螺旋霉素发酵培养基的改进

目前螺旋霉素发酵生产中培养基氮源多用鱼粉或黄豆饼粉。黄豆饼粉的优点是原材料质量稳定，染菌率低，但发酵效价相对较低。以鱼粉作氮源发酵效价相对较高，但鱼粉质量不稳定。本研究对培养基配方进行改进，在黄豆饼粉配方中加入动物蛋白ＮＹ，提高了发酵水平。后采用正交设计对黄豆饼粉、ＮＹ、葡萄糖、淀粉四个因素作三水平试验，最终得到最佳培养基配方：黄豆饼粉２％，ＮＹｏ．５％，淀粉７．０％，发酵效价为原配方效价的１４０．９２％，证实了新配方的可靠性。     

螺旋霉素链霉菌在不同氮源中的代谢

螺旋霉素链霉菌生产螺旋霉素的培养基中有鱼粉和黄豆饼粉作氮源的配方。比较在两种配方中螺旋霉素链霉菌的代谢情况，发现黄豆饼粉配方在发酵前期α－淀粉酶活力低而中期酶活力迅速提高，还原糖浓度高于鱼粉配方；蛋白酶活力比鱼粉配方低得多，致使氮源利用缓慢，ＮＨ２－Ｎ居高不下，且黄豆饼粉配方的细胞内ＡＴＰ堆积量大，最高达８２，３ｍｇ／１００ｍｌ，平均４７．９ｍｇ／１００ｍｌ，比鱼粉配方的ＡＴＰ平均值高约１．５倍。这些因素造成了黄豆饼粉配方的生产能力低于鱼粉配方，为螺旋霉素发酵工艺优化提供了理论依据。     

西索米星生产培养基优化

在西索米星发酵与生产过程中，培养基组份品质、培养基配比极大地影响菌体生产与产抗能力。我们对西索米星发酵主氮源黄豆饼粉加工方法进行考察．发现采用热榨黄豆饼粉的稳定性优于冷榨黄豆饼粉；应用均匀设计优化发酵培养基也取得好效果。     

棉籽饼粉在青霉素发酵中的应用研究

分别采用产黄青霉菌药用培养基、棉籽饼粉、玉米桨、花生饼粉、黄豆饼粉作为产黄青霉Ｐｘａ－１菌种发酵培养基中的有机氮源进行青霉素遥瓶发酵试验及２２Ｌ模拟发酵罐发酵试验,结果表明采用药用培养基生产能力最高,棉籽饼粉次之,但是具有非常广阔的应用前景。     

玉米粉水解物作为红霉素发酵培养基的研究

研究了摇瓶试验中玉米粉水解物替代葡萄糖发酵红霉素的最佳培养基组成。用均匀设计法得到发酵基础培养基的最佳配比(wB，％)：玉米粉3．6，黄豆饼粉2．0，玉米浆0．23，碳酸钙0．5，淀粉0．6；用正交试验得到了优化的补混合料配比(％)：玉米粉4．5，黄豆饼粉2．0，硫酸铵1．0，酵母粉2．0；并得到了玉米粉的最适水解条件。30t发酵罐放大实验结果表明，用玉米粉水解物替代葡萄糖作碳源发酵红霉素，发酵单位提高5．8％，综合生产成本降低26．0％。     

链霉素产生菌Act streptomycini11号的自然变异

作者用自然分离方法研究Act.streptomycini Krass.11号菌株(菌株973号变株)的形态变异和产抗菌素能力。培养基含1%葡萄糖,2%黄豆饼粉,0.25%NaCl,2%琼脂。单孢子分离并培养12昼夜后加以分型,每一类型研究40～50个菌落。抗菌素活性是用250毫升摇瓶经摇床发酵6～7昼夜后     

几种原材料对红霉素发酵的影响

采用上海第三制药厂供给的红霉菌~#1-23,考察了几种原材料对红霉素发酵的影响,并以正交试验法优选了发酵培养基的配比。实验结果表明优质而新鲜的黄豆饼粉是提高发酵单位的重要保证,磷酸盐的用量以及硫酸镁对发酵有一定的影响,增加玉米浆、蚕蛹粉的量或加入吲哚丁酸可提高发酵单位。 试验在300及500ml摇瓶中进行,培养基装量为摇瓶体积的十分之一,摇床转速230转/分。首先采用正交试验表L_8(2~7)对黄豆饼粉、葡萄糖、淀粉、玉米浆、蚕蛹粉、KH_2PO_4及MgSO_4等7种原材料的配比进行优选,认为MgSO_4对红霉素发酵单位的影响最大,并通过进一步摇瓶试验证实发酵基础料中不宜配入MgSO_4但在发酵过程中适时适量地补入MgSO_4(如132小时左右补入0.1-     

利福霉素产生菌发酵培养基的研究

本文考查了各种无机、有机氮源和黄豆饼粉酶解液对地中海诺卡氏菌(Nocardiamediterranei)C_(?)-8菌株生物合成利福霉素SV的影响。结果以蛋白胨、硝酸钾的效果为最佳。通过均匀设计的实验,获得了最佳发酵培养基的组成,使利福霉素SV的产量提高30%.     

薄盖灵芝菌深层发酵培养的研究

为了解决临床药源,对薄盖灵芝(Ganoderma capense(Lloyd)Teng)Gcl菌种进行了深层发酵培养的研究。所得结果是:选用4号发酵培养基(由蔗糖4％,豆饼粉2％,KH_2PO_40.15％,CaCO_3 0.05％,MgSO_4·7H_2O 0.075％及(NH_4)_2SO_40.05％组成),在24～26℃下,培养120～144小时,发酵液为黄棕色,布满菌丝,静止后澄清透明,pH值约为5左右,残糖量降至0.3左右,具有清香味,这时即可终止发酵。发酵物经提取后制成针剂及片剂,供临床应用。     

培养基优化设计提升多拉菌素生物发酵水平

运用响应面法优化了多拉菌素生产菌的发酵培养基。首先通过单因素实验发现正效应因子;接着采用Plackett-Burman(P-B)设计确定了黄豆饼粉、麦芽糊精和MgSO4是影响多拉菌素产量的显著因素;然后利用最陡爬坡试验分别找到3个因素的合理浓度范围;并进一步利用中心组合设计优化了黄豆饼粉、麦芽糊精和MgSO4的最佳浓度配比。筛选并优化得到了最适的培养基浓度为黄豆饼粉17.30g/L,麦芽糊精77.30g/L,MgSO4     

争光霉素A_2发酵

新抗生素发酵时,多组份特点不断出现,各组份的百分比高低不一,而所需的却并不是全部组份。争光霉素的发酵组份分得13个,最近资料说明组份A_2 、B_2的化学结构与博莱霉素A_2、B_2相同。探讨争光霉素各组份的临床疗效时,需要相当于日本博莱霉素(BLM)规格的样品供临床对比,1974年“日本抗生物质医药品解说”中规定的BLM规格为:A_255-70％、B_225-32％、A_2＇<7％。使用争光霉素的高产变株70-5-8时,玉米浆、黄豆饼粉培养基发酵得A_230.2％、B_219％,因此提高发酵液中A_2的百分比,对于我厂承担的制备相当于 BLM规格的样品时,具有提取分离及经济上的方便之处。另一方面从化学合成制备新的半合成BLM的二条工艺路线之一为:从BLM A_2开始,所以如果着眼于制备半合成的新争光霉素、也需要尽可能多的A_2。     

二十碳五烯酸的发酵工艺

以产二十碳五烯酸(EPA)的解脂耶罗维亚酵母(Yarrowia lipolytic) SIPI-N-5为出发菌株,通过碳源和氮源优化,以5％甘油为碳源,0.5％酵母浸粉为氮源,摇瓶中EPA的产量为1 324 mg/L.进一步在5L发酵罐进行分批发酵培养,采用较适宜的培养基并补加葡萄糖和酵母浸粉,EPA产量提高至2 701 mg/L.提取发酵产物,获得占总油脂含量33.9％的EPA.     

庆大霉素产生菌FW-10的选育

以绛红小单孢菌(Micromonos pora par-purea)140庆大霉菌为出发菌,分离使用高氏—天冬素培养基,种子培养基为地瓜粉1.0％,玉米粉1.5％、黄豆饼粉1.0％、蛋白胨0.2％、葡萄糖0.1％、硝酸钾0.05％、碳酸钙0.6％、氯化钴1γ/ml、pH自然。发酵培养基配方1为:地瓜粉6.5％,黄豆饼粉3.5％,鱼粉0.5％,蛋白胨0.3％,酵母粉0.2％、碳酸钙0.65％,硫酸铵0.15％,硝酸钾0.01％,氯化钴10γml,pH自然。配方2为:玉米淀粉5％,黄豆饼粉2.5％,玉米粉1.5％,鱼粉0.5％,蛋白胨0.3％,硫酸铵0.1％,碳酸钙0.5％,氯化钴4γ/ml,pH自然。培养温度34℃,摇瓶机转速,配方1用270r.p.m,配方2用     

Avermectins发酵培养基的研究

以Streptomyces avermitilis ATCC31272和它的突变株为试验菌株进行avermectins发酵培养基的研究,最初筛选到的发酵培养基中必需加入番茄酱和鲜酵母,进一步通过对170多种发酵培养基的筛选实验,选择出一种以淀粉,酵母粉,豆饼粉和无机盐为营养物的培养基,并以它为基础研究了碳源,氮源,无机盐等对avermectins生物合成的影响,经多次培养基的优化试验,突变株Sa-76-9摇瓶发酵效价达3500－4000ug/ml。     

工业羽毛蛋白胨对红霉素基因工程菌ZL1004发酵过程的影响

本文在50L发酵罐上研究了工业羽毛蛋白胨对红霉素基因工程菌ZL 1004发酵过程的影响,结果表明发酵培养基中加入较多的羽毛蛋白胨不利于红霉素的合成,而加入适量的羽毛蛋白胨可有效提升整个发酵过程的摄氧率(OUR)水平、促进菌体对碳氮源的利用和红霉素的合成.进一步对培养基进行优化,采用0.6%羽毛蛋白胨、3.3%黄豆饼粉,发酵结束时红霉素效价达12487U/mL,A组分达9774μg/mL,分别比对照高18.21%和19.94%.利用显微图像及形态分析软件对发酵周期内的菌丝形态进行了跟踪定量研究,分析表明培养基中加入适量羽毛蛋白胨可优化菌丝形态,使其朝有利于红霉素合成的方向进行分化.     

响应面法优化林可霉素发酵培养基

采用响应面法对林可霉素产生菌林肯链霉菌SL-98-2#-8的发酵培养基进行优化.首先,采用Plackett-Burman方法对影响发酵各因素的效应进行评价,筛选出有显著效应的5个因素:淀粉、葡萄糖、KH2PO4、豆饼粉和玉米浆;并通过响应面分析法优化这5个主要因素.优化后这5个因素的最佳含量为淀粉2.1%;玉米浆0.33%;葡萄糖8.5%;豆饼粉2.53%;KH2PO40.022%.采用优化后的培养基进行摇瓶发酵,林可霉素的含量为3700ug/ml,比优化前提高了12%.     

螺旋霉素与乙酰螺旋霉素

螺旋霉素(Spiramycin,简写为 SPM)为大环内酯类抗生素,由生二素链霉菌(St-reptomyces ambofaciens)产生。发酵产物螺旋霉素为一混合组份,由螺旋霉素Ⅰ(63±10％),螺旋霉素Ⅱ(24±5％)和螺旋霉素Ⅲ(13±5％)组成。其抗菌活性与红霉素等同类抗生素相似,主要用作抗革兰氏阳性菌感染。     

庆大霉素发酵工艺的研究

目的通过对庆大霉素发酵条件的优化,提高发酵生产的能力。方法以绛红色小单孢菌2-25为对象,通过单因素试验和四因素三水平(4×3)正交试验筛选出了菌株2-25的最佳培养基配方及培养条件。结果该菌种的最佳发酵条件:5.0%玉米淀粉,3.0%黄豆饼粉,0.6%蛋白胨,0.15%硝酸钾,在33℃、pH 7.8、接种量25%,培养84h,产品质量符合中国药典2005版(CP2005)、美国药典28(USP28)。结论优化发酵条件后菌株2-25发酵水平明显提高。     

氨基酸与微量营养物在螺旋霉素生物合成中的作用

作者用合成培养基研究了螺旋霉素(Spiramycin)的生物合成,以及某些微量营养物(氨基酸、维生素与微量元素)对抗生素产量的影响。螺旋霉素产生菌——产二素链霉菌(S.ambofaciens)系保存在含:葡萄糖10.0、胨5.0、KH_2PO_41.0、MgSO_4·7H_2O0.5、琼脂20.0克/升的培养基上(pH6.0～6.5)。接种过的斜面于30℃培养10天,然后置于5℃冰箱中保存。种子培养基含:葡萄糖10.0、K_2HPO_41.0、NaNO_32.0、KH_2PO_41.0、MgSO_4·7H_2O 0.5克/升,pH调至7.0。每只装50毫升培养基的250毫升摇瓶,灭菌后用产二素链霉菌的孢子悬液接种,再置于27℃旋转式     

质粒pSG1与链霉素生物合成的关系

利用灰色链霉菌No45质粒pSG1上的洁霉素抗性基因,在种子培养基中添加2～4单位/毫升洁霉素,其结果为:(1)种子培养及发酵温度均为30℃时与两者均为28℃时相比,链霉素效价只有28℃时的40％,当种子培养基中添加2单位/毫升洁霉素时,效价提高到63％,亦即能挽回23％的损失,(2)将灰色链霉菌No45和No45-3混合接入种子培养基中(简称混合种子),并添加2～4单位/毫升洁霉素,种子培养和发酵温度均为28℃,当No45:No45-3为1.8:0.2,1.6:0.4时,结果加洁霉素比不加洁霉素时效价高出5～6.5倍。表明种子培养基中添加约2～4单位/毫升的洁霉素可以挽回高温季节造成的部分损失。