缺氧/复氧对卵巢癌SKOV3细胞增殖能力的影响

目的:探讨缺氧/复氧后卵巢浆液性囊腺癌细胞株SKOV3增殖能力的改变及其相关机制。方法:SKOV3细胞分别缺氧24h及缺氧后复氧培养不同时间。用MTT法检测细胞的增殖,流式细胞仪检测细胞周期;Western blot和RT-PCR检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达。用HIF-1α抑制剂雷帕霉素(Rapamycin)预处理细胞30min后,检测上述各指标的变化。结果:复氧24h细胞增殖率增加(1.38±0.60,P=0.023);复氧48h细胞增殖率恢复为常氧培养水平(0.67±0.28,P=0.48)。流式细胞仪分析显示复氧24h时S期细胞增加[(48.45±1.15)%,P=0.013],G1期细胞减少[(45.71±2.28)%,P=0.044]。常规培养的SKOV3稳定表达HIF-1α,缺氧可使HIF-1α蛋白表达增加(P=0.0045),复氧8h,HIF-1α表达迅速下降。Rapamycin可以使细胞周期停滞于G0~G1期,从而降低细胞的增殖能力。结论:缺氧/复氧可增强卵巢癌细胞株SKOV3的增殖能力,HIF-1α通路可能在其中起重要作用。     

缺氧对BeWo细胞系中缺氧诱导因子2及其靶基因VEGF表达的影响

目的:探讨缺氧对体外培养的BeWo细胞中血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,以及应用反义寡核甘酸封闭缺氧诱导因子2α(HIF- 2α)后,VEGF表达的变化。方法:将BeWo细胞分4组进行体外培养:常氧组、缺氧组、HIF -2α正义组和HIF- 2α反义组。检测HIF- 2α蛋白、HIF -2αmRNA和VEGFmRNA表达。结果:与常氧组相比,缺氧组的HIF- 2α蛋白、mRNA、VEGF的mRNA水平均升高;与缺氧组相比,反义组的HIF -2α蛋白、HIF-2αmRNA、VEGFmRNA表达均降低。结论:缺氧可诱导BeWo细胞中VEGF的表达,这种作用可能是通过HIF- 2介导的     

缺氧对体外培养的早孕期细胞滋养细胞中缺氧适应相关部分基因表达及细胞浸润能力的调控

目的:探讨缺氧对细胞滋养细胞表达缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及氧感受器缺氧诱导因子脯氨酸羟化酶1、2(HPH/PHD1、2)和抑制缺氧诱导因子-1(FIH-1)的调控,以及缺氧对体外培养的细胞滋养细胞浸润能力的调节。方法:用RT-PCR和Western blot法检测在常氧、缺氧再复氧及持续缺氧等条件下,细胞滋养细胞中HIF-1α、HPH/PHD1、2和FIH-1 mRNA和蛋白表达的变化;并用体外侵袭实验检测缺氧再复氧、持续低氧对细胞滋养细胞浸润能力的影响。结果:(1)持续缺氧条件下培养的细胞滋养细胞HIF-1α和HPH/PHD2 mRNA和蛋白表达显著高于常氧组(P<0.01);HPH/PHD1和FIH-1 mRNA和蛋白表达显著低于常氧组(P<0.01)。缺氧再复氧后培养的细胞滋养细胞HIF-1α和HPH/PHD2 mRNA和蛋白表达显著高于常氧组(P<0.05),但显著低于持续缺氧组(P<0.05);HPH/PHD1和FIH-1 mRNA和蛋白表达均显著低于常氧组(P<0.05),但显著高于持续缺氧组(P<0.05)。(2)持续缺氧显著抑制细胞滋养细胞的浸润能力,与常氧组比较明显降低(P<0.01);缺氧后再复氧细胞滋养细胞的浸润能力居中,与常氧组比较明显降低(P<0.05);与持续缺氧组比较明显升高(P<0.05)。结论:滋养细胞可感受氧分压变化,HIF-1α、HPH/PHD1、HPH/PHD2和FIH-1相互作用与滋养细胞浸润能力调节有关。     

二氯化钴化学缺氧对细胞滋养层细胞凋亡及侵润的影响

目的:研究二氯化钴(CoCl2)诱发化学缺氧对培养的细胞滋养层细胞凋亡及侵润的影响。方法:采用MTT和流式细胞术检测细胞滋养层细胞的增殖和凋亡,并运用Transwell体外侵润实验检测化学缺氧对细胞滋养层细胞侵润能力的影响。结果:CoCl2可抑制细胞滋养层细胞增殖,并促进其凋亡,以缺氧24h最为明显(P<0.05)。CoCl2诱导细胞滋养层细胞缺氧24h,对其侵润及运动有显著抑制作用(P<0.05)。结论:CoCl2诱导缺氧抑制细胞滋养层细胞增殖并促进其凋亡,同时也抑制了细胞滋养层细胞的侵润。     

喜树碱药物NSC606985抗卵巢癌细胞活性及其机制的研究

目的:体外观察喜树碱药物NSC606985对人卵巢癌细胞的生长抑制效应、凋亡诱导效应以及抗癌机制。方法:采用MTT法检测不同浓度(6.25,12.5,25,50,100nmol/L)NSC606985作用特定时间(24,48,72h)后对人卵巢癌COC1细胞的生长抑制效应,用AnnexinV-FITC/PI双染法FCM检测NSC606985对COC1细胞的凋亡诱导效应,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测缺氧(2%O2)对HIF-1α,AMFR及RhoC mRNA表达水平的影响。用免疫印迹技术(Western blot)检测物理性缺氧及氯化钴(CoCl2)化学模拟缺氧下HIF-1α蛋白的表达水平以及NSC606985对HIF-1α的调控效应。结果:纳摩尔浓度的NSC606985可以显著抑制人卵巢癌COC1细胞生长,呈现剂量及时间依赖效应。不同浓度(50,100,200nmol/L)NSC606985作用24h凋亡细胞比率分别是68.44%,80.86%,91.98%,具有剂量依赖性。在人卵巢癌细胞系COC1和SKOV3中,缺氧(2%O2)14h对HIF-1α、AMFR及RhoC mRNA的表达无影响,却可以上调HO-8910PM细胞HIF-1αmRNA水平。物理性缺氧(2%O2 14h)及CoCl2化学模拟缺氧(50μmol/L或150μmol/L 24h)诱导COC1,HO-8910PM及SKOV3等卵巢癌细胞株HIF-1α蛋白高水平表达,NSC606985(20～400nmol/L 14h或24h)可呈剂量依赖性显著下调缺氧诱导的HIF-1α蛋白。结论:NSC606985抑制卵巢癌细胞增殖具有剂量和时间依赖性,可能与诱导细胞凋亡相关。缺氧下HIF-1α在卵巢癌细胞的恶性生物学行为中发挥重要作用,NSC606985可通过下调缺氧诱导的HIF-1α蛋白发挥独特的抗癌机制。     

化学合成小分子干扰RNA抑制缺氧大鼠视网膜血管内皮细胞缺氧诱导因子-1α基因的表达

目的 探讨缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF- 1α)在早产儿视网膜病发病中的作用,为其基因治疗寻找新的靶点.方法 将化学合成的小分子干扰RNA( smallinterference RNA,siRNA)用脂质体介导法转染大鼠视网膜血管内皮细胞,转染的细胞在含化学缺氧剂——二氯化钴的培养基中培养.培养8h后,应用荧光定量逆转录-聚合酶链反应和Western印迹技术检测转染后细胞HIF-1α mRNA和蛋白的表达量.培养24 h后应用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐比色法检测细胞的增殖活性.采用两独立样本t检验比较各转染组与阴性对照组之间的差异.结果 成功将siRNA转染至大鼠视网膜血管内皮细胞,荧光定量逆转录-聚合酶链反应技术检测显示,针对靶基因HIF-1α设计的4条平行干扰序列siRNA均能不同程度抑制HIF-1α的转录表达,siRNA1、siRNA2和siRNA4组HIF-1α mRNA的相对表达水平分别为0.1620±0.0147、0.2034±0.0251和0.3049±0.0165,分别降至空白对照组(1.0000±0.0344)的16.20％、20.34％和30.49％,与阴性对照组(0.8334±0.0242)之间差异有统计学意义(t分别为16.786、8.953和4.087,P均＜0.05).Western印迹技术显示,siRNA1和siRNA2转染的大鼠视网膜血管内皮细胞HIF-1α蛋白表达水平分别为0.4956±0.0421和0.6544±1.0032,明显低于空白对照组(3.5105±0.4084)和阴性对照组(3.4019±1.0677),差异均有统计学意义(t分别为6.861、2.893、4.567和5.072,P均＜0.05).siRNA1和siRNA2组细胞增殖抑制率分别为(49.5±2.9)％和(67.4±1.2)％,明显高于阴性对照组[(15.7±1.5)％],差异有统计学意义(t分别为2.786和6.904,P＜0.05).结论 化学合成的HIF-1α siRNA能有效抑制大鼠视网膜血管内皮细胞在缺氧条件下HIF-1α mRNA及蛋白的表达,从而降低细胞增殖活性.     

脂氧素A4对缺氧损伤的人脐静脉内皮细胞的保护作用

目的 探讨脂氧素A4(LXA4)对缺氧损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的保护作用及其机制.方法 体外培养HUVEC,培养后的细胞分别以单纯M199培养基培养(对照组)、氯化钴(CoCl2)诱导细胞缺氧(缺氧组)、不同浓度LXA4(1、10、100 nmol/L)加入缺氧组细胞培养液中(药物干预组);倒置相差显微镜下观察各组HUVEC的形态学变化;四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度LXA4培养24 h和100 nmol/L的LXA4作用不同时间(4、8、12、24 h)后缺氧HUVEC存活率;免疫细胞化学法检测细胞胞质内第Ⅷ因子相关抗原抗体(vWF)水平变化(以灰度值表示),细胞质内出现棕黄色颗粒为阳性;激光共聚焦显微镜观察细胞质内游离Ca2+荧光强度变化.结果 (1)细胞形态:缺氧组HUVEC明显失去原有正常细胞形态,细胞变圆,核固缩;药物干预组正常细胞数量增多,加入100 nmol/L浓度的LXA4后,大部分细胞形态与正常细胞形态基本相似.(2)细胞存活率:缺氧组细胞存活率为(40.1±3.9)%,药物干预组细胞培养液中加入1、10、100 nmol/L浓度的LXA4后,细胞存活率分别为(52.9±1.4)%、(64.1±3.3)%、(76.6±1.6)%,分别与缺氧组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).药物干预组细胞培养液中LXA4浓度为100 nmol/L时,作用4、8、12、24 h,细胞存活率分别为(68.2±2.3)%、(82.5±1.4)%、(82.9±1.4)%和(72.2±8.5)%,且在12 h时达峰值;药物干预组各时间点细胞存活率分别与缺氧组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).(3)vWF水平:随着药物干预组细胞培养液中LXA4浓度的增加,其胞质内vWF水平逐步降低,LXA4浓度为1、10、100 nmol/L时.vWF水平分别为203.9±0.7、204.6±0.9、191.8±0.5,分别与缺氧组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).(4)Ca2+荧光强度:激光共聚焦显微镜观察结果显示,LXA4可提高缺氧HUVEC胞质内Ca2+荧光强度.结论 LXA4对缺氧HUVEC维持正常的细胞形态起重要作用,并可提高其细胞存活率及降低细胞质内vWF水平,其保护机制可能是通过降低细胞内钙超载和转移细胞核内Ca2+,使细胞质内Ca2+增加.     

缺氧微环境下HIF-1α对卵巢癌A2780细胞侵袭转移的影响及分子机制

目的:探讨缺氧微环境下HIF-1α在卵巢癌细胞系A2780侵袭转移中的作用。方法:常氧及缺氧微环境培养卵巢癌A2780细胞;RT-PCR及Western blot法检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和基质金属蛋白酶13(MMP13)mRNA及蛋白的表达;siRNA干扰HIF-1α表达,检测干扰效率及MMP13表达的变化;Transwell小室侵袭实验检测siRNA干扰前后卵巢癌细胞侵袭转移能力。结果:缺氧诱导卵巢癌A2780细胞HIF-1α及MMP13表达上调,细胞侵袭数明显增多;siRNA能有效抑制HIF-1α表达及缺氧引起的MMP13增多,降低细胞侵袭能力。结论:HIF-1α通过调控MMP13表达增强缺氧环境下卵巢癌细胞的侵袭能力。     

低氧诱导因子1α对子宫颈癌细胞生物学行为的影响

目的探讨低氧诱导因子1α（HIF-1α）对宫颈癌细胞的生物学行为的影响以及其中可能存在的分子机制。方法通过CoCl2化学诱导宫颈癌HeLa细胞缺氧;构建靶向HIF-1α的反义真核表达载体、经脂质体介导转染HeLa细胞的方法沉默HIF-1α的表达。将实验细胞分为常氧未转染对照（NN）组、常氧空质粒转染对照（NI）组、常氧转染pcDNA3．0／HIF-1α质粒（NT）组、缺氧未转染对照（HN）组、缺氧空质粒转染对照（HI）组、缺氧转染pcDNA3．0／HIF-1α质粒（HT）组。用四甲基偶氮唑蓝法、Transwell侵袭小室方法观察各组细胞的增殖、侵袭能力的改变,用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率,用RT-PCR技术检测各组细胞目的基因HIF-1α及其靶基因血管内皮生长因子（VEGF）、葡萄糖转运体1（GLUT1）、多药耐药基因1（MDR1）的表达变化。结果NT组细胞在培养12、24、48、72h时的活细胞数分别为0．053±O．003、0．074±0．004、0．148±0．015、0．192±0．038,而HT组分别为0．069±0．003、0．155±0．022、0．224±0．022、0．308±0．069;NT和HT组的细胞增殖受到抑制,NT组与NN及NI组、HT组与HN及HI组间的活细胞数分别比较,差异均有统计学意义（P〈0．01）。各组细胞的凋亡率分别是,NN组（29．27±0．18）％、NI组（31．13±0．08）％、NT组（51．11±0．14）％、HN组（11．46±0．28）％、HI组（15．77±0．49）％、HT组（40．05±0．97）％;HT组与HN及HI组、NT组与NN及NI组间分别比较,差异均有统计学意义（P〈0．01）。各组细胞的侵袭能力由高到低依次为HI、HN、NI、NN、HT、NT组,分别为（40±9）％、（37±12）％、（28±5）％、（26±7）％、（19±7）％、（10±5）％;NT组与NN及NI组、HT组与HN及HI组间分别比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）。NT组细胞HIF-1α、VEGF、GLUT1、MDR1 mRNA的相对表达量分别为0．05±0．12、0．09±0．11、0．08±0．15、0．05±0．15,而HT组分别为0．04±0．16、0．16±0．16、0．12±0．20、0．20±0．21;NT组与NN及NI组、HT组与HN及HI组间分别比较,HIF-1α、VEGF、GLUT1、MDR1 mRNA的相对表达量均有降低,差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论HIF-1α可能主要通过其下游的靶基因对宫颈癌细胞的恶性生物学行为产生影响,包括抗凋亡、促增殖、增加血液供应和能量供应、耐药等,且体外抑制HIF-1α的表达对宫颈癌细胞有抑制作用。     

RNA干扰抑制高氧暴露下A549细胞中硫氧还蛋白-2表达的研究

目的 研究小分子干扰RNA(small interference RNA,SiRNA)抑制高氧暴露下人肺腺癌A549细胞硫氧还蛋白-2(thioredoxin-2,Trx-2)的表达及其与细胞凋亡的关系,探讨Trx-2对高氧肺损伤线粒体的保护作用. 方法 体外传代培养A549细胞系,将Trx-2序列特异性的SiRNA通过Lipo-fectamine 2000转染A549细胞,随机分为干扰后空气组、无干扰高氧组和干扰后高氧组.三组分别于高氧或空气暴露12、24、48 h后采用RT-PCR技术测定Trx-2和细胞色素c(cytochrome c,Cytc)mRNA的表达;采用流式细胞术检测三组A549细胞凋亡情况. 结果 (1)RT-PCR检测显示序列特异性SiRNA可显著降低Trx-2 mRNA的表达.(2)干扰后高氧组24 h Trx-2 mRNA水平为0.2774±0.0174,48 h为0.2587±0.0069,均低于无干扰高氧组(分别为0.7799±0.1249,0.4050±0.0842)(P均＜0.05).无干扰高氧组24 h Trx-2 mRNA水平高于干扰后空气组(0.4046±0.0161)(P＜0.05).(3)无干扰高氧组24 h Cytc mRNA水平为0.3957±0.0903,48 h为0.3438±0.0092,均低于干扰后高氧组(分别为0.6620±0.0395,0.4806±0.0977)和干扰后空气组(分别为0.5197±0.0377,0.4902±0.1079)(P均＜0.05).(4)干扰后高氧组A549细胞凋亡率明显高于干扰后空气组. 结论 SiRNA能显著下调A549细胞Trx-2 mRNA的表达;高氧暴露诱导SiRNA干扰后A549细胞Trx-2和Cytc mRNA表达的变化表明Trx-2对高氧肺损伤线粒体可能起重要的保护作用.     

低分子肝素对低氧诱导的早孕细胞滋养细胞凋亡的影响

目的:研究低分子肝素对低氧诱导的早孕细胞滋养细胞凋亡的影响。方法:选取正常早孕(8～10周)绒毛,使用Percoll梯度离心法提取细胞滋养细胞在1%和20%氧分压下分别进行原代培养。两种氧条件下均设对照组与研究组。研究组培养液中加入不同浓度低分子肝素(终浓度为0.1U/ml、1U/ml、10U/ml),未加低分子肝素组作为对照组,将培养孔板分别置入1%和20%氧分压培养箱中培养120h。使用TUNEL法检测细胞凋亡,RT-PCR法检测凋亡基因表达。结果:(1)与20%氧分压条件下对照组相比,在1%氧分压下对照组的细胞滋养细胞的生长明显增加,差异有统计学意义(P0.05);(2)与对照组比较,1%和20%氧分压下研究组,细胞滋养细胞的生长均明显增加,差异有统计学意义(P0.05);(3)与20%氧分压条件对照组相比,在1%氧分压下,对照组的细胞滋养细胞的凋亡明显增加,有显著差异(P0.01);(4)在1%氧分压下,与对照组相比,研究组细胞滋养细胞的凋亡明显减少,差异有统计学意义(P0.05)。结论:低氧能促进早孕细胞滋养细胞生长,并诱导细胞滋养细胞凋亡;低分子肝素抑制低氧诱导的早孕细胞滋养细胞凋亡并促进其生长。     

低氧环境对人上皮性卵巢癌细胞株上皮间质转化及侵袭能力的影响及机制探讨

目的:探讨低氧环境对人卵巢癌细胞上皮间质转化(EMT)和侵袭能力的影响及可能机制。方法:培养人卵巢癌细胞株SKOV-3、3AO,将每株细胞分为对照组、Co Cl2(模拟低氧环境)组、VPL(钙离子拮抗剂)组和VPL+Co Cl2组。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测Co Cl2对SKOV-3、3AO细胞生长情况的影响;倒置相差显微镜下观察低氧后细胞形态的改变;采用Western blot法检测SKOV-3、3AO细胞中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、转录因子Twist、上皮型钙黏蛋白(E-cad)及神经型钙黏蛋白(N-cad)表达的变化;体外侵袭实验穿膜小室(Transwell小室)检测细胞的侵袭能力。结果:Co Cl2作用后,两种细胞的存活率均较对照组明显降低(P0.05)。低氧环境下,部分细胞伸出伪足,呈多角形,细胞排列松散、紊乱。Co Cl2能体外模拟细胞低氧环境,诱导HIF-1α蛋白高表达。SKOV-3、3AO细胞中,Co C12组中HIF-1α、Twist、N-cad蛋白表达明显高于对照组、Co C12+VPL组(P0.01,P0.05);E-cad蛋白表达明显低于对照组、Co C12+VPL组(P0.01,P0.05);VPL组与对照组相比,各蛋白表达的变化无明显差异(P0.05)。Co C12组两种细胞的穿膜数均显著多于对照组、Co C12+VPL组(P0.01,P0.05)。结论:钙信号途径参与了低氧环境下HIF-1α调节卵巢癌SKOV-3、3AO细胞中Twist的表达,从而诱导这两种细胞EMT的发生并增强其侵袭能力。     

子痫前期孕产妇胎盘组织中过氧化氢对人类白细胞相关抗原G表达的影响

目的 探讨子痫前期孕产妇胎盘组织中氧化应激产物过氧化氢(H2O2)对胎盘滋养细胞中的人类白细胞相关抗原G(HLA-G)表达的影响.方法 选择2008年10月-2009年10月南京医科大学第一附属医院住院的产妇40例,其中子痫前期组20例,健康妊娠组20例.采用比色法检测两组产妇胎盘组织中H2O2水平;采用蛋白印迹法检测两组产妇胎盘组织中HLA-G蛋白的表达水平;并对胎盘组织中H2O2水平与HLA-G蛋白表达水平进行相关性分析.人绒毛膜癌细胞株JEG-3细胞培养24 h后贴壁完全,分为两组,干预组加入浓度为175 μmol/L的H2O2,对照组不加H2O2,两组细胞培养24及48 h后,采用蛋白印迹法和细胞免疫荧光法检测JEG-3细胞中HLA-G蛋白表达水平和强度的变化.结果 (1)子痫前期组产妇胎盘组织中H2O2水平为(105±13)nmol·mg-1·prot-1,健康妊娠组产妇胎盘组织中H2O2水平为(62±18)nmol·mg-1·prot-1,子痫前期组较健康妊娠组明显升高,且差异有统计学意义(P<0.05).(2)子痫前期组产妇胎盘组织中HLA-G蛋白表达水平为0.20±0.08,健康妊娠组为1.67±0.65,子痫前期组比健康妊娠组下降了88%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05).(3)两组产妇胎盘组织中H2O2水平与HLA-G蛋白表达水平呈显著负相关(r=-0.895,P=0.000).(4)H2O2干预JEG-3细胞24 h后,JEG-3细胞中HLA-G蛋白表达水平为1.95±0.25,干预48 h后为0.65±0.08;与未干预细胞中的3.21±0.33比较,分别下降了39%和80%,干预24、48 h分别与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);干预48 h与干预24 h比较,HLA-G蛋白表达水平下降了67%,两者比较,差异有统计学意义(P<0.05).H2O2干预JEG-3细胞48 h后荧光显微镜下显示,干预组细胞中HLA-G表达强度明显弱于对照组.结论 子痫前期产妇胎盘滋养细胞中的高水平H2O2能下调胎盘滋养细胞中HLA-G蛋白的表达,从而参与子痫前期的发病.     

缺氧诱导卵巢上皮性癌细胞形成拟态血管的前期研究

目的探讨缺氧在卵巢上皮性癌细胞系SKOV3和ES2细胞拟态血管形成过程中的作用及西罗莫司对其的抑制效应。方法建立人工基底膜基质凝胶Matrigel三维培养系统,分别在常氧(常氧组)、缺氧(缺氧组)、缺氧时加入西罗莫司(缺氧+西罗莫司组)等条件下诱导,观察SKOV3和ES2细胞形成拟态血管的能力;应用相差显微镜和扫描电镜观察拟态血管的形态及其立体结构的特点;用RT-PCR技术检测不同条件下缺氧诱导因子(HIF)1αmRNA的相对表达量。结果培养7d后,缺氧组SKOV3和ES2细胞出现变形、伸展,形成腔样、管状、分支和网络状等管道结构;而常氧组及缺氧+西罗莫司组,部分细胞出现伸展但不形成管道结构。缺氧组SKOV3和ES2细胞的HIF-1αmRNA表达量分别为0·801±0·034和0·736±0·059,显著高于缺氧+西罗莫司组(分别为0·025±0·007和0·231±0·035;P<0·01,P<0·05)和常氧组(分别为0·010±0·004和0·011±0·002;P均<0·01)。结论缺氧是卵巢上皮性癌细胞形成拟态血管的重要诱导因素,西罗莫司通过抑制HIF-1αmRNA的表达阻断拟态血管的形成。     

Effect of hypoxia on placental activin A,inhibin A and follistatin synthesis

Placental activin A and inhibin A output is increased in pre-eclampsia, a condition characterized by placental hypoxaemia, whereas follistatin secretion is unaltered. We investigated whether hypoxia was the basis for elevated placental activin A and inhibin A output. First trimester and term placental explants were grown in 5-6% dissolved O(2) (n=10/trimester) and 200 microM cobalt chloride (CoCl(2),n =6/trimester) to simulate environmental and cellular hypoxia respectively, for up to 72 h. Activin A, inhibin A and follistatin production were compared with control cultures grown in standard media at 20% O(2). In first trimester and term placenta, activin A output declined significantly under 5-6% O(2) (P=0.006 and 0.001 after 48 h respectively). Inhibin A declined significantly under 5-6% O(2), mainly in first trimester placenta (P=0.03, 24h). CoCl(2) significantly elevated activin A production in term placenta (P=0.003, 48 h), whereas inhibin A output was unaffected. Neither low O(2) or CoCl(2) altered follistatin output from first trimester or term placenta. These findings suggest that there may be novel O(2) sensing mechanism/s that down regulate activin A and inhibin A in the placenta and that low O(2) is not the mechanism behind increased placental inhibin A or activin A output in pre-eclampsia.