＢＩＵ８７／ＴＫ细胞的ＤＮＡ，用ＤＩＧ标记检测证实整合了ＨＳＶＴＫ基因，在病毒上清用ＲＴＰＣＲ检测到目的基因的转录。转导ＨＳＶＴＫ基因的膀胱癌细胞获得对ＡＣＶ的化学敏感性，给予ＡＣＶ可有效地杀伤肿瘤细胞。     

一例前列腺癌P53基因第6外显子中的移码突变

以ＰＣＲ单链构象多态（ＰＣＲＳＳＣＰ）分析及ＰＣＲ直接测序技术，结合免疫组织化学方法，对１例前列腺癌患者治疗前的前列腺穿刺组织及内分泌治疗后复发的手术切除标本中不同部位随机取材的肿瘤组织进行Ｐ５３基因第５，６外显子及Ｐ５３蛋白表达的检测，发现在第６外显子的第２０８密码子存在碱基插入突变（ＧＡＣ→ＧＡＴ），免疫组织化学检测中未发现Ｐ５３蛋白的过量表达。前列腺癌中尚未见有此种Ｐ５３基因突变的文献报道。     

动脉硬化闭塞症与血管内皮细胞活性因子关系的研究

目的　探讨动脉硬化闭塞症（ＡＳＯ） 与内皮素１（ＥＴ１） 、一氧化氮（ＮＯ） 等血管内皮细胞活性因子的相互关系。方法　选择９６ 例ＡＳＯ 患者，采用密度梯度法检测循环内皮细胞计数（ＣＥＣ），采用放射免疫测定法检测血浆ＥＴ１ 、血栓素Ｂ２（ＴＸＢ２）、６酮前列腺素Ｆ１α（６ＫＰＧＦ１α） ，降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ） 、血管紧张素Ⅱ（ＡＴⅡ）、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ），采用酶联免疫检测细胞间粘附分子１（ＩＣＡＭ１）、Ｐ选择素（ＰＳ）。采用Ｇｒｉｓｓ 法检测血浆ＮＯ水平。结果　所有患者均存在高ＥＴ１、ＴＸＢ２ 、ＡＴⅡ、粘附分子、ＣＥＣ血症，存在低ＮＯ、ＣＧＲＰ、６ＫＰＧＦ１α血症，且以Ⅲ期病人最明显。结论　ＡＳＯ 的发生发展同血管内皮细胞活性因子密切相关，ＥＴ１、ＮＯ 等血管活性因子的检测有助于ＡＳＯ发病机制的探讨和病情严重程度的判别。     

MTT测定恶性肿瘤细胞对化疗药物的敏感性

目的 探讨３－（４．５）－双甲基－２－噻唑－（２．５）－二苯基溴化四氮唑蓝（ＭＴＴ）法测定恶性肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。方法 采用改良的ＭＴＴ法检测了１８９例恶性肿瘤标本对９种化疗药物的体外敏感性。结果 ５１例胃癌细胞对化疗药物的敏感性,由高到低依次为丝裂霉素（ＭＭＣ）,５－氟脲嘧啶（５－Ｆｕ）,顺铂（ＤＤＰ）,阿霉素（ＡＤＭ）,阿糖胞苷（Ａｒａ－Ｃ）,平阳霉素（ＰＹＭ）,甲氨喋呤（ＭＴＸ）,足     

柳氮磺吡啶和甲氨喋呤治疗强直性脊柱炎

目的：了解柳氮磺吡啶（ＳＡＰＡ）与甲氨喋呤（ＭＴＸ）联合用药对强直性脊柱炎（ＡＳ）的临床疗效。方法：ＭＴＸ１５～２０ｍｇ１次／周，ＳＡＰＡ１ｇ２次／日。连续服药８个月，随访３～１２个月，疗程结束后判定疗效，同时记录和观察药物毒副反应，结果：３７例ＡＳ患者有２５例临床缓解占６８％，显效９例占２４％，有效３例占８％，同时还观察到病情发作期、病程短、年龄小以及骶髂受累级越小，临床疗效越好，结论：ＭＴＸ＋     

1，25二羟维生素D3对乳腺癌细胞株生长及凋亡的影响

目的　研究１ ，２５ 二羟维生素 Ｄ３［１ ，２５（ Ｏ Ｈ）２ Ｄ３］ 对乳腺癌细胞株 Ｍ Ｃ Ｆ７ 生长及凋亡的影响。　方法　采用四唑氮蓝比色（ Ｍ Ｔ Ｔ） 法检测细胞增殖，光镜和电镜形态学观察，流式细胞仪测定细胞周期和凋亡率，末端脱氧核苷酸转移酶介导的原位酶标记（ Ｔ Ｕ Ｎ Ｅ Ｌ） 法计数凋亡细胞，免疫印迹法检测ｂｃｌ２ 蛋白表达。　结果　１０ － ７ ｍｏｌ／ Ｌ 的１ ，２５（ Ｏ Ｈ）２ Ｄ３ 就可以抑制 Ｍ Ｃ Ｆ７ 增生，改变细胞周期时相分布，致 Ｇ０／ Ｇ１ 期阻滞，加强细胞毒性化疗药阿霉素（ Ａｄｒ） 的作用，促进细胞凋亡，下调ｂｃｌ２ 蛋白表达。　结论　１ ，２５（ Ｏ Ｈ）２ Ｄ３ 可以作为细胞调亡诱导剂成为新一类乳腺癌激素治疗药。     

热休克蛋白70反义寡核苷酸增加热应激的前列腺癌细胞凋亡的研究

研究证实 ,许多恶性肿瘤细胞在正常状况和热疗时都有热休克蛋白 70(ＨＳＰ70 )的高表达 ,并与其获得热耐受性[1] 、抗凋亡[2 ] 等恶性行为密切相关。我们探讨了ＨＳＰ70反义寡核苷酸抑制体外培养的人前列腺癌细胞株ＬＮＣａＰ及ＰＣ 3ｍＨＳＰ70的表达后 ,对热应激诱导其凋亡的作用。1.材料与方法 :全硫代ＨＳＰ70反义寡核苷酸序列为 5′ ＣＧＣＧＧＣＴＴＴＧＧＣ ＣＡＴ 3′ ,与人ＨＳＰ70ｍＲＮＡ的起始密码子及下游区 4个密码子互补 ;正义寡核苷酸序列为 :5′ ＡＴＧＧＣＣＡＡＡＧＣＣＧＣＧ 3′作为对照。人前列腺癌雄激素依赖细胞株…     

电烧伤早期止血启动的分子标志物对血栓形成的影响

目的　了解电烧伤早期血栓形成的基础。方法　分析测定了２６ 例电烧伤早期病人血浆中的某些分子标志物,其中包括：血栓烷素（ Ｔ Ｘ Ｂ２） 、血小板表面α颗粒膜蛋白（ Ｇ Ｍ Ｐ１４０） 、前列环素（ Ｐ Ｇ Ｉ２） 、内皮素１（ Ｅ Ｔ１） 、纤溶酶原活性（ Ｐ Ｌ Ｇ Ａ） 。结果　在电烧伤早期 Ｇ Ｍ Ｐ１４０ 及内皮素明显升高（ Ｐ＜ ００１） , Ｐ Ｌ Ｇ Ａ 在伤后２ 周出现了有意义的变化。而 Ｔ Ｘ Ｂ２ 和 Ｐ Ｇ Ｉ２ 这对平衡关系被打破,出现血栓前状态。结论　一项或多项的止血启动的分子标志物的综合性变化都可能参与血栓形成的基础。     

白细胞介素6对前列腺癌细胞体外生长的影响及其调节

目的　了解白细胞介素６（ＩＬ６） 对前列腺癌（ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ,ＰＣａ） 细胞体外生长的影响及地塞米松（ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ,Ｄｅｘ） 对此的调节。方法　采用ＥＬＩＳＡ 法测定ＰＣａ 细胞系ＰＣ３ｍ 细胞ＩＬ６ 的自分泌及Ｄｅｘ 处理后的分泌状况,并用结晶紫法观察ＩＬ６ 、抗ＩＬ６ 抗体和Ｄｅｘ 对ＰＣ３ｍ 细胞生长的影响。结果　ＰＣ３ｍ 细胞可自分泌ＩＬ６,ＩＬ６ 无促进ＰＣ３ｍ 细胞增殖作用（ Ｐ＞ ０．０５）;抗ＩＬ６ 抗体可抑制ＰＣ３ｍ 细胞生长,细胞毒性由（１４．８４ ±１．２５） ％ 递增至（４１ ．４１ ±０ ．８０）％ ,呈剂量依赖关系（ Ｐ＜０．０５） 。Ｄｅｘ 不能减少ＩＬ６ 的产生但可抑制ＰＣ３ｍ 细胞增殖。细胞毒性由（１４ ．０６ ±０．２０）％ 递增至（３１ ．２５ ±１ ．１９）％ ,呈浓度依赖关系（ Ｐ＜ ０ ．０５）。结论　ＩＬ６ 为ＰＣ３ｍ 细胞的自分泌生长因子;Ｄｅｘ 可抑制ＰＣ３ｍ 细胞增殖,但并非通过抑制ＩＬ６ 的生成而发挥作用。     

VP-16诱导PC-3细胞凋亡和p53基因表达的研究

目的 研究ＶＰ－１６诱导雄激素非依赖型前列腺癌细胞ＰＣ－３凋亡和抑癌基因ｐ５３表达的关系。方法 以末端标记法（ＴＵＮＥＬ）和流式细胞术（ＦＣＭ）研究ＰＣ－３细胞凋亡及细胞周期分布;以免疫组化方法研究ｐ５３蛋白的表达。结果 末端标记法显示凋亡的ＰＣ－３细胞呈明显的形态学改变,流式细胞术和免疫组化检测结果表明,随ＶＰ－１６作用浓度的增加利用和作用时间的延长,ＰＣ－３细胞的凋亡率和其ｐ５３基因表达阳性的     

p53状态能否有助于选择浸润性膀胱癌患者保留膀胱

本研究的目的旨在探讨浸润性膀胱癌的ｐ５３状态是否有助于选择患者接受保留膀胱的治疗。１１１例有肌层浸润（Ｔ２～３Ｎ０Ｍ０）的膀胱移行细胞癌患者接受甲氨喋呤、长春花碱、阿霉素和顺铂（ＭＶＡＣ）的辅助化疗。其中６０例患者（５４％）对ＭＶＡＣ呈完全性临床...     

转化生长因子β1及β3在前列腺癌中的表达及其意义

目的研究前列腺癌（ＰＣａ）组织中转化生长因子（ＴＧＦ）β１与β３的表达及与ＰＣａ的病理分级、临床分期和远处转移的关系。方法采用免疫组织化学（ＩＨＣ）方法对４６例ＰＣａ标本进行染色。结果３９例表现广泛的肿瘤细胞外基质（ＥＣＭ）和胞浆ＴＧＦβ１染色，余７例只ＥＣＭＴＧＦβ１染色。ＴＧＦβ１ＥＣＭ／胞浆染色指数与ＰＣａＧｌｅａｓｏｎ评分、临床分期及有远处转移的ＰＣａ（Ｄ２期）呈正相关（ｒ分别为０．４２／０．３１，０．８１／０．６４，０．６８／０．４４，Ｐ均＜０．０５）。４６例ＰＣａ标本中，４５例有明显的肿瘤细胞胞浆ＴＧＦβ３染色，２５例示较弱的ＥＣＭＴＧＦβ３染色；ＴＧＦβ３染色指数与ＰＣａ临床分期、Ｇｌｅａｓｏｎ评分及远处转移无显著性相关（Ｐ均＞０．０５）。结论ＴＧＦβ１在ＰＣａ中有高表达，可能通过自分泌和旁分泌机制对ＰＣａ生长起促进而非抑制的作用，并可作为监测ＰＣａ病程进展的瘤标。ＴＧＦβ３在ＰＣａ中虽有表达，但其作用尚待阐明     

阿魏酸钠对犬心脏停跳复苏后脑组织TXB_2、6-keto-PGF_(1a)及MDA含量的影响

研究了阿魏酸钠对犬心脏停跳１０分钟复苏后４小时脑组织中血栓素Ｂ２（ＴＸＢ２）、６－酮－前列腺素Ｆ１ａ（６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１ａ）及丙二醛（ＭＤＡ）含量的影响。１７只犬随机分为非缺血对照组（Ａ组）、缺血再灌注常规治疗组（Ｂ组）及缺血再灌注阿魏酸钠治疗组（Ｃ组）。结果发现，Ｂ组ＴＸＢ２、ＭＤＡ含量及ＴＸＢ２／６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１ａ比值均较 Ａ组明显升高（Ｐ＜０． ０１）。 Ｃ组 ＴＸＢ２、ＭＤＡ含量及 ＴＸＢ２／６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１ａ比值升高幅度均较Ｂ组明显低（Ｐ＜０．０１）。表明阿魏酸钠可明显抑制犬心脏停跳复苏后脑组织花生四烯酸代谢及脂质过氧化反应。     

肝癌病人树突状细胞诱导高效而特异的抗肝癌免疫

目的 以肝癌病人树突状细胞（ＤＣ）体外诱导抗肝癌免疫。方法 自肝癌病人外周血中分离出单个核细胞（ＰＢＭＣ０;以人肝癌细胞系ＨｅｐＧ２肿瘤细胞的肿瘤相关抗原（ＴＡＡ）激活ＤＣ;以粒／巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）及白介素４（ＩＬ－４）联合刺激ＰＢＭＣ中ＤＣ;ＤＣ诱导自体Ｔ淋巴细胞增殖,分化为细胞毒性Ｔ细胞（ＣＴＬ）;检测ＣＴＬ及其上清液对ＨｅｐＧ２,ＢＥＬ－７４０２,ＬＯＶＯｅｙ ＨＯＳ－８６     

细胞周期对Fas/APO-1在前列腺癌细胞系PC-3M中表达的影响

目的研究细胞周期对ＰＣ３Ｍ细胞表面Ｆａｓ／ＡＰＯ１蛋白表达的影响。方法采用直接免疫荧光流式细胞术对前列腺癌细胞系ＰＣ３Ｍ未同步化的细胞,及经改良的笑气阻断及ＴｄＲ双阻断方法同步化的不同细胞周期细胞表面Ｆａｓ／ＡＰＯ１表达情况进行检测。结果未同步化的ＰＣ３Ｍ细胞Ｆａｓ／ＡＰＯ１表达阳性率为３４２０％;ＰＣ３Ｍ细胞系不同细胞周期的细胞表面Ｆａｓ／ＡＰＯ１表达明显不同,以Ｓ期最高达８５０５％,Ｇ１及Ｍ期较低,分别为３３２％和４９５％。结论细胞周期对细胞表面Ｆａｓ／ＡＰＯ１的表达情况有明显影响。深入研究细胞周期对肿瘤细胞Ｆａｓ／ＡＰＯ１表达情况的影响,对于采用Ｆａｓ／ＡＰＯ１系统途径治疗恶性肿瘤有重要意义。     

巢式逆转录多聚酶链反应检测周围静脉血中肝癌细胞的敏感性

本研究拟应用巢式逆转录多聚酶链反应（巢式ＲＴＰＣＲ）检测不同稀释比例的周围静脉血液中存在的肝癌细胞，并探讨其敏感性。１．材料和方法：（１）细胞系选择：选择能分泌ＡＦＰ的人肝癌细胞株ＳＭＭＣＬＩＮＭ（由本校病理解剖教研室提供），进行体外传代培养，显...     

PCNA、T和Th淋巴细胞在肾透明细胞癌的表达与预后的关系

应用免疫组化方法检测增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）、Ｔ淋巴细胞（Ｔ）和辅助Ｔ淋巴细胞（Ｔｈ）在５２例肾透明细胞癌中的阳性表达，分析其与预后的关系。结果：ＰＣＮＡ指数（ＰＣＮＡＬＩ）与肿瘤核分级存在相关性，与分期无关；ＰＣＮＡＬＩ≥２０％组的生存率明显低于＜２０％组（Ｐ＜０．０５）。Ｔ淋巴细胞标记指数（ＴＬＩ）≥１０％组生存率明显高于＜１０％组（Ｐ＜０．０５）；辅助Ｔ淋巴细胞标记指数（ＴｈＬＩ）≥１０％及ＴｈＬＩ＜１０％两组间生存率无显著性差异（Ｐ＞０．０５），ＴＬＩ、ＴｈＬＩ与肿瘤分期、核分级无相关性。结论：ＰＣＮＡＬＩ、ＴＬＩ可以作为肾透明细胞癌的预后指标，ＴｈＬＩ与预后无相关性