结核分枝杆菌逃逸免疫杀伤机制的研究进展

结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, MTB)是典型的胞内致病菌,感染机体后主要寄居于宿主巨噬细胞内。巨噬细胞作为机体防御系统的第一道防线,可通过介导和调控自身及其他细胞凋亡而实现其免疫调节、免疫杀伤及清除病原菌的作用。MTB感染机体后可通过多种途径使巨噬细胞不能正常凋亡,借以逃避巨噬细胞的免疫监视及清除,继而在体内衍生繁殖。进一步探讨结核分枝杆菌逃逸宿主细胞的免疫杀伤机制,对宿主细胞抗结核免疫及人们更好地防治结核病具有深远影响。     

结核分枝杆菌与宿主作用相关蛋白研究进展

结核分枝杆菌(MTB)是第二大致死性感染性疾病的病原体,以呼吸道感染为主要途径,一旦侵入宿主体内即很难被清除。本文主要阐述了结核分枝杆菌侵入人体后有些蛋白可以调节宿主免疫机制、抵御宿主的清除作用,从而与宿主长期共存;其蛋白作用机制包括阻止吞噬溶酶体的形成和酸化、抑制自噬体的形成、抗氧化应激、抑制细胞凋亡等。如何打破两者的“共存”现象还需要继续研究。     

结核分枝杆菌主要分泌蛋白的研究进展

结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis,Mtb）是引起结核病的病原体。Mtb是典型的细胞内寄生菌,是一种不能运动,不产生芽胞．兼性需氧的小杆菌。被宿主巨噬细胞吞噬后,依其毒力的大小及宿主抗感染能力的强弱而在宿主巨噬细胞内被消灭或长期处于休眠状态,当条件改变时,处于休眠状态的结核分枝杆菌可再次恢复致病性。     

结核分枝杆菌及结核疫苗新作用方式的研究

结核病主要是由结核分枝杆菌引起的传染性疾病,是严重威胁人类健康的重大公共卫生问题。目前,卡介苗仍是唯一被批准应用于人体的预防性疫苗,其对婴幼儿具有较好的保护效果,但对成年人的保护作用存在巨大争议。巨噬细胞和树突状细胞吞噬结核分枝杆菌之后,启动适应性免疫应答,活化的效应性CD4⁺和CD8⁺T细胞通过释放细胞因子和细胞毒作用发挥免疫效应。然而,结核分枝杆菌可通过抑制吞噬溶酶体形成、改变代谢途径、抑制抗原提呈等作用发生免疫逃逸,使其在宿主体内长期存在。近年来,随着多组学的发展,针对结核分枝杆菌感染免疫机制的研究有了一定的进展,但通过接种疫苗对结核病进行防控的结果依然不尽人意。本文重点探讨了结核分枝杆菌和宿主之间的免疫反应以及逃逸机制,并概述了结核疫苗的研发情况,有助于我们利用结核菌感染的免疫学知识对结核病疫苗进行快速高效的研发。     

结核分枝杆菌感染细胞的信号传导通路研究进展

结核病是由结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis，Mtb）经呼吸道、消化道或皮肤损伤等多种途径侵入人体而引起的多种组织器官传染病，但其致病的分子和细胞机制至今未完全明了。Mtb是一种典型的胞内致病菌，能在巨噬细胞内长期生存，并诱导细胞转化为朗罕细胞而形成结核结节。业已肯定，结核结节及结核肉芽肿是结核病最基本、最重要的病理特征，是组织细胞对Mtb感染的炎性反应性增殖。因此，在Mtb感染过程中，必然存在Mtb与宿主细胞的相互作用，并涉及相关信号传导通路。本文就近年有关Mtb感染宿主细胞的相关信号传导通路及其致病意义的研究进展作一综述。     

结核分枝杆菌PE/PPE蛋白研究进展

PE/PPE蛋白是分枝杆菌所独有的蛋白家族,因其氨基端分别含有Pro-Glu(PE)和Pro-Pro-Glu(PPE)的基序而得名,其编码基因约占结核分枝杆菌整个基因组的10%。PE/PPE蛋白从被发现开始就引起了人们的广泛兴趣,本文就近年来的研究进展作一综述。     

结核分枝杆菌RD区蛋白研究进展

由病原菌结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)引发的结核病是一种严重危害人类健康的传染病。根据世界卫生组织的《全球结核病报告2017》年报指出:2016年新增结核病感染者1 040万例,其中死亡人数达到167万例,死于HIV共感染的人数37万。随着多耐药性菌株和HIV共感染等出现,使得结核病的预防和治疗形式愈加严峻,积极研发新型结核疫苗十分必要。结核分枝杆菌RD区编码蛋白在结核病新型疫苗研发及新型诊断方法建立中具有重要的潜在意义及应用价值。 本文主要介绍结核分枝杆菌基因组RD区及其编码蛋白的研究进展。     

结核分枝杆菌感染过程中宿主抗菌肽LL-37免疫调控功能的研究进展

抗菌肽是先天免疫系统的重要组成部分,LL-37是已知唯一在人体中表达的抗菌肽。LL-37除了具有抗结核活性和免疫调节等生物学功能外,还可能是活动性结核的重要标识。本文着重就结核分枝杆菌感染调控LL-37表达机制、LL-37在结核分枝杆菌感染过程中的免疫防御以及免疫调节功能等方面进行阐述。另外,讨论了LL-37在结核病诊断、治疗中的应用潜力,以期为结核病预防和控制工作提供新的思路。     

结核分枝杆菌PKnG蛋白结构与功能的生物信息学分析北大核心CSCD

目的运用生物信息学的方法分析结核分枝杆菌PKnG蛋白的结构与功能。方法从NCBI数据库获取PKnG的基因信息;使用protParam工具分析PKnG基因编码蛋白的理化性质,运用ProtScale工具分析其疏水性;运用SOPMA工具预测其二级结构,运用SWISS-MODEL工具模拟其三级结构;运用NCBI网站上的BLAST工具对PKnG蛋白的保守域进行预测,运用NetPhos 3.1Server预测其磷酸化位点;运用ABCperd服务器以及SYFPEITHI程序分别预测PKnG蛋白的B细胞和T细胞抗原表位;运用SignalP 4.1Server预测其信号肽,运用TMHMM2.0和TMpred Server对其跨膜螺旋区进行预测;运用STRING 10.5程序对其相互作用蛋白进行预测。结果预测PKnG基因编码蛋白由750个氨基酸构成,理论等电点5.52,为不稳定疏水蛋白,其二级结构以α-螺旋为主,有3个保守区域和多个磷酸化位点,有7个B细胞抗原表位和4个T细胞抗原表位,无信号肽和跨膜螺旋区,并发现数个相关作用蛋白。结论PKnG为不稳定疏水蛋白,含有T、B细胞抗原表位,具有良好的抗原性,可作为结核诊断与治疗的潜在候选因子。     

结核杆菌转录组学研究进展

自1998年结核分枝杆菌H37Rv菌株的全基因组测序完成以后,结核杆菌转录组学的研究就变得异常活跃,特别是随着高通量的基因芯片技术应用于结核菌转录组学的研究,结核杆菌转录组学的进展更加迅猛.结核杆菌转录组学研究经历了由体外分离株到巨噬细胞吞噬体内结核杆菌,从结核杆菌在体外的表达到在宿主体内表达,而宿主由以小鼠为模型到以人体为模型的研究过程.由于以动物为模型的便利性,当前结核杆菌转录组学研究以基因突变小鼠为模型或药物作用后的小鼠结核感染模型为主.这些研究为抗结核药物研究和临床诊断提供必要的基础信息.本文对结核杆菌的转录组学研究作一综述.     

结核分枝杆菌Rv2660c蛋白原核重组表达及其免疫活性研究

目的利用原核表达系统表达、纯化结核分枝杆菌潜伏感染相关蛋白Rv2660c,评价其在血清学方面用于结核病诊断的价值。方法合成Rv2660c全基因核酸序列,构建pET28a-Rv2660c融合表达载体,在原核系统内进行重组表达,亲和层析纯化重组Rv2660c蛋白,采用Western-Blot、ELISA实验分析重组蛋白的免疫反应。结果pET28a-Rv2660c在大肠杆菌内成功表达重组Rv2660c蛋白,SDS-PAGE电泳鉴定重组蛋白分子量为10.2 KD,与预期一致,Western-Blot结果表明重组蛋白Rv2660c只能与活动性结核患者血清反应,出现一条杂交条带;ELISA结果发现重组Rv2660c蛋白与结核患者血清能产生较强的反应,结核病菌阳患者组、菌阴患者组、潜伏感染组以及健康对照组A450平均值分别为0.52、0.48、0.28和0.25。结论重组结核分枝杆菌Rv2660c蛋白具有一定的免疫原性,对活动性结核病的诊断具有一定的价值,但对结核分枝杆菌潜伏感染的诊断没有价值。     

结核病相关microRNA研究进展

miRNA由内源性基因转录而来,是一类小分子非编码RNA,长度约20～24 bp。典型特征是具有发卡结构,转录后具有调控基因表达的功能。有人提出,miRNA在结核病的潜伏感染和活动性感染中扮演着一个重要的控制管理角色,而且miRNA表达量在结核病潜伏性感染和活动性感染患者中具有差异性。更有研究发现miR-155,miR-29a,miR-361-5p,miR-889以及miR-576-3p等miRNA在结核分枝杆菌感染者中有一定的表达差异,被人认为可能是结核病的诊断标志。     

临床标本中结核分枝杆菌抗原蛋白鉴定的研究进展

结核病是由结核分枝杆菌感染导致的严重的呼吸系统传染病,其传播隐匿,防控难度大。目前的结核病快速发现技术存在一定缺陷,亟需新的诊断技术。抗原检测技术具有适用广泛、操作简便、快速精确的优点,但尚未发现具有良好的稳定检测效果的靶标。另外,即使是针对同一抗原靶标,不同研究的检测效能差异也较大。因此,笔者对不同鉴定方法和实验研究证实的各种临床标本中存在的抗原蛋白的检测状况进行综述,以重新思考结核分枝杆菌抗原在临床标本中实际存在的状态和含量,以及改进抗原发现和鉴定的方法,为结核病抗原诊断技术的发展提供理论参考。     

实时定量PCR技术检测结核分枝杆菌蛋白编码基因表达水平研究

目的运用实时定量PCR(qRT-PCR)检测66株结核分枝杆菌蛋白编码基因(fbpB,psts1,mpt64)的表达水平,探讨结核分枝杆菌耐药菌株与敏感菌株,北京基因型菌株与非北京基因型菌株的蛋白抗原在转录水平的差异。方法根据GenBank提供的序列,设计特异性引物,扩增目的基因片段,克隆入载体,重组质粒经纯化及梯度稀释,应用qRT-PCR检测基因的表达水平。结果北京基因型菌株psts1基因表达水平与非北京基因型菌株比较差异有统计学意义(t=3.721,P<0.01);耐药菌株mpt64基因表达水平与敏感菌株比较差异有统计学意义(t=3.951,P<0.01)。结核分枝杆菌活菌的扩增曲线呈典型的S型,结核分枝杆菌死菌和非结核分枝杆菌呈水平直线,未检测到荧光信号。结论北京基因型结核分枝杆菌psts1基因的表达量低于非北京基因型,结核分枝杆菌耐药菌株mpt64基因的表达量低于敏感株。     

重组结核杆菌融合蛋白(EC)用于诊断结核分枝杆菌感染的有效性和安全性系统评价

目的:系统评价重组结核杆菌融合蛋白(EC)相较于结核菌素纯蛋白衍生物(TB-PPD)用于诊断结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)感染的有效性和安全性。方法:检索临床指南数据库、生物医学文献数据库、卫生行政部门和行业协会官方网站及不良反应监测官方网站,检索时间均自建库截止到2022年2月。英文检索词：Recombinant Mycobacterium tuberculosis fusion protein、CFP10/ESAT6;中文检索词：重组结核分枝杆菌融合蛋白、重组结核杆菌融合蛋白、宜卡、CFP10/ESAT6。收集重组结核杆菌融合蛋白(EC)和结核菌素纯蛋白衍生物(TB-PPD)诊断MTB感染有效性和安全性的指南、共识、团体标准、系统评价和原始研究等。由2名研究者独立筛选文献、提取资料并评价纳入研究的偏倚风险,根据异质性大小采用Meta分析或描述性分析。结果:纳入指南2部、专家共识3篇、团体标准2部,均指出重组结核杆菌融合蛋白(EC)和结核菌素纯蛋白衍生物(TB-PPD)可用于诊断MTB感染和结核病辅助诊断。纳入系统评价1篇,结果显示,重组...     

分泌蛋白MPT64鉴定结核分枝杆菌复合群的应用研究

v、牛分枝杆菌和非洲分枝杆菌为阳性,24株非MTB均为阴性;mpt64基因扩增的结果与ELISA法检测结果完全相符.ELISA法检测MTB临床分离株的敏感度为97.3%(110/113),57株非MTB均未检出MPT64蛋白,检测特异度为100.0%.基因扩增MTB中2株为阴性,非MTB均为阴性.结论 采用ELISA法检测分泌蛋白MPT64来鉴定MTB复合群,是一种准确、快速和简便的方法,值得临床推广应用.