WWOX和CD133在结直肠癌中的表达及临床意义

目的检测结直肠癌（CRC）组织中WWOX和CD133蛋白的表达情况及其相互之间的关系,并探讨它们与CRC患者临床
病理参数之间的关系。方法采用免疫组织化学ElivisionTM plus 法检测174 例CRC 组织和80 例正常结直肠黏膜组织中
WWOX和CD133蛋白的表达情况。结果在CRC组织中WWOX和CD133蛋白表达的阳性率分别为41.4%和53.4%;对照组
中WWOX和CD133 蛋白表达的阳性率分别为87.5%和5.0%,其表达差异在两组之间有统计学意义（P<0.05）。WWOX和
CD133蛋白表达与CRC患者肿瘤组织的不同分化程度、浸润深度、淋巴结是否转移以及不同Duke分期等之间差异均有统计学
意义（P<0.05）,且WWOX蛋白表达的阳性率与CD133蛋白的阳性率之间呈负相关关系（P<0.05）。Kaplan-Meier法生存分析结
果显示在CRC组织中WWOX蛋白阳性表达组患者术后总的存活时间明显高于其阴性组患者,而CD133蛋白阳性组患者术后
总的存活时间明显低于其阴性组患者,log-rank单因素分析差异有统计学意义。Cox多因素分析显示WWOX和CD133蛋白的
阳性表达及Duke分期是影响CRC患者术后生存的独立预后因子。结论反常表达的WWOX和CD133参与了CRC的发生、发
展、侵袭以及转移;在CRC患者中联合检测WWOX和CD133蛋白的表达对预测其进展和预后均有重要意义。
     

CD133和CD44在胃腺癌中的表达及其与E-cadherin的关系

目的探讨原发性胃腺癌（gastric adenocarcinoma, GAC）组织中CD133、CD44和E-cadherin蛋白表达的关系及临床病理
意义。方法应用免疫组织化学ElivisionTM plus法检测145例胃腺癌组织和30例正常胃黏膜组织中CD133、CD44和E-cadherin
蛋白的表达。结果在正常胃黏膜组织中,CD133、CD44和E-cadherin蛋白的阳性表达率分别为10.0%、3.3%和100%;在GAC
组中,CD133、CD44 和E-cadherin 蛋白的阳性表达率分别为46.9%、47.6%和42.8%,两组之间,差异均有显著性（P<0.05）。
CD133、CD44和E-cadherin蛋白的表达水平均与肿瘤的大小、分化程度、淋巴结转移与否、浸润深度、临床分期及术后生存期有
关（全部P<0.05）;CD133的表达与CD44的表达呈正相关（P<0.05）,CD133和CD44的表达均与E-cadherin的表达呈负相关（P<
0.005）。Kaplan-Meier 生存分析表明,CD133 和CD44 蛋白表达阳性的患者其生存率明显低于其阴性表达患者（P<0.001）;
E-cadherin蛋白表达阳性的患者其生存率明显高于其阴性表达患者。Cox回归分析：CD133、CD44和E-cadherin的表达是影响
GAC患者术后生存率的独立预后因素。结论CD133、CD44和E-cadherin的表达水平在GAC组织中与肿瘤组织的大小、分化
程度、临床分期、浸润深度、淋巴结转移与否及预后等均有关;在GAC组织中联合检测CD133、CD44和E-cadherin对判断预后
有价值。
     

上皮性卵巢癌中CD133与EMT相关因子表达的关系

目的探讨上皮性卵巢癌（Epithelial ovarian cancer, EOC）中CD133 蛋白及上皮-间质转化（Epithelial mesenchymal
transition, EMT）相关因子Snail、E-cadherin 蛋白表达的关系及其功能意义。方法采用免疫组织化学ElivisionTM plus 法检测
150 例EOC和50 例良性上皮性卵巢肿瘤中CD133、Snail 和E-cadherin 蛋白的表达情况。结果良性上皮性卵巢肿瘤组织中
CD133、Snail和E-cadherin蛋白的表达阳性率分别为10%、8.0%和70%,在EOC组织中3者表达分别为58.7%、60.7%和32.7%,
差异有统计学意义（P<0.05）。CD133、Snail 和E-cadherin 的表达与EOC的腹腔脏器和淋巴结转移以及FIGO 分期有关（P<
0.01）;E-cadherin蛋白的表达与Snail及CD133 蛋白的表达均呈负相关关系（r分别为-0.545和-0.570,P均<0.01）,CD133蛋白的
表达与Snail蛋白的表达呈正相关关系（r=0.599,P<0.01）。Kaplan-Meier生存分析表明,CD133和Snail的过表达均与患者的生
存率有关,阳性表达的患者生存率明显低于阴性者（P<0.05）;而随着E-cadherin蛋白表达水平的降低EOC患者生存率明显下
降（P<0.05）。多因素分析表明FIGO分期、CD133、Snail 和E-cadherin 的表达是影响EOC根治术后患者预后的独立因素（P<
0.05）。结论CD133和Snail表达的升高以及E-cadherin表达的降低与EOC的侵袭、转移和预后等因素相关,这些指标的联合
检测有可能作为评估EOC患者临床预后的重要指标。
     

雷公藤甲素对佐剂关节炎肺功能降低大鼠Notch通路受体和配体基因表达的影响

目的观察雷公藤甲素（TPT）对佐剂关节炎（AA)大鼠Notch受体、配体表达的影响。方法将40只大鼠随机分为正常对照（NC）
组、模型（MC）组、甲氨喋呤（MTX）组、TPT组,每组10只,分别向除NC组外的其余动物右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂0.1 mL
致炎,复制AA大鼠模型,致炎后第12填开始给药。NC组及MC组均给予生理盐水,其余组分别给予MTX、TPT。给药30 d后,检
测各组足趾肿胀度（E）、关节炎指数（AI）、肺功能、Notch受体/配体的变化。结果MC组大鼠E、AI、Notch3、Notch4、Delta1表达明
显升高;肺功能参数、Notch1、Jagged1、Jagged2表达降低（P<0.01）;与MC组比较,TPT组肺功能参数、Notch1、Jagged1、Jagged2的
表达升高,E、AI及Notch3、Notch4、Delta1表达降低,疗效优于对照组MTX（P<0.05,P<0.01）。结论TPT可能是通过上调Delta1、
Notch3、Notch4的表达、下调Jagged1、Jagged2、Notch1表达,降低炎症反应和免疫复合物沉积,改善AA关节和肺部症状。
     

CD133 在骨髓增生异常综合征患者中的表达及临床意义

摘要：目的探讨骨髓增生异常综合征（MDS）患者骨髓中CD133的表达及其临床意义。方法应用流式细胞仪采用直接
免疫荧光标记法,分别测定31例难治性贫血伴幼稚细胞增多（RAEB）、10例难治性血细胞减少伴多系发育异常（RCMD）
以及11例再生障碍性贫血患者骨髓中CD133+细胞和CD34+/CD38-细胞比例,对比分析CD133及CD34/CD38在不同亚型
MDS中的表达及临床意义。结果在RAEB型MDS患者骨髓有核细胞中,CD133阳性细胞平均占6.75%,RCMD患者平
均占1.41%,而再生障碍性贫血对照组占2.70%,RAEB组显著高于其他两组（P<0.05）;再障对照组与RCMD组之间无显
著性差异（P>0.05）;CD34+/CD38-细胞比例在3组中均小于1%,统计学上无显著性差异（P>0.05）。结论CD133在MDS
的进展类型RAEB患者骨髓细胞中高表达,CD133有助于RAEB分型诊断;而CD34+/CD38-标记在MDS分型诊断中并无
价值。     

无血清培养CD133+Colo205大肠癌细胞可高表达ALDH1

目的通过观察含生长因子的无血清培养基（serum-free medium, SFM）培养的Colo205细胞,研究其对CD133与ALDH1
表达的影响。方法用含生长因子的无血清培养基对Colo205 细胞进行培养,以含血清培养基（serum-supplimented medium,
SSM）组作为对照,流式细胞术检测两组细胞表面标志物CD133表达的阳性率;流式分选SFM组CD133+细胞和CD133-细胞,倒
置显微镜观察CD133+细胞和CD133-细胞在无血清培养基中的生长特性;利用细胞免疫荧光检测CD133+细胞和CD133-细胞
CD133和ALDH1的表达;分别将CD133+细胞和CD133-细胞在NOD/SCID小鼠皮下进行成瘤实验,采用免疫组织化学方法对
肿瘤组织检测ALDH1表达。结果SFM组CD133+细胞比例明显高于SSM组（P<0.05）;CD133+细胞在SFM中可以形成肿瘤干
细胞球,而CD133-则不能形成;CD133+细胞高表达CD133和ALDH1,且两者共表达,而CD133-细胞则是阴性表达;CD133+细胞
和CD133-细胞成瘤后,CD133+细胞组肿瘤组织ALDH1阳性表达,而CD133-细胞组阴性表达。结论含生长因子的无血清培养
基培养CD133+Colo205大肠癌细胞能够形成肿瘤干细胞球及高表达ALDH1,ALDH1可能是大肠癌干细胞候选的标志物之一。
     

宫颈癌中Snail、Slug和KAI1的表达及临床意义

目的检测宫颈癌中上皮间充质转化（EMT）相关标记物Snail、Slug和转移抑制因子KAI1的表达,并分析它们的相互关系
及其临床病理意义。方法利用免疫组化ElivisionTM plus法检测154例宫颈鳞状细胞癌（CSCC）、50例宫颈上皮内瘤变（CIN）
和40例正常宫颈上皮组织中Snail、Slug和KAI1蛋白的表达。结果Snail、Slug和KAI1在CSCC组、CIN组和对照组的阳性表
达率分别为66.2%、66.9%、43.5%;32.0%、34.0%、64.0%和0%、2.5%、95.0%,两组相互之间差异有统计学意义（P<0.05）。Snail、
Slug 和KAI1 蛋白的表达均与CSCC肿瘤组织的分化程度、淋巴结转移与否、浸润深度、FIGO分期及术后生存期均有关（P<
0.05）;Snail蛋白的表达与Slug蛋白的表达呈正相关关系（r=0.752,P<0.001）,Snail和Slug蛋白的表达均与KAI1蛋白的表达呈
负相关关系（P<0.001）。Kaplan-Meier生存分析表明,Snail和Slug蛋白表达阳性的患者其生存率明显低于其阴性表达的患者
（P<0.001）;KAI1蛋白表达阳性的患者其生存率明显高于其阴性表达的患者（P<0.001）。Cox回归分析显示Snail和KAI1蛋白
的阳性表达及FIGO分期是影响CSCC患者术后生存的独立预后因素。结论Snail、Slug和KAI1蛋白的表达水平在CSCC组织
中与肿瘤组织的分化程度、FIGO、浸润深度、淋巴结转移与否及预后等均有关;在CSCC组织中早期联合检测Snail、Slug 和
KAI1对判断预后有价值。
     

RNA干扰抑制CD133 表达对CD133+肝癌干细胞增殖和化疗敏感性的影响

目的利用慢病毒介导的RNA干扰技术下调CD133+
HepG2肝癌干细胞中CD133的表达,探讨其对肝癌干细胞增殖及化疗敏感性的影响。方法利用流式分选技术筛选CD133+
HepG2细胞并检测分选前后CD133表达量,体外成球及体内成瘤实验
鉴定其“干性”;随后以CD133mRNA编码序列为干扰靶点,采用慢病毒介导的shRNA转染CD133+细胞。应用RT-PCR和
Western Blot检测CD133mRNA及蛋白表达,克隆形成实验检测转染前后细胞增殖情况,CCK-8法和流式细胞仪检测在化疗药
物顺铂作用下转染前后细胞的生长抑制率及凋亡情况。结果分选前后CD133表达率分别为（3.36±1.80）%,（ 88.74±3.19）%;
CD133+细胞相对于CD133-细胞有更强的体外成球和体内成瘤能力;转染CD133shRNA后的细胞CD133mRNA表达明显受到
抑制（P<0.05）,蛋白表达水平降低,增殖能力显著下降（P<0.01）。顺铂对转染CD133shRNA后细胞生长抑制作用明显提高（P<
0.01）,且其在顺铂作用下的凋亡率也显著增加（P<0.05）。结论慢病毒介导的shRNA能显著下调CD133+肝癌干细胞CD133基
因的表达,抑制其增殖并提高其对顺铂的敏感性。
     

肿瘤干细胞标志物CD133、ABCG2、p75~（NTR）在非小细胞肺癌组织的表达及其生物学意义

目的探讨肿瘤干细胞标志物CD133、ABCG2及p75NTR在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及其生物学意义。方法采用免疫组织化学方法,检测44例NSCLC组织、17例癌旁组织、17例非肿瘤组织中的CD133、ABCG2及p75NTR蛋白的表达并对结果进行分析。结果 （1）CD133、ABCG2及p75NTR蛋白在44例NSCLC组织中的阳性表达率分别为68.2%（30/44）、31.8%（14/44）、47.7%（21/44）,在17例癌旁组织中分别为5.9%（1/17）、0（0/17）、11.8%（2/17）,在17例非肿瘤组织中分别为47.1%（8/17）、11.8%（2/17）、17.6%（3/17）,差异均有统计学意义（P〈0.05）;其中NSCLC组织中p75NTR蛋白的阳性表达与肿瘤的远处转移密切相关（P〈0.05）;（2）随肿瘤恶性度的增加,CD133蛋白的阳性表达率也明显增加,差异接近统计学意义（P=0.07）。结论 NSCLC组织中CD133、ABCG2及p75NTR的表达明显高于癌旁及非肿瘤组织,或许这三者与NSCLC恶性演进有关;肿瘤干细胞标记物CD133的表达与NSCLC的分化密切相关,CD133蛋白或许能成为NSCLC的肿瘤干细胞标记物。     

Notch1，Jagged1和VEGF蛋白在非小细胞肺癌的表达及其意义

目的:检测Notch1,Jagged1和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织的表达及其临床病理学意义.方法:应用免疫组织化学SP法检测65例NSCLC组织、15例正常支气管上皮组织中Notch1,Jagged1和VEGF蛋白的表达并分析它们与临床病理参数间的关系.结果:Notch1,Jagged1和VEGF蛋白在非小细胞肺癌中表达的阳性强度分别为81.5%(53/65),83.1%(54/65)和93.8%(61/65),均明显高于正常支气管上皮组织的阳性强度(P＜0.05);NSCLC中Notch1和VEGF蛋白表达与患者临床分期和淋巴结转移密切相关(P＜0.05);Jagged1蛋白表达与患者病理类型和淋巴结转移有关.Notch1,Jagged1和VEGF蛋白的表达三者两两间均呈显著正相关.结论:Notch1,Jagged1和VEGF蛋白可能在肺癌发生发展中起重要作用;其高表达有可能作为预测NSCLC侵袭、转移的重要指标.     

非小细胞肺癌中TRIM25和PKM2蛋白表达

目的检测临床非小细胞肺癌（Non-small cell lung cancer, NSCLC）病人组织中TRIM25、PKM2蛋白的表达情况,探讨它
们的关联性及意义。方法应用组织免疫荧光法,检测TRIM25、PKM2 蛋白在60 例NSCLC组织和20 例癌旁边正常肺组织
（>5 cm）表达情况,同时运用Western blotting方法检测TRIM25、PKM2在10例新鲜NSCLC组织中表达情况,并结合标本的临
床病理特征进行分析。结果TRIM25在60例非小细胞肺癌组织中的阳性表达率45%,而20例癌旁正常肺组织中仅为10%（P=
0.005）。TRIM25在腺癌中阳性表达率为28.6%,而在鳞癌中为59.4%（P=0.017）。TRIM25被发现与TNM分期、淋巴结转移之
间呈正相关性（P<0.05）。PKM2在60例非小细胞肺癌组织中表达率为73.3%,而在20例癌旁正常肺组织中为30%（P=0.001）。
PKM2 在腺癌的表达为57.1%,而在鳞癌中为87.5%（P=0.008）。通过关联性分析TRIM25 和PKM2 存在相关性（P=0.026）。
Western blot结果表明当TRIM25表达升高时PKM2表达增长放缓。结论TRIM25、PKM2蛋白可能同时参与到NSCLC发生发
展过程中,存在负相关性。
     

肿瘤干细胞标志物CD133和内皮素转化酶对非小细胞肺癌预后的影响

目的 研究肿瘤干细胞标志物CD133和内皮素转化酶(ECE)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中表达的临床意义.方法 用免疫组织化学方法检测77例NSCLC组织中CD133和ECE的表达,分析其与肿瘤大小、组织学类型、组织分化程度、淋巴结转移和预后的关系.结果 77例NSCLC组织中CD133与ECE的阳性表达率分别为51.9%(40/77)和45.5%(35/77).CD133和ECE的表达与淋巴结转移呈正相关(r=0.246,P＜0.05;r=0.339,P＜0.05);CD133和ECE的表达均与患者术后生存时间呈负相关(P＜0.05).CD133和ECE的表达与肿瘤大小、组织学类型和组织分化程度均无关(P＞0.05).CD133与ECE的表达之间呈正相关(r=0.249,P＜0.05).结论 肿瘤干细胞标志物CD133和ECE的表达与NSCLC的淋巴转移和预后密切相关,它们的高表达提示患者预后不良.     

RNA干扰抑制CD59对非小细胞肺癌GLC-P细胞株增殖的影响

目的运用RNAi技术抑制CD59基因的表达,观察其对非小细胞肺癌细胞株GLC-P增值、凋亡的影响。方法合成可抑
制CD59基因的片段,并运用RNA干扰技术,构建重组质粒,通过脂质体转染法将重组质粒转染至非小细胞肺癌细胞株GLC-P,
并筛选出稳定表达细胞后,采用PCR、MTT、ELISA 法检测该稳定表达细胞株的增值、凋亡所受到的影响。结果干扰后的
GLC-P细胞株中CD59 mRNA表达量较未干扰组显著降低（P<0.05）,同时MTT、ELISA实验检测显示肺癌GLC-P细胞增殖能
力降低,可诱导肺癌细胞的凋亡。结论肺癌患者肿瘤细胞中存在CD59高表达,抑制CD59基因表达的同时可抑制GLC-P细
胞的增殖能力并诱导细胞凋亡,为非小细胞肺癌的靶向治疗提供了新靶点、新思路。
     

上皮性卵巢癌中八聚体结合转录因子4、Notch1及DLL4的表达及其临床意义

目的 探讨上皮性卵巢癌(EOC)中八聚体结合转录因子4(OCT4)、Notch1及DLL4蛋白表达之间的关系及其功能意义.方法 收集207例EOC术后标本和65例卵巢良性上皮性肿瘤标本,应用免疫组化学法检测EOC和卵巢良性上皮性肿瘤组织中OCT4、Notch1以及DLL4蛋白的表达情况.结果 EOC组织和卵巢良性上皮性肿瘤组织中,OCT4、Notch1和DLL4蛋白的阳性表达率分别为60.0%、61.8%、60.9%和9.2%、6.2%、0,差异均有统计学意义(P<0.05);OCT4、Notch1和DLL4的表达与EOC的组织学分化、FIGO分期、盆腔淋巴结转移有关(P<0.05);DLL4蛋白的表达分别与OCT4和Notch1的表达呈正相关关系(r值分别为0.758和0.704,P均<0.001),同时,OCT4与Notch1蛋白的表达亦呈正相关(r=0.645,P<0.001).Kaplan-Meier生存分析表明,OCT4、Notch1和DLL4蛋白的过表达均与患者的生存率有关,3种蛋白表达阳性组患者生存率均明显低于蛋白表达阴性组患者(P<0.05).多因素分析:OCT4、DLL4蛋白的表达和FIGO分期是影响EOC根治术后患者预后的独立因素(P<0.05).结论OCT4、Notch1及DLL4的过表达与EOC的组织学分化程度、转移和预后等因素密切相关,联合检测这些指标可能对于EOC患者的病情进展和预后判断给予重要提示.     

喉鳞癌组织中SMG-1、ATM和P53的表达及临床意义

目的检测SMG-1、ATM和P53在喉鳞癌组织中的表达,探讨它们在肿瘤发生发展过程中的相互作用。方法收集2006年
1月1日~2009年8月31日在耳鼻咽喉科住院手术的喉鳞癌患者标本,采用免疫组化法检测63例喉鳞癌、30例癌旁正常组织中
SMG-1、ATM和P53 蛋白的表达情况,并对它们的表达与喉癌临床病理特征之间的关系以及三者的相关性进行分析。结果
SMG-1、ATM和P53在喉鳞癌组中的表达率分别为36.5%（23/63）、41.3%（26/63）、和57.1%（36/63）,与癌旁正常组织比较（分别
为73.3%、83.3%、和20.0%）,差异有统计学意义（P<0.05）;SMG-1表达与T分期和原发部位呈显著相关（P<0.05）,与患者年龄、
N分期、病理分级无关（P>0.05）。ATM和P53表达均与患者年龄、T分期、N分期、原发部位、病理分级无关（P>0.05）。SMG-1阴
性表达患者的五年生存率明显高于阳性患者,差异有统计学意义（P<0.05）。SMG-1 和P53 的表达之间存在负相关关系
（r=-0.476, P<0.01）。结论SMG-1 、ATM和P53与喉癌的发生关系密切,SMG-1表达是反映喉癌临床病理特征和预后的重要生
物学指标,其可能通过调控P53表达,共同在喉癌的发生发展中起重要作用。